Vaccimonitor

Using guinea pig as a model for evaluation of equine influenza vaccine

ABSTRACT Equine influenza is a highly contagious viral disease, specially among 1-5 years old naive horses. Vaccination is considered the best way to control the disease spread and outbreaks. Although foals are the main animal used for evaluation of equine influenza vaccines, guinea pigs were chosen as an alternative model in the present work, as they have a negligible antibody titer against equine influenza virus and are cheaper and easier to handle than foals. Five equine influenza vaccine batches were evaluated in two animal models, foals and guinea pigs, by injection of two doses/animal with 4 weeks apart using 2 mL/animal/dose and evaluation of immune responses by hemagglutination inhibition test and enzyme-linked immunosorbent assay. On the 7th week post vaccination, equine influenza antibodies titers reached maximum values of 9-10.2 and 8.7-10 hemagglutination inhibition units for foals and guinea pigs, respectively; sample/negative ratios were 0.126-0.464 and 0.128-0.445 for both animals, respectively. The use of guinea pigs as an animal model for the evaluation of equine influenza vaccines could be recommended instead of foals.

RESUMEN La gripe equina es una enfermedad viral muy contagiosa, especialmente entre los caballos jóvenes de 1 a 5 años de edad. La vacunación se considera la mejor forma de controlar la propagación y los brotes de la enfermedad. Aunque los potros son el principal animal utilizado para la evaluación de vacunas contra la gripe equina, en el presente trabajo se eligieron cobayos como modelo alternativo, ya que tienen un título insignificante de anticuerpos contra el virus de la gripe equina y son más baratos y fáciles de manejar que los potros. Se evaluaron cinco lotes de vacunas contra la gripe equina en dos modelos animales, potros y cobayos, mediante la inyección de dos dosis/animal con 4 semanas de intervalo utilizando 2 mL/animal/dosis y la evaluación de las respuestas inmunitarias mediante la prueba de inhibición de la hemaglutinación y el ensayo inmunoenzimático. En la 7ª semana posvacunación, los títulos de anticuerpos contra la gripe equina alcanzaron valores máximos de 9-10,2 y 8,7-10 unidades de inhibición de la hemaglutinación para potros y cobayos, respectivamente; las relaciones muestras/negativos fueron de 0,126-0,464 y 0,128-0,445 para ambos animales, respectivamente. Podría recomendarse el uso de cobayos como modelo animal para la evaluación de vacunas contra la gripe equina, en lugar de potros.

Efficacy of current vaccines against recently isolated foot and mouth disease virus type A South America (Venezuela) in Egypt 2022

ABSTRACT Foot and mouth disease is a highly contagious viral disease that poses a significant economic threat to cloven-hoofed animals, including cattle and sheep. The emergence of a novel foot and mouth disease virus-A isolate, FMDV-A-Egy-AHRI-RL385-Ven-2022, in Egypt in 2022 has raised concerns about its potential impact on existing vaccination programs. Given that vaccination is a key strategy for foot and mouth disease virus control, the present study was aimed to assess the cross-protective efficacy of both local and imported inactivated vaccines against this new threat. Through challenge experiments and serum neutralization tests, we observed limited effectiveness of both vaccine types. The calculated r1-values at 28 days post-vaccination indicated a minimal immune response to FMDV-A-Egy-AHRI-RL385-Ven-2022 (0.176 and 0.175 for local and imported vaccines, respectively). Challenge experiments further confirmed these findings, revealing 0% protection from the local vaccine and only 20% protection from imported vaccines by day 7 post-challenge. These results underscore the urgent need to update existing foot and mouth disease virus vaccines in Egypt by incorporating the newly circulating FMDV-A-Egy-AHRI-RL385-Ven-2022 strain. This proactive measure is crucial to prevent future outbreaks and ensure effective disease control.

RESUMEN La fiebre aftosa es una enfermedad vírica muy contagiosa que supone una importante amenaza económica para los animales biungulados, entre ellos el ganado vacuno y ovino. La aparición de un nuevo aislado del virus A de la fiebre aftosa, el FMDV-A-Egy-AHRI-RL385-Ven-2022, en Egipto en 2022 ha suscitado preocupación por su posible impacto en los programas de vacunación existentes. Dado que la vacunación es una estrategia clave para el control del virus de la fiebre aftosa, el objetivo del presente estudio fue evaluar la eficacia protectora cruzada de las vacunas inactivadas locales e importadas frente a esta nueva amenaza. Mediante experimentos de desafío y pruebas de seroneutralización, observamos una eficacia limitada de ambos tipos de vacuna. Los valores r1 calculados a los 28 días posvacunación indicaron una respuesta inmunitaria mínima frente a FMDV-A-Egy-AHRI-RL385-Ven-2022 (0,176 y 0,175 para las vacunas local e importada, respectivamente). Los experimentos de provocación confirmaron aún más estos resultados, revelando un 0% de protección de la vacuna local y sólo un 20% de protección de las vacunas importadas al séptimo día después de la provocación. Estos resultados subrayan la urgente necesidad de actualizar las vacunas existentes contra el virus de la fiebre aftosa en Egipto incorporando la nueva cepa circulante FMDV-A-Egy-AHRI-RL385-Ven-2022. Esta medida proactiva es crucial para prevenir futuros brotes y garantizar un control eficaz de la enfermedad.

