Revista Cubana de Medicina Tropical

Pneumocystis jirovecii: one hundred years of history

Introducción: Pneumocystis jirovecii es uno de los patógenos oportunistas más importantes que afectan a individuos con síndrome de inmunodeficiencia adquirida y pacientes inmunodeprimidos por otras causas. A pesar de haber sido observado por primera vez hace más de 100 años, se desconocen aún muchos aspectos importantes de su biología y de la morbilidad que produce. Objetivo: en este trabajo se pretende presentar una actualización sobre los principales aspectos de la historia, la epidemiología y la biología de P. jirovecii, así como de la enfermedad que produce. Conclusiones: se han publicado varios artículos de revisión desde su descubrimiento que brindan detalles y elementos novedosos del microorganismo, sin embargo, pocos son los manuscritos encontrados en la literatura de habla hispana que aborden esta problemática.

Introduction: Pneumocystis jirovecii is one of the most important opportunistic pathogens affecting AIDS individuals and immunodepressive patients. In spite of the fact that it was observed one hundred years ago for the first time, many fundamental aspects of its biology and the morbidity it causes are still unknown. Objective: this paper was aimed at presenting updating on the main aspects of the history, the epidemiology and the biology of P. jirovecii and the disease it causes. Conclusions: a number of review articles have been published since the discovery, all of which provide details and novel elements of the microorganism. However, few original papers dealing with this problem have been found in the Spanish literature.

**Presumptive identification of Cryptococcus gattii isolated from Terminalia catappa in Montería city, Córdoba, Colombia**

Introducción: los miembros del complejo Cryptococcus neoformans, son la causa de criptococosis en humanos y animales. La infección en humanos es adquirida por la inhalación de los propágulos presentes en el ambiente, por esta razón es de gran importancia el estudio de su hábitat. Objetivo: determinar la relación ecológica de Cryptococcus gattii con árboles de Terminalia catappa presentes en la zona urbana de la ciudad de Montería, Colombia. Métodos: se seleccionaron 163 árboles de Terminalia catappa de los cuales se tomaron muestras de corteza, hojas, flores, fruto y suelo circundante. El aislamiento se realizó utilizando el medio de agar semillas de Guizotia abyssinica, la identificación se hizo mediante pruebas morfológicas y fisiológicas y la variedad se determinó con las pruebas de L-canavanina-glicina-azul de bromotimol (CGB), D-prolina y D-triptofano. Resultados: se obtuvieron 9,050 UFC/g con características de Cryptococcus spp. De ellas, 5,795 UFC/g correspondieron presuntivamente a Cryptococcus gattii. El mayor porcentaje de aislamientos se encontró en flores, seguido por corteza y fruto, con tamaños celulares y capsulares pequeños. Estos aislamientos fueron más frecuentes en el sur de la ciudad, seguido por la zona centro y en menor porcentaje por la zona norte. Conclusiones: los hallazgos muestran una estrecha relación entre Cryptococcus gattii y Terminalia catappa. Este estudio es el primero que se hace en la ciudad de Montería. Los resultados brindan información valiosa para la comprensión y el análisis sobre la epidemiología de la criptococosis en la ciudad de Montería, Colombia.

Introduction: the members of the Cryptococcus neoformans species complex are responsible for cryptococcosis in animals and humans. Human infection is thought to be acquired by inhalation of airborne propagules from an environmental source; therefore it is greatly important to study their habitat. Objective: to determine the ecological relationship of Cryptococcus gattii with Terminalia catappa trees present in urban areas of Montería city in Colombia. Methods: a total of 163 Terminalia catappa trees were selected; some samples were taken from the bark, the leaves, the flowers, the fruits of these trees and from the surrounding soil. The yeast was isolated using the Guizotia abyssinica seed agar medium; it was identified thanks to biochemical and morphologic tests whereas the right variety was determined by L-canavanine-glycine- bromothymol blue (CGB), D-proline and D-tryptophan tests. Results: there was obtained 9.050 CFU/g isolate of Cryptococcus spp., 5.795 CFU/g of which were presumptively identified as Cryptococcus gattii. The highest percentage of isolates was found in flowers, followed by bark and fruits, presenting small cellular and capsular sizes. These isolates were more frequent in the south of the city, followed by the center zone and the lowest percentage in the northern zone. Conclusions: these findings confirmed the close relationship of Cryptococcus gattii and Terminalia catappa, being this the first study conducted in Montería city. These results give us meaningful information for understanding and analyzing the epidemiology of cryptococcosis in Monteria city, Colombia.

