Revista de Salud Animal

Toxic plants and food safety: Enzootic Bovine Haematuria by Pteridium spp. a relevant health hazard

La inocuidad alimentaria resulta un tema de alta prioridad para aquellos actores involucrados en la producción agropecuaria y la seguridad del consumidor. En este contexto las intoxicaciones por plantas en la ganadería ocasionan la eliminación de compuestos altamente dañinos los que de forma reiterada llegan hasta el consumidor a través de la leche y las carnes de los animales intoxicados. Un ejemplo relevante lo constituye Pteridium spp., helecho altamente invasivo capaz de dominar en áreas de pastoreo de vacunos, con atención a regiones andinas en Latinoamérica. El presente trabajo brinda un enfoque holístico de esta materia tomando como ejemplo la entidad clínica Hematuria Enzoótica Bovina (HEB), causada por la ingestión de Pteridium spp. contentiva del norsesquiterpeno ptaquilósido, compuesto carcinogénico que puede alcanzar niveles elevados en la planta influenciado por factores ambientales y fenológicos, que ocasiona neoplasias malignas en vejiga urinaria, con evolución fatal. La eliminación por la leche del ptaquilósido en los rebaños vacunos expuestos al consumo constante del helecho resulta además de alta potencialidad tóxica para los consumidores. De ahí que se enfatice en la necesidad de implementar acciones de vigilancia y prevención, y prestar máxima atención a la inocuidad de la leche en las zonas ganaderas con HEB y con ello minimizar el riesgo de los consumidores de contraer cáncer gástrico.

Food safety is a high priority issue for those factors involved in agricultural production and consumer safety. In this context, plant poisoning in livestock causes the elimination of the highly damaging compounds that repeatedly reach the consumer through milk and meat from animals intoxicated. A relevant example is Pteridium spp., a highly invasive fern able to dominate in cattle grassing areas, with attention to Latin American Andean regions. This paper provides a holistic approach to this issue using the example of Enzootic Bovine Hematuria (EBH), a clinical entity caused by ingestion the of Pteridium spp. containing the carcinogenic norsesquiterpene ptaquiloside that can reach high levels in the plant influenced by environmental and phenology factors occasioning malignant neoplasias in the bladder, with fatal outcome. The ptaquiloside removal of milk from cows exposed to constant consumption of the toxic fern represents a potential hazard for consumers as well. Hence, it has been emphasized the need of implementing surveillance and prevention actions , and paying a close attention to milk safety in grassing areas with EBH and thereby minimizing the risk of gastric cancer of consumers.

Metabolism particularities of polyamines and their possible application in veterinary medicine

Las poliaminas (PAs) putrecsina (Pu), espermidina (Spd) y espermina (Spm) son cationes orgánicos ubicuos con cargas distribuidas que interactúan con varias macromoléculas, y afectan muchas funciones a nivel celular. Las PAs son esenciales para el crecimiento normal de la célula y la actividad creciente de su enzima limitante Ornitinadescarboxilasa (ODC), más allá de su umbral mínimo e indefinido, pueden inducir a la transformación y la formación de tumores. Dado que en humanos se ha demostrado una relación entre contenido de PAs y enfermedades y dada la importancia creciente que tiene la ODC en la regulación de la biosíntesis de las PAs, así como la participación de dichas aminas en diversos procesos biológicos, hacen recomendable cuantificar estas moléculas en diversos fluidos incluyendo el plasma, la orina y el suero. La presente reseña enfatiza en todos aquellos aspectos metabólicos y de características físico-químicas referentes a las PAs, a la ODC, su antizima (AZ) y al inhibidor de la AZ (AZI), que son muy particulares y representan una estrategia poco común de la fisiología celular. Así como pretende estimular la generación de resultados que permitan una mayor aplicación en el diagnóstico de distintas enfermedades o esclarecimiento de procesos degenerativos, así como posibles aplicaciones en ciencias veterinarias.

