Vaccimonitor

Limitations of the serum bactericidal assay for the evaluation of meningococcal B vaccines

Study of the consistency of a culture on of Streptococcus pneumoniae 19A on rotational shaker at a scale of 40 L

RESUMEN Streptococcus pneumoniae es un patógeno oportunista que puede causar infecciones como otitis media, neumonía, sepsis y meningitis. Sin embargo, existen muchas limitaciones para el cultivo en zaranda de este microorganismo en los laboratorios de microbiología. Por esta razón, se realizó un estudio de la consistencia del cultivo en zaranda de Streptoccoccus pneumoniae 19A a escala de 40 L. Para esto se desarrolló previamente la curva de crecimiento patrón hasta las 5 h. Desde el pre-inóculo se inocularon 6 frascos de 100 mL, de los cuales se realizó la inoculación en botellones de 1 L y 5 L. En todos los casos, se determinó la pureza a partir de la tinción de Gram y el crecimiento bacteriano se monitoreó por el método de conteo de viables y la densidad óptica cada 1 h. Además, se evaluó el rendimiento del cultivo a partir de la cantidad de biomasa obtenida por peso húmedo. Cada proceso se llevó a cabo en condiciones iguales por triplicado. En los tres procesos se obtuvieron curvas de crecimiento similares, tanto por densidad óptica como por conteo de viables, alcanzando una viabilidad máxima de 109 UFC/mL en la última escala. Además, se obtuvieron rendimientos de biomasa de 11,62; 11,92 y 11,60 g/L, respectivamente. Estos resultados demuestran que la metodología utilizada ofrece una consistencia de este proceso, a pesar del alto volumen de cultivo en zaranda, lo cual no afectó la calidad de la biomasa, demostrado por la viabilidad final.

ABSTRACT Streptococcus pneumoniae is an opportunistic pathogen that can cause infections including otitis media, pneumonia, sepsis and meningitis. However, there are many limitations for the cultivation in shaker of this microorganism in microbiology laboratories. For this reason, a study of the consistency of the culture in shaker of Streptoccoccus pneumoniae 19A was carried out at a scale of 40 L. The pattern growth curve was made until 5 h, under our laboratory conditions and culture medium. From the pre-inoculum 6 bottles of 100 mL were inoculated, from which the scaling was accomplished to bottles of 1 L and 5 L. In all cases the purity was determined by Gram staining and the bacterial growth by viable counting method and the optical density were monitored every 1 h. In addition, the yield was evaluated from the determination of the amount of biomass obtained by wet weight. Each process has been made in equal conditions in triplicate. In the three processes, similar growth curves were obtained both by optical density and by viable counts, reaching a maximum viability of 109 CFU/mL on the last scale. In addition, biomass yields of 11.62, 11.92 and 11.60 g/L were obtained, respectively. These results demonstrate that the methodology used offers a high process consistency, despite the high volume of culture in rotational shaker, and did not affect the quality of the biomass, which could be demonstrated by the viable count.

The effect of Spirulina algae on the immune response of SPF chickens to commercial inactivated Newcastle vaccine in poultry

ABSTRACT The objective of this study was to investigate the effects of Spirulina platensis (SP) powder supplementation on immune response in SPF chickens. For this purpose, 120 SPF chicks were randomly clustered into six groups consisting of 20 birds each which assigned to five groups vaccinated by commercial inactivated Newcastle disease (ND) vaccine at 21 days of age. The four groups were supplemented with 0.5, 1, 1.5 and 2 g of SP per kg of ration at 7 day of age and other group as control treatment group. Control unvaccinated group still without any treatment. Individual blood samples were collected weekly from all groups, and NDV-HI antibodies were measured using Hemagglutination inhibition (HI) test. After 28 days post-vaccination, ten birds from all groups were challenged intramuscularly at a dose 0.5 mL/bird containing 106 EID50 of local NDV genotype VII. Challenge virus shedding was detected using real time qrt-PCR of oropharyngeal swabs that were collected from all challenged chicken groups of at 3, 5, 7 and 10 days post challenge. Obtained results showed that vaccinated groups of SPF-chickens either supplied with Spirulina or control treatment group induced positive serological response as NDV-HI antibody were measured in sera of immunized chicks (7.6, 8, 8.3, 8.9 and 7.4 log2, respectively) at 4 weeks post vaccination (WPV). Significant differences were observed at 2 WPV in the vaccinated SPF chickens consumed 1, 1.5 and 2 g of SP/kg of ration, compared to untreated vaccinated group (p<0.05). Immunized SPF chickens supplied with different SP concentration confer satisfactory protection against heterologous challenge virus (90%, 100%, 100% and 100% respectively), in contrast to untreated vaccinated chickens. Different percentages of reduction of viral shedding (55%, 65%, 76% and 87%) of treated vaccinated chickens with different concentration of SP were detected, despite untreated group were reduced 46% from total viral shedding. These findings suggest that dietary Spirulina has immune-stimulatory effects on the immune system of SPF chickens. One gram from SP per kg of ration was minimum recommended concentration that able to exhibit optimum immune response, increase protection against heterologous strains and able to reduce viral shedding.