**Effect of 4B3 monoclonal antibody on the experimental Cryptococcus neoformans infection**

Introducción: las frecuencias de recaídas y elevada letalidad de la criptococosis se mantienen altas, lo cual incentiva la búsqueda de nuevas estrategias terapéuticas. Objetivos: evaluar el efecto del anticuerpo monoclonal 4B3 sobre la infección criptocócica en ratones BALB/c. Métodos: se determinó la cinética de la concentración sérica del anticuerpo monoclonal para su administración intraperitoneal (500 µg), que fue medida por ELISA cuantitativo de doble anticuerpo. La capacidad protectora se observó mediante el registro de supervivencia de ratones BALB/c administrados con 500 µg de anticuerpo monoclonal 4B3 e inoculados con 2 x 10(2,2) células/mL de Cryptococcus neoformans, así como por evaluación de la diseminación de la levadura a los principales órganos diana. Se identificó el efecto del anticuerpo monoclonal 4B3 sobre la fagocitosis y lisis del microorganismo por células de la línea de macrófagos P338.D1. Resultados: la dosis empleada fue suficiente para mantener valores séricos elevados del 4B3 (38 µg/mL) durante al menos 46 d. Se determinó que el 4B3 no confiere protección, lo cual potencia la diseminación del microorganismo y disminuye el tiempo de vida de los animales. El ensayo de fagocitosis mostró que el anticuerpo evaluado incrementa la actividad fagocítica de los macrófagos sin lograr un efecto fungicida. Conclusiones: el anticuerpo monoclonal 4B3 estimula la fagocitosis de C. neoformans por macrófagos, pero sin efecto fungicida. Con ello favorece la diseminación de la levadura y disminuye el tiempo de vida de los ratones a la infección.

Introduction: frequent relapses and high lethality of criptococcosis has encouraged the search for new therapeutic strategies. Objectives: to evaluate the effect of the monoclonal antibody 4B3 on the cryptococcal infection in Balb/c mice. Methods: the kinetics in serum concentration of the studied monoclonal antibody was determined for intraperitoneal administration (500 µg) by quantitative sandwich ELISA. In order to assess its protective capability, were administered 500 µg of 4B3 and innoculated 2 x 10(2.2) cells/mL of Cryptococcus neoformans. The survival of mice was recorded and the yeast dissemination to the main target organs was evaluated. Macrophages P338.D1 cell lines were used to measure the effect of the monoclonal antibody 4B3 on the phagocytosis and lysis of the microorganism. Results: the used dose helped to keep high values (38 µg/m) of 4B3 in serum for at least 46 days. It was found that the monoclonal antibody does not give protection, which makes the microorganism dissemination possible, along with the reduction in the survival of mice. Finally, the phagocytosis test showed that 4B3 increased the phagocytic activity of macrophages without any fungicidal effect. Conclusions: the monoclonal antibody 4B3 stimulates C. neoformans phagocytosis by macrophages without fungicidal effect, thus favoring yeast dissemination and decreasing the survival of mice due to cryptococcal infection.

Radiological patterns and final diagnosis of patients presumptive of pulmonary tuberculosis with negative sputum smears

Introducción: el diagnóstico de la tuberculosis pulmonar en los enfermos con baciloscopia negativa es un reto en la práctica médica, basándose en la mayoría de los casos en elementos clínicos y radiográficos. En el Hospital Neumológico Benéfico Jurídico en La Habana funciona una comisión de expertos en el diagnóstico de la tuberculosis con baciloscopia negativa denominada CODIBAARNE. Objetivo: identificar los patrones radiológicos y el diagnóstico definitivo de enfermos presentados en esta comisión entre octubre de 2002 a diciembre de 2003. Métodos: se realizó un estudio descriptivo en una muestra de enfermos en el período señalado y que por la recomendación de la comisión CODIBAARNE pasaron a ser seguidos y estudiados en el Hospital Neumológico Benéfico Jurídico para definir sus diagnósticos. Los datos se obtuvieron del registro de pacientes y de las historias clínicas individuales de los enfermos. Resultados: la edad media de estos enfermos fue de 68,2 años, 57 % era del sexo masculino. Los síntomas más frecuentes resultaron la tos (76 %), el síndrome general (70 %), y la expectoración (61 %). Los patrones radiográficos más usuales fueron los infiltrados, con cavitaciones o sin estas (44 %), y las lesiones fibróticas (34 %). Los diagnósticos más comunes mostraron bronquiectasias (26 %), seguidos por el de tuberculosis pulmonar con baciloscopia negativa (24 %). Conclusiones: los resultados de esta investigación ponen de manifiesto la importancia del trabajo del grupo de expertos que constituyen la CODIBAARNE en relación con el diagnóstico de los casos de tuberculosis con baciloscopia negativa.

