Scielo RSS http://scielo.sld.cu/rss.php?pid=1025-028X20220001&lang=en vol. 31 num. 1 lang. en http://scielo.sld.cu/img/en/fbpelogp.gif http://scielo.sld.cu http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1025-028X2022000100001&lng=en&nrm=iso&tlng=en http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1025-028X2022000100004&lng=en&nrm=iso&tlng=en http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1025-028X2022000100009&lng=en&nrm=iso&tlng=en RESUMEN El virus de la fiebre aftosa es un patógeno altamente infeccioso y contagioso. Recientemente, el topotipo VII, linaje Lib-12 del serotipo SAT2 se describió en brotes en Egipto durante 2018. La vacunación es una forma eficaz de controlar y combatir los brotes del virus de la fiebre aftosa, especialmente en áreas endémicas como Egipto. El presente estudio tuvo como objetivo evaluar la eficacia de la vacuna contra la fiebre aftosa que se produce actualmente, frente a la cepa de campo recientemente aislada del virus de la fiebre aftosa SAT2 topotipo VII, linaje Lib-12 (SAT2 Libia), mediante la aplicación de estudios in vitro e in vivo. Se inocularon en terneros, dos lotes de la vacuna actual contra el virus de la fiebre aftosa. A los 28 días posteriores a la vacunación, se recolectaron muestras de suero y se analizaron contra el virus de la fiebre aftosa SAT2 Libia adaptado a cultivo de tejidos y SAT2/EGY/2/2012 utilizando una prueba de neutralización viral para determinar la relación serológica (valor r1). El ensayo de reto en terneros vacunados se llevó a cabo empleando una cepa virulenta de la fiebre aftosa SAT2 Libia. Se encontró que los títulos de anticuerpos neutralizantes inducidos por los dos lotes de vacuna (1 y 2) y los de animales no vacunados, fueron 0,48, 0,39 y 0,15 log10 DICT50/mL, respectivamente, mientras que la prueba reveló valores de protección de 20%, 0% y 0%, respectivamente. Además, los valores de r1 fueron 0,195 y 0,186 para los lotes de vacuna (1 y 2), respectivamente. Se llegó a la conclusión de que los lotes de vacunas locales comerciales inactivadas disponibles actualmente (SAT2 SAT2/EGY/2/2012) no protegen a los terneros contra el virus circulante de la fiebre aftosa SAT2 topotipo VII, linaje Lib-12 que se aisló recientemente, por lo que es recomendable actualizar las vacunas existentes con la cepa aislada actualmente.<hr/>ABSTRACT Foot and mouth disease virus is a highly infectious and contagious pathogen. Recently the topotype VII, Lib‐12 lineage of serotype SAT2 was reported through outbreaks in Egypt during 2018. Vaccination is an effective way to control and combat the foot and mouth disease virus outbreaks especially in endemic areas like Egypt. The present study was aimed to evaluate the efficacy of the current produced foot and mouth disease vaccine, against the recently isolated field strain foot and mouth disease virus SAT2 topotype VII, Lib-12 lineage (SAT2 Libya), by applying in vitro and in vivo studies. Two batches of the current foot and mouth disease virus vaccine were inoculated in calves. At the 28th day post-vaccination serum samples were collected and tested against tissue culture adapted foot and mouth disease virus SAT2 Libya and SAT2/EGY/2/2012 using virus neutralization test to determine serological relationship (r1-value). The challenge test for vaccinated calves was carried out against the virulent foot and mouth disease virus SAT2 Libya. It was found that neutralizing antibody titers induced by the two vaccine batches (1 and 2) and those in unvaccinated animals were 0.48, 0.39 and 0.15 log10 TCID50/mL, respectively, while the challenge revealed protection values of 20%, 0% and 0%, respectively. Furthermore, the r1 values were 0.195 and 0.186 for vaccine batches (1 and 2), respectively. It was concluded that the available local commercial inactivated foot and mouth disease virus vaccine batches (SAT2 SAT2/EGY/2/2012) are unable to protect calves against the current circulating foot and mouth disease virus field isolate SAT2 topotype VII, Lib-12 lineage, thus it is highly recommended to update the existing vaccines with the present isolated strain. http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1025-028X2022000100015&lng=en&nrm=iso&tlng=en RESUMEN Este artículo proporciona un caso de estudio del uso del Análisis Modal de Fallos y Efectos para identificar y evaluar los riesgos de un posible cambio del lote de siembra de trabajo en el Instituto Finlay de Vacunas. Este análisis tuvo lugar