Revista Cubana de Medicina Tropical

Aplicación de la secuenciación nucleotídica de VP1 a la identificación de Enterovirus humanos

Se describió la introducción de un método molecular para la identificación de los Enterovirus basado en la amplificación, secuenciación y análisis filogenético de la proteína VP1. Se demostró que este método reduce grandemente el tiempo requerido para la identificación de los Enterovirus aislados y resulta de gran utilidad en la caracterización de aislamientos difíciles de tipificar, con el empleo de los reactivos inmunológicos de rutina. Por la rapidez de ejecución de la técnica reviste vital importancia su uso durante epidemias, dada la rápida determinación del agente causal.

The introduction of a mollecular method to identify the Entoviruses based on the amplification, sequencing and phylogenetic analysis of protein VP1 was described. It was proved that this method reduces significantly the time required for the identification of the isolated Entoviruses and that it is very useful in the characterization of isolates which are difficult to typify by the routine immunoloigical reagents. As it is a very fast technqiue, its use is very important during epidemics to determine the causal agent rapidly.

Susceptibilidad in vitro de aislamientos vaginales de Candida frente a clotrimazol y nistatina

Se determinó la susceptibilidad in vitro frente a clotrimazol y nistatina de 123 aislamientos de Candida, obtenidos mediante exudados vaginales de 404 mujeres que asistieron al Hospital Ginecoobstétrico "Ramón González Coro" de Ciudad de La Habana. De acuerdo con el número de colonias obtenidas en el aislamiento primario, las cepas fueron separadas en 2 categorías: colonización e infección. Para cada cepa se determinó la concentración mínima inhibitoria (CMI) de cada antifúngico, mediante un método de microdilución en caldo casitona. Las medias geométricas de los valores de CMI fueron mayores frente a nistatina (1,08 mg/mL) que frente a clotrimazol (0,22 mg/mL), aunque los rangos fueron similares (£ 0,125-16 mg/mL). Para Candida albicans, que fue la especie aislada con mayor frecuencia (54,5 %); las medias geométricas de los valores de la CMI fueron de 0,17 y 0,16 mg/mL para clotrimazol y de 0,71 y 0,92 mg/mL para nistatina, en ambas categorías. C. glabrata mostró el valor de CMI más elevado (16 mg/mL) frente a ambos antifúngicos. Solo los aislamientos de C. lusitaniae mostraron diferencia significativa (p < 0,01) entre los valores de CMI de nistatina de acuerdo con el número de colonias en el aislamiento primario. En aislamientos procedentes de mujeres tratadas con clotrimazol y/o nistatina en episodios anteriores de candidiasis, se observaron valores más elevados de las medias de CMI frente a nistatina que frente a clotrimazol; aunque esta diferencia no fue estadísticamente significativa.

The susceptibility in vitro of 123 isolates of Candida against clotrimazole and nystatin was determined. The isolates were obtained by vaginal smears from 404 women that attended "Ramón Gonzalez Coro" Gynecoobstetric Hospital, in Havana City According to the number of colonies obtained in the primary isolation, the strains were separated into 2 categories: colonization and infection. The inhibitory minimum concentration was determined for each antigunfal by a method of microdilution in casitone broth. The geometrical means of the IMC values were higher against nystatin (1.08 mg/mL) than against clotrimazole (0.22 mg/mL), eventhough the features were similar ( £ 0.125 -16 mg/mL) For Candida albicans, that was the most frequently isolated species (54.5 %), the geometrical means of the IMC values were 0.17 and 0.16 mg/mL for clotrimazole and 0.71 and 0.92 for nystatin, in both categories. C. glabrata showed the highest IMC values (16 mg/mL) against antifungals. Only the isolates of C. lusitaniae showed a significant difference (p < 0.001) between the IMC values of nystatin according to the number of colonies in the primary isolation. In isolates from women treated with clotrimazole and/or nystatin in previous episodes of candidiasis, there were observed more elevated values of the means of IMC against nystatin than against clotrimazole, although this difference was not statistically remarkable.

Caracterización microbiológica de cepas candidatas vacunales de Leptospira interrogans serogrupo Ballum

Se caracterizaron microbiológicamente 2 cepas candidatas vacunales de Leptospira interrogans serogrupo Ballum, como parte de los trabajos encaminados a la obtención de nuevas formulaciones vacunales antileptospirósicas para uso humano. Se evaluó la cinética de crecimiento de ambas cepas en medio proteico EMJH y en 3 medios libres de proteínas. Se estimó la virulencia en hámsters mediante el cálculo de la dosis letal media. Fueron analizados los perfiles antigénicos celulares y extracelulares mediante SDS-PAGE unidimensional y comparados con aquellos de cepas pertenecientes a los serogrupos Canicola, Icterohaemorrhagiae y Pomona. La homología antigénica entre serogrupos heterólogos se analizó mediante western blotting con suero de hámsters vacunados con vax-SPIRAL®. Los resultados obtenidos demostraron un crecimiento fastidioso de ambas cepas de Ballum en los medios de cultivo estudiados, una alta virulencia en el modelo animal y una gran homología antigénica, con cepas pertenecientes a otros serogrupos de Leptospira de mayor circulación en Cuba.

Two candidate vaccines of Ballum serogroup Leptospira interrogans were microbiologically characterized as part of the work directed to the obtention of new antileptospirosis vaccine formulations for human use. The growth kynetics of both strains was evaluated in EMJH protein medium and in 3 protein free media. The virulence was estimated in hamsters by the calculation of the mean lethal dose. The cellular and extracellular antigenic profiles were analyzed by unidimensional SDS-PAGE and compared with those from strains of Canicola, Icterohaemorrhaagiaae and Pomona serogroups.The antigenic homology among heterologous groups was analyzed by western blotting with serun from hasterms vaccinated with vax-SPIRAL®. The results obtained showed a fastidious growth of both strains of Ballum in the studied media, a high virulence in the animal model and a large antigenic homology with strains from other serogroups of Lepstospira prevailing in Cuba.

Staphylococcus aureus resistente a la meticilina: detección de portadores entre niños hospitalizados y niños sanos de la comunidad

Se realizó un estudio descriptivo puntual para la búsqueda de portadores nasales de cepas de Staphylococcus aureus resistentes a la meticilina (SARM), entre niños sanos atendidos en círculos infantiles y entre niños hospitalizados expuestos a uno de los factores de riesgo o más que predisponen para la colonización por este tipo de cepas; durante el período comprendido entre octubre de 2000 a febrero de 2001, en el municipio Marianao. Para el aislamiento primario de las cepas SARM se utilizó el medio oxacilina-manitol-sal-agar (OMSA) y a todas las cepas identificadas como S. aureus se les determinó la sensibilidad a drogas antimicrobianas por el método de Kirby-Bauer. Para identificar la resistencia a la oxacilina en las cepas recuperadas en OMSA se aplicaron los métodos: oxacillin salt-agar screening-plate y la determinación de la concentración mínima inhibitoria (CMI) en agar y en caldo. Se investigó la presencia del gen mecA mediante la reacción en cadena de la polimerasa en aquellas cepas que presentaron una CMI ³ 4 µg/mL de oxacilina. De los niños sanos, 0,35 % y de los hospitalizados, 2 % constituyeron portadores nasales de cepas SARM. Las cepas aisladas en ambos grupos de estudio mostraron índices altos de resistencia para la penicilina, tetraciclina y eritromicina por el método de Kirby-Bauer. Se identificó el gen mecA en una cepa SARM aislada de un portador nasal hospitalizado y se definió que su comportamiento se correspondía con el descrito para una cepa homorresistente para la oxacilina.

A descriptive punctual study was conducted to search for nasal carriers of Staphylococcus aureus strains resistant to methycilin (SARM) among sound children attended in nurseries and hospitalized children exposed to one or more risk factors predisposing to the colonization by this type of strains from October, 2000, to February, 2001, in Marianao municipality. For the primary isolation of the SARM strains, it was used the oxacillin-manitol-salt-agar (OMSA) and the sensitivity to antimicrobial drugs was determined in all strains identified as S. Aereus by using the Kirby-Bauer method. In order to identify the resistance to oxacillin in the strains recovered from OMSA, the oxacillin salt-agar screening -plate method and the determination of inhibitory minimum concentration (IMC) in agar and broth were applied. The presence of the mecA gene was nvestigated by polymerase chain reaction in those strains with an IMC ³ 4 mg/mL of oxacillin. Of the sound children, 0.35 % and of the hospitalized, 2 %, were nasal carriers of SARM strains. The strains isolated in both study groups showed high indexes of resistance to penicillin, tetracycline and erythromycin by the Kirby-Bauer method. The mecA gene was identified in a SARM strain isolated from a hospitalized nasal carrier and it was defined that its behaviour agreed with the one described for a strain homoresistant to oxacillin.

Portadores de Neisseria meningitidis en niños de una escuela primaria

Se realizó, con la autorización de la Dirección Municipal de Educación, Dirección Municipal de Salud y el consentimiento informado de los padres, un estudio transversal descriptivo en 318 niños de la Escuela "Mártires del Corynthia"; con el propósito de conocer la prevalencia de portadores de meningococo en niños de edad escolar, determinar los marcadores epidemiológicos de las cepas aisladas y establecer la posible relación existente entre el portador y las variables como edad, sexo, antecedente de infección respiratoria aguda, hacinamiento, amigdalectomía, efecto inhibitorio de la flora acompañante y el estado secretor de antígenos ABH en la saliva. A todos, se les tomó exudado nasofaríngeo y una muestra de saliva. Además, los padres llenaron una encuesta donde se indagó sobre los factores de riesgo a investigar. Se detectó 6,9 % de portadores de meningococo y predominaron las cepas NA:NT:P1.NST:L3,7,9. Los factores de riesgo que dieron resultados estadísticamente significativos respecto a la condición de portador de Neisseria meningitidis fueron: edad, antecedente de infección respiratoria aguda y la presencia de Streptococcus pneumoniae y Neisseria lactamica de la flora bacteriana acompañante en la nasofaringe de los niños investigados.

A cross-sectional and descriptive study was conducted among 318 children from the "Mártires del Corynthia" Primary School under the authorization of the Municipal Division of Education and the informed consent of their parents aimed at knowing the prevalence of meningoccoco carriers in school children, determining the epidemiological markers of the isolated strains and establishing the possible relation existing between the carrier and variables, such as age, sex, acute respiratory infection history, hacinamiento, amigdalectomy, inhibitory effect of of the accompanying flora and the secretory state of ABH antigens in saliva. All of them underwent nasopharyngeal exudate and a saliva sample was taken. In adition, the paents were surveyed about the risks factors to be investigated. 6.9 % of meningoccoco carriers were found and the NA:NT:P1:NST:L3,7,9 strains predominated. The risk factors with statistically significant results regarding the condition of carrier Neisseria meningitidis carrier were age, acute respiratory infection history, and the presence of Streptococcus pneumoniae and Neisseria lactamica of the accompanying bacterial flora in the nasopharynx of the children under study.

Evaluación preliminar de la actividad antiviral del extracto acuoso de Phyllanthus orbicularis frente al virus VHS-1

Se evaluó la actividad antiviral del extracto acuoso de Phyllanthus orbicularis; un miembro de la familia Euohorbiacea, frente al virus del herpes simple tipo 1 (VHS-1), tanto en cultivo celular, específicamente en fibroblastos de prepucio humano, como un modelo animal en ratones Balb-c. El efecto extracelular del extracto sobre VHS-1, resultó ser efectivo, obteniéndose un índice selectivo de 44, lo que apunta hacia una posible acción virucida sobre la partícula. En el ensayo in vivo, la administración del extracto acuoso (12 mg/kg), de manera tópica, redujo de forma significativa el desarrollo de lesiones en ratones infectados por vía subcutánea con VHS-1 (1 x 106 UFP). Estos resultados sugieren la consideración de Phyllanthus orbicularis, como un posible candidato anti VHS-1.

The antiviral activity of the aqueous extract of Phyllanthus orbicularis, a member of the Euohorbiacea family, against the simple herpes virus type1 was evaluated in cellular culture, specifically in fibroblasts of human prepucium, and in an animal model, Balb-c mice. The extracelullar effect of the extract on HIV-1 proved to be effective. A selective index of 44 was obtained, which shows a possible virucidal action on the particle. In the trial in vivo, the topical administration of the aqueous extract (12 mg/kg) reduced significantly the development of lesions in mice subcutaneously infected with HIV-1 (1 x 106 UFP). These results suggest the consideration of Phyllanthus orbicularis as a possible anti-HIV-1 candidate

Utilidad de 2 métodos coproparasitológicos y su empleo en un ensayo terapéutico antigiardiásico

Se realizó un estudio a 456 niños con edades de 1 a 5 años, pertenecientes a 4 guarderías infantiles del municipio San Miguel del Padrón, en el mes de noviembre de 1998; para evaluar el diagnóstico de Giardia lamblia y otros protozoos intestinales, utilizando comparativamente los métodos de diagnóstico coproparasitológicos de examen directo y la técnica de concentración de Ritchie o formol-éter. Además, se desarrolló un ensayo terapéutico, utilizando tinidazol y albendazol, para el tratamiento de la infección por G. lamblia. La técnica de concentración de Ritchie fue más efectiva que el examen microscópico directo para el diagnóstico de Giardia lamblia, Entamoeba histolytica/ Entamoeba dispar y Cyclospora cayetanensis y se demostró la mayor sensibilidad del examen seriado sobre el análisis de una sola muestra (p< 0,01). Por otra parte, el tinidazol demostró mayor eficacia que el albendazol para el tratamiento de la infección por G. lamblia, con un mayor porcentaje de curación (72 % vs. 34,6 %) (p< 0,01).

A study of 456 children aged 1-5 from 4 day care centers of San Miguel del Padrón municipality was conducted in November, 1998, to evaluate the diagnosis of Giardia lamblia and other intestinal protozoa by using comparatively the coproparasitological diagnostic methods of direct examination and Ritchie's concentration technique or formol-ether. Besides, a therapeutical trial was developed with tinidazole and albendazole for treating the infection caused by G. lamblia. Ritchie's concentration technique was more effective than the microscopic direct examination for diagnosing Giardia lamblia, Entamoeba histolytical/Entamoeba dispar and Cyclospora cayetanensis. It was demonstratyed that the serial examination was more sensitive than the analysis of just one sample (p< 0.01). On the other hand, tinidazole proved to be more efficient than albendazole to treat the infection produced by G. lamblia, with a greater cure percentage (72 % vs. 334.6 %), (p < 0.01).

Comportamiento de la trichomonosis vaginal en un grupo de adolescente

Se estudió un total de 275 adolescentes en las edades comprendidas entre 10 y 19 años procedentes de la consulta infanto-juvenil, de interrupción de embarazos y de infecciones de transmisión sexual del Hospital Docente Ginecoobstérico "Ramón González Coro" y el Hospital "Eusebio Hernández", ambos de Ciudad de La Habana, en el período comprendido de agosto de 1999 a septiembre de 2000, para conocer el comportamiento de la infección por Trichomonas vaginalis en este grupo poblacional. Se reportó 18,1 % de positividad a la parasitosis. Se demostró mediante el cálculo de riesgo relativo que las adolescentes que presentaron una infección activa o pasada por Trichomonas vaginalis tenían más posibilidades de contraer una infección por Papiloma virus humano que las que no presentaban esta condición. Se pudo comprobar que 78 (28,3 %) del total de pacientes examinadas presentaron algún tipo de lesión en el cuello uterino. Se dan a conocer algunos factores de riesgo como el no uso de condón, el tener múltiples parejas sexuales así como el comienzo precoz de las relaciones sexuales; los cuales pueden facilitar la adquisición de esta parasitosis en una población tan vulnerable como son las adolescentes.

275 adolescents aged 10-19 receiving attention at the infantojuvenile department of pregnancy interruption and of sexually transmitted infections of "Ramón Gonzalez Coro" and "Eusebio Hernández" Gynecoobstetric Teaching Hospitals, both in Havana City, were studied from August, 1999, to September, 2000, aimed at knowing the behavior of the infection caused by Trichomonas vaginalis in this population group. The results yielded 18.1 % of positivity to parasitosis. It was proved by the calculation of relative risk that the adolescents that had an active or past infection due to Trichomonas vaginalis have more possibilities of getting an infection produced by human Papilomavirus than those without this condition. It was demonstrated that 78 (28.3 %) of the total of patients examined had some type of lesion in the uterine cervix Some risk factors as non using condon, having multiple sexual partners and the early beginning of sexual relations, which may facilitate the adquisition of this parasitosis in a population so vulnerable as the adolescents, were made known..

Conocimientos, creencias y prácticas de médicos de Cienfuegos en relación con la amebiasis intestinal: resultados de una intervención

Se demostró, con el empleo de herramientas inmunológicas y biomoleculares, en un estudio realizado en la provincia de Cienfuegos, que en aquella provincia la amebiasis intestinal era un problema de salud sobredimensionado. Una encuesta sobre conocimientos, percepciones y prácticas aplicada a médicos relacionados con el diagnóstico, tratamiento y control de esta parasitosis evidenció que la sobredimensión podía estar asociada a una inadecuada percepción del problema y a un marcado desconocimiento que sobre importantes aspectos de esta entidad poseían. Para contribuir a la solución de la sobredimensión, y de sus consecuencias, se ejecutó un grupo de acciones en la citada provincia. A 1 año de completada la puesta en práctica de esas medidas, una segunda aplicación de la encuesta, cuyos resultados se publican en este documento, permitió conocer de una significativa mejoría de los encuestados en la casi totalidad de los aspectos cognoscitivos (6,73 y 11,23 medias de respuestas correctas antes y después, respectivamente, de la intervención) y perceptuales evaluados.

In a study conducted in the province of Cienfuegos, it was proved by using immunological and biomolecular tools that intestina amebiasis in that province was an overdimensioned health problem. A survey on knowledge, perceptions and practices applied to those physicians related to the diagnosis, treatment and control of this parasitosis showed that the overdimensioning may be associated with an inadequate perception of the problem and with a marked lack of knowledge about important aspects of this entity. To contribute to the solution of the ovedimensioning and of its consequences, a set of actions were taken in that province. After a year, a second survey was done, whose results are published in this document, allowing to know about a significant improvement of the surveyed in almost all the evaluated cognitive and perceptual aspects (6.73 and 11.23 means of correct answers before and after. the intervention, respectively).

Niveles de resistencia a insecticidas y sus mecanismos en 2 cepas de Aedes aegypti de Panamá

Se determinaron los niveles de susceptibilidad y/o resistencia a insecticidas, en larvas y adultos de Aedes aegypti procedentes de 2 localidades de Panamá (Río Abajo y Victoriano Lorenzo). En larvas, se encontró resistencia a pirimifos metil en las 2 localidades, sin embargo, resultaron susceptibles al resto de los insecticidas organofosforados (temefos, malation, fention, fenitrotion y clorpirifos) y a los piretroides (deltametrina, lambdacialotrina, cipermetrina y ciflutrina). En los ensayos de adultos, de acuerdo con las categorías de la Organización Mundial de la Salud, las 2 localidades resultaron también completamente susceptibles a los piretroides deltamentrina, lambdacialotrina, b cipermetrina y ciflutrina.

The levels of susceptibility and/or resistance to insecticides in larvae and adults of Aedes aegypti from 2 localities of Panamá (Río Abajo and Victoriano Lorenzo) were determined. Among larvae, it was found resistance to methyl- pyrimifos in both localities; however, they were susceptible to the rest of the organophosphate insecticides (temephos, malathion, fenthion fenitrothion and clorpirifos) and to pyrethroids (deltamethrin, lambda-cyhalothrin, cypermethrin and cyfluthrin. In the trials carried out in adults, according to the categories of the World Health Organization, the 2 localities proved to be completely susceptible to deltamethrin, lambda-cyhalothrin, b cypermethrin and cyfluthrin.

Estado de la resistencia a insecticidas en cepas de terreno de la especie Blattella germanica (Dictyoptera: Blattellidae) procedentes del municipio Pinar del Río

Se realizó un estudio de los niveles de resistencia a 10 insecticidas: 4 compuestos organofosforados (malation, clorpirifos, pirimifos metil y diazinon), 2 carbamatos (propoxur y bendiocarb) y 4 piretroides (cipermetrina, deltametrina, lambdacialotrina y ciflutrina) en 5 cepas de Blattella germanica (Linnaeus, 1767) colectadas en el terreno, procedentes de la ciudad de Pinar del Río. Se detectaron altos niveles de resistencia a los insecticidas: bendiocarb, cipermetrina y deltametrina; bajo nivel de resistencia a diazinon; moderada a alta a pirimifos metil; así como, susceptibilidad a un insecticida de cada grupo en estudio: clorpirifos (organofosforado), propoxur (carbamato) y ciflutrina (piretroide). Solo una cepa presentó baja resistencia a malation (Inicio Carlos Manuel) y a lambdacialotrina (Consejo Celso Maragoto). Se evidenció resistencia cruzada cipermetrina-deltametrina, que no afectó la susceptibilidad a los piretroides lambdacialotrina y ciflutrina.

A study of the levels of resistance to 10 insecticides: 4 organophosphate compounds (malathion, clorpirifos, methyl-pyrimifos and diazinon), 2 carbamates (propoxur and bendiocarb) and 4 pyrethroids (cypermethrin, deltamethrin, lamda-cyhalothrin and cyfluthrin) was conducted in 5 strains of Blatella germanica (Linnaeus, 1767) collected in the field of Pinar del Río. High levels of resistance to bediocarb, cypermethrin and deltamethrin insecticides; low level of resistance to diazinon; from moderate to high resistance to methyl-pyrimifos, as well as susceptibility to one insecticide in each study group: clorpirifos (organophosphate), propoxur (carbamate) and cyfluthrin (pyrethroid); were detected. Only a strain presented low resistance to malathion (Inicio Carlos Manuel) and to lambda-cyhalothrin (Consejo Celso Maragoto). Cypermethrin-deltamethrin cross resistance was evidenced. It did not affect the susceptibility to lambda-cyalothrin and cyfluthrin.

Amplificación al azar del ADN de 5 poblaciones cubanas de peces larvívoros del género Rivulus

Se amplificó al azar el ADN de 10 individuos de 5 poblaciones de Rivulus colectados en la región occidental de Cuba. De la amplificación, empleando 5 cebadores, no resultó ningún marcador monomórfico, lo que evidenció una alta variabilidad genética entre los peces de las 5 poblaciones. Según la distancia genética entre los individuos, se forman 4 grupos, para cada uno de los cuales aparecen marcadores genéticos de RAPD (ADN polimórfico amplificado al azar) que son específicos, porque no se evidencian en el resto de los individuos. Estos resultados apoyan la utilización del RAPD como una herramienta eficiente para la caracterización genética de peces cubanos del género Rivulus.

DNA from 10 individuals from 5 populations of Rivulus collected in the western region of Cuba was amplified at random. No monomorphic marker resulted from the amplification by using 5 primers, which showed the high genetic variability existing among the fishes of the 5 populations. According to the genetic distance among the individuals, they were divided into 4 groups, for which there are specific genetic markers of RAPD, since they are not observed in the rest of the subjects. These results support the use of RAPD as an efficient tool for the genetic characterization of Cuban fishes of the Rivulus genus.

Aeromonas: an emerging pathogen associated with extraintestinal infection in Cuba

Se evaluó una paciente de 87 años con antecedentes de cardiopatía que había estado presentando disnea y fiebre durante 2 meses. Un estudio bacteriológico resultó ser positivo a Aeromonas hydrophila en el contexto de un cáncer de pulmón existente. El estudio fue negativo para los bacilos ácidos rápidos.

An 87 years-old female with a history of heart disease who has been presenting dysnea and fever for 2 months was evaluated. A sputum bacteriological study proved positive for Aeromonas hydrophila in the context of an existing lung cancer. The study was negative for acid fast bacilli.

Evaluación de medio semisólido para la conservación de microorganismos de la familia Enterobacteriaceae

Se estudiaron 26 cepas bacterianas pertenecientes a la familia Enterobacteriaceae, con el objetivo de evaluar el mantenimiento de las propiedades culturales, tintoriales y bioquímicas de microorganismos originalmente preservados en el medio semisólido de conservación, desde finales de la década de los años 80; de las cuales 22 se encontraban viables, lo que demuestra supervivencia por más de 10 años. Los microorganismos han sido mantenidos en este medio desde su introducción al Laboratorio de Colección de Cultivos Microbianos del Instituto Nacional de Higiene, