Revista Cubana de Medicina Tropical

Normalización de la técnica de reducción de placas para diferenciar una infección por dengue de una infección por fiebre amarilla

Se normalizó la técnica de neutralización por reducción de placas para diferenciar una infección por dengue de una infección por fiebre amarilla. Para ello se utilizaron muestras de suero de donantes cubanos en los que el antecedente previo de vacunación o no con fiebre amarilla era conocido y de pacientes costarricenses con un cuadro clínico de dengue sin antecedentes de vacunación con fiebre amarilla. El día óptimo de coloración de las placas fue el 5 y la menor dilución de suero capaz de diferenciar entre una infección por dengue de una por fiebre amarilla fue de 1/5. Dada la elevada especificidad de la técnica normalizada, se podrán realizar estudios de factores de riesgo de dengue hemorrágico en individuos vacunados por fiebre amarilla, tema de gran actualidad e importancia.

The plaque reduction neutralization assay was standardized to differentiate an infection caused by dengue from another infection produced by yellow fever. Serum samples from Cuban donors were used to this end. Information on previous vaccination against yellow fever was available. Samples from Costa Rican patients with a clinical picture of dengue and with no antecedents of vaccination against yellow fever were also utilized. The optimal plaque staining day was the fifth day and the smallest serum dilution capable of differentiating an infection resulting from dengue from another infection caused by yellow fever was of 1/5. According to the high specificity of the standardized technique, risk factor studies of dengue hemorrhagic fever could be made among individuals vaccinated against yellow fever, which is a present and important topic.

Incidencia de los Adenovirus en las conjuntivitis virales

Se llevó a cabo un estudio de incidencia de los Adenovirus en las conjuntivitis virales, para lo cual se realizó un diseño muestral y se tomaron muestras de exudado conjuntival a 150 pacientes con diagnóstico de conjuntivitis de presuntiva causa viral, en el Hospital Oftalmológico "Ramón Pando Ferrer" en el período comprendido entre julio y diciembre de 1994. Las muestras fueron inoculadas en cultivo celular y a las que presentaron un efecto citopatogénico sugestivo de infección por Adenovirus, se les realizó la técnica de inmunofluorescencia indirecta (IFI). Se usaron anticuerpos monoclonales contra Adenovirus, lo que permitió identificarlas como pertencientes a la familia Adenoviridae. Se utilizó la técnica de hemaglutinación, con hematíes de monos y ratas como sistema indicador, para agrupar los aislamientos previamente identificados mediante la técnica de IFI, después se les realizó el análisis por enzimas de restricción del genoma viral, lo cual posibilitó la clasificación en tipos. Los resultados de este estudio mostraron una incidencia de los Adenovirus en las conjuntivitis virales de 20 %, con un intervalo de confianza del 14-26 %, y un índice de confiabilidad de 95 %. Se demostró que el serotipo 37 fue el que produjo conjuntivitis con mayor frecuencia.

A study about the incidence of Adenovirus on viral conjunctivitis was conducted. A sample design was made and samples of conjunctival exudate were taken from 150 patients with diagnosis of apparently viral conjunctivitis at the "Ramón Pando Ferrer" Ophthalmological Hospital from July to December, 1994. Samples were innoculated in cell culture and the indirect immunofluorescence technique was applied to those with a cytopathogenic effect that suggested infection due to Adenovirus. Monoclonal antibodies were used against Adenovirus allowing to identify them as part of the Adenoviridae family. The hemoagglutination technique was used with erythrocytes of monkeys and rats as an indicator system in order to group the isolates previously identified by the indirect immunofluorescence technique. Later on, it was made an analysis by restriction enzymes of the viral genome to enable typing. The results of this study showed an incidence of Adenovirus on viral conjunctivitis of 20 %, with a confidence interval between 14 and 26 % and a reliability index of 95 %. It was proved that serotype 37 caused conjunctitivis more frequently.

