Revista de Protección Vegetal

Mathematical modeling of the population dynamics: historical development and practical use in Cuba

La modelación matemática ha cobrado auge en los estudios ecológicos, ya que permite optimizar el uso de controles biológicos al determinar las condiciones de equilibrio del ecosistema. Se recoge la evolución histórica de la modelación matemática en el campo de la ecología cuantitativa de poblaciones y las investigaciones realizadas en Cuba. Se muestra la utilidad práctica del método grados-días como instrumento de medición. Se presentan los modelos de crecimiento y dinámica más conocidos: logístico, presa-depredador y hospedante-parásito. Por último, se mencionan las modificaciones realizadas al modelo Lotka-Volterra y la factibilidad de modelar la dinámica del ciclo de vida, incluyendo todas las fases de la población que se estudia. Se establecen, entre los retos para la temática en Cuba: a) desarrollar estudios que permitan determinar la influencia de los cambios de temperatura ambiental en los parámetros biológicos de poblaciones plagas en cultivos de importancia económica; b) implementar nuevas variantes de modelación como son la estadística bayesiana y la geo-estadística para aumentar el nivel de las predicciones; c) continuar el trabajo multidisciplinario encaminado a incorporar la interpretación biológica de los modelos matemáticos en la toma de decisiones para el manejo integrado de plagas.

The mathematical modeling has the highest point in the ecological studies because it allows optimizing the use of biological controls when determining the conditions of balance in the ecosystem. The historical evolution of the mathematical models in the field of the quantitative ecology of populations and the investigations carried out in Cuba are shown. The practical utility of the grades-days method as a measuring instrument is illustrated. The most known growth models, such as the logistical, prey-predator and host parasite, are presented. Lastly, we refer to the modifications carried out to the Lotka-Volterra Model and the feasibility of modeling the dynamics of the life cycle. For this topic in Cuba, the challenges established were: a) development of studies determining the influence of the environmental temperature changes on the biological parameters of pest populations in crops of economic importance, b) implementation of new modeling variants like the bayesian statistics and geo-statistics to increase the level of the predictions, c) continuation of multidisciplinary works guided to incorporate the biological interpretation of the mathematical models in the making of decisions in the integrated pest management.

Molecular detection of Potato yellow vein virus in the natural whitefly vector Trialeurodes vaporariorum, Westwood

Potato yellow vein virus (PYVV) expresses yellowing symptoms on plants and it is transmitted by the whitefly vector Trialeurodes vaporariorum Westwood. No molecular viral detection from the vector extracts has been reported to date. The objectives of this study were I) amplification of the PYVV major coat protein (CP) gene from viruliferous vector extracts by RT-PCR using specific primers, II) cloning and III) sequencing and sequences analysis. Some Colombian Solanum phureja (Jus et Buk) field potato plants expressing yellowing symptoms and confirmed PYVV positive by RT-PCR were used as virus donor plants for feeding whiteflies. Viruliferous vectors were obtained by depositing aviruliferous whiteflies on symptomatic leaves and kept in a muslin cloth-covered glass flask for 48 h. A kit SV for total RNA Isolation System (Promega®) was used for extracting the viral RNA from one viruliferous whitefly and from pools of viruliferous vectors (2, 5, 10, 15 and 20 individuals); CP gene amplicons of about 765bp were cloned and sequenced to confirm the PYVV genome. Blast alignment established more than 99% similarity between CP gene amplified from vector extracts and several GenBank reported PYVV CP genes from Colombian and Peruvian isolates.This study presents information concerning the molecular detection of PYVV in its natural vector for the first time by using a very simple viral acquisition technique for obtaining viruliferous vectors that could be of interest for future studies concerning virus and vector gene characterization, plant-virus and vector interaction and/or epidemiological studies.