en uno de los procesos críticos de las Plantas de Producción de Ingrediente Farmacéutico Activo del Instituto Finlay de Vacunas. No incluyó cambios en la tecnología de obtención del Lote de Siembra de Trabajo, ni cambios en el Lote de Siembra de Referencia. Como resultado, se identificaron ocho riesgos potenciales y de ellos se valoraron 17 causas, las cuales se asocian principalmente a la contaminación del Lote de Siembra de Trabajo o baja viabilidad del Lote de Siembra de Referencia, uso de materias primas y materiales de proveedores no calificados o posteriores al período de vigencia, errores de manipulación, parámetros de operación inadecuados, uso de medios de cultivo, soluciones y materiales contaminados, inadecuado funcionamiento del equipamiento e instalaciones y personal no capacitado. Los riesgos identificados son aceptables, con una probabilidad baja de ocurrencia y no están vinculados a la seguridad y eficacia del Ingrediente Farmacéutico Activo, ni de las vacunas. Por último, se propuso una estrategia que minimiza los posibles fallos ante un cambio de Lote de Siembra de trabajo para la fabricación de un producto biofarmacéutico.<hr/>ABSTRACT This article provides a case study of the use of Modal Failure and Effects Analysis to identify and assess the risks of a possible change in the Working Seed Lot at Finlay Vaccine Institute. This analysis took place in one of the critical processes of the Active Pharmaceutical Ingredient Production Plants of the Finlay Vaccine Institute. This analysis did not include changes in the technology for obtaining the Working Seed Lot or changes in the Reference Seed Lot. As a result, eight potential risks were identified and 17 causes were assessed, mainly associated with contamination of the Working Seed Lot or low viability of the Reference Seed Lot, use of raw materials and other materials from unqualified suppliers or after the validity period, handling errors, inadequate operating parameters, use of culture media, contaminated solutions and materials, inadequate operation of equipment and facilities, and untrained personnel. The identified risks are acceptable, with a low probability of occurrence and are not linked to the safety and efficacy of the active pharmaceutical ingredient or vaccines. Finally, a strategy was proposed that minimizes possible failures in the event of a change in Working Seed Lot for the manufacture of a biopharmaceutical product. http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1025-028X2022000100025&lng=en&nrm=iso&tlng=en RESUMEN Haemophilus influenzae tipo b es un importante patógeno del hombre causante de varias de las enfermedades invasivas en niños menores de cinco años, contra el cual fueron autorizadas las vacunas glicoconjugadas a partir del polirribosilribitol fosfato. Quimi-Hib® es la primera y única vacuna contra este patógeno que utiliza el polisacárido obtenido por síntesis química. El Ingrediente Farmacéutico Activo es producido por el Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología y se obtiene a partir de su conjugación al toxoide tetánico. En el presente reporte se hizo una caracterización del polirribosilribitol fosfato mediante la técnica de cromatografía de exclusión molecular de alta eficacia con detección ultravioleta a 215 nm. En el estudio se evaluaron tres lotes y se determinó el perfil de elución en una columna SuperdexTM 75 10/300 GL Increase con un porciento de pureza de 77,42 ± 8,97 y una masa molar promedio de 7.381 Da ± 210,93. La principal impureza presente en el polirribosilribitol fosfato es el dimetilsulfóxido, disolvente utilizado en la reacción de activación con el éster N-hidroxisuccinimidilo del ácido β-maleimidopropiónico. El polirribosilribitol fosfato se purificó por filtración con un Amicon Ultra-15 de 2.000 Da hasta una pureza de 99,1 % y se conjugó al toxoide tetánico. El rendimiento de la reacción de conjugación con el polisacárido purificado fue de 30,0 % ± 1,77 el cual no muestra diferencias significativas con el control que fue 33,7 % ± 3,57 demostrándose que el dimetilsulfóxido no afecta el desempeño de la reacción de conjugación.