Detección de herpesvirus en pacientes inmunocomprometidos con meningoencefalitis, mediante la técnica de reacción en cadena de la polimerasa

Se utilizó la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (RCP) múltiple para detectar, en un solo tubo de reacción, la presencia del virus de herpes simple (VHS), Citomegalovirus (CMV), virus de Epstein Barr (VEB), virus de la varicela zóster (VVZ) y/o el virus del herpes humano 6 (VHH6). Cincuenta líquidos cefalorraquídeos de pacientes con el síndrome de inmunodeficiencia adquirida y con sospecha clínica de meningoencefalitis por el VHS, recibidos en el Laboratorio de Enfermedades de Transmisión Sexual del Departamento de Virología del Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kourí" entre los años 1993 y 1996 fueron analizados; de éstos, 4 resultaron positivos al VHS, 3 a CMV, 2 al VVZ y 1 al VHH6, para 20 % de positividad. Se correlacionaron los resultados de la RCP con los hallazgos clínicos que presentaban los pacientes en el momento que se les realizó la punción lumbar. La introducción de esta técnica en el laboratorio permite contar con una herramienta útil, por su sencillez y rapidez, para el diagnóstico de las meningoencefalitis por herpesvirus.

The multiple polymerase chain reaction technique was used to detect in a single assay tube the presence of herpes simplex virus (HSV), Citomegalovirus (CMV). Epstein Barr virus (EBV), varicella zoster virus (VZV), and/or human herpes virus-6 (HHV6). 50 cerebrospinal fluids from patients with AIDS and clinically suspected to have meningoencephalitis due to HSV were received and analyzed at the laboratories of Sexually Transmitted Diseases of the Virology Department of the "Pedro Kourí" Tropical Medicine Institute from 1993 to 1996. 4 of them were positive to HSV, 3 to CMV, 2 to VZV, and 1 to HHV6 for a positivity of 20 %. The results of the PCR were correlated to the clinical findings presented by the patients at the time of the lumbar puncture. The introduction of this technique in the laboratory allows to have an easy, fast and useful tool for the diagnosis of meningoencephalitis due to herpesvirus.

Aplicación de la técnica de reacción en cadena de la polimerasa para la detección de secuencias de Papillomavirus humano

Se aplicó la técnica de reacción en cadena de la polimerasa para la detección de secuencias de Papillomavirus humano (PVH) mediante controles de líneas celulares de cáncer cervical y tejidos obtenidos por biopsia con diagnóstico clínico positivo a PVH. Se utilizó un juego de oligonucleótidos consenso, que son complementarios a una región altamente conservada dentro del marco de lectura abierta E1 del genoma viral de los PVH que afectan la mucosa cervical. Con este juego de cebadores fue posible amplificar secuencias de ácido desoxirribonucleico (ADN) correspondientes a los PVH 6 y 11, considerados dentro del grupo de bajo riesgo y de los PVH 16, 18, 31 y 33 comprendidos en el grupo de alto riego. El estudio de la sensibilidad de la técnica de amplificación arrojó como resultado un nivel de detección de 3,5 partículas virales por cada genoma diploide celular.

The polymerase chain reaction technique was applied to detect sequences of human Papillomavirus (HPV) by controls of cellular lines of cervical cancer and of tissues obtained through biopsy with a HPV-positive clinical diagnosis. A set of consensus oligonucleotides, which are complementary to a highly conserved region within the open reading frame El of the viral genome of HPV affecting the cervical mucosa, was used. With these primers it was possible to amplify DNA sequences corresponding to HPV 6 and 11, considered in the low risk group, and to HPV 16, 18, 31 and 33, included in the high risk group. The study of the sensitivity of the amplification technique showed a level of detection of 3,5 viral particles per each cellular diploid genome.

Susceptibilidad de las larvas de Anopheles pseudopunctipennis al parasitismo del nematodo Romanomermis iyengari Nematoda: Mermithidae), Estado de Oaxaca, México

Se realizó un estudio con larvas de mosquito de la especie Anopheles pseudopunctipennis Theobald 1901, en condiciones de laboratorio y de campo para evaluar los niveles de susceptibilidad al parasitismo del nematodo Romanomermis iyengari Welch 1964. Para los ensayos de laboratorio se utilizaron las dosis de 5:1 y 10:1, y larvas de II estadio de desarrollo, colectadas en reservorios naturales. Para los experimentos de campo se aplicó una dosis de 1 000 preparasíticos/m² de área de superficie. Los resultados hallados tanto en las pruebas de laboratorio como de campo arrojaron elevados niveles de infectación en las larvas, con valores de 90 a 100 % y de 85 a 95 %, respectivamente. Se observó una reducción marcada de las densidades larvarias en los 5 reservorios tratados 7 d después de las aplicaciones, lo que demostró una elevada susceptibilidad en esta especie de anofelino al parasitismo del mermítido.