El Potato yellow vein virus (PYVV) produce síntomas de amarillamiento en las nervaduras de la hoja de papa, y es transmitido por el vector natural Trialeurodes vaporariorum Westwood (mosca blanca). Hasta la fecha no se ha detectado molecularmente PYVV en extractos de moscas virulíferas. Los objetivos de este estudio fueron I) amplificar el gen de la proteína mayor de la cápside (CP) de PYVV a partir de extractos del vector, utilizando RT-PCR con cebadores específicos, II) clonar los amplicones y III) secuenciar y analizar las secuencias. Se utilizaron como donadoras de virus, las plantas de papa Solanum phureja (Jus et Buk), colectadas en campo con síntomas de amarillamiento y confirmadas positivas para PYVV por RT-PCR. Se depositaron moscas aviruliferas en hojas sintomáticas cubiertas con tela de muselina, para la adquisición de PYVV durante 48 h. Para la extracción de RNA viral se empleó el kit SV total RNA Isolation System (Promega®), utilizando una mosca o grupos (2, 5, 10, 15 y 20 individuos). Los amplicones obtenidos de CP, aproximadamente 765 pb se clonaron y secuenciaron. Las secuencias obtenidas se alinearon con la herramienta BLAST; se establecieron similitudes del 99% entre el amplicón derivado del vector y secuencias del gen CP de aislados de PYVV colombianos y peruanos.

**Distribution of the Sugarcane yellow leaf virus in Cuba**

El presente estudio tuvo el propósito de determinar la distribución del Virus de la hoja amarilla (Sugarcane yellow leaf virus, SCYLV), en diferentes provincias del país y las variantes genéticas presentes. Se analizaron 35 campos (348 ha), de los cuales se tomaron 525 muestras de hojas en 13 cultivares comerciales. La detección del virus se realizó por Inmunoimpresión de Tejidos y por Reacción en Cadena de la Polimerasa con Transcripción Reversa (RT-PCR). Las muestras que resultaron positivas fueron utilizadas para identificar las variantes genéticas por RT-PCR con cebadores específicos. En la mayoría de las provincias fue alta la incidencia de síntomas asociados a esta enfermedad (82,29%). Se detectó, por primera vez, la presencia de este patógeno en áreas comerciales de todas las provincias que cultivan la caña de azúcar en Cuba. En la mayoría de los cultivares infectados, se observó el mayor grado de severidad de los síntomas, asociada a esta enfermedad. Se determinó la presencia de tres variantes genéticas de SCYLV: BRA-PER, CUB y REU. También se observaron infecciones mixtas de los genotipos BRA-PER + CUB y BRA-PER + REU.

The present study had the purpose of determining the distribution of the Sugarcane yellow leaf virus (SCYLV) and its genetic variants occurring in different provinces of the country. Thirty five fields were examined (348 ha), and 525 samples of leaves were taken in 13 commercial cultivars. Detection of the virus was carried out by Tissue Blot Immunoassay (TBIA) and the molecular analysis by Reverse Transcription- Polymerase Chain Reaction (RT-PCR). The positive samples were used to identify the genetic variants by RT-PCR with specific primers. In most of the provinces, the incidence of symptoms associated with this disease (82.29%) was high. This is the first time that this pathogen has been detected in commercial areas of all the provinces where sugarcane is cultivated in Cuba. In most of the infected cultivars, the highest severity grade of the symptoms associated with this disease was observed. The presence of three genetic variants of SCYLV was determined: BRA-PER, CUB and REU. Mixed infections of the genotypes, BRA-PER + CUB and BRA-PER + REU, were also observed.

Chemical composition of the essential oil of Piper hispidum Sw. and antibacterial activity against Xanthomonas albilineans (Ashby) Dowson and Xanthomonas campestris pv. campestris (Pammel) Dowson

Los aceites esenciales son una alternativa potencial para el control de bacterias fitopatógenas. Los objetivos de este trabajo fueron determinar la composición química del aceite esencial de Piper hispidum Sw. y su actividad antibacteriana sobre Xanthomonas albilineans (Ashby) Dowson y Xanthomonas campestris pv. campestris (Pammel) Dowson. La composición del aceite de las hojas de esta especie, obtenido por hidrodestilación empleando un equipo Clevenger, se investigó por Cromatografía Gaseosa-Espectrometría de Masas (CG/EM). El efecto antibacteriano se evaluó utilizando el método de difusión en agar. El aceite esencial de P. hispidum (rendimiento 0,17%) es una mezcla compleja de 101 componentes. Como componente principal se identificó al trans-a- bisaboleno (11,28%) y se destacan otros como: b-pineno (8,20%), a-pineno (4,76%), allo-aromadendreno (4,92%), (-) espatulenol (3,65%) y L-linalol (3,61%). El aceite presentó una actividad antibacteriana ligera sobre X. campestris pv. campestris y marcada sobre X. albilineans, por lo que puede ser considerado como un candidato para la obtención de antimicrobianos destinados al manejo de esta última bacteria.

