Scielo RSS http://scielo.sld.cu/rss.php?pid=1025-028X20010003&lang=en vol. 10 num. 3 lang. en http://scielo.sld.cu/img/en/fbpelogp.gif http://scielo.sld.cu http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1025-028X2001000300001&lng=en&nrm=iso&tlng=en Como parte de los estudios de caracterización de la respuesta inmune inducida en vacunados con vax-SPIRAL (Vacuna Antileptospirósica Trivalente) se vacunaron 109 y 69 voluntarios pertenecientes a la Universidad Agraria y al Centro de Sanidad Agropecuaria respectivamente, pertenecientes al municipio San José de Las Lajas, provincia La Habana. Se realizaron dos muestreos de sangre: antes de la aplicación de la primera dosis (T0) y 21 días después de la segunda dosis (T1). La IgG específica fue medida mediante un ELISA indirecto cuantitativo y su efecto protector se midió mediante un ensayo de protección pasiva en hámster. De acuerdo con el nivel de IgG específica medido por ELISA, se prepararon cuatro mezclas de sueros a evaluar. Entre las 18-24 h de inoculados los sueros, los hámsters se retaron frente a 1 000 -10 000 DL50 de los serovares canicola, copenhageni y mozdok, siendo observados durante 14 días. Coeficientes de correlación de 0,94 y 0,97 indicaron una fuerte relación entre el nivel de IgG y protección en el caso de canicola y mozdok respectivamente, para copenhageni se obtuvo un coeficiente de correlación de 0,83 indicativo de una moderadamente fuerte relación. El nivel de IgG específica medido en el suero de personas expuestas al riesgo natural está relacionado con la protección.<hr/>As part of the characterisation studies of the human immune response induced in vaccinated people with vax-SPIRAL (Trivalent Antileptospirosic Vaccine), 109 and 69 voluntary people from the Universidad Agropecuaria and Centro Nacional de Sanidad Agropecuaria, Havana Province were vaccinated respectively. Two blood samples were taken, before vaccination (T0) and 21 days after the second dose (T1). The specific IgG response was measured by means a quantitative indirect ELISA and its protective effect was evaluated by a passive protection test in hamsters. Taking into consideration the ELISA results four pools of sera were prepared and inoculated into the hamsters. They were challenge 18-24 hours later with 1000 -10 000 DL50 of virulent strains of serovars canicola, copenhageni and mozdok. The animals were observed during 14 days. The correlation coefficient of 0.94 and 0.97 indicating a relatively strong relationship between the IgG level and protection for canicola and mozdok respectively, for copenhageni a correlation coefficient equals to 0,83 was obtained indicating a moderately strong relationship. The specific IgG response of sera from risk people was related with protection. http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1025-028X2001000300002&lng=en&nrm=iso&tlng=en La respuesta IgG sérica inducida por la aplicación de la vacuna antileptospirósica trivalente (canicola, copenhageni, mozdok) vax-SPIRAL fue evaluada en dos poblaciones de riesgo del municipio San José de Las Lajas, La Habana, Cuba. Fueron determinados los niveles de anticuerpos IgG antes y después de la vacunación mediante ELISA, empleando como antígeno de recubrimiento células completas inactivadas de los serovares componentes de la vacuna. Se definió como criterio de respuesta el incremento en dos veces de la concentración de IgG posterior a la vacunación. La vacuna indujo una respuesta de anticuerpos IgG similar para los tres serovares en ambas poblaciones, obteniéndose entre 63,77% y 70,04% de respuesta. Se observó una elevada seroprevalencia de anticuerpos contra los tres serovares antes de la vacunación. Se obtuvieron además diferencias estadísticas significativas (p<0,05) entre los niveles de IgG antes y después de la vacunación en las dos poblaciones. Estos resultados constituyen la primera demostración de la capacidad inmunogénica de vax- SPIRAL en población de riesgo expuesta y una evidencia de que la respuesta está influenciada, entre otros factores, por el contacto previo con el germen.