Polyamines (PAs) putrescine (Pu), spermidine (Spd) and spermine (Spm) are ubiquitous organic cations with distributed loads interacting with various macromolecules and affecting many functions at cell level. They are essential for normal cell growth, the increased activity of ODC, its rate-limiting enzyme, beyond its minimal threshold which is not definite. They can induce transformation and tumor formation. Since humans have shown a relationship between PAs content and diseases, and given the great importance of PAs biosynthesis regulation by ODC, as well as in diverse biological processes of such amine participation, it is advisable to quantify these molecules in various fluids including plasma, urine and serum. This review emphasizes on the metabolic aspects and the physicochemical characteristics related to PAs, ODC, antizima (AZ) and AZ inhibitor (AZI), which are unique and represent an unusual strategy of cell physiology. Stimulating generation of results allowing a greater application for different disease diagnostics or degenerative processes, as well as a better exploitation of the benefits in multiple disciplines is recommended and possible application in veterinary science.

Antimicrobial Resistance and genes associated to the host-microbe interaction of Pasteurella multocida isolates from swine in Western Cuba

Pasteurella multocida is an important veterinary pathogen that causes a range of animal diseases, including fowl cholera, hemorrhagic septicemia in cattle and atrophic rhinitis in swine. P. multocida is generally recognized as a secondary invader contributing substantially to respiratory diseases in pigs by aggravation of lung lesions. Five capsule serogroups are routinely identified in P. multocida (A, B, D, E, and F) and each is generally associated with, but not completely restricted, to a specific host. A total of 16 isolates of Pasteurella multocida capsular genotype A and two isolates capsular genotype D were characterized for their susceptibilities to 10 antibiotics and the presence of four genes for virulence factors associated to adherence. The use of PCR showed that colonization factors (ptfA), sialidases (nanH) and outer membrane proteins (ompH) occurred in 100% porcine strains, while nanB as a further colonization-related gene was detected in 22% of isolates. The 94% of the isolates showed multiple-drug resistance. It was observed that 100% were resistant to amoxicillin and spectinomicin. The resistance profiles suggested that cephalosporins and sulphametozaxole were the drugs most likely to be active against P. multocida in vitro.

Pasteurella multocida es un patógeno de amplia distribución mundial, responsable de diversos procesos clínicos en varias especies de animales, produce el cólera aviar en aves, septicemia hemorrágica en bovinos y la rinitis atrófica en cerdos. En esta especie animal P.multocida se considera, además como un patógeno secundario que contribuye sustancialmente a los procesos clínicos respiratorios, agravando las lesiones pulmonares. Existen 5 serogrupos capsulares en P. multocida (A, B, D, E, and F) y cada uno es generalmente asociado, pero no completamente restringido a un hospedero específico. En este estudio se realizó la caracterización de la resistencia antimicrobiana frente a 10 antibióticos y la detección de cuatro genes asociados a la virulencia en 16 aislados de P. multocida tipo capsular A y 2 del tipo capsular D, todos procedentes de cerdos. Los ensayos de PCR evidenciaron la presencia de factores de colonización (ptfA), sialidasa (nanH) y la proteína de membrana externa ompH en 100% de los aislados, mientras el gen nanB asociado a la colonización solamente se detectó en 22% de los aislados. El 94% de los aislados mostraron multirresistencia a los antimicrobianos evaluados, el 100% fueron resistentes a amoxicillin y spectinomicin. Los perfiles de resistencia detectados señalan que las cephalosporina y sulphametozaxole fueron las drogas más activas contra P. multocida in vitro.

Retrospective study on infectious agents affecting bovine reproduction in the department of Caquetá, Colombia

Se analizaron los resultados de las investigaciones serológicas para brucelosis, leptospirosis, herpesvirus bovino -1 (HVB-1), diarrea viral bovina (DVB) y Neospora caninum, de los casos enviados al laboratorio por los propietarios de los hatos bovinos en el departamento del Caquetá, Colombia, en los años 1999 - 2009. La información fue obtenida de la base de datos del ICA (Instituto Colombiano Agropecuario), seccional Caquetá. Se consideraron las variables: agentes infecciosos, años, municipios, zonas y sexos. El porcentaje promedio de brucelosis fue de 6,4% y los mayores valores se obtuvieron para herpesvirus bovino-1 (HVB-1). En el caso de Neospora, las investigaciones comenzaron en 2007 y en los 3 años solo se trabajaron 36 muestras, de las cuales 12 fueron positivas (33,3%). Se encontraron diferencias entre municipios, zonas y sexos. En este último caso las hembras tuvieron mayores valores de seropositividad que los machos excepto para HVB- 1. Se concluye que aunque el número de animales investigados en algunos casos fue bajo, los agentes infecciosos que afectan la reproducción parecen ser de importancia en el departamento de Caquetá y es necesario profundizar en su participación causal en los problemas reproductivos.