Establishment of the purification scheme for SOBERANA^®02, SOBERANA^®Plus and SOBERANA 01 antigens

RESUMEN La urgente necesidad de desarrollar y producir vacunas seguras y efectivas para garantizar la reducción de la propagación del coronavirus de tipo 2 causante del síndrome respiratorio agudo severo, hizo que el Centro de Inmunología Molecular y el Instituto Finlay de Vacunas, desarrollaran dos vacunas y un candidato vacunal contra la COVID-19, que tienen como componente la molécula del dominio de unión al receptor (aa 319-541) del virus. Para establecer el proceso productivo, se realizaron experimentos en los posibles pasos del proceso de purificación de la molécula del dominio de unión al receptor (aa 319-541), con vistas a su posterior transferencia tecnológica a escala industrial. Dicha molécula está fusionada con una etiqueta de hexahistidina en su extremo C-terminal y presenta nueve residuos de cisteína en su secuencia que forman cuatro enlaces disulfuros intramoleculares, quedando una cisteína libre que permite obtener dos moléculas: dimérica y monomérica, antígenos que forman parte de las vacunas SOBERANA®02 y SOBERANA®Plus y el candidato vacunal SOBERANA 01. Se determinaron las mejores condiciones de adsorción de las matrices cromatográficas de afinidad por quelatos metálicos, intercambio catiónico y exclusión molecular. Se evaluó el desempeño del proceso a escala piloto y se caracterizó la molécula de acuerdo a sus propiedades físico-químicas y biológicas. Los resultados obtenidos mostraron un 60,02 ± 5,15% de recuperación total de la proteína de interés, con más del 98% de pureza en ambas moléculas, una eficiente remoción de contaminantes y una antigenicidad mayor del 90% referido al monómero control del dominio de unión al receptor con 99% de pureza, lo que demuestra que el proceso establecido es eficiente en la obtención de un producto con la calidad requerida.

ABSTRACT The urgent need to develop and produce safe and effective vaccines to guarantee the reduction of the spread of the type 2 coronavirus that causes severe acute respiratory syndrome, led the Center for Molecular Immunology and the Finlay Vaccine Institute to develop two vaccines and one candidate vaccine to combat the 2019 coronavirus pandemic. As part of the establishment of the production process, experiments were carried out on the possible steps of the purification process of the receptor binding domain molecule (aa 319-541) with a view to its subsequent technological transfer on an industrial scale. This molecule is fused with a hexahistidine tag at its C-terminal end and has nine cysteine residues in its sequence that form four intramolecular disulfide bonds; leaving a free cysteine that allows two molecules to be obtained: dimeric and monomeric, which constitute the antigens of the SOBERANA®02 and SOBERANA®Plus vaccines and the SOBERANA 01 vaccine candidate. The best adsorption conditions of the chromatographic matrices of affinity for metal chelates, cationic exchange and molecular exclusion were determined. The performance of the process was evaluated on a pilot scale and the molecule was characterized according to its physical-chemical and biological properties. The results obtained showed a 60.02 ± 5.15% total recovery of the protein of interest with more than 98% purity in both molecules, an efficient removal of contaminants and an antigenicity greater than 90% referred to the control monomer of the domain receptor binding with 99% purity; which demonstrates that the established process is efficient in obtaining a product with the required quality.

Health intervention with SOBERANA^®02 and SOBERANA^®Plus vaccines in workers: a successful response in confronting the COVID-19 pandemic

RESUMEN La vacunación es una forma de contribuir a la protección de la población al reducir el riesgo de efectos graves de la enfermedad COVID-19. Para marzo de 2021, en tiempo récord, la industria biotecnológica cubana contaba con cinco candidatos vacunales. Se realizó una intervención sanitaria con un esquema heterólogo: dos dosis de SOBERANA®02 más una dosis de SOBERANA®Plus, en trabajadores durante el período de marzo a junio de 2021, en el Instituto Finlay de Vacunas, en La Habana, Cuba. Se evaluaron los efectos directos e indirectos de la vacunación con SOBERANA®02 y SOBERANA®Plus en una cohorte de riesgo de infección, enfermedad y diseminación de la COVID-19. La cohorte se estableció en marzo de 2021 en trabajadores con alta exposición al coronavirus de tipo 2 causante del síndrome respiratorio agudo severo, en el área de consulta médica de Instituto Finlay de Vacunas, establecida como sitio clínico. Entre el 22 de marzo de 2021 y el 11 de junio de 2021, se inscribieron un total de 1.776 participantes; de ellos, 1.719 cumplieron los criterios de inclusión con un porcentaje de 96,79 % para la primera dosis, 1.675 recibieron la segunda dosis y 1.653 se vacunaron SOBERANA®Plus como tercera dosis para un 97,87. Mil cuatrocientos cincuenta y siete tenían entre 19 y 59 años, con predominio del sexo femenino. De los participantes, 175 tuvieron acontecimientos adversos y se observaron, predominantemente, una hora después de la administración de cada dosis. La reacción local más referida fue el dolor en el lugar de la inyección. Se registraron pocos acontecimientos adversos no solicitados. No se notificó ningún evento adverso grave o severo asociado a la vacuna. La distribución de casos de COVID-19 fue de 30, 16 y 6 posterior a cada dosis recibida. No se notificaron muertes asociadas a COVID-19. Las vacunas SOBERANA®02 y SOBERANA®Plus tuvieron un buen perfil de seguridad y fueron capaces de reducir la enfermedad grave por COVID-19 y la muerte, ayudando a revertir la situación epidemiológica causada por el coronavirus de tipo 2 causante del síndrome respiratorio agudo severo en Cuba.