<hr/>ABSTRACT Haemophilus influenzae type b is an important human pathogen causing some invasive diseases in children less than five years of age. Glycoconjugate vaccines based on polyribosylribitol phosphate have been licensed against this bacterium. Quimi-Hib® is the first and only vaccine against this pathogen using the chemically synthesized polysaccharide. The Active Pharmaceutical Ingredient is produced by the Center for Genetic Engineering and Biotechnology and is obtained from its conjugation to tetanus toxoid. In the present report a characterization of polyribosylribitol phosphate was performed by high performance molecular exclusion chromatography with ultraviolet detection at 215 nm. Three batches were evaluated in the study and the elution profile was determined on a SuperdexTM 75 10/300 GL Increase column with a purity percentage of 77.42 ± 8.97 and an average molecular weight of 7,381 Da ± 210.93. The main impurity present in polyribosylribitol phosphate was dimethylsulfoxide, the solvent used in the activation reaction with N-hydroxysuccinimidyl ester of β-maleimidopropionic acid. Polyribosylribitol phosphate was purified by filtration using a 2,000 Da cut-off Amicon Ultra-15 to a purity of 99.1 % and conjugated to tetanus toxoid. The yield of the conjugation reaction with the purified polysaccharide was 30.0 % ± 1.77 which shows no significant difference with the control which was 33.7%± 3.57 demonstrating that dimethylsulfoxide does not affect the performance of the conjugation reaction. http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1025-028X2022000100034&lng=en&nrm=iso&tlng=en ABSTRACT In Egypt, the lyophilized live attenuated sheep pox virus vaccine has been used for the vaccination of cattle against lumpy skin disease virus to control its economic impact on livestock industry. In this endeavor, we validate the efficacy of Carbopol® as a stabilizer and adjuvant to enhance immunogenicity of such a heterologous sheep pox virus vaccine against lumpy skin disease. Lyophilization of sheep pox virus vaccine stabilized with Carbopol® produced better physical and antigenic properties than freeze-drying with lactalbumin/sucrose stabilizer; this was manifested by superior disc uniformity, thermo-stability at 37oC, and less reduction in virus titer. Immunization of calves' groups with variable sheep pox vaccine doses containing different Carbopol® concentrations revealed that 103.5 TCID50 of sheep pox virus vaccine enclosing 0.5% Carbopol® is the field dose of choice. Moreover, it induced protective serum neutralizing index of 2.5 and a ELISA S/P ratio of 36, by the 4th week post vaccination. Besides, the inclusion of 0.5% Carbopol® in formulation of the sheep pox virus vaccine was safe in bovines and enhanced cellular immune response to lumpy skin disease virus, as evidenced by increased T cell proliferation. Hence, it is recommended to use Carbopol® as 0.5% in preparation of live attenuated sheep pox virus vaccine to confer better protection against lumpy skin disease virus infection.<hr/>RESUMEN En Egipto, la vacuna atenuada liofilizada contra el virus de la viruela ovina ha sido utilizado para la vacunación del ganado, contra el virus de la dermatosis nodular contagiosa, para controlar su impacto económico en la industria ganadera. En este trabajo, validamos la eficacia del Carbopol®, como estabilizador y adyuvante, para mejorar la inmunogenicidad de dicha vacuna heteróloga contra la dermatosis nodular contagiosa. La liofilización de la vacuna contra el virus de la viruela ovina estabilizada con Carbopol®, resultó en mejores propiedades físicas y antigénicas que la liofilización con el estabilizador de lactoalbúmina/sacarosa; lo anterior se manifestó en la uniformidad superior del disco, la termoestabilidad a 37°C y la menor reducción del título del virus. La inmunización de grupos de terneros con dosis variables de vacuna contra el virus de la viruela ovina, que contenían diferentes concentraciones de Carbopol®, reveló que la dosis de campo de elección fue 103,5 TCID50 de la vacuna contra el virus de la viruela ovina conteniendo 0,5% de Carbopol®, la que indujo un índice de neutralización sérica protectora de 2,5 y una relación S/P de ELISA de 36 a la cuarta semana después de la vacunación. Además, la inclusión de Carbopol® al 0,5% en la formulación de la vacuna contra el virus de la viruela ovina fue segura en los bovinos y potenció la respuesta inmunitaria celular contra el virus de la dermatosis nodular contagiosa, como lo demuestra el aumento de la proliferación de células T. Por lo tanto, se recomienda el uso de Carbopol® al 0,5% en la preparación de la vacuna viva atenuada contra el virus de la viruela ovina para conferir una mejor protección contra la infección por el virus de la dermatosis nodular contagiosa.