Results of serological surveys for brucellosis, leptospirosis, bovine herpesvirus1 (BHV-1), bovine viral diarrhea (BVD) and Neospora caninum from 1999 to 2009 were reviewed to analyze the behavior of infectious agents affecting bovine reproduction in the Department of Caquetá, Colombia,. The information was obtained from the data base of ICA (Colombian Agricultural Institute), sectional Caquetá. The variables considered were: infectious agents, years, municipalities, regions and sexes. The percentage of seropositive to brucellosis was 6.4% and the highest values were obtained for bovine herpesvirus 1 (BHV-1). In the case of Neospora, research began in 2007 and only 36 samples were worked in 3 years, of which 12 were seropositive (33.3%). There were differences between municipalities, regions and sexes. In the latter case, females had higher seropositivity than males except for BHV-1. Although the number of animals studied in some cases was low, it was concluded that infectious agents affecting reproduction appear to be significant in the department of Caquetá and their role among the causes of reproductive problems needs to be study in depth.

Canine parvovirus in the Bolivar province, Ecuador. Utility of Box-Jenkins models for its analysis and prediction

El objetivo del trabajo fue evaluar la prevalencia y mortalidad de la parvovirosis canina en Bólivar, Ecuador y la factibilidad de los modelos ARIMA (Box-Jenkins) para su análisis y predicción. Se utilizaron datos retrospectivos obtenidos en el hospital veterinario «Caninos y Felinos» de la ciudad de Guaranda; se evaluó la prevalencia y mortalidad mensual de la enfermedad, definiéndose con los valores obtenidos series de tiempo a las que se les ajustó un modelo de Box-Jenkins, determinándose sus parámetros para identificar modelos mixtos con estructura ARIMA. Los modelos ajustados a las series fueron utilizados para pronosticar los valores del año 2011, comparándose con los observados mediante la prueba de Kolmogorov-Smirnov. La prevalencia y mortalidad tuvieron una estacionalidad semestral, el modelo ajustado para prevalencia fue ARIMA (2,0,2)x(1,0,1)6 con constante y para mortalidad ARIMA(1,0,0)x(2,0,2)6 con constante, pronosticándose en cada caso el mismo patrón de comportamiento para los próximos 12 meses, con elevada correspondencia entre los datos reales y pronosticados por los modelo (P> 0,010). Se concluye que la prevalencia y mortalidad tienen un patrón estacional semestral y pueden modelarse y pronosticarse con elevada precisión mediante modelos Box-Jenkins, facilitándose su aplicación en estos y otros indicadores de salud animal, siempre que las observaciones se puedan expresar como una serie de tiempo.

The objective of the present work was to evaluate the prevalence and mortality of canine parvovirus and the feasibility of the model ARIMA (Box-Jenkins) for its analysis and prediction. Retrospective data was obtained from the veterinary hospital «Caninos y Felinos» of the town of Guaranda; The monthly prevalence and mortality of the disease was evaluated and series of time were defined with the values obtained to which a Box-Jenkins model was fitted determining its parameters to identify mixed models with ARMA structure. The models fitted to the series were used to prognosticate the values of the year 2011, comparing with the values observed through the Kolmogorov-Smirnov test.The prevalence and mortality showed a semiannual seasonal behavior; the model fitted for prevalencewas ARIMA (2,0,2)x(1,0,1)6 with constantand for mortality ARIMA(1,0,0)x(2,0,2)6 with constant. In each case, the same behavior pattern was prognosticated for the next 12 months with a high correspondence between the real data and those prognosticated with the models (P>0,010). It is concluded that the prevalence and the mortality has a six-monthly seasonal pattern and can be modulated and prognosticated with high precision through Box-Jenkins models making easy its application in these and other indicators of animal health always that the observations can be expressed as a series of time.