Introduction: the diagnosis of pulmonary tuberculosis in sputum smears-negative patients is a challenge for today´s medical practice, mostly supported on clinical and radiographic elements. In Hospital Neumológico Benéfico Jurídico of Havana, there is an expert commission for the sputum smear-negative diagnosis of tuberculosis called CODIBAARNE. Objective: to identify the radiological patterns and the final diagnosis of patients submitted to this committee from October 2002 to December 2003. Methods: a descriptive study was conducted in a sample of patients within the above-mentioned period, who had been studied and followed-up in Hospital Neumológico Benéfico Jurídico in order to define their final diagnoses under the CODIBAARNE commission recommendation. Data were gathered from the register of patients and from the individual medical histories. Results: the average age of these patients was 68.2 years and 57 % were males. The most frequent symptoms were cough (76 %), general syndrome (70 %) and expectoration (61 %). The mostly seen radiographic patterns were infiltrates, with or without cavitation (44 %) and fibrotic lesions (34 %). The most common diagnoses showed bronchiectasia (26 %), followed by sputum smears-negative pulmonary tuberculosis (24 %). Conclusions: the results of this research work evinced the importance of the work by the group of experts in CODIBAARNE regarding the sputum smears-negative diagnosis of tuberculosis cases.

Evaluation of the immobilization of one HIV-2 gp36 peptide in nitrocellulose membrane

Introducción: la inmovilización de antígenos a soportes sólidos se utiliza para el desarrollo de diversos inmunoensayos. Una de las primeras tecnologías desarrolladas fue la adsorción de proteínas por aplicación directa sobre la nitrocelulosa. Objetivo: normalizar la inmovilización de un péptido sintético de la proteína de transmembrana gp36 del VIH-2, a un soporte de nitrocelulosa para fines diagnósticos y evaluar los parámetros de desempeño en un grupo de muestras de sueros con reactividad de interés conocida. Métodos: el péptido se inmovilizó de forma libre, conjugado a la albúmina de suero bovina (BSA) y a la hemocianina de lapa marina (KLH) como proteínas portadoras. Se analizaron los parámetros de inmovilización y se determinó la variante óptima. Con la variante escogida se evaluó la sensibilidad y especificidad diagnóstica frente a paneles de referencia del Laboratorio de Investigaciones del SIDA. La especificidad analítica se evaluó con muestras reactivas a VIH-1 y HTLV-I. Resultados: el análisis de las variantes de péptido inmovilizadas a las membranas de nitrocelulosa, demostró que el péptido gp36-BSA, fue el que logró la mayor diferenciación entre muestras positivas y negativas. Se obtuvo 100 % de sensibilidad y 95,2 % de especificidad diagnóstica, así como 100 % de especificidad analítica. Conclusiones: el péptido gp36-BSA inmovilizado en membranas de nitrocelulosa es eficaz en el diagnóstico serológico del VIH-2, lo cual permitirá considerarlo para su empleo con fines diagnósticos en sistemas que utilicen como fase sólida la nitrocelulosa.

Introduction: antigen immobilization in solid supports is used for the development of several immunoassays. One of the first technologies developed was the protein adsorption by direct application to nitrocellulose. Objective: to standardize the immobilization of a synthetic peptide of the HIV-2 transmembrane protein gp36 to nitrocellulose support for diagnostic purposes and to evaluate the performance parameters in a group of serum samples with recognized interesting reactivity. Methods: the peptide was freely immobilized, conjugated to bovine serum albumin (BSA) and to keyhole limpet hemocyanin (KLH) as carrier proteins. Immobilization parameters were analyzed and then, the optimal immobilization alternative was determined. Using the chosen variant, the diagnostic sensitivity and specificity against reference panels of the AIDS Research Laboratory were evaluated. Analytical specificity was evaluated with reactive samples to HIV-1 and HTLV-I. Results: the analysis of the immobilized peptide variants to nitrocellulose membranes showed that the gp36 peptide-BSA was the one that succeeded in setting the greatest differentiation between positive and negative samples. There were observed 100% sensitivity, 95.2% diagnostic specificity and 100% analytical specificity. Conclusions: the gp36-BSA peptide immobilized on nitrocellulose membranes showed efficacy for the serological diagnosis of HIV-2, which will allow considering this peptide for diagnostic uses in systems with nitrocellulose based solid phase.