ABSTRACT Vaccination is a way to help protect people by reducing the risk of serious effects from COVID-19 illness. By March of 2021, in record time, Cuba’s biotech industry had five vaccine candidates. A sanitary intervention with a heterologous scheme, two doses of SOBERANA®02 and one dose of SOBERANA®Plus, was carried out in workers during the period of March to June 2021 at Finlay Vaccine Institute, in Havana, Cuba. We evaluated the direct and indirect effects of vaccination with SOBERANA®02 and SOBERANA®Plus, in a cohort at risk of infection, disease and spread of the epidemic COVID-19. The cohort was established in March 2021, among workers with high exposure to SARS-CoV-2, at the area of medical consultation at Finlay Vaccine Institute, established as clinical site. Between March 22, 2021 and June 11, 2021, were enrolled a total of 1,776 participants and, of them, 1,719 met the inclusion criteria with a percentage of 96.79% for first dose, of which 1,675 received the second dose and 1,653 received SOBERANA®Plus as third dose for 97.87%. The majority of participants were aged 19-59 years (1,457), being female, the predominant sex. Among the participants, 175 had adverse events, predominantly observed one hour after the administration of each dose. The most common local reaction was injection site pain. Few unsolicited adverse events were recorded. No vaccine-associated severe or serious adverse events were reported. The distribution of COVID-19 case was 30 post first dose, 16 post second dose and 6 post last dose. No deaths associated with COVID-19 were reported. SOBERANA®02 and SOBERANA®Plus vaccines had a good safety profile and were capable of a reduction of severe COVID-19 illness and death helping to reverse the epidemiological situation caused by the SARS-COV-2 in Cuba.

Processability of nanofilters used in the purification of the recombinant receptor-binding domain protein of severe acute respiratory syndrome type 2 coronavirus

RESUMEN En el Centro de Inmunología Molecular se producen el ingrediente farmacéutico activo y la materia prima biológica empleados para la formulación de las vacunas SOBERANAS®. El antígeno de estas vacunas es la proteína del dominio de unión al receptor del coronavirus tipo 2 del síndrome respiratorio agudo severo. La producción de esta proteína recombinante se basa en el cultivo de células de ovario de hámster chino en biorreactores tipo tanque agitado. El proceso tecnológico a escala industrial consta de varias etapas: preparación de medios de cultivo y soluciones, fermentación, clarificación de sobrenadante y purificación. En los procesos biotecnológicos derivados de líneas celulares de origen animal, la contaminación viral endógena o adventicia constituye un riesgo potencial. Por tal motivo, en el proceso de purificación se emplea un paso específico para la remoción viral mediante la nanofiltración. Los nanofiltros empleados son materiales desechables que influyen significativamente en el costo del proceso. Actualmente se desconoce la capacidad de procesamiento de los nanofiltros en el proceso de purificación en cuestión, siendo el objetivo de la presente investigación con vistas a reducir los costos de producción. Se determinó la capacidad de procesamiento de los filtros Virosart CPV, siendo de 239,74 g/m2 (71,67% de saturación) y 1.259 g/m2 (67,82% de saturación) para la especie dímero y la mezcla, respectivamente. Se determinó la disminución del costo de producción de la etapa de nanofiltración, que representa una disminución del 54,85% del costo de filtración de la especie dímero y un 25% de la mezcla.

ABSTRACT The active pharmaceutical ingredient and the biological raw material, used for the formulation of the SOBERANA® vaccines, are produced at the Molecular Immunology Center. The antigen of these vaccines is the receptor-binding domain protein of the severe acute respiratory syndrome type 2 coronavirus. The production of this recombinant protein is based on the culture of Chinese hamster ovary cells in stirred tank bioreactors. The technological process on an industrial scale consists of several stages: preparation of culture media and solutions, fermentation, clarification of supernatant and purification. In biotechnological processes derived from cell lines of animal origin, endogenous or adventitious viral contamination is a potential risk. For this reason, a specific step for viral removal by nanofiltration is used in the purification process. The nanofilters used are disposable materials that significantly influence the cost of the process. The processing capacity of the nanofilters in the purification process in question is currently unknown, being the objective of the present investigation with a view to reducing production costs. The processing capacity of the Virosart CPV filters was determined to be 239.74 g/m2 (71.67% saturation) and 1,259 g/m2 (67.82% saturation) for the dimer species and the mixture, respectively. The decrease in the production cost of the nanofiltration stage was determined, representing a 54.85% decrease in the filtration cost for the dimer species and a 25% decrease for the mixture.

Evaluation of a prepared combined inactivated vaccine against hemorrhagic disease virus 2 and Clostridium perfringens type A infections in rabbit

ABSTRACT Rabbit hemorrhagic disease virus 2 and Clostridium perfringens type A cause infections in rabbit. Vaccines are considered an effective strategy for fighting these infections. Nowadays, the demand for using a nanoparticle adjuvant as (Montanide™ IMS) is increased due to its ability for enhancing both humoral and cell mediated immunity and, in addition, it can be administrated through different routes. An inactivated vaccine against rabbit hemorrhagic disease virus 2 and Clostridium perfringens type A which adjuvanted by Montanide™ IMS 1313 N VG PR (IMS 1313) was developed. The prepared vaccine was evaluated in rabbits for sterility, safety and potency via two different routes of vaccination. Oral administration of inactivated vaccine was evaluated as an alternative route to subcutaneous vaccination. The results revealed that rabbits vaccinated by subcutaneous route exhibited satisfactory antibody and antitoxin titer against rabbit hemorrhagic disease virus 2 and Clostridium perfringens type A, respectively, from 2nd week post vaccination and reached the peak at 3th week post vaccination. On the other hand, antibody and antitoxin titer of orally vaccinated rabbits didn't reach the satisfactory level. Rabbits vaccinated orally were not protected against virulent rabbit hemorrhagic disease virus 2, with 30% protection, while rabbits vaccinated subcutaneously showed satisfactory protection (90%). Serum nitric oxide and lysozyme activity had significant differences between vaccinated and control rabbits. The level of nitric oxide and lysozyme in sera of subcutaneously vaccinated rabbits was higher than that of orally vaccinated rabbits. Interleukin-6 and tumor necrosis factor-ɑ were determined in the spleen of vaccinated rabbits, significant differences were obtained between subcutaneously and orally vaccinated rabbits. It was concluded that the combined vaccine is potent when inoculated by subcutaneous route in contrast to the oral route. The Montanide™ IMS 1313 adjuvant is a product that can be used for rabbit vaccine preparation.