RESUMEN El objetivo de este estudio fue investigar los efectos de la suplementación con polvo de Spirulina platensis (SP) sobre la respuesta inmune en pollos SPF. Para este propósito se agruparon al azar 120 polluelos SPF en seis grupos de 20 aves cada uno, que se asignaron a cinco grupos vacunados con la vacuna comercial inactivada contra la enfermedad de Newcastle (ND) a los 21 días de edad. Cuatro grupos se suplementaron con 0,5; 1; 1,5 y 2 g de SP por kg de ración a los 7 días de edad, un grupo vacunado sin suplemento y un grupo sin ningún tratamiento. Semanalmente, se recogieron muestras de sangre individuales de todos los grupos y se midieron los anticuerpos hemaglutinantes contra el virus Newcastle (NDV-HI) mediante la prueba de inhibición de la hemaglutinación (HI). 28 días después de la vacunación, fueron retadas diez aves de cada grupo por vía intramuscular a una dosis 106 EID50 del genotipo VII del NDV local en un volumen de 0,5 mL/ave. Se detectó la eliminación del virus mediante qrt-PCR en hisopos orofaríngeos que se recolectaron en todos los grupos a los 3, 5, 7 y 10 días después del reto. Los resultados obtenidos mostraron que los grupos vacunados de pollos y suplementados con Espirulina y el grupo de control vacunado, indujeron una respuesta serológica positiva cuando se determinaron los anticuerpos NDV-HI en los pollitos inmunizados (7,6; 8; 8,3; 8,9 y 7,4 log2 respectivamente) a las 4 semanas después de la vacunación (SPV). Se observaron diferencias significativas a las 2 SPV en los pollos vacunados que consumieron 1, 1,5 y 2 g de SP/kg de ración, en comparación con el grupo vacunado no tratado (p<0,05). Los pollos inmunizados que recibieron diferentes concentraciones de SP mostraron una protección satisfactoria contra el desafío heterólogo viral (90%, 100%, 100% y 100% respectivamente), en contraste con los pollos vacunados no tratados. Se observaron diferentes porcentajes de reducción de la diseminación viral (55%, 65%, 76% y 87%) entre los pollos vacunados tratados con diferente concentración de SP. En el grupo no tratado se redujo al 46%. Estos hallazgos sugieren que la Espirulina en la dieta tiene efectos inmunoestimuladores sobre el sistema inmunitario de los pollos. Un gramo de SP por kg de ración fue la concentración mínima recomendada para una respuesta inmune óptima, y de esta forma aumentar la protección contra las cepas heterólogas y disminuir la diseminación viral.

Evaluation of the system of surveillance of events postvaccination in the Isle of the Youth, Cuba: A look in two moments

RESUMEN La evaluación en la vigilancia en salud es un instrumento útil para analizar resultados en relación con los objetivos, comparar beneficios con costos y orientar objetivos iniciales de los sistemas. El objetivo de ésta investigación fue evaluar el sistema de vigilancia de eventos adversos consecutivos a la vacunación en la Isla de la Juventud, Cuba, entre enero/2018 y marzo/2019. Se llevó a cabo un estudio descriptivo a través del diseño de una investigación evaluativa, que constó de dos fases complementarias para la dimensión “Proceso”. Se evaluaron los tres componentes del sistema: “Estructura, Proceso y Resultado” mediante una metodología integral. El alcance del estudio estuvo determinado por todos los médicos y enfermeros de la Atención Primaria de Salud, así como los Vicedirectores de Higiene y Epidemiología y los tutores legales de niños de 2 a 18 meses de edad vacunados. Se emplearon frecuencias absolutas y relativas, así como tasas e Indice de Posición. Se realizó además prueba de comparación de proporciones. La “Estructura” del sistema se evaluó como “definida”; el “Proceso” de “funcionamiento regular a priori y de buen funcionamiento a posteriori”, con significación estadística en varios atributos vistos como tal y como competencias; mientras que los “Resultados” fueron evaluados de “muy útiles”, marcado por la elevada satisfacción de los usuarios internos y externos. De forma general el sistema fue evaluado de satisfactorio. La evaluación del sistema permitió identificar brechas en su funcionamiento; sin embargo, valoraciones generales hacen suponer una madurez del funcionamiento genérico del Sistema a 20 años de su implementación.