Sequence of viral infection associated to pregnancy in a dengue outbreak in Santiago de Cuba in 2006

Introducción: en la provincia Santiago de Cuba se han producido diferentes epidemias de dengue en los últimos años, donde han estado incluidas mujeres en estado de gravidez. Objetivo: conocer la inmunidad y describir el papel de la infección con dengue, así como su secuencia. Métodos: se realizó un estudio observacional y descriptivo para caracterizar la inmunidad a dengue en las madres e hijos después de 10 y 12 meses de nacidos y conocer la influencia de determinadas secuencias de infección virales en las mujeres embarazadas que sufrieron la enfermedad, durante la epidemia de dengue 3, en Santiago de Cuba. Para ello se estudiaron las muestras de suero de 25 mujeres confirmadas de dengue 3 y de los niños nacidos de estas, al cabo de los 10 y 12 meses de nacidos. Se determinaron los títulos de IgG y las secuencias virales de infección; se analizaron según la clasificación del dengue de acuerdo con el criterio de la Organización Mundial de la Salud. Resultados: los niños no presentaron anticuerpos y las secuencias virales de infección asociadas a las madres en orden de frecuencia resultaron con igual porcentaje el DEN2/DEN3, DEN1/DEN2/DEN3 (21,74 %) y en menor porcentaje por último el DEN1/DEN3 (17,39 %). Conclusiones: los niños no desarrollaron inmunidad humoral (IgG), a pesar de que algunos presentaron manifestaciones propias de la enfermedad. Las infecciones secundarias favorecieron las formas graves de la entidad.

Introduction: several dengue outbreaks have taken place in Santiago de Cuba province in the last few years, in which pregnant women have been involved. Objectives: to determine the immunity and to describe the role of dengue infection and its sequence. Methods: an observational and descriptive study was conducted to characterize dengue immunity in mothers and children after 10 and 12 months of birth and to determine the influence of certain viral infection sequences in pregnant women who suffered this disease during the dengue 3 epidemics in Santiago de Cuba. To this end, serum samples from 25 females tested dengue 3-positive and from children born to them after 10 and 12 months of childbirth were studied. IgG titers and viral infection sequences were determined and analyzed according to the World Health Organization dengue classification criteria. Results: the children did not present with the antibodies and the viral infection sequences associated to mothers; in order of frequency, the same percentage was observed in DEN2/DEN3, DEN1/DEN2/DEN3 (21,74 %); but lower percentage in DEN1/DEN3 (17,39 %). Conclusions: the children did not develop humoral immunity (IgG) despite some manifestations inherent to the disease. The secondary infections prompted the most serious forms of the disease.

Molecular diagnosis of influenza A (H1N1) 2009 virus and other respiratory viruses during the first pandemic wave in Cuba

Introducción: el primer virus pandémico del siglo XXI, el virus influenza A (H1N1)/2009, emergió en México, a finales del mes de abril de 2009, después de un triple reordenamiento entre virus de influenza de origen aviar, humano y porcino, y desde allí se diseminó por el mundo. Frente a ese evento, en Cuba, se adoptaron medidas determinantes antipandémicas, entre ellas, se reforzó la vigilancia virológica con todas las acciones necesarias. Objetivos: detectar y confirmar la entrada del agente causal de la pandemia en el país, de forma rápida, oportuna y además, definir la participación de otros virus en la etiología de las infecciones respiratorias agudas. Métodos: como consecuencia de la vigilancia de laboratorio, entre las semanas epidemiológicas 38 a la 42 de 2009 (meses de septiembre y octubre) se procesó un total de 1 063 muestras clínicas respiratorias (exudado nasofaríngeo, aspirado bronquial y muestras de necropsia de pulmón), detectándose el mayor número de casos confirmados de infección por el nuevo virus en este período, que se correspondió con la primera oleada pandémica en Cuba. El diagnóstico virológico se realizó utilizando un algoritmo de diagnóstico molecular. Resultados: de las 1 063 muestras, 597 (56,0 %) resultaron positivas. El virus de influenza pandémica A(H1N1)2009, fue el agente etiológico detectado con mayor frecuencia en 306 casos sospechosos (51 %), seguido por el virus influenza A(H3N2) en 228 pacientes(38 %). Otros virus respiratorios se diagnosticaron en 63 muestras clínicas (11 %). El virus pandémico se confirmó en 50 gestantes. Los rinovirus se detectaron con mayor frecuencia en muestras de pacientes con diagnóstico clínico de bronconeumonía y bronquiolitis. Durante el período estudiado se reportó un incremento de la morbilidad, se notificaron 225 825 atenciones médicas por infección respiratoria aguda a mediados del mes de octubre. Conclusión: el algoritmo de diagnóstico molecular empleado para la confirmación de los virus influenza y otros virus respiratorios demostró ser sensible, específico y efectivo para garantizar la vigilancia virológica sistemática en nuestro país durante la fase pandémica.