Measurement uncertainty of sodium percarbonate in STABILAK

Se estimó la incertidumbre de la medición del percarbonato de sodio componente del producto Stabilak, destinado a la conservación de la leche cruda sin refrigeración. Se emplearon dos procedimientos para estimar la incertidumbre combinada. El primero utilizó el procedimiento paso a paso para estimar la incertidumbre de cada etapa del proceso de medición, con estos datos se determinó la incertidumbre combinada y por último la expandida. El segundo procedimiento evaluó la incertidumbre de manera global, los datos se obtuvieron del control interno de la calidad del método analítico. La incertidumbre estimada de forma global resultó mayor U = 1,58%, que la obtenida por el procedimiento paso a paso U = 1,21%, este último identificó como principales fuentes de variación del resultado, la precisión del ensayo en condiciones intermedias, seguida por la variación del volumen de la bureta utilizada en el ensayo. El resultado expresado como concentración de percarbonato y la incertidumbre expandida asociada, aporta mayor información al usuario, que dispone de un intervalo de valores probables para la toma de decisiones sobre el resultado analítico.

Measurement uncertainty of sodium percarbonate, component of the product Stabilak, was estimated. This product is used to preserve raw milk without refrigeration. Two procedures were used to estimate the combined uncertainty. The first one used the step by step procedure to estimate the uncertainty of each stage of the measurement process. With these data, the combined and expanded uncertainties were determined. The second method evaluated the uncertainty globally, and the data were obtained from the validation process of the analytical method. The overall uncertainty was higher (U = 1.58%) than that obtained by the step by step procedure (U = 1.21%). This latter identified the assay precision under intermediate conditions followed by the buret volume variation as the major variation sources of the result. The result expressed as percarbonate concentration and the associated expanded uncertainty provides more information to the user, who can make use of a range of likely values for making decisions on the analytical result.

**Stability on shelf (second year) of a gel from the Rhizophora mangle L.**

La estabilidad en anaquel, de larga duración o shelf life de una formulación es un factor fundamental para obtener un producto de calidad, más aún en los productos naturales pues son a menudo propensos al deterioro, especialmente durante el almacenamiento. Se evaluó la estabilidad a 5±3ºC durante el segundo año, de tres lotes pilotos de un semisólido en forma de gel, obtenido a partir del extracto acuoso de la corteza de Rhizophora mangle L. Los lotes fueron producidos a escala piloto y envasados en tubos de aluminio de 25 g con laqueado interior. Se evaluaron los indicadores físico-químicos y microbiológicos a los 24 meses de almacenamiento y se compararon con los obtenidos a tiempo inicial y a los 12 meses. Como resultado todos los lotes mostraron estables sus propiedades organolépticas, pH de 6 a 7, área de extensibilidad de 30-50 cm², límite microbiano <10² UFC/g, actividad antimicrobiana entre 8-10 mg/g y comportamiento reológico de un fluido no newtoniano del tipo Herschel Bulkley, sin diferencias significativas con los tiempos anteriores. La concentración de taninos totales presentó variación en el tiempo, no obstante este indicador estuvo dentro del límite de aceptación para la formulación de 13-30 mg/g. Estos resultados permiten proponer un período de validez del producto de 2 años bajo las condiciones de almacenamiento ensayadas.

A long-term shelf stability or shelf life of a formulation is a critical factor in obtaining a quality product; moreover in natural products since they are often prone to deterioration, especially during storage. The stability of three pilot batches of a semisolid gel was evaluated at 5 ± 3 ºC during the second year. They were obtained from R. mangle L bark aqueous extract. Lots were produced at pilot scale and packaged in internally lacquered aluminum tubes of 25 g. Physical-chemical and microbiological indicators were evaluated after 24 months of storage and compared with those obtained at the initial time and after 12 months. All batches showed stable organoleptic properties, pH 6 to 7, extensibility area of 30-50 cm², microbial limit <10² CFU/g, antimicrobial activity between 8-10 mg/g and rheological behavior of a non-newtonian fluid type Herschel Bulkley, without significant differences with the earlier times. The concentration of total tannins showed variation over time; however, this indicator was within the acceptance limit for a 13-30 mg/g formulation. These results allowed proposing a shelf life of the product of two years under the storage conditions tested.