The essential oils are a potential alternative to the control of phytopathogenic bacteria. The aims of this work to determine the chemical composition of the essential oil of Piper hispidum Sw. and to established it´s antibacterial activity against Xanthomonas albilineans (Ashby) Dowson and Xanthomonas campestris pv. campestris (Pammel) Dowson. The composition of the leaves essential oil of this plant, obtained by hydrodistillation in a Clevenger-type apparatus, was researched by Gas Chromatography- Mass Spectrometry (GC/MS). The antibacterial effect of the essential oil was evaluated using the agar diffusion method. The essential oil (yield 0,17%) is a complex oil that have trans- a- bisabolene (11,28%) as the principal component and there are others like: b-pinene (8,2%), a-pinene (4,76%), allo-aromadendrene (4,92%), (-) spatulenol (3,65%) and L-linalool (3,61%). The oil shown a weak antibacterial activity against X. campestris pv. campestris and strong against X. albilineans, for that it is may consider as a candidate for the management of this last bacterium.

**Effectiveness of nematophagous fungi on Meloidogyne incognita (Kofoid and White) Chitwood on tomato in field conditions in Loja, Ecuador**

El objetivo del presente trabajo fue determinar el efecto de varios aislamientos autóctonos de los hongos Pochonia chlamydosporia (Goddard) Zare y Gams (Hypocreales: Clavicipitaceae) y Purpureocillium lilacinum Luansa-ard et al. (Hypocreales: Ophiocordycipitaceae) en el control de Meloidogyne incognita (Kofoid y White) Chitwood, en tomate, en condiciones de campo. Se utilizaron seis aislamientos fúngicos y un control sin aplicación, distribuidos según un diseño de bloques al azar con cuatro réplicas. Las aplicaciones de los hongos lograron reducir el índice de agallamiento por M. incognita, así como las poblaciones de juveniles infestivos (J2) en el suelo y en las raíces del cultivo, a la vez que se observó un estímulo en las variables agronómicas número de frutos, masa de los frutos y rendimiento agrícola. Estos resultados constituyen una contribución a la solución del problema de los nematodos formadores de agalla, en el cultivo del tomate en las condiciones de Loja, Ecuador, con recursos locales, no agresivos al medio ambiente.

This work was aimed to evaluate the effect of isolates of the fungi Pochonia chlamydosporia (Goddard) Zare and Gams (Hypocreales: Clavicipitaceae) and Purpureocillium lilacinum Luansa-ard et al. (Hypocreales: Ophiocordycipitaceae) in the Meloidogyne incognita (Kofoid and White) Chitwood control in tomato in field conditions. The assay comprised six fungic isolates and a control without fungi, in a ramdomized block design. In treated plants the gall index and the nematode population in roots and in the soil were reduced in comparison with the untreated plots. The number of fruits, the weight of fruits and yields were enhanced in the plots treated with the fungi. These results are a contribution to the solution of the root-knot nematode problem in the conditions of Loja, Ecuador, with local resources and no harmful to the environment.

Antibacterial activity of esential oils against pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum

Los aceites esenciales son considerados una importante alternativa para el manejo sustentable de plagas en la agricultura, debido a su reconocida actividad antimicrobiana sobre diversas plagas clave en cultivos de importancia económica. El objetivo de este trabajo fue identificar las potencialidades de aceites esenciales de Thymus vulgaris L., Pimpinella anisum L., Citrus sinensis (L.) Osbeck., Ocimum basilicum L., Curcuma longa L., Ruta chalepensis L. y Melaleuca quinquenervia (Cav) S.T. Blake como candidatos para el desarrollo de nuevos agentes antibacterianos para el manejo de Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum. Los aceites esenciales se extrajeron por hidrodestilación empleando un equipo Clevenger, y su evaluación biológica se realizó por el método de difusión en agar. Las Concentraciones Mínimas Inhibitorias (CMI) y Mínimas Bactericidas (CMB) del aceite más promisorio se establecieron por el método de las diluciones seriadas; su composición química se determinó por CG/EM. Al compuesto mayoritario del aceite más promisorio se le determinó las CMI y CMB. Los aceites de albahaca y anís produjeron una inhibición ligera del crecimiento de la bacteria y el de tomillo mostró la actividad antibacteriana más promisoria (CMI = CMB = 0,1%). En la composición química del aceite prevalecen los compuestos monoterpenoides. Los principales constituyentes identificados fueron el timol (57,0%), el p-cimeno (14,7%) y el g- terpineno (14,1%). El timol evidenció un elevado efecto antibacteriano sobre P. carotovorum subsp. carotovorum (CMI = CMB = 0,2%). Los resultados obtenidos señalan al aceite de tomillo como ingrediente activo promisorio para desarrollar nuevos plaguicidas destinados al manejo de P. carotovorum subsp. carotovorum en cultivos de importancia económica.

The essential oils have been considered an important alternative to sustainable management of pests in agriculture due to their recognized antimicrobial activity against several pests of important economic crops. The aim of this study was to identify the potential of essential oils of Thymus vulgaris L., Pimpinella anisum L., Citrus sinensis (L.) Osbeck., Ocimum basilicum L., Curcuma longa L., Ruta chalepensis L. and Melaleuca quinquenervia (Cav) S.T. Blake as candidates for the development of new antibacterials. Essential oils were extracted by hydrodistillation using a Clevenger- type equipment and their biological evaluation against Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum (Jones) Waldee emends. Hauben et al. was carried out by agar diffusion method. The minimal inhibitory concentration (MIC) and the minimal bactericidal concentration (MBC) of the most active essential oil was carried out by the serial dilution method and its chemical composition was determined by GC / MS. The MIC and MBC of the main compound from the most active essential oil were determined by the serial dilution method. Among the tested oils, anise and white basil essential oils showed weak activity, whereas the essential oil of thyme showed strong antibacterial activity against the evaluated bacteria (MIC = MBC = 0.1%). The chemical composition of the oils was characterized by the prevalence of monoterpenoid and sesquiterpenoid compounds. Thymol was the main constituents (57.0%), followed by p-cimene (14.7%) and g- terpinene (14.1%). It exhibited strong antibacterial activity against P. carotovorum subsp. carotovorum (MIC = MBC = 0.2%). The results obtained pointed to the essential oil of thyme as a promising active ingredient for developing new pesticides for the control of P. carotovorum subsp. carotovorum in crops of economic importance.

Predatory mirids (Hemiptera: Heteroptera: Miridae) in tomato and tobacco in Cuba

In order to update the presence of species of mirid predators and their impact on solanaceous crops of interest, samples were taken from tomato and tobacco in open fields and from tomato in covered crops of selected locations of Mayabeque and Las Tunas Provinces every seven days. In each sampling, mirid specimens were counted and collected for their subsequent identification and determination of incidence. The results showed the presence of the species Nesidiocoris tenuis Reuter, Macrolophus praeclarus (Distant) and Cyrtopeltis = Engyatus varians (Distant). The mirids were present in most samples taken in tomato and tobacco, while the incidence remained over 40% in both crops.

Con el objetivo de actualizar la presencia de especies de míridos depredadores y su incidencia en solanáceas de interés, se realizaron 10 muestreos en los cultivos de tomate y tabaco a campo abierto y en casas de cultivos protegidos de tomate, en localidades seleccionadas de las provincias Mayabeque y Las Tunas desde finales de marzo a inicios de julio 2013. En cada muestreo se procedió al conteo de míridos y la recolecta de ejemplares para su posterior identificación y determinación de la incidencia. Los resultados evidenciaron la presencia de las especies Nesidiocoris tenuis Reuter, Macrolophus praeclarus (Distant) y Cyrtopeltis= Engyatus varians (Distant). Los míridos estuvieron presentes en la mayoría de los muestreos realizados en el tomate y el tabaco. La incidencia se mantuvo por encima del 40 % en ambos cultivos.