Introduction: the first pandemic virus of the 21st century - the influenza A (H1N1)/2009 virus-appeared in Mexico in April 2009 after triple reassortment of influenza strains of avian, human and pig origin and from there, it was spread worldwide. With the purpose of facing up to this event, Cuba adopted anti-pandemic measures including the virology surveillance using all necessary actions. Objectives: the detection and validation of the entry of the causative agent of pandemic into the country in a fast and timely way, in addition to the definition of involvement of other viruses in the etiology of acute respiratory infections. Methods: as a result of the lab surveillance, from the 38th to the 42nd epidemiological weeks (September and October, 2009), 1 063 respiratory clinical samples were processed (nasopharyngeal exudates, bronchial aspirates and lung necropsy samples). The highest number of confirmed cases caused by the new virus was detected in this period that represented the first pandemic wave in Cuba. Diagnosis was based on molecular diagnosis algorithm. Results: out of the 1 063 samples, 597 (56.0 %) were positive. The pandemic influenza A (H1N1) virus was the most commonly detected etiological agent in 306 suspected cases (51 %) followed by influenza A (H3N2) virus in 228 cases (38 %). Other respiratory viruses were diagnosed in 63 clinical samples (11 %). The pandemic virus was confirmed in 50 pregnant women. Rhinoviruses were identified more frequently in those samples from patients with clinical diagnosis of bronchial pneumonia and broncholitis. Morbidity increased during this period; 225 825 medical consultations were notified due to acute respiratory infections mid-October 2009. Conclusions: the molecular diagnosis algorithm proved to be sensitive, specific and effective to assure the systematic virological surveillance in our country during the pandemic phase.

Effectiveness of the anti-meningococcal vaccine VA-MENGO-BC® in the first year of life of Cuban children, 1997-2008

Introducción: la enfermedad meningocócica constituye un importante problema de salud mundial. Desde 1991 la vacuna VA-MENGOC-BC® se aplica en Cuba a los niños menores de 1 año. Objetivo: evaluar la efectividad de la vacuna VA-MENGOC-BC®. Métodos: para la evaluación poslicenciamiento de VA-MENGOC-BC® se estudiaron los lactantes con enfermedad meningocócica notificados entre 1997 y 2008. Resultados: ocurrieron 114 casos para una incidencia media anual de 7,1/100 000 lactantes. La estimación de la efectividad vacunal media resultó de 84,0 %, oscilando entre 68 y 104 %. La ocurrencia de enfermedad meningocócica en los no vacunados fue de 20,2 % (23/114); 79,8 % (91/114) en lactantes con edad de vacunación y en 75,8 % (69/91) se precisó la fecha de inmunización. Tenían una sola dosis de vacuna aplicada 26,4 % (24/91) y 73,6 % (67/91) recibió el esquema completo (2 dosis). La enfermedad meningocócica predominó en los primeros 6 meses de edad, declinó a partir de este momento y comenzó de nuevo su ascenso a los 10 y 11 meses. Predominó la forma meníngea (89,5 %); la letalidad general fue de 7 % (8/114), con 4,4 % para la meningococemia y 2,6 % para la meningitis. Conclusiones: la efectividad de VA-MENGOC-BC® fue satisfactoria. Se sugiere realizar un análisis por un grupo de expertos sobre la necesidad de aplicar una tercera dosis.

Introduction: meningococcal disease is an important health problem worldwide. Since 1991 the vaccine VA-MENGOC-BC has been used in Cuban under one-year old infants. Objective: to evaluate the effectiveness of the vaccine VA-MENGO-BC®. Methods: for the evaluation after licensing this vaccine, all the infants affected by meningococcal disease between 1997 and 2008 were studied. Results: a total number of 114 cases were recorded. The annual average incidence was 7.1 per 100 000 infants. The mean vaccinal effectiveness for the period was 84.0 %, ranging from 68 % to 104 %. The frequency of disease in unvaccinated children was 20.2 % (23/114); 79.8 % (91/114) within the vaccination age, but only 75.8 % (69/91) of them had confirmed the immunization date. Only 26.4 % (24/91) had one single dose applied whereas 73.6 % (67/91) had completed their vaccination schedule (2 doses). The meningococcal disease prevailed in the first six months of life, declined afterwards and then started to rise again at 10 and 11 months of age. The meningeal form of clinical presentation predominated (89.5 %); case-fatality rate was 7.0 % (8/114), being 4,4 % for meningococcemia and 2,6 % for meningitis. Conclusions: the vaccine VA-MENGOC-BC® effectiveness in infants was satisfactory. It is suggested that further analysis be made by a group of experts on the use of a booster dose.