Mosquito larvae of the species Anopheles pseudopunctipennis Theobals 1901 were studied under laboratory and field conditions to evaluate the level of susceptibility to the parasitism of nematode Romanomermis iyengari Welch 1964. Doses of 5:1 and 10:1 and development stage II larvae collected in natural reservoirs were used for the laboratory assays. A dose of 1 000 preparasitic agents/ m² was applied to field trials. The results of the lab and field tests yielded high levels of infestation in larvae with values ranging from 90 to 100 % and from 85 to 95 %, respectively. A marked reduction of the larval densities was observed in the 5 treated reservoirs seven days later, which showed an elevated susceptibility of the anopheline species to mermethid parasitism.

Susceptibilidad antimicrobiana y aislamiento de plásmidos en Plesiomonas shigelloides

Se estudiaron 30 cepas de Plesiomonas shigelloides aisladas de pacientes con enfermedad diarreica aguda y procedentes de los diferentes centros de salud del país. Se caracterizaron fenotípicamente mediante pruebas bioquímicas convencionales y se les determinó la susceptibilidad antimicrobiana por el método de Kirby Bauer, frente a 11 drogas. Se halló que las cepas de Plesiomonas shigelloides fueron sensibles a 7 y resistentes a 6 de las drogas investigadas. Se determinó la presencia de plásmidos en 12 de 29 cepas analizadas y se evidenció la diversidad en sus patrones plasmídicos.

30 strains of Plesiomonas shigelloides isolated from patients with acute diarrheal disease at different health centers of the country were studied. The were phenotypically characterized by conventional biochemical tests and the antimicrobial susceptibility to 11 drugs was determined by the Kirby Bauers method. It was found that the strains of Plesiomonas shigelloides were sensitive to 7 and resistant to 6 of the investigated drugs. The presence of plasmids in 12 of the 29 analyzed strains was determined and the diversity in their plasmidic patterns was proved.

Evaluación del polisacárido capsular tipo específico de Cryptococcus neoformans como inmunógeno y antígeno control positivo

Se obtuvo el polisacárido capsular tipo específico de una cepa autóctona de Cryptococcus neoformans var. neoformans con el empleo del método de precipitación selectiva con bromuro de hexadeciltrimetilamonio. El polisacárido capsular se acopló a eritrocitos de carnero y se utilizó como inmunógeno en conejos, se obtuvieron títulos de anticuerpos de hasta 1:32. Fueron evaluadas diluciones dobles seriadas del polisacárido capsular como antígeno control positivo mediante las técnicas de contrainmunoelectroforesis, látex y ELISA, y demostraron actividad biológica.

The specific type of capsular polysaccharide of an autoctonous strain of Cryptococcus neoformans var. neoformans was obtained by using the method of selective precipitation with hexadimethrine bromide. The capsular polysaccharide was matched to lambs erythrocytes and it was used as an immunogen in rabbits. Antibody titres of up to 1:32 were attained. Doble serial dilutions of the capsular polysaccharide were evaluated as positive control antigen by contraimmunoelectrophoresis, latex and ELISA techniques, showing biological activity.

Detección de anticuerpos, antígenos y complejos inmunes circulantes en las fascioliasis aguda y crónica.: Resultados preliminares

Se estudió un total de 24 pacientes con fascioliasis, de los cuales 19 se encontraban en la fase crónica y 5 en la fase aguda. Se detectó la presencia de antígenos y complejos inmunes circulantes (CIC) en el 100 % de los pacientes con fascioliasis aguda que tenían menos de 30 días de evolución de los síntomas clínicos, en tanto que la presencia de coproantígenos se hizo evidente en el 100 % de los pacientes crónicos. En este grupo se observó un significativo número de casos con elevados niveles de anticuerpos y 43,7 % de casos con CIC detectados tanto por la técnica de precipitación con PEG como por la de desviación del C1q. Se encontró una correlación altamente significativa entre el conteo de huevos y los niveles de CIC por ambas técnicas, así como una correlación significativa entre el conteo de huevos y los niveles de coproantígenos.

24 patients with fascioliasis were studied. 19 of them were in the chronic stage and 5 in acute stage. The presence of antigens and of circulating immune complexes (CIC) was detected in 100 % of the patients suffering from acute fascioliasis with less than 30 days of evolution of the clinical symptoms; whereas coproantigens were present in 100 % of the chronic patients. In this group it was observed a considerable number of cases with elevated levels of antibodies. 43.7 % of the cases with CIC were detected by using the precipitation technique with PEG and that of Clq deviation. A highly significant correlation was found between the eggs counting and the CIC levels by both techniques. Another important correlation was established between the eggs counting and the levels of coproantigens.