Meliola crucifera Starbärk causing black mildew in Melicoccus bijugatus Jacq. in Colombia

El objetivo del presente trabajo fue identificar la especie del agente causal del mildiu negro del mamoncillo (Melicoccus bijugatus Jacq.) en Colombia. Para identificarlo se hizo una revisión de las colecciones de mildiu negro sobre mamoncillo, depositadas en el Museo Micológico de la Universidad Nacional de Colombia, sede Medellín (MMUNM). La observación de los síntomas y signos del hongo se realizó con la ayuda de un estereomicroscopio Boeco® y, a partir de este, se realizaron los micropreparados en lactofenol mediante raspados a mano alzada. La observación de las estructuras presentes, mediciones y microfotografías se realizaron con un microscopio Carl Zeiss® Axiostar Plus con cámara digital Canon® PowerShot G5. Este hongo se caracteriza por provocar manchas negras de hasta cinco milímetros de diámetro en las hojas, generalmente en el haz, y ocasionalmente, en el envés. El hongo posee hifas oscuras, rectas; hifopodios opuestos, dispersos, cilíndrico-clavados; células conidiógenas mezcladas con los hifopodios, opuestas en su mayoría, ampuliformes; setas alrededor del peritecio, numerosas, dispersas, rectas, con ramificaciones primarias y secundarias. Peritecios dispersos, verrucosos, de color marrón oscuro; ascas unitunicadas, evanescentes; ascosporas elipsoides, con cuatro septos, constrictas en el septo; pared marrón-canela. Los resultados morfológicos permitieron determinar el hongo Meliola crucifera Starbärk, como agente causal del mildiu negro del mamoncillo.

The objective of this study was the species-level identification of the causal agent of the black mildew of mamoncillo (Melicoccus bijugatus) in Colombia using collections of black mildew of mamoncillo deposited at the Museo Micológico de la Universidad Nacional de Colombia Medellín (MMUNM). Observation of symptoms and signs, free-hand sections of structures, measurements, and photomicrographs were performed with a Boeco® stereoscope and a Carl Zeiss® Axiostar Plus microscope equipped with a Canon® PowerShot G5 digital camera. This fungus is characterized by foliar black spots up to five millimeters in diameter mostly on the adaxial leaf surface. Hyphae: dark brown, erect or sinuous; hyphopodia: opposite, scattered, arcuate; conidiogenous cell mixed with hyphopodia, usually opposite, ampulliform; mycelial setae: around perithecia, numerous, scattered, erect, with apex 1-2 dichotomous. Perithecia: scattered, verrucose, dark brown; asci unitunicate, evanescent; ascospores: ellipsoid, four-septated, constricted at the septa; cinnamon-brown. The morphological results allowed the identification of the causal agent of black mildew of mamoncillo as the fungus Meliola crucifera.

Detection of nuclear polyhedrosis virus (BmNPV) in silkworm (Bombyx mori L.) by nucleic acid hybridization

El gusano de seda de la morera, Bombyx mori (Lepidoptera: Bombycidae), es afectado por numerosas enfermedades como la Grasserie, provocada por el virus de la poliedrosis nuclear (BmNPV). Su manejo y control se dirigen principalmente a la prevención y diagnóstico temprano. El objetivo de este trabajo estuvo encaminado al diagnóstico del virus BmNPV asociado a los síntomas de Grasserie, observados en las crías de gusano de seda en Cuba. Se desarrollaron los métodos de diagnóstico molecular basados en la hibridación radiactiva y no radiactiva de ácidos nucleicos, a partir de extracciones de poliedros de larvas del tercer y cuarto instar. En ambos métodos de hibridación se pudo detectar la presencia de BmNPV. En el caso de la hibridación radiactiva, se obtuvieron resultados positivos del 5,5% de las muestras analizadas del tercer instar, lo que coincide con los resultados de la hibridación no radiactiva. Sin embargo, en el cuarto instar se detectó el 28,8% de muestras positivas por hibridación radiactiva y 22,2% por la no radiactiva, del total de muestras analizadas. Aunque la hibridación radiactiva mostró más sensibilidad, ambos métodos permitieron confirmar que es posible detectar BmNPV a partir del tercer instar, lo cual permite establecer las medidas de tratamiento preventivo y manejo de las crías para minimizar las pérdidas productivas