Cuban advisory work to face the rise of malarial cases in two Haitian departments in April 2010

Introducción: la malaria se considera un serio problema de salud pública en Haití, principalmente en las zonas rurales del área costera, con alturas inferiores a los 600 m sobre el nivel del mar; específicamente en zonas de terrenos planos y con cultivos de arroz. Objetivo: describir las acciones llevadas a cabo en cuatro localidades pertenecientes a dos departamentos de la República de Haití ante un aumento en el número de casos de malaria. Métodos: el trabajo se llevó a cabo en tres comunas del departamento Oeste y una del departamento de Nippes en Haití, en abril de 2010. Se realizó pesquisaje de febriles en las áreas y toma de muestras para gota gruesa, así como actividades antivectoriales que incluyeron búsqueda de criaderos y tratamiento térmico extradomiciliario e intradomiciliario. Resultados: se comprobó por medio del diagnóstico con gota gruesa, que no todas las personas que presentaban cuadro febril padecían de malaria; se obtuvieron bajos valores de positividad. Durante el estudio solo se diagnosticó Plasmodium falciparum. De 46 criaderos encuestados 26 resultaron positivos a Anopheles albimanus. No se pudo evaluar el impacto de los tratamientos con insecticidas porque la zona no contaba con datos preliminares. Conclusión: estos resultados le brindan al programa de control de malaria conocimientos acerca de la distribución y el control de los vectores, además, enfatizan la necesidad de realizar una estratificación actual de la presencia de la enfermedad, mejorar el diagnóstico, así como promover campañas de prevención que incluyan todos los aspectos del programa del control de la malaria en Haití.

Introduction: malaria is considered to be a serious health problem in Haití, mainly in the rural zones of the coastal area located at 600 m above the sea level, particularly shallow zones with rice crops. Objective: to describe the actions taken in four sites of two Haitian departments to face the rise of the number of malarial cases. Methods: the advisory work was carried out in three communities located in the West department and one in Nippes department in April 2010. Fever screenings along with sample-taking for thick smear test were performed as well as anti-vector activities including search for breeding sites and thermal treatment in the house and out of it. Results: it was confirmed in this thick smear test that not all the persons presenting with febrile symptoms suffered malaria since low positive values to this disease were obtained. During this study, only Plasmodium falciparum was diagnosed. Out of the 46 breeding sites, 26 were positive to Anopheles albimanus. The impact of insecticidal treatment could not be assessed since the areas did not have preliminary data on this respect. Conclusions: these results provide the malaria control program with pieces of knowledge about the distribution and control of vectors in addition to emphasizing the need of making an updated stratification of the incidence of the disease that comprises all the aspects of the malaria control program in Haiti.

**Effectiveness of insecticidal formulations for the Aedes aegypti adult population control in La Habana, Cuba**

Introducción: el control del vector continúa siendo la única medida sostenible para evitar la transmisión de dengue, donde desempeña un papel esencial el uso de adulticidas en caso de altos índices de infestación del vector, en presencia de brotes o epidemias de dengue. Los piretroides son los más utilizados y el organofosforado cloriprifos, que por ser más costoso, su uso ha sido limitado. Objetivos: determinar la efectividad de los insecticidas, en su formulación comercial, que están hoy día en uso por la Unidad Nacional de Vigilancia y Lucha Antivectorial en Cuba para el control de adultos de Ae. aegypti, como son el clorpirifos (Terfos 48 CE) y los piretroides, lambdacialotrina (ICON 2.5 CE) y cipermetrina (Galgotrin 25 CE). Métodos: se utilizaron 15 cepas de Ae. aegypti, procedentes de los 15 municipios de La Habana, colectados en 2008 y la cepa susceptible de referencia Rockefeller. El nivel de efectividad de estos contra el estado adulto se determinó mediante bioensayos recomendados por la Organización Mundial de la Salud. Resultados: en los bioensayos de efectividad en el campo, Terfos 48 CE fue el más efectivo, con 100 % de mortalidad en todas las cepas, seguido por Icon 2.5 CE y Galgotrin 25 CE, con los cuales se obtuvo entre 98 y 100 % de mortalidad. Conclusiones: las pruebas de campo demostraron que los insecticidas utilizados por el programa de erradicación de Ae. aegypti mantienen aún una elevada efectividad en La Habana; se recomienda el uso de clorpirifos con los piretroides para retardar la evolución de la resistencia a este último grupo.

Introduction: the vector control remains the sole sustainable measure to prevent dengue transmission in which the key role goes to adulticides in case of high rates of infestation by the vector, outbreaks or dengue epidemics. Pyrethroids are the most used whereas organophosphorous chloripirifos has been occasionally used because of the cost. Objectives: to determine the effectiveness of insecticides in their commercial formulation that is applied today by the National Unit of Anti-Vector Control and Surveillance in Cuba for the control of Ae aegypti adults such as chlorpirifos (Terfos 48 CE) and pyrethroids, lambda-cyhalothrin (ICON 2.5 CE) and cypermethrin (Galgotrin 25 CE). Methods: fifteen Ae. Aegypti strains from the 15 municipalities of La Habana province, collected in 2008, and the Rockefeller reference strain were used. The level of effectiveness of these products against the adult vector was determined through WHO-recommended bioassays. Results: in situ effectiveness bioassays, Terphos 48 CE was the most effective in causing 100% mortality of all the strains, followed by Icon 2.5 CE and Galgotrin 25 CE which reached 98% and 100% mortality rates respectively. Conclusions: the field tests showed that the insecticides currently in use in the Aedes aegypti eradication program are still highly effective in La Habana province. The combined use of chlorpirifos and pyrethroids are recommended to delay the evolution of resistance to this last group of insecticides.