ABSTRACT Evaluation in health surveillance is a useful instrument to analyze results in relation to the objectives, compare benefits with costs and guide initial objectives of the systems. The objective of this research was to evaluate the surveillance system for adverse events following vaccination in Isle of Youth, Cuba, between January 2018 and March 2019. A descriptive study was carried out through the design of an evaluative research, which consisted of two complementary phases for the Process dimension. The three components of the system were evaluated: “Structure, Process and Results” through a comprehensive methodology. The scope of the study was determined by all primary care doctors and nurses, as well as the Deputy Directors of Hygiene and Epidemiology and legal guardians of vaccinated children from 2 to 18 months of age. Absolute and relative frequencies were used, as well as rates and position index. A comparison of proportions test was also performed. The system “Structure” was evaluated as defined; the regular operation “Process” a priori and posteriori good functioning; with statistical significance in several attributes seen as such and as competences, while the Results were evaluated as very useful, marked by the high satisfaction of internal and external users. In general, the system was evaluated as satisfactory. The evaluation of the system allowed to identify gaps in its operation, however, general assessment suggests a maturity of the generic functioning of the System 20 years after its implementation.

Analysis of the global research on conjugate vaccines with the BD-BiPat platform

RESUMEN La tecnología para el desarrollo de vacunas conjugadas preventivas consiste en la unión de polisacáridos bacterianos y una proteína portadora. Este procedimiento constituye uno de los principales desafíos en el mundo de la vacunología y por tanto del Comité Nacional de Expertos en Vacunas. Este órgano, guía y discute las estrategias para el desarrollo e introducción de nuevas vacunas en Cuba. El objetivo de este trabajo fue realizar un análisis de la investigación mundial sobre vacunas conjugadas con la plataforma BD-BiPat (Instituto Finlay de Vacunas, Cuba). La plataforma BD-BiPat permite acceder con formularios de búsqueda directamente a los MeSH a través de PubMed y extraer los datos para su normalización, análisis y visualización. El término usado fue “Vaccines, Conjugate”. El corpus de datos constó de 3852 registros a los que se aplicaron indicadores métricos de co-ocurrencia y visualizaciones en forma de redes. Los resultados del estudio permitieron evidenciar que es una tecnología muy efectiva, que se ha incrementado rápidamente a nivel mundial. Entre los agentes infecciosos asociados a vacunas conjugadas más estudiados están: Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae y Salmonella Typhi. Estados Unidos de América y Reino Unido fueron los países más productivos. Los resultados obtenidos podrían tributar a los decisores en política científica de instituciones dedicadas al desarrollo de vacunas, así como su introducción en programas de vacunación. Igualmente, las funcionalidades de la aplicación web BD-BiPat pueden extenderse a los grupos de vigilancia e inteligencia del sector.

ABSTRACT The technology for the development of conjugate vaccines consist of the union of bacterial polysaccharides and a protein carrier. This procedure constitutes one of the main challenges in the world of vaccinology and therefore of the Cuban Expert Committee on Vaccines. This committee guides and discusses strategies for the development and introduction of new vaccines in Cuba. The aim of this work was to perform an analysis of the global research on conjugated vaccines with the BD-BiPat platform (Finlay Institute of Vaccines, Cuba). This platform allows access with search forms directly to the PubMed MeSH and extract data for normalization, analysis and visualization. The term used was “Vaccines, Conjugate”. The data corpus consisted of 3852 records to which metric indicators of co-occurrence and visualizations in the form of networks were applied. The study showed that it is a novel technology, which has increased rapidly worldwide. Among the most studied infectious agents associated with conjugate vaccines are Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae and Salmonella Typhi. The United States of America and the United Kingdom were the most productive countries. Results could be useful for decision-makers in scientific policy for the vaccine development, as well as introduction of vaccines in programs of immunization. Likewise, the functionalities of the BD-BiPat platform can be extended to surveillance and intelligence groups in this sector.