RESUMEN El virus de la enfermedad hemorrágica del conejo tipo 2 y el Clostridium perfringens tipo A causan infecciones en conejos. Las vacunas se consideran una estrategia eficaz para combatir estas infecciones. Hoy en día, la demanda para el uso de un adyuvante de nanopartículas como Montanide™ IMS es cada vez mayor debido a su capacidad para mejorar la inmunidad humoral y la mediada por células, y a la posibilidad de administrarla por diferentes vías. En este estudio se desarrolló una vacuna inactivada contra el virus de la enfermedad hemorrágica del conejo tipo 2 y el Clostridium perfringens tipo A, adyuvada con Montanide™ IMS 1313 N VG PR (IMS 1313). Se evaluó la vacuna preparada en cuanto a esterilidad, seguridad y potencia en conejos mediante dos vías diferentes de vacunación. Se evaluó la administración oral de la vacuna inactivada como vía alternativa a la vacunación subcutánea. Los resultados revelaron que los conejos vacunados por vía subcutánea presentaban títulos satisfactorios de anticuerpos y antitoxinas contra el virus 2 de la enfermedad hemorrágica del conejo y el Clostridium perfringens tipo A, respectivamente, a partir de la segunda semana de vacunación y alcanzaron el máximo en la tercera semana. En cambio, los títulos de anticuerpos y antitoxinas de los conejos vacunados por vía oral no alcanzaron un nivel satisfactorio. Los conejos vacunados por vía oral no mostraron protección contra el virus virulento de la enfermedad hemorrágica del conejo tipo 2, con un 30% de protección, mientras que los conejos vacunados por vía subcutánea mostraron una protección satisfactoria (90%). El óxido nítrico sérico y la actividad de la lisozima presentaron diferencias significativas entre los conejos vacunados y los controles. El nivel de óxido nítrico y lisozima en el suero de los conejos vacunados por vía subcutánea fue superior al de los conejos vacunados por vía oral. Se determinaron la interleucina-6 y el factor de necrosis tumoral-ɑ en el bazo de los conejos vacunados, y se obtuvieron diferencias significativas entre los conejos vacunados por la vía subcutánea y la oral. Se concluyó que la vacuna combinada es potente cuando se inocula por vía subcutánea en contraste con la vía oral. El adyuvante Montanide™ IMS 1313 es un producto que puede utilizarse para la preparación de vacunas para conejos.

Effect of inactivated and mRNA COVID-19 vaccines on thrombocytopenia in immune thrombocytopenia patients

RESUMEN Este estudio observacional retrospectivo tuvo como objetivo abordar los posibles efectos de las vacunas inactivada y de ARNm en pacientes con trombocitopenia inmunitaria relacionados con la exacerbación. Para definir exacerbación, se consideró una disminución de más del 30% en el recuento de plaquetas con respecto al valor basal o un recuento de plaquetas disminuido a menos de 30×109/L o el desarrollo de una nueva hemorragia. Cincuenta y nueve (hombres 30,5%, mujeres 69,5%) de 208 pacientes con trombocitopenia inmunitaria, se inscribieron en el estudio. La mediana de edad fue de 47 años (rango 18-86). Se realizó un total de 171 vacunaciones en 59 pacientes. El 38% y el 62% de los pacientes fueron vacunados con Sinovac® y BioNTech®, respectivamente. En total, 10 (16,9%) pacientes experimentaron una disminución del recuento de plaquetas por debajo de 30×109/L tras la vacunación. Durante el último año antes de la pandemia, 19 de la misma cohorte (32,2%) experimentaron dicha disminución. Después de la primera, segunda y la dosis de refuerzo de la vacunación, el 12,7%, 13,8% y 15% de los pacientes experimentaron exacerbaciones, respectivamente; las exacerbaciones con hemorragias leves fueron del 2,3% y todos los episodios hemorrágicos se trataron con éxito comenzando con esteroides o aumentando la dosis de esteroides. No se registró ninguna hemorragia grave o potencialmente mortal. Se documentó una diferencia estadística en la exacerbación en los pacientes vacunados con la vacuna de ARNm (p =0,041) sólo después de la primera dosis y los pacientes más jóvenes experimentaron una mayor tasa de exacerbación sin significación estadística (p=0,06) después de la primera dosis. En conclusión, tanto la vacuna de ARNm como la inactivada parecen ser seguras para los pacientes con trombocitopenia inmunitaria con complicaciones hemorrágicas poco frecuentes. Especialmente los pacientes más jóvenes y los vacunados con vacunas de ARNm deben ser objeto de un seguimiento estrecho durante 1-2 meses después de la vacunación para detectar trombocitopenia.

ABSTRACT This retrospective observational study was aimed to address the possible effects of inactivated and mRNA vaccines in immune thrombocytopenia patients related to exacerbation. To define exacerbation, more than 30% decrease in platelet counts from baseline or platelet counts decreased to less than 30×109/L and/or development of new bleeding were considered. Fifty-nine (male 30.5%, female 69.5%) out of 208 immune thrombocytopenia patients, were enrolled in the study. The median age was 47 (range18-86). A total of 171 vaccinations were performed in 59 patients. Thirty-eight and 62% of patients were vaccinated with Sinovac® and BioNTech®, respectively. Overall, 10 (16.9%) patients experienced decrease in platelet count below 30×109/L after vaccination. During the last year before pandemic, 19 of the same cohort (32.2%) experienced such decrease. After first, second and booster dose vaccinations, 12.7%, 13.8% and 15% of patients experienced exacerbation respectively; exacerbation with minor bleeding was 2.3% and all bleeding episodes were successfully treated by starting with steroid or increasing the steroid dose. We did not report any severe and life-threatening bleeding. A statistical difference in exacerbation was documented in patients vaccinated with mRNA vaccine (p =0.041) only after the first dose and younger patients experienced a higher rate of exacerbation without statistical significance (p=0.06) after the first dose. In conclusion, both mRNA and inactivated vaccines seem to be safe for immune thrombocytopenia patients with rare bleeding complications. Especially younger patients and those vaccinated with mRNA vaccines should be followed up closely for 1-2 months post vaccination for thrombocytopenia.