Optimization of extracting solutions of antibacterial molecules from Cenchritis muricatus (Gastropoda:Littorinidae)

Introducción: los moluscos marinos constituyen un reservorio natural de moléculas con potencialidades terapéuticas para el tratamiento de enfermedades infecciosas en momentos en que se han descrito numerosas cepas resistentes a los antibióticos convencionales. Objetivo: comparar 3 soluciones: ácido acético 30 %, metanol 50 % y salina-ácida (NaCl 0,6 mol/L, HCl 1 %) atendiendo a sus capacidades extractivas de moléculas con actividad antibacteriana del molusco marino Cenchritis muricatus. Métodos: para el procesamiento del material biológico se utilizaron las 3 soluciones de extracción y se analizaron los extractos obtenidos de acuerdo con la concentración de proteínas totales y la inhibición del crecimiento bacteriano de cepas de Staphylococcus aureus y Escherichia coli, mediante un bioensayo turbidimétrico en microplacas de 96 pocillos en medio Luria-Bertani. Resultados: se obtuvo mayor concentración de proteínas totales (7,8 mg/mL) con el extracto total de C. muricatus obtenido con la solución salina-ácida. Además con 200 mg/mL de proteínas totales del extracto se obtuvo inhibición significativa (p< 0,001) del crecimiento de S. aureus (12,64 %) y E. coli (12,1 %) respecto al control positivo de inhibición del crecimiento por cloranfenicol. Conclusiones: de acuerdo con los resultados de la comparación entre las soluciones, la solución salina-ácida resultó ser la más eficiente en la extracción de moléculas antibacterianas, probablemente péptidos antimicrobianos de C. muricatus.

Introduction: marine mollusks are natural reservoirs of molecules with therapeutic potential for the treatment of infectious diseases, at a time when many antibiotic-resistant strains are being described. Objective: to compare three solutions: 30% acetic acid, 50% methanol and saline-acid (NaCl 0.6 mol/L, 1% HCl) according to their capacities to extract molecules with antimicrobial activity from the marine mollusk Cenchritis muricatus. Methods: the three extraction solutions were used to process the biological material, and then, the obtained extracts were analyzed in terms of total protein concentration and the bacterial growth inhibition of Staphylococcus aureus and Escherichia coli strains by means of a turbidimetric bioassay using 96 well microplates in Luria-Bertani (LB) culture medium. Results: the highest total protein concentration (7.8 mg/mL) was found in the C. muricatus extract from the saline-acid solution. Additionally, 200 mg/mL of total proteins from the extract caused significant growth inhibition (p<0.001) of S. aureus (12.64 %) and E. coli (12.1 %) compared to the positive control of growth inhibition using chloramphenicol. Conclusions: according to these results, the saline-acid solution proved to be more efficient in extracting molecules with antibacterial activity that are likely to be antimicrobial peptides from C. muricatus.

Contributions made by the Cuban advisory work to the entomological surveillance in Haiti

Introducción: el terremoto ocurrido en Haití en enero de 2010 condujo a un agravamiento de las condiciones higiénicas, sanitarias y ambientales, lo cual incrementó la disponibilidad de sitios de cría de vectores de enfermedades en el país. Objetivo: reportar los primeros resultados acerca de la vigilancia entomológica establecida por parte de la asesoría que realiza Cuba en Haití después del terremoto. Métodos: el trabajo se llevó a cabo en 7 localidades situadas en el departamento Oeste, uno de los 10 en que se encuentra dividido Haití; se realizaron muestreos larvales en recipientes y sitios de cría naturales con las metodologías establecidas para ambos. La frecuencia de muestreo fue semanal en el período mayo-octubre, 2010. Resultados: se reportaron la presencia y distribución en el departamento Oeste en Haití de 12 especies de mosquitos y la presencia de Triatoma rubrofasciata. Se identificaron los principales sitios de cría de las tres especies de mosquitos de mayor importancia; Aedes aegypti, que correspondió a depósitos de almacenamiento de agua seguidos por gomas usadas de auto y pequeños depósitos artificiales; Anopheles albimanus en los campos de arroz, pisada de animales y planicies pantanosas costeras; y para Culex quinquefasciatus vector de filariosis linfática aún sin erradicar en Haití, fueron los canales y las zanjas de aguas residuales. Conclusiones: estos resultados son los primeros que se obtienen en esta vigilancia después de la ocurrencia del terremoto, que constituyen información valiosa para la toma de decisiones en el momento de programar el control ante la presencia de cualquier epidemia, donde se involucren estos insectos vectores en este Departamento.

