Vaccimonitor

A single dose of live-attenuated 638 Vibrio cholerae oral vaccine is safe and immunogenic in adult volunteers in Mozambique

A placebo-controlled randomized, double-blind, clinical trial was carried out to assess the safety, reactogenicity, and immunogenicity of the lyophilized vaccine candidate against cholera derived from the live attenuated 638 Vibrio cholerae O1 El Tor Ogawa strain. One hundred and twenty presumably healthy female and male adult volunteers aged between 18 and 50 years were included. They were from Maputo, Mozambique a cholera endemic area, where, in addition, human immunodeficiency virus (HIV) seroprevalence is from 20 to 30%. A dose of 2 x 10 9 colony forming units (CFU) was given to 80 subjects and other 40 received only vaccine lyoprotectors as a placebo control. Out-patient follow-up of adverse events was carried out during the following 30 days after vaccination. The immune response was evaluated by the estimation of seroconversion rate and the geometric mean titer (GMT) of vibriocidal antibodies in the sera from volunteers that was collected previously, and at days 14 and 21 after immunization. No serious adverse events were reported. The adverse events found in the vaccine group were similar to those of the placebo groups. They were independent from the detection of antibodies against HIV-1, HIV-2, hepatitis (H) A; HC and hepatitis B surface antigen. The presence of helminthes did not modify the incidence of adverse events. The 638 vaccine strain was isolated in 37 (46.25%) vaccinated volunteer's feces. The peak of the GMT of vibriocidal antibodies in the vaccine group was 9056 versus 39 in the placebo group at 14 days with a total seroconversion of 97.4% at 21 days. The 638 vaccine candidate is safe and immunogenic in a cholera endemic region.

Se realizó un ensayo clínico controlado con placebo, aleatorizado y a doble ciego, para evaluar la seguridad, reactogenicidad e inmunogenicidad del candidato vacunal liofilizado contra el cólera de la cepa viva atenuada 638 de V. cholerae O1 El Tor Ogawa. Se incluyeron 120 voluntarios de ambos sexos, aparentemente sanos, entre 18 y 50 años de edad, en Maputo, Mozambique, un área endémica de cólera, donde la seroprevalencia del virus de inmunodeficiencia humana (VIH) es de 20% a 30%. Ochenta sujetos recibieron como tratamiento una dosis oral de 2 x 10 9 UFC del candidato vacunal 638 y otros 40 una dosis del placebo que contenía solo los lioprotectores. Se realizó seguimiento ambulatorio de los eventos adversos durante 30 días. La respuesta inmune se evaluó por medio de la estimación de la tasa de seroconversión y la media geométrica del título (MGT) de anticuerpos vibriocidas en los sueros de los voluntaries, antes y a los 14 y 21 días posteriores a la inmunización. No se reportaron eventos adversos graves. La incidencia de eventos adversos reportados en el grupo que recibió la vacuna fue similar al del grupo placebo. Los eventos adversos encontrados fueron independientes de la detección de anticuerpos contra el VIH-1, VIH-2, hepatitis (H) A, HC y el antígeno de superficie del virus de la hepatitis B. La presencia de helmintos no modificó la incidencia de eventos adversos. La cepa vacunal fue aislada en 37 (46,25%) voluntarios que recibieron la vacuna. A los 14 días el pico de la MGT de anticuerpos vibriocidas en el grupo de la vacuna fue de 9056 frente a 39 en el grupo placebo, con una seroconversión total de 97,4% a los 21 días. Se concluye que el candidato vacunal 638 es seguro e inmunogénico en una región endémica de cólera.

Breastfeeding and humoral immune response against tetanus and diphtheria toxoid in children of 2 years old

Teniendo en cuenta que el impacto de la lactancia materna sobre la respuesta a la vacunación es controversial, se evaluó la influencia de la lactancia materna sobre la respuesta humoral a las vacunas con toxoide tetánico y diftérico en niños de 2 años de edad que culminaron la etapa básica de inmunización del esquema de vacunación infantil. Se seleccionaron 44 niños que se diferenciaron en dos grupos de estudios, de acuerdo con el tiempo que fueron amamantados. Para la determinación de las concentraciones de antitoxina diftérica y tetánica se utilizaron ensayos inmunoenzimáticos en fase sólida (ELISA). Al aplicar el test de Student en los resultados obtenidos se constató que recibir la lactancia materna exclusiva por 6 meses o más determinó un incremento en las concentraciones de antitoxina diftérica, mientras que no se evidenciaron diferencias en cuanto a las concentraciones de antitoxina tetánica detectadas entre los niños lactados de manera exclusiva por 6 meses o más, con aquellos lactados por períodos inferiores.

Since the impact of breastfeeding on the response to vaccination is controversial, we studied the effect of breastfeeding on humoral response to tetanus and diphtheria vaccination in two years old children who have ended the immunization basic stage of the vaccination schedule. Forty-four children were selected, they were then divided into two study groups according to the time they were breastfeeding. Solid phase immunosorbent assays (ELISA) were used to determine concentrations of diphtheria and tetanus antitoxin. After applying the Student test to results, it was proved that exclusive breastfeeding for six months or longer showed an increase in the concentrations of diphtheria antitoxin, while there was no difference of tetanus antitoxin concentrations detected among children exclusively breastfed for six months or more, with those breastfed for lesser periods.

Influence of mucosal immunization routes on herpes simplex virus type 2 protection with AFCol as adjuvant

Las vacunas mucosales se han planteado como una estrategia prometedora para inducir protección mucosal. El virus herpes simple tipo 2 es uno de los patógenos más frecuentes en el humano transmitidos por vía sexual. Varios candidatos vacunales contra este patógeno se han evaluado, pero no han sido efectivos, por lo que aún no se cuenta con una vacuna profiláctica ni terapéutica. La gD2 es una glicoproteína recombinante y está reportada como uno de los antígenos de importancia vacunal contra este germen. Contamos con el cocleato derivado del proteoliposoma de Neisseria meningitidis serogrupo B (AFCo1) que ha mostrado capacidades adyuvantes por varias vías de inmunización. El objetivo de este trabajo fue evaluar la protección inducida en ratones por el AFCo1-gD2, administrada por diferentes vías mucosales. Se utilizaron ratones hembras C57BL6, los cuales fueron inmunizados por vía intranasal (IN), intravaginal (IVag) o intrarrectal (IR) con AFCo1-gD2 o gD2 sola. Se determinó la IgG anti gD2, la proliferación celular específica, la replicación viral en lavado vaginal, los signos de la enfermedad y la protección frente al reto viral. Se obtuvo respuestas significativas de IgG anti gD2 por todas las vías, aunque la IN mostró los valores más elevados. Se observó proliferación celular en células de animales inmunizados IN e IVag, pero no por vía IR. Se observó la mayor protección (100%) en los animales inmunizados por vía IN. Se concluye que la vía nasal es la más prometedora en la inducción de protección contra este reto viral.

Mucosal vaccines are a promising strategy to induce mucosal protection. Herpes simplex virus type 2 is the commonest pathogens in the human transmitted by exposure at the genital mucosal surfaces. Many vaccine candidates against this pathogen have been evaluated; but they have not been effective, and neither a prophylactic nor a therapeutic vaccine has been yet obtained. The gD2 is a recombinant glycoprotein and it is reported as one of the antigens of importance for vaccine against this virus. There is the cochleate (AFCo1) derived from proteoliposome of Neisseria meningitidis serogroup B. This cochleate has shown potentialities as adjuvant for several immunization routes. The objective of this study was to evaluate the protection induced in mice by the AFCo1-gD2 administered by different mucosal routes. Female mice C57BL/6 were used and immunized by: intranasal (IN), intravaginal (IVag), or intrarectal (IR) routes with AFCo1-gD2 or gD2 alone. The anti-gD2 IgG and specific cellular proliferation were determined and the viral replication in vaginal wash, the signs of disease and the protection against the viral challenge, were measured too. A significant anti-gD2 IgG response was obtained by all routes, although the IN route showed the highest values. Cellular proliferation was observed in cells of animals immunized IN and IVag route; but not by IR route. In addition, a higher protection (100%) in the animals immunized with AFCo1-gD2 by IN route was observed. In conclusion the intranasal is the most promising route in the protection induction against this viral challenge.

Two murine biomodels comparison in the head sperm morphology assay

Este trabajo tuvo como objetivo realizar una comparación entre el ratón Balb/c y ratas Sprague Dawley (SD) como biomodelo en el ensayo de la morfología de la cabeza del espermatozoide, teniendo en cuenta la frecuencia de formas anómalas en la cabeza del espermatozoide basales e inducidas con ciclofosfamida (CF). Se utilizaron 20 animales/grupo de la línea de ratón Balb/c y de ratas Sprague Dawley, administrados durante 35 días en el ratón y 52 días en la rata. Se creó un grupo control negativo (no administrado), dos controles con sustancias vehículo y un control positivo administrado con CF 50 mg/kg por vía intraperitoneal durante cinco días consecutivos. El mejor biomodelo experimental resultó ser el de los ratones Balb/c que difirió significativamente con los resultados obtenidos en las ratas SD, teniendo en cuenta los valores espontáneos e inducidos en la concentración espermática y la frecuencia de espermatozoides morfológicamente anómalos en epidídimos. Este estudio permitirá utilizar esta línea de ratón con mayor eficiencia en la evaluación genotóxica y toxicológica de la fertilidad preclínica de drogas, vacunas y otros productos.

This research aimed at comparing Balb/c mice and Sprague Dawley rats as biomodel in the head sperm morphology assay, keeping in mind the frequency in anomalous forms in the sperm head basal and induced with cyclophosphamide (CF). Twenty animals/group were used of Balb/c mice line and Sprague Dawley (SD) rats, administered during 35 days in the mouse and 52 days in the rat. Using a negative control group (not administered), two substance-vehicle controls and positive control CF administered with 50 mg/kg, by intraperitoneal route during five consecutives days. The best experimental biomodel turns out to be the Balb/c mice differing significantly from the results obtained in the SD rats, keeping in mind the spontaneous and induced values in the spermatic concentration and the frequency of anomalous epididymis sperms. This study will allow to use mice species with more efficiency in the genotoxic and preclinical toxicology fertility evaluation of drugs, vaccine and other products.