A cross-sectional assessment of refusal factors towards polio vaccination

ABSTRACT Poliomyelitis is a contagious disease that still remains in Pakistan, despite efforts to ensure full vaccination coverage, but, in counterpart, refusal is prevailing. Therefore, the present study was conducted to assess refusal factors to polio vaccination. A cross-sectional approach was followed for the present study which was conducted in the North Waziristan Tribal District (polio endemic area) between January 2023 to July 2023. Data were collected on a self-developed questionnaire. The study participants were from the general public and were recruited through simple random sampling. The data were analyzed using Statistical package for social sciences SPSS. A total of 387 respondents completed the survey, amongst which most of the respondents were male (90.7%), living in a joint family (87.1%), and had primary education (48.3%). Most of the respondents showed poor knowledge regarding polio disease (58.7%). Religious extremism, poor knowledge regarding the disease and joint family culture were the significant predictors of the refusal of polio vaccination. This refusal may cause the re-emergence of polio outbreaks.

RESUMEN La poliomielitis es una enfermedad contagiosa que aún persiste en Pakistán, a pesar de los esfuerzos que se realizan para garantizar una cobertura de vacunación completa, pero, en contrapartida, prevalece el rechazo. El presente estudio se realizó para evaluar factores de rechazo a la vacunación contra la poliomielitis. Se llevó a cabo un estudio de corte transversal, en el distrito tribal de Waziristán del Norte (zona endémica de poliomielitis) entre enero de 2023 y julio de 2023. Los datos se recogieron mediante un cuestionario. Los participantes en el estudio procedían del público en general y se reclutaron mediante muestreo aleatorio simple. Los datos se analizaron con el paquete estadístico para ciencias sociales SPSS. Completaron la encuesta 387participantes, la mayoría de los cuales eran varones (90,7%), vivían en una familia conjunta (87,1%) y tenían estudios primarios (48,3%). La mayoría de los encuestados tenían escasos conocimientos sobre la poliomielitis (58,7%). El extremismo religioso, los escasos conocimientos sobre la enfermedad y la cultura de familia conjunta fueron los factores predictivos significativos del rechazo a la vacunación antipoliomielítica. Este rechazo puede provocar la reaparición de brotes de polio.

Challenges of vaccine politics: implications for addressing hesitancy

Preparation and evaluation of a bivalent peste des petits ruminants and Brucella Rev-1 vaccine for sheep

ABSTRACT Sheep industry is of great importance in the economy. Infectious diseases of ruminants are an economic threat and can cause massive damage globally. Peste des petits ruminants and brucellosis are two diseases that affect sheep and cause great economic losses. The live attenuated peste des petits ruminants vaccine induces strong immunity and high protection against this disease. On the other hand, the live attenuated Brucella melitensis Rev-1 vaccine represents one of the best choices for controlling Brucella diseases. In the present study, the newly prepared bivalent vaccine against peste des petits ruminants and Brucella Rev-1 from local isolates was studied in comparison with the monovalent vaccines against each disease. Enzyme-linked immunosorbent assay and seroneutralization test were used for serological evaluation of the immune response in the vaccinated sheep groups; the prepared bivalent vaccine induced higher antibody titers than the monovalent vaccines and the protective antibody titer was detected 3-4 weeks after vaccination. The bivalent vaccine can provide excellent protection to sheep against peste des petits ruminants and Brucella melitensis compared to monovalent vaccines.

RESUMEN La industria ovina tiene una gran importancia en la economía. Las enfermedades infecciosas de los rumiantes son una amenaza a la economía y pueden causar daños masivos en todo el mundo. La peste de pequeños rumiantes y la brucelosis son dos enfermedades que afectan al ganado ovino y causan grandes pérdidas económicas. La vacuna viva atenuada contra la peste de pequeños rumiantes induce una fuerte inmunidad y una elevada protección contra esta enfermedad. Por otra parte, la vacuna viva atenuada contra Brucella melitensis Rev-1 representa una de las mejores opciones para controlar las enfermedades causadas por Brucella. En el presente trabajo se estudió la vacuna bivalente preparada contra la peste de pequeños rumiantes y Brucella Rev-1 a partir de aislados locales, en comparación con las vacunas monovalentes contra cada enfermedad. Para la evaluación serológica de la respuesta inmunitaria en los grupos de ovejas vacunadas se utilizaron el ensayo inmunoenzimático y la prueba de seroneutralización; la vacuna bivalente preparada indujo títulos de anticuerpos más elevados que las vacunas monovalentes y el título de anticuerpos protectores se detectó a las 3-4 semanas después de la vacunación. La vacuna bivalente puede proporcionar una excelente protección a los ovinos contra la peste de pequeños rumiantes y Brucella melitensis en comparación con las vacunas monovalentes.

Perception and knowledge of Pakistanis on COVID-19 and its vaccination: implications for public health

ABSTRACT Since the beginning, COVID-19 caused deaths and social and economic devastation worldwide. Effective prophylactic strategies such as personal protection measures, social distancing, and vaccination were key players in limiting disease transmission. The present study aimed to investigate the perception and knowledge of the Pakistani public regarding various aspects of COVID-19 after more than 3 years of the pandemic initiation. The study also aimed to investigate the association between educational level and knowledge about COVID-19. An online cross-sectional survey was conducted using a convenience sample of 1,043 individuals from different cities in Pakistan. The survey consisted of various sets of questions covering the aspects of the study objectives. Most of the participants reported a solid understanding of COVID-19; however, there were some misconceptions and knowledge gaps concerning certain pandemic elements. The study also highlighted a link between educational level and awareness of COVID-19, with a higher education level related to a better understanding of the pandemic and effective preventive strategies. This study provides valuable insight into the perception and education level of the Pakistani public regarding COVID-19. The findings highlight the need of continued public health efforts to promote and ensure access to effective prevention measures, particularly in vulnerable populations who may face barriers to obtaining protective equipment.

RESUMEN Desde el principio, la COVID-19 causó muertes y devastación social y económica en todo el mundo. Las estrategias profilácticas eficaces, como las medidas de protección personal, el distanciamiento social y la vacunación fueron fundamentales para limitar la transmisión de la enfermedad. El presente estudio tuvo como objetivo investigar la percepción y los conocimientos del público pakistaní en relación con diversos aspectos de la COVID-19 después de más de 3 años del inicio de la pandemia. El estudio también pretendió investigar la asociación entre el nivel educativo y el conocimiento sobre COVID-19. Se realizó una encuesta transversal en línea utilizando una muestra de conveniencia de 1.043 individuos de diferentes ciudades de Pakistán. La encuesta constaba de varios conjuntos de preguntas que cubrían los aspectos de los objetivos del estudio. La mayoría de los participantes declararon tener un conocimiento sólido sobre COVID-19; sin embargo, tenían algunas ideas erróneas y lagunas de conocimiento en relación con determinados elementos de la pandemia. El estudio también puso de relieve una relación entre el nivel educativo y el conocimiento sobre COVID-19, relacionándose un mayor nivel educativo con una mejor comprensión de la pandemia y de las estrategias preventivas eficaces. Este estudio proporciona una valiosa información sobre la percepción y el nivel de educación del público pakistaní en relación con COVID-19. Los resultados ponen de relieve la necesidad de continuar los esfuerzos de salud pública para promover y garantizar el acceso a medidas de prevención eficaces, en particular en las poblaciones vulnerables que pueden enfrentarse a barreras para obtener equipos de protección.

Studying the efficacy of some commercial inactivated avian influenza H5 vaccines against the currently circulating highly pathogenic H5N8 virus in broiler chickens in Egypt

ABSTRACT The avian influenza H5N8 virus is a highly pathogenic virus that can cause severe economic losses in poultry species worldwide. In Egypt, highly pathogenic avian influenza virus of subtype H5N8 clade 2.3.4.4b was reported in 2016, and despite vaccination efforts, the virus has become endemic. The current study aims to evaluate the efficacy of some commercial inactivated H5 vaccines from a different lineage against the challenge with HPAI H5N8 virus in broiler chickens, in Egypt. Groups of broilers vaccinated with different inactivated H5 vaccines and unvaccinated controls were challenged with HPAI H5N8 virus. Antibody titer was calculated at the first 3 weeks after vaccination and the viral shedding titer was calculated at 3-, 5-, 7- and 10-days post challenge. Mortality rates were monitored daily during the first 10 days after the challenge to provide an estimate of the protection level. According to our findings, following a challenge with the HPAI H5N8 clade 2.3.4.4b virus, the inactivated vaccines offered varying degrees of efficacy, HI titer and reduction of virus shedding titer, which may be related to variations in the nucleotide sequence identity percentages of the HA genes between the challenge virus and the vaccine seeds. These findings emphasize the need for continual updating of the H5 vaccines applied in Egypt to keep up with the continual mutations that discovered in H5Nx viruses.

RESUMEN El virus de la gripe aviar H5N8 es un virus altamente patógeno que puede causar graves pérdidas económicas en especies avícolas de todo el mundo. En Egipto, el virus de la gripe aviar altamente patógena del subtipo H5N8 clado 2.3.4.4b se notificó en 2016 y, a pesar de los esfuerzos de vacunación, el virus se ha vuelto endémico. El presente estudio tiene como objetivo evaluar la eficacia de algunas vacunas comerciales inactivadas H5 de linaje diferente, contra el virus de la influenza aviar de alta patogenicidad H5N8 en pollos de engorde, en Egipto. Grupos de pollos de engorde vacunados con diferentes vacunas H5 inactivadas y controles no vacunados fueron retados con el virus de la influenza aviar de alta patogenicidad H5N8. Se calculó el título de anticuerpos a las 3 semanas de la vacunación y el título de excreción viral a los 3, 5, 7 y 10 días de la prueba. Las tasas de mortalidad se controlaron diariamente durante los 10 días siguientes al reto para obtener una estimación del nivel de protección. Según nuestros hallazgos, tras el reto con el virus de la influenza aviar de alta patogenicidad H5N8 del clado 2.3.4.4b, las vacunas inactivadas ofrecieron diferentes grados de eficacia, título de inhibición de la hemaglutinación y reducción del título de excreción del virus, lo que puede estar relacionado con las variaciones en los porcentajes de identidad de la secuencia de nucleótidos de los genes HA entre el virus del reto y las semillas de la vacuna. Estos hallazgos enfatizan la necesidad de una actualización continua de las vacunas H5 aplicadas en Egipto para mantenerse al día con las continuas mutaciones que se descubren en los virus H5Nx.