The mulberry silkworm, Bombyx mori L. (Lepidoptera: Bombycidae) is affected by numerous diseases like Grassery, caused by the nuclear polyhedrosis virus (BmNPV). The management and control of these diseases mainly consist of prevention and early diagnosis. The objective of this work was aimed at the diagnosis of the virus BmNPV associated with the symptoms of Grassery observed in the production areas of the Mulberry silkworm in Cuba. Molecular diagnostic methods for BmNPV based on radioactive and non-radioactive hybridization of nucleic acids (HNA), from larvae's polyhedra extractions in the 3rd and 4th instars, were developed. In both hybridization methods, BmNPV presence was detected. Positive results of 5.5% of samples analyzed in the 3rd larval stage were obtained using radioactive hybridization, which agreed with non-radioactive hybridization results. Nevertheless, in the 4th stage, 28.8% of positive samples were detected using radioactive hybridization and 22.2% of total analyzed samples for non-radioactive hybridization. Although radioactive hybridization showed higher sensibility, both methods allowed to confirm that it was possible to detect BmNPV from the 3rd larval stage, which allows to establish the enhancement of preventive treatment and management measures of mulberry litters with the objective of minimizing production loses.

**Pathogenic bacteria of Bombyx mori L. larvae in breeding areas of Cuba**

Los aislados bacterianos SUR - 6, DiP/2012 y Oct/Y se obtuvieron a partir de gusanos de seda (Bombyx mori L.) infectados naturalmente, los cuales presentaban síntomas evidentes de flacheria bacteriana. El presente trabajo tuvo como objetivo identificar los patógenos bacterianos asociados a estos síntomas observados en las crías de gusano de seda en zonas de Cuba, para establecer medidas de control y saneamiento. Los estudios morfológico, bioquímico y fisiológico de los aislados permitieron identificarlos como Enterobacter cloacae (SUR - 6), Serratia marcescens (DiP/2012) y Acinetobacter baumanii (Oct/Y), los cuales, en la literatura, son informados ampliamente como patógenos de insectos.

The bacterial isolates SUR - 6, DiP/2012 and Oct/Y were isolated from silkworms (Bombyx mori L.) infected naturally, which presented evident symptoms of bacterial flacheria. The goal of this study was to identify the bacterial pathogens associated with symptoms observed in silkworm breeding areas of Cuba, to establish control and sanitation measures. The morphological, biochemical and physiologic study allowed to identify these isolates as Enterobacter cloacae (SUR - 6), Serratia marcescens (DiP /2012), and Acinetobacter baumanii (Oct/Y), which are informed widely in the literature like pathogens of insects.

**Chemical composition and antibacterial activity of the essential oil from Ruta chalepensis L.**

El aceite esencial de Ruta chalepensis L, hierba perteneciente a la familia Rutaceae, es de utilidad en perfumería, como saborizante y posee actividad insecticida. Su composición depende de las condiciones geobotánicas específicas y se han descrito varios quimiotipos. El objetivo de este trabajo fue establecer las potencialidades del aceite esencial de R. chalepensis como candidato para el desarrollo de nuevos antibacterianos en el manejo de fitopatógenos. El aceite esencial se obtuvo por hidrodestilación con equipo Clevenger; se determinó su rendimiento y su composición química se investigó por CG/EM. La evaluación del efecto antibacteriano se realizó por difusión en agar. En la composición del aceite esencial de ruda (rendimiento 0,3 % (v/p)) predominaron las cetonas alifáticas; las de mayor abundancia relativa fueron 2-undecanona (34,88 %) y 2-nonanona (25,23 %). La esencia de R. chalepensis inhibió el crecimiento de Xanthomonas albilineans (Ashby) Dowson y Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis (Smith) Davis et al.. El efecto antibacteriano sugiere que esta esencia podría constituir la base del desarrollo futuro de nuevos antimicrobianos para el manejo de plagas en caña de azúcar y tomate.