<hr/>The humoral immune response induced by the trivalent (canicola, copenhageni, mozdok) leptospiral vaccine, vax- SPIRAL, was studied in two risk populations of San José de Las Lajas, Cuba. The levels of IgG antibodies were evaluated before and after vaccination by means of ELISA, using whole-cell antigens of serovars mentioned above for coating the microtiter plates. Two-fold increasing of the IgG concentration after vaccination was defined as response criterion. The vaccine induced a similar IgG response in both populations, between 63,77% and 70,04%. A high seroprevalence of IgG antibodies against the three serovars was observed. Significant statistical differences (p<0,05) were obtained between IgG levels before and after vaccination. These results are the first demonstration of the immunogenicity of vax-SPIRAL in people expose at risk and evidence that the response may be influenced, among other factors, by the previous contact with the micro-organism. http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1025-028X2001000300003&lng=en&nrm=iso&tlng=en Con el objetivo de evaluar la respuesta inmune inducida por la vacuna cubana vax-SPIRAL se desarrollaron tres ELISAs de tipo indirecto para la cuantificación de IgG humana antileptospira, en el cual se emplearon como antígenos de captura las células enteras de Leptospira interrogans de los serovares canicola canicola, icterohaemorrhagiae copenhageni y pomona mozdok, inactivadas con formaldehído y posteriormente desecadas a 33 °C durante 16-20 h en placas para ELISA. Para la cuantificación se empleó un suero estándar al que se le asignaron unidades arbitrarias, correspondientes al recíproco del título obtenido por microaglutinación (MAT). Estos fueron 31, 12 y 58 U/mL respectivamente para los tres serovares señalados que se incluyen en el preparado vacunal. Se utilizó un conjugado anti IgG humana-peroxidasa, el cual se une a los anticuerpos específicos contra cada serovar, la reacción se evidencia por la acción de la enzima sobre la mezcla sustratocromógeno (ortofenilendiamina) que genera color. El método normalizado se validó para los tres serovares; la precisión intra e interensayos fueron excelentes, con coeficientes de variación inferiores al 10%. Las desviaciones de la recuperación y linealidad fueron también inferiores al 10%. El suero control se ubicaron para los tres serovares en la zona de mayor interés para las muestras. Los ELISAs mostraron un 100% de sensibilidad para los tres serovares y se obtuvieron valores de 93,33% de especificidad para los serovares canicola canicola e icterohaemorrhagiae copenagheni y de 100% para el serovar pomona mozdok. El límite de detección para cada uno de los serovares fue de 0,478; 0,127 y 0,632 U/mL respectivamente.<hr/>Indirect ELISAs for the quantitative determination of human IgG-class antibodies to leptospira were developed for the evaluation of the immune response elicited by vax-SPIRAL. Whole cells of Leptospira interrogans, serovars canicola canicola, icterohaemorrhagiae copenhageni and pomona mozdok were used as capture antigens. The formaldehydeinactivated cells were dried at 33 °C between 16-20 hours on ELISA plates. The units of the standard serum were assigned according the inverted microagglutination tittles, and were 31, 12 and 58 U/mL respectively. An anti-human IgG class / HRPO conjugate was employed for the detection of antibodies to leptospira, then the chromogenic substrate (H2O2-orthophenilendiamine) is hydrolyzed by the enzyme of the conjugate, and the intensity of the color is proportional to the antibody concentration in the sample. The intra and interassay precision studies achieved variation coefficients below 10%. The deviations of the recovery and linearity tests were below 10% also. The control serum was located according the samples. The sensitivity was 100% for all serovars, and the specificity was 93,33% for the serovars canicola canicola and icterohaemorrhagiae copenhageni, and 100 % for pomona mozdok. The detection limits were 0.478, 0,127 and 0,632 U/mL respectively.