Determination of Sodium deoxycolate residues in vaccinal formulation by micellar electrokinetic chromatography

El deoxicolato de sodio (DCNa) es el surfactante por excelencia empleado en la industria biofarmacéutica para la solubilización de vesículas de membrana externa. Es bien conocida la importancia que reviste el control de este metabolito en materiales biológicos, debido a su alta toxicidad para el organismo humano. Para demostrar la presencia de bajas concentraciones de este metabolito en formulaciones vacunales es necesario el empleo de una metodología altamente selectiva, sensible, específica y reproducible. En el presente reporte se utilizó la cromatografía electrocinética micelar (MEKC) en un analizador capilar de iones (Water corp. Milford MA), con una detección a 185 nm, con lámpara de mercurio. Se empleó un capilar de sílica fundida (Waters Corp. Milford MA); se evaluó la pureza de dos lotes de deoxicolato de sodio y se analizaron 15 muestras de vesículas purificadas, ingrediente farmacéutico activo de formulaciones vacunales. Los datos fueron registrados y procesados con el software Millennium TM (Waters Corp. Milford MA). Se determinó que los lotes de deoxicolato de sodio contenían 1,19% y 0,44% de ácido cólico contaminante y que el 93% de las muestras de vesículas purificadas tenían de 0 a 2,44 µg DCNa/100 µg de proteína. Los resultados obtenidos por MEKC fueron comparados con una modificación de una prueba cinética empleada para determinar ácidos biliares en sangre (Merckotest). El sistema MEKC mostró mejores resultados con respecto al Merkotest.

The sodium deoxycholate (DCNa) source is the surfactant used in the biopharmaceutical industry for the solubilization of outer membrane vesicles. It is well known the importance of control of this metabolite in biological materials due to its high toxicity for humans. To demonstrate significant small variations of this metabolite in vaccine formulations it is necessary to use a methodology highly selective, sensitive, specific and reproducible. In this report we used the micellar electrokinetic chromatography (MEKC) in a Capillary Ion Analyzer (Water corp. Milford MA) detection at 185 nm mercury lamp. It employed a fused silica capillary uncoated (Waters Corp. Milford MA). We assessed the purity of 2 lots of sodium deoxycholate and analyzed 15 samples of purified vesicles active pharmaceutical ingredient vaccine formulations. Data were recorded and processed with software Millennium TM (Waters Corp. Milford MA). It was found that lots of sodium deoxycholate containing 1.19 and 0.44% cholic acid and contaminate that 93% of the purified vesicles samples were from 0 to 2.44 mg protein DCNa/100 µg. MECK's results were compared with a kinetic test used to determine bile acids in blood (Merckotest). MECK system showed better results regarding the Merkotest.

Relevant aspects of the use of Mycobacterium ´habana ´ as Tuberculosis vaccinal candidate

La eficacia protectora de la actual vacuna (BCG) contra la tuberculosis, para contrarrestar las formas pulmonares de esta enfermedad y su reactivación, resulta variable o poco eficiente, lo cual impone la búsqueda urgente de nuevas alternativas profilácticas contra esta enfermedad. Basados en las ventajas inmunogénicas que ofrece el uso de vacunas vivas, se han encaminado diferentes estrategias de este tipo empleando mutantes auxotróficos de Mycobacterium tuberculosis , BCG recombinante o micobacterias no tuberculosas. Existen evidencias experimentales acerca de la protección conferida tras la vacunación con cepas vivas, inactivadas o fracciones proteicas de Mycobacterium'habana' TMC-5135 contra la infección por Mycobacterium tuberculosis. Esta respuesta protectora parece ir aparejada de escasos signos de virulencia en los modelos animales ensayados, lo cual coloca a M.´habana´ dentro de los posibles candidatos vacunales contra la tuberculosis al ajustarse a la condición que impone una vacuna clásica de reproducir la infección y los eventos inmunes que le suceden lo más fielmente posible a como ocurren de manera natural, sin causar extensos daños en el receptor.

The protective efficacy of current Tuberculosis vaccine (BCG) against pulmonary tuberculosis and reactivation is variable and inefficient. This is the reason of the urgent search of new prophylactic alternatives for disease control. Different strategies using Mycobacteriun tuberculosis auxotrophic mutants, recombinant BCG or non-tuberculous micobacteria are carried out taking advantage of the use of live vaccines. Experimental evidences demonstrate protection conferred by the vaccination with live, inactivated or protein fraction of Mycobacterium ´habana ´ TMC-5135. Protection seems to be related to few virulence signs in animal models. Experimental results place M. ´habana ´ among vaccine candidates against tuberculosis meeting the condition of a ¨classic¨ vaccine to mimic natural infection as close as possible inducing strong immune protective response without causing extensive disease.

Meeting Report Immunopharmacology 2011. June 26-30, 2011. Varadero, Cuba