The essential oil of Ruta chalepensis L, herb belonging to Rutaceae family, is useful in perfumery, for flavoring and has insecticidal activity. Its composition depends on the specific geobotanical conditions, and several chemiotypes has been described. The aim of this work was to establish the potential of the essential oil obtained from R. chalepensis as a candidate for the development of new antibacterials in the management of plant pathogens. The essential oil was obtained by hydrodistillation with a Clevenger equipment; the yield determined and its chemical composition investigated by GC/MS. The antibacterial assessment was conducted using the agar diffusion technique. In the composition of the essential oil of rue (yield of 0.3 % (v/w)), aliphatic ketones were predominant; 2-undecanone (34.88%) and 2-nonanone (25.23%) showed the higher relative abundance. R. chalepensis essence inhibited growth of Xanthomonas albilineans (Ashby) Dowson and Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis (Smith) Davis et al. The antibacterial effect suggests that this essence can provide the basis for future development of new antimicrobials for pest management in sugar cane and tomato.

**Insecticide in vitro activity of crude extract of Beauveria bassiana (Balsamo) Vuillemin on larvae of Phyllophaga spp. (Harris)**

Este ensayo tuvo como objetivo determinar el efecto insecticida de los extractos crudos de Beauveria bassiana (Bálsamo) Vuillemin sobre larvas de gallina ciega (Phyllophaga spp.) (Harris). Los extractos se obtuvieron a partir de un medio de fermentación sólida del hongo entomopatógeno y las larvas del insecto (Phyllophaga spp) se recolectaron en zonas del municipio de Zacatepec, Morelos, México. Se diseñó un experimento con dos criterios: A. con sustrato: T1 Agua destilada (control), T2.- Extracto crudo de B. bassiana. B. sin sustrato: T3.- Agua destilada y T4.- Extracto crudo de B. bassiana; se utilizaron 8 larvas por tratamiento. A cada larva se le inyectó 10 µl y se observaron cada 48 horas por 10 días. Los datos se sometieron a un análisis no paramétrico (Kruskal-Wallis). Con respecto al T1 no hubo mortalidad (0%) durante todo el experimento. T2 la mortalidad se presentó a las 72 horas (12.5%); T3, se registró el 12.5% de mortalidad a las 48Hrs.; para el T4 la mortalidad fue de 37.5% en el mismo periodo de tiempo. Al octavo día, los tratamientos 2, 3 y 4 se registró 62.5% de mortalidad. Los resultados obtenidos permiten demostrar la potencialidad insecticida del extracto crudo de B. bassiana.

The objective of this test was to evaluate the insecticidal effect of the crude extracts of Beauveria bassiana (Balsam) Vuillemin on larvae of white grubs (Phyllophaga spp.) (Harris). The extracts were obtained from a solid fermentation medium of the enthomopathogenic fungus, and the insect larvae (Phyllophaga spp.) were collected in areas of the municipality of Zacatepec, Morelos, Mexico. An experiment was designed with two criteria: A. with substrate: T1 distilled water (control), T2- crude extract of B. bassiana and B. without substrate: T3- distilled water and T4- crude extract of B. bassiana; eight larvae per treatment were used. Each larva was injected with 10 µl of the treatment and observed every 48 hours for 10 days. The data were submitted to a non-parametric analysis (Kruskal-Wallis). With respect to T1, there was no mortality (0 %) during the entire experiment. In T2, mortality was observed at the 72 hours (12.5 %); in T3, 12.5% mortality was recorded at 48hrs; for T4, mortality was 37.5 % in the same period of time. On the eighth day, treatments 2, 3 and 4, 62.5 % mortality was recorded. The results obtained allowed to show the insecticide potential of the crude extract of B. bassiana.

COMPAPROP: A system for multiple proportion comparisons

Se desarrolló un software, implementado en macros con lenguaje Microsoft Visual Basic para Aplicaciones y Framework Grails, que permite comparar proporciones múltiples por los métodos: Wald, Wald con corrección por continuidad, McNemar y Few Test. El sistema COMPAPROP brinda una forma rápida y eficaz de realizar una selección de tratamientos sobre la base de su contraste.

A software was developed, implemented in macros using Microsoft Visual Basic for Applications and Grails Framework, allowing to compare multiple proportions by the methods Wald, Wald with continuity correction, McNemar and Few Test. COMPROP System provides a fast and efficient way for carrying out a variety of treatments based on its contrast.

Soybean and radish as new hosts of Begomoviruses in Cuba

Detection and identification of Ca. Phytoplasmas sp. and begomovirus on Phaseolus vulgaris L. in Cuba