Characterization of allergic rhinitis in the "General Calixto Garcia" University Hospital. October 2016-October 2017

RESUMEN Las enfermedades alérgicas van en aumento importante en todo el mundo. La rinitis alérgica es una enfermedad inflamatoria crónica de la mucosa nasal IgE mediada, alérgeno-específica con participación de diversas células. Nos propusimos caracterizar la rinitis alérgica en pacientes atendidos en el Hospital Universitario “General Calixto García”. Se realizó un estudio observacional descriptivo de corte transversal, no aleatorizado, entre octubre 2016 y octubre 2017. En una muestra de 100 pacientes que cumplieron los criterios de inclusión, se realizó historia clínica alergológica empleando variables como: edad, sexo, antecedentes patológicos personales y familiares, procedencia, manifestaciones clínicas, y prueba cutánea por punción. Predominó el sexo femenino entre 30 y 39 años de edad, de área urbana, antecedentes patológicos familiares y personales de asma y conjuntivitis. La rinitis intermitente leve prevaleció en nuestro estudio, así como la sensibilidad a Dermatophagoides pteronyssinus. La tercera década de la vida fue la edad promedio de los pacientes. Se concluye que los pacientes presentaron una alta sensibilidad a Dermatophagoides pteronyssinus. La rinitis persistente leve, con la mitad de los casos, obtuvo mayor predominio por la duración de los síntomas.

ABSTRACT Allergic diseases are increasing significantly worldwide. Allergic rhinitis is a chronic inflammatory disease of the nasal mucosa, IgE-mediated, allergen-specific with the participation of various cells. The aims of this study was to characterize allergic rhinitis in patients treated at the “General Calixto García University Hospital”. Descriptive cross-sectional non-randomized observational study was carried out between October 2016 and October 2017. A sample of 100 patients who meet the inclusion criteria was studied. Allergological medical history was performed using variables such as age, sex, personal and family pathological history, origin, clinical manifestations, and puncture skin test. Female sex predominated between 30 and 39 years old, urban area, family and personal pathological history of asthma and conjunctivitis. Mild intermittent rhinitis predominated in our study. Sensitivity to Dermatophagoides pteronyssinus. The third decade of life was the average age of the patients in this study. We summarize that patients had presented a high sensitivity to Dermatophagoides pteronyssinus. Mild persistent rhinitis with half of the cases had a greater predominance for the duration of symptoms.

Mycobacterium tuberculosis genes and virulence determinants that contribute to the immune response evasion

RESUMEN La tuberculosis pulmonar es un problema de salud pública a nivel mundial. La Organización Mundial de la Salud en el año 2018 reportó alrededor de 10 millones de enfermos y 1,5 millones de muertes. Mycobacterium tuberculosis es un patógeno intracelular y el agente causal de la enfermedad. Estudios experimentales de virulencia han permitido determinar un conjunto de genes de virulencia, que le confieren la capacidad de resistir el ambiente hostil en el macrófago, superar la actividad de la respuesta inmune y persistir en el hospedero. El objetivo de la publicación es presentar una revisión de las investigaciones de los últimos 20 años que han demostrado los genes o factores de virulencia de M. tuberculosis que contribuyen a la evasión de la respuesta inmune. Según los resultados de las investigaciones, existen múltiples factores y genes de virulencia que participan en la evasión de la respuesta inmune innata como ESAT-6, PknG, PhoP, ManLAM, SapM, katG, tpx, nuoG, sodA/secA2, pknE y Rv3654c/Rv3655c, mientras existen elementos capaces de modular la respuesta inmune adaptativa. La comprensión de la interacción entre los genes de virulencia y la actividad del sistema inmune, son importantes para estudiar nuevos métodos de diagnóstico, el diseño de nuevas vacunas y por ende, mejorar las medidas de control, prevención y tratamiento de la tuberculosis.

ABSTRACT Pulmonary tuberculosis is a public health problem worldwide. The World Health Organization in 2018 reported about 10 million patients and 1.5 million deaths. Mycobacterium tuberculosis, an intracellular pathogen, is the causative agent of the disease. Experimental virulence studies have allowed to determine a set of virulence genes that confer the ability to resist the hostile environment in the macrophage, overcome the activity of the immune response and persist in the host. The objective of the publication is to present a review of the last 20 years investigations that have shown the genes or virulence factors of M. tuberculosis that contribute to the evasion of the immune response. According to the results of the investigations, there are multiple virulence factors and genes that participate in the evasion of the innate immune response such as ESAT-6, PknG, PhoP, ManLAM, SapM, katG, tpx, nuoG, sodA/secA2, pknE and Rv3654c/Rv3655c, while there are elements capable of modulating the adaptive immune response. The understanding of the interaction between the virulence genes and the activity of the immune system, are important to study new diagnostic methods, the design of new vaccines and therefore, to improve the control, prevention and treatment measures of tuberculosis.