Molecular characterization and pathogenicity evaluation of recent infectious bursal disease virus strains: implications for Newcastle disease vaccine efficacy

ABSTRACT Infectious bursal disease continues to cause significant economic losses in the Egyptian poultry industry despite intensive vaccination programs. This study was aimed to molecularly characterize the circulating infectious bursal disease virus strains in Egypt and to compare the pathogenic and immunosuppressive effects of very virulent and variant strains. Ten pooled bursal samples from suspected broiler flocks were subjected to reverse transcription polymerase chain reaction for detection and identification. Nine samples tested positive. Sequencing and phylogenetic analysis identified seven samples (D1, D3, D4, D5, D6, D7, and D8) as very virulent-like strains, showing 98.8-99.2% amino acid sequence identity among them, but only 87.8-91% identity with vaccine strains used in Egypt. Two samples (D9 and D10) were identified as variants with 96-96.4% identity with other Egyptian variants. Two isolates (D8 and D10) were selected to study their pathogenicity and immunosuppressive effects in specific pathogen free chickens, which were orally infected with 105 egg infective dose 50% of each isolate and vaccinated against Newcastle disease, 5 days before infection. The variant strain caused earlier and more severe bursal damage without clinical signs or mortality, while the very virulent strain led to typical disease symptoms and 60% mortality. The mean hemagglutination inhibition titers were lower in variant-infected chickens, while protection against Newcastle disease virus was 60% and 40% in very virulent and variant-infected chickens, respectively, compared to 90% in uninfected chickens. These findings indicate that variant strains are more pathogenic and immunosuppressive than very virulent strains, highlighting the need for effective control measures.

RESUMEN La bursitis infecciosa continúa causando importantes pérdidas económicas en la industria avícola egipcia a pesar de los intensos programas de vacunación. El objetivo de este estudio fue caracterizar molecularmente cepas del virus de la bursitis infecciosa circulantes en Egipto y comparar los efectos patógenos e inmunosupresores de cepas muy virulentas y variantes. Diez muestras procedentes de pollos de engorde sospechosos de bursitis infecciosa fueron sometidas a la reacción en cadena de la polimerasa de transcripción inversa para su detección e identificación. Nueve muestras resultaron positivas. Mediante la secuenciación y el análisis filogenético se identificaron siete muestras (D1, D3, D4, D5, D6, D7 y D8) como cepas muy virulentas, que mostraban una identidad de secuencia de aminoácidos del 98,8-99,2% entre ellas, pero sólo del 87,8-91% con las cepas vacunales utilizadas en Egipto. Dos muestras (D9 y D10) se identificaron como cepas variantes con un 96-96,4% de identidad con otras variantes egipcias. Se seleccionaron dos aislados (D8 y D10) para estudiar su patogenicidad y efectos inmunosupresores en pollos libres de patógenos específicos, que fueron infectados por vía oral con 105 dosis infectivas en huevos 50% de cada aislado y vacunados contra la enfermedad de Newcastle, 5 días antes de la infección. La cepa variante causó lesiones bursales más tempranas y graves sin signos clínicos ni mortalidad, mientras que la cepa muy virulenta provocó síntomas típicos de la enfermedad y un 60% de mortalidad. El título medio de inhibición de la hemaglutinación fue inferior en los pollos infectados por la cepa variante, mientras que la protección contra el virus de la enfermedad de Newcastle fue del 60% y el 40% en los pollos infectados con la muy virulenta y la variante, respectivamente, en comparación con el 90% en los pollos no infectados. Estos resultados indican que las cepas variantes son más patógenas e inmunosupresoras que las cepas muy virulentas, lo que pone de relieve la necesidad de adoptar medidas de control eficaces.

Evaluation of live attenuated canine parvovirus vaccines using real-time PCR

ABSTRACT Canine parvovirus infections pose a significant global threat to canine health, necessitating effective vaccination strategies. This study evaluates the viral content in 20 batches of live attenuated canine parvovirus vaccines using real-time polymerase chain reaction and compares the results with the immunofluorescence test. The study involved canine parvovirus strain 39, adapted to Madin-Darby canine kidney cells, and vaccine batches sourced from various local and international suppliers. The immunofluorescence test results showed 18 batches met the permissible titer level of 3 log10 fluorescent antibody infective dose 50%/mL, while two batches (3 and 18) did not. Similarly, real-time polymerase chain reaction analysis confirmed the same 18 batches met the permissible titer level, with no significant difference between the methods as indicated by the 95% confidence interval for the difference in results (lower: 4.3949, upper: 5.3600). The findings support integrating advanced diagnostic technologies like real-time polymerase chain reaction into routine vaccine evaluation protocols, ensuring higher standards of veterinary biologics assessment; this transition aims to enhance the accuracy, efficiency, and overall quality of canine parvovirus vaccine evaluation, ultimately improving canine health protection.

RESUMEN Las infecciones por parvovirus canino suponen una importante amenaza mundial para la salud canina, lo que exige estrategias de vacunación eficaces. En el presente estudio se evalúa el contenido viral en 20 lotes de vacunas vivas atenuadas contra el parvovirus canino mediante la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real y se comparan los resultados con la prueba de inmunofluorescencia. En el estudio se utilizó la cepa 39 del parvovirus canino, adaptada a células de riñón canino Madin-Darby y lotes de vacunas procedentes de diversos proveedores locales e internacionales. Los resultados de la prueba de inmunofluorescencia mostraron que 18 lotes cumplieron el nivel de título permitido de 3 log10 dosis infecciosa determinada por inmunofluorescencia 50%/mL, mientras que dos lotes (3 y 18) no. Del mismo modo, el análisis de la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real confirmó que los 18 lotes cumplieron el nivel de título permitido, sin diferencias significativas entre los métodos, como indica el intervalo de confianza del 95% (inferior: 4,3949, superior: 5,3600). Los resultados apoyan la integración de tecnologías avanzadas de diagnóstico como la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real en los protocolos rutinarios de evaluación de vacunas, garantizando estándares más altos en la evaluación de biológicos veterinarios; esta transición pretende mejorar la precisión, la eficiencia y la calidad general de la evaluación de vacunas contra el parvovirus canino y, en última instancia, mejorar la protección de la salud canina.

Infectivity of SARS-CoV-2 in Golden Syrian hamster as a model for immunogenicity and efficacy trials of biomolecules and vaccine candidates

RESUMEN La rápida propagación del coronavirus tipo 2 del síndrome respiratorio agudo severo desencadenó una emergencia sanitaria global con la consecuente necesidad de desarrollar vacunas y terapias que requieren el empleo de modelos animales para sus evaluaciones. Con el objetivo de conocer el comportamiento de la infección con la cepa de coronavirus tipo 2 del síndrome respiratorio agudo severo circulante en Cuba en el hámster Sirio Dorado y poder disponer de ese modelo animal en los ensayos de candidatos vacunales cubanos y fármacos contra el virus, se desarrolló un estudio de infectividad. Se utilizaron técnicas moleculares y cultivos virales que demostraron la presencia de ARN viral y virus infectivos en muestras de nasofaringe y pulmones desde el día 3 post infección, periodo donde se observó el pico de mayor concentración viral, seguido de una declinación gradual de la carga viral hasta el día 14. Los hámsteres infectados manifestaron signos de enfermedad, con reducción del peso corporal más notable en los días 5 y 7 post infección. La histopatología demostró ocurrencia de daño pulmonar de severo a grave, principalmente en los días 5 y 7 post infección. Los resultados permiten concluir que el hámster Sirio Dorado es susceptible a la infección con la cepa D614G de coronavirus tipo 2 del síndrome respiratorio agudo severo circulante en Cuba y reproduce una enfermedad similar a la que sufren los humanos con infecciones leves o moderadas durante la COVID-19, por lo que constituye un modelo valioso para estudios preclínicos con candidatos vacunales y fármacos para el tratamiento de la infección por coronavirus tipo 2 del síndrome respiratorio agudo severo.

ABSTRACT The rapid spread of SARS-CoV-2 throughout the world triggered a global sanitary emergency with the consequent need to develop vaccines and therapies against the virus, which require the use of animal models for their evaluations. An infectivity study was carried out to determine the behavior of infection with the circulating strain of SARS-CoV-2 in Cuba in the Golden Syrian hamster in order to use this animal model in the trials of Cuban vaccine candidates and drugs against the virus. Molecular techniques and viral cultures were used, which demonstrated the presence of viral RNA and infective virus in samples of nasopharynx and lungs on day 3 post infection, period where the highest viral concentration peak was observed, followed by a gradual decline of the viral load until day 14. Infected hamsters showed signs of disease, with the most notable reduction in body weight on days 5 and 7 post infection. Histopathology showed occurrence of severe to serious lung damage, mainly on days 5 and 7 post infection. The results allow us to conclude that the Golden Syrian hamster is susceptible to infection by the D614G strain of SARS-CoV-2 circulating in Cuba, and reproduces a disease similar to that suffered by humans with mild infections during COVID-19, making it a valuable model for preclinical studies with vaccine and drug candidates for the treatment of SARS-CoV-2 infection.

Anti-epidermal growth factor receptor immunotherapy in patients with advanced prostate cancer

RESUMEN En Cuba, el cáncer de próstata representa el primer lugar en incidencia y mortalidad por enfermedades neoplásicas en el hombre. Con el empleo de la quimioterapia y la prednisona en pacientes sintomáticos, metastásicos y en progresión, no se alcanzan las tasas de respuesta esperadas. En la era de la inmunoterapia, los tratamientos combinados pretenden mejorar la supervivencia con un perfil de seguridad aceptable. Para evaluar la eficacia y la seguridad de la combinación terapéutica con inmunoterapia anti-receptor del factor de crecimiento epidérmico en pacientes con cáncer de próstata metastásico y resistente a la castración, se revisaron los resultados de cuatro ensayos clínicos controlados y se ejecutó un meta-análisis de los mismos. Se utilizaron gráficos de bosque, y todos los análisis fueron hechos con el programa RevMan 5, versión 5.0. Se corroboró la superioridad del empleo del docetaxel en la supervivencia de los pacientes con cáncer de próstata avanzado; en todos los ensayos de nimotuzumab o CIMAvax-EGF® más quimioterapia comparados con quimioterapia sola, se observó beneficio con el tratamiento combinado, en particular del docetaxel con nimotuzumab. No se informan eventos adversos serios con la administración de la inmunoterapia asociada a la quimioterapia. Se concluyó que la combinación con ambos fármacos inmunoterapéuticos aporta un beneficio clínico en la mediana de supervivencia, en particular, con el esquema de docetaxel/prednisona. Ambas inmunoterapias resultan seguras, la mayoría de los eventos adversos fueron ligeros, no serios y sin relación causal con el producto.

ABSTRACT In Cuba, prostate cancer represents the first place in incidence and mortality due to neoplastic diseases in men. With the use of chemotherapy and prednisone in symptomatic, metastatic and progressive patients, the expected response rates are not achieved. In the era of immunotherapy, combined treatments aim to improve survival with an acceptable safety profile. To evaluate the efficacy and safety of the therapeutic combination with anti-epidermal growth factor receptor immunotherapy in patients with metastatic and castration-resistant prostate cancer, the results of four controlled clinical trials were reviewed and a meta-analysis of them was performed. Forest plots were used, and all analyses were performed with the RevMan 5 program, version 5.0. The superiority of the use of docetaxel in the survival of patients with advanced prostate cancer was confirmed. In all trials of nimotuzumab or CIMAvax-EGF® plus chemotherapy versus chemotherapy alone, benefit was observed with the combination treatment, particularly with docetaxel plus nimotuzumab. No serious adverse events were reported with the administration of immunotherapy in combination with chemotherapy. It was concluded that the combination with both immunotherapeutic drugs provides a clinical benefit in median survival, particularly with the docetaxel/prednisone regimen. Both immunotherapies are safe, most adverse events were mild, non-serious and not causally related to the product.