Introduction: the earthquake occurred in Haiti in January 2010 led to the worsening of the hygienic, sanitary and environmental conditions and increased the number of breeding sites for disease-borne vectors in the country. Objectives: to report the first results of the entomological surveillance set by the Cuban advisory group in Haiti after the earthquake. Methods: the work was carried out in 7 sites located in West department, one of the ten departments of the country; larval sampling was conducted in reservoirs and natural breeding sites based on the methodologies for both. The sampling was weekly in the May-October period in 2010. Results: twelve mosquito species were reported in the West department as well as the presence of Triatoma rubrofasciata. The fundamental breeding sites of the three most important mosquito species were identified including Aedes aegypti with water tanks followed by worn car rubbers and small artificial deposits, Anopheles albimanus in rice fields, animal footprints and coastal swampy plains, and Culex quniquefasciatus, one lymphatic phylarosis-borne vector still existing in Haiti, in drains and waste water ditches. Conclusions: these results are the first ones from this surveillance program after the earthquake and represent valuable information for the decision-making at the time of designing a control program to face the occurrence of any epidemics in which these insect vectors might be involved in this department.

**Antimalarial activity of hydroalcoholic extract from Bixa orellana L**.

Introducción: Bixa orellana L. es una especie usada en la medicina tradicional de países de diversos continentes. Entre las propiedades medicinales que se le atribuyen se incluye su acción antimalárica. Objetivo: evaluar la actividad antimalárica in vitro e in vivo de un extracto de B. orellana cultivada en Cuba. Métodos: la actividad antimalárica del extracto hidroalcohólico de semillas de Bija se evaluó in vitro frente a la cepa Ghana de Plasmodium falciparum e in vivo utilizando un modelo de malaria de roedores, ratones Balb/c infectados con la cepa ANKA de Plasmodium berghei. La citotoxicidad se determinó frente a fibroblastos humanos de la línea MRC-5. Además, se caracterizó preliminarmente la composición fitoquímica del extracto estudiado. Resultados: el extracto exhibió un valor de concentración inhibitoria media de 11,6 µg/mL, concentración citotóxica media de 60,2 µg/mL e índice de selectividad de 5,1. La administración subcutánea del extracto a la dosis de 500 mg/kg causó una reducción de 50,3 ± 5,8 % de la parasitemia en los animales infectados en comparación con la observada en los controles. El tamizaje fitoquímico fue consistente con la detección de triterpenoides y(o) esteroides, alcaloides, compuestos lactónicos, compuestos fenólicos, taninos y flavonoides. Conclusiones: el extracto hidroalcohólico de semillas de B. orellana cultivada en Cuba mostró actividad antimalárica moderada tanto in vitro como in vivo. El fraccionamiento guiado por bioensayos permitiría identificar las moléculas responsables de la actividad demostrada por este extracto y reevaluar sus potencialidades.

Introduction: Bixa orellana L. is one species used in traditional herb medicine in several continents. Among the medicinal properties attributed to this plant, the antimalarial action has been included. Objective: to evaluate in vitro and in vivo antimalarial activity of extract from B. orellana grown in Cuba. Methods: the antimalarial activity of the hydroalcoholic extract fro Bija seeds was evaluated in vitro against Plasmodium falciparum Ghana strain and in vivo using a model of murine malaria, that is, Balb/c mice infected with Plasmodium berghei ANKA strain. Citotoxicity was determined against MRC-5 human fibroblasts. Additionally, phytochemical composition of the studied extract was preliminarily informed. Results: the extract exhibited IC50 (Medium Inhibitory Concentration) of 11.6 µg/mL, CC50 (Medium Citotoxic Concentration) of 60.2 µg/mL and SI (Selectivity Index) of 5.1. Subcutaneous administration of the extract at a 500 mg/kg dose caused parasitemia reduction of 50.3 ± 5.8 % on infected animals compared with that of the controls. Phytochemical screening was consistent with detection of triterpenoids and/or steroids, alkaloids, lactonic compounds, phenols, tanins and flavonoids. Conclusions: the hydroalcoholic extract from B. orellana seeds grown in Cuba showed in vitro and in vivo moderate antimalarial activity. Bioassay-guided fractioning will allow identifying the molecules responsible for the exhibited extract activity and re-evaluating the potentialities of this extract.