**Morphometric characterization of Oestrus ovis (Diptera: Oestridae) larvae from infested sheep in Cuba**

Con el objetivo de caracterizar morfométricamente los estadios parasitarios de Oestrus ovis, se colectaron 100 larvas de cada uno de los diferentes estadios (L1, L2, L3) de hospederos infestados necropsiados, colocadas en etanol 70° y medidas bajo un microscopio estéreo. Los resultados obtenidos fueron comparados con los de otros autores. Se realizó un estudio de los ejemplares con vistas a la descripción de características morfológicas que permitan criterios diagnósticos. Se tomaron microfotografías de diferentes regiones de los estadios larvarios.

In order to characterize the parasitic stages of Oestrus ovis morphometrically, 100 larvae from each stage (L1, L2, L3) were collected from necrotic infested hosts, placed in ethanol 70° and measured under a stereo microscope. The results were compared with those of other authors. The specimens were studied with a view to the description of morphological features that allow diagnostic criteria. Micrographs were taken from different regions of the larval stages.

Effect of cryopreservation on viability and the acrosomal state of new zeland rabbit (Oryctolagus cuniculus) semen

El objetivo del estudio fue investigar el efecto de la criopreservación sobre la viabilidad y estado acrosomal de espermatozoides de conejo de la raza Nueva Zelanda (Oryctolagus cuniculus). Se utilizaron 46 eyaculados, obtenidos mediante vagina artificial, evaluándose las siguientes características en semen fresco y post-descongelado: % de viabilidad sin y con reacción acrosomal (VsRA y VcRA, respectivamente), y % de mortalidad sin y con reacción acrosomal (MsRA y McRA, respectivamente), mediante la tinción de Isotiocianato de fluoresceína conjugada con la lectina de Arachis Hypogaea y Ioduro de Propidio (FITC-PNA/IP). Se obtuvieron los siguientes valores en semen fresco: 73.6+4.9%, 5.5+2.4%, 15.2+3.7% y 5.6+2.3%, respectivamente; y para semen post-descongelado: 40.0+4.8%, 10.4+3.1%, 38.1+6.1 y 11.5+3.6, respectivamente. Se determinaron diferencias estadísticamente significativas (p<0.05) entre las características espermáticas en fresco y post-descongeladas, causadas por los efectos de la criopreservación. Se concluye que aún cuando la viabilidad y el estado acrosomal de los espermatozoides se ven afectados por la criopreservación, queda suficiente cantidad de espermatozoides vivos y sin reacción acrosomal capaces de realizar la fertilización.

The effect of cryopreservation on the viability and the acrosomal state of spermatozoa of New Zeeland rabbits (Oryctolagus cuniculus) was studied. Forty six ejaculates, obtained with an artificial vagina, were used to determine the percentages of viability and mortality with and without acrosomal reaction (VsRA, VcRA, MsRA and McRA, respectively) in fresh and post-thawed semen by staining with fluorescein isothiocianato conjugated with lectine from Arachis Hypogaea and propidium iodide (FITC-PNA/IP). The values obtained in fresh semen were 73.6+4.9%, 5.5+2.4%, 15.2+3.7% and 5.6+2.3%, respectively, and 40.0+4.8%, 10.4+3.1%, 38.1+6.1 y 11.5+3.6, respectively, in post-thawed semen. Statistically significant differences (p<0.05) were determined between the spermatic characteristics in fresh and post-thawed semen, which were caused by the effects of cryopreservation. It is concluded that, even when the viability and the acrosomal state of the spermatozoa are affected by cryopreservation, a sufficient quantity of spermatozoa remains alive and without acrosomal reaction capable to fulfill the fertilization.

Heterotopic hematopoiesis in ossified rings of the trachea of laying hens affected by the chronic respiratory syndrome

En un estudio aleatorizado realizado en Cuba y en gallinas ponedoras y sus reemplazos afectadas por síndrome respiratorio crónico (SRC), se muestrearon los órganos del sistema respiratorio de 65 gallinas, 48 reemplazos y 30 sin alteraciones clínica aparentes. Las muestras fueron procesadas por histología convencional. Como hallazgo no esperado se observó la osificación del cartílago hialino de la tráquea (OCHT) y la presencia de medula ósea en los núcleos osificados. Esto fue confirmado por la tinción de Giemsa donde se pudo identificar células mieloblásticas y eritroblásticas. Dada la relación que existe entre la insuficiencia ventilatoria y la OCHT con hematopoyesis heterotópica en ambas categorías, se pueden establecer los siguientes mecanismos hipotéticos: Las aves pudieron establecer una adaptación de la Hb a la hipoxia crónica a la formación de hematopoyesis en la OCHT, como mecanismo compensatorio ante la hipoxia crónica causada por la insuficiencia ventilatoria, además existe una estrecha relación entre los osteoblastos (OCHT) y la hematopoyesis heterotópica.

In a randomized study carried out in Cuba in laying hens and their replacements affected by the chronic respiratory syndrome (CRS), tracheas of 65 hens, 48 replacement and 30 without apparent clinical changes, were sampled. The samples were processed by conventional histology. As an unexpected finding the ossification of the hyaline cartilage of the trachea (OHCT) and the presence of bone marrow in the ossified nuclei were observed. This was confirmed by Giemsa staining where myeloblastics and erytroblastics cells could be identify. Taking into consideration the relationship between the respiratory failure and the OHCT with heterotopic hematopoiesis in both categories, the following hypothetical mechanisms can be established : birds could establish an adaptation from Hb to the chronic hypoxia to the hematopoiesis formation in the OHCT, as a compensatory mechanism against the chronic hypoxia caused by the respiratory failure, besides existing a close relationship between osteoblasts (OHCT) and the heterotopic hematopoiesis.

Rabies in an African civet (Civettictis civetta) in Huambo province, Angola

La rabia es una zoonosis ampliamente generalizada, y poco notificada, así, por falta de tratamiento a tiempo resulta fatal en 100% de los casos, ya sea en el hombre como en animal. Se considera al perro el principal reservorio de transmisión en el ciclo urbano, se hace necesario investigar los reservorios naturales del virus, para garantizar el control de la enfermedad. En este trabajo, se reporta por primera vez en la provincia de Huambo un caso de rabia en una Civeta Africana (Civettictis civetta). El caso fue detectado en el barrio Raimundo de la administración de barrio Comandante Xavier Samacau del municipio Huambo sede. El animal presentó un comportamiento agresivo mordiendo a personas y objetos inanimados que encontraba en su camino, resultando lesionadas una mujer y una niña de 3 años. El mismo fue capturado, sacrificado y enviado al Instituto de Servicio Veterinario, donde el encéfalo fue sometido a investigación por Inmunofluorescencia directa con resultados positivos a Lyssavirus. El comportamiento clínico de este animal, caracterizado por elevada agresividad con ataque a objetos inanimados y al hombre así como el diagnóstico positivo por inmunofluorescencia permitieron establecer el diagnóstico de rabia.

Rabies is a widespread zoonosis, little reported, and, for lack of an opportune treatment, fatal in 100% of cases, either in man or animal. Although the dog is considered the main reservoir of transmission in the urban cycle, it is necessary to investigate the natural reservoirs of the virus to guarantee the control of the disease. In this paper, a case of rabies in an African Civet (Civettictis civetta) is reported for the first time in Huambo province. The case was detected in Raimundo neighborhood, in the district administration Commander Xavier Samacau, Huambo municipality. The animal showed an aggressive behavior biting people and inanimate objects in its path. A woman and a three year old girl were injured. It was captured, slaughtered and sent to the Veterinary Service Institute, where brain samples were tested for the presence of lyssavirus antigen using the fluorescent antibody test with positive results. The clinical behavior of this animal, characterized by a high aggression in attacking inanimate objects and humans and the positive diagnosis by immunofluorescence allowed establishing the diagnosis of rabies.

First report on the lipid composition of milk from livestock in Cuba

Seroprevalence of Toxoplasma gondii and associated risk factors in Felis catus in Havana

Molecular and phylogenetic analysis based on the spicule glycoprotein gene of bovine coronavirus

Application of Biotechnology in Animal Health and Improvement

International Meetings sponsored by INIA/AECID in the framework of the 20^thInternational Course on Infectious, Emergent and Transboundary Animal Diseases