Dermatitis causada por Hylesia metabus (Lepidoptera: Hemileucidae) en la región costera del Estado del Delta del Amacuro, Venezuela

Se presentan 2 casos de una dermatitis intensa causada por la mariposa Hylesia metabus en un área que hasta el momento, no ha sido descrita como endémica para esta especie. Las dermatitits observadas en estos casos pueden describirse como pápulas generalizadas salientes, muy circunscritas, pruriginosas, comparables con la urticaria, eritematosas, edema de grado variable; así como una erupción monomorfa, consistente en pápulas pequeñas, duras, coronadas por una pequeña vesícula. Las lesiones descritas de los 2 pacientes evolucionaron con pápulas intensamente pruriginosas, durante una semana y al cabo de estos días los pacientes sanaron sin secuelas dermatológicas.

2 cases of acute dermatitis caused by butterfly Hylesia metabus in an area that so far has not been considered as endemic for this species were presented. The dermatitis observed in these individuals may be described as very circumscribed, pruriginous, erythematous generalized protruding papulas that may be compared with urticaria, and with a variable degree oedema. Monomorphic eruption consisting in small hard papulas crowned by a little vesicle was also present. The lesions of these 2 patients evoluted with intensely pruriginous papulas for a week and after that they healed without dermatological sequelae.

Estudio comparativo entre diferentes esquemas de administración de 2 dosis con la vacuna cubana antihepatitis B

Se realizó un estudio clínico controlado, correspondiente a la fase II, en una población de adultos sanos del sexo masculino con edades comprendidas entre 18 y 23 años; donde se evaluó la inmunogenicidad de 5 esquemas de administración de la vacuna antihepatitis-B (Heberbiovac-HB). Se estudiaron 5 grupos: I (grupo control 0, 1 y 6 meses), II (0 y 2 meses), III (0 y 4 meses) IV (0 y 6 meses) y V (0 y 8 meses). Los resultados no mostraron diferencias significativas en cuanto a porcentaje de seroprotección de ninguno de los grupos de 2 dosis respecto al control de 3 dosis. Concluimos que entre la primera y la segunda dosis puede transcurrir un tiempo desde 2 hasta 6 meses sin necesidad de reiniciar el esquema. Este aporte servirá de base a un estudio poblacional que determine cuál es el mejor esquema de administración a aplicar.

A controlled clinical trial, corresponding to stage 2, was conducted in a population of sound adult males aged 18-23 to evaluate the immunogenecity of 5 schedules of Cuban vaccine against hepatitis B (Cheberbiovac-HB). 5 groups were studied: I (control group 0, 1 and 6 months), II (0 and 2 months), III (0 and 4 months), IV (0 and 6 months), and V (0 and 8 months). The results showed no significant differences as regards the percentaje of seroprotection of any of the groups of 2 doses compared with the control of 3 doses. It is concluded that between the first and the second dose there may be a period of time from 2 to 6 months with no need to reinitiate the schedule. This information will serve as a basis for a population based study to determine which schedule is the best to be used.

Diagnóstico serológico del VIH-1 en muestras de sangre seca en papel de filtro por el sistema DAVIH Dot VIH-1

Se evaluaron muestras de sangre seca en papel de filtro por el sistema DAVIH Dot VIH-1 de Laboratorios DAVIH (La Habana, Cuba). Las muestras utilizadas, 103 positivas y 105 negativas, estaban confirmadas de forma previa por DAVIH Blot de Laboratorios DAVIH. Para utilizar la sangre seca en papel de filtro, se realizaron modificaciones al procedimiento original en cuanto a los tiempos de incubación de las muestras y conjugado, y la agitación en ambas etapas. Se obtuvieron resultados de sensibilidad y especificidad relativas de 100 y 99,05 %, respectivamente.

Dried blood specimens spotted on filter paper were evaluated by the HIV-1 DAVIH Dot system from DAVIH Laboratories (Havana, Cuba). The samples used, 103 positive and 105 negative, were previously confirmed by DAVIH Blot from DAVIH Laboratories. In order to use the dried blood on filter paper some modifications were made to the original procedure regarding the times of incubation of the samples and conjugate, and the agitation in both stages. Relative sensitivity and specificity of 100 and 99.05 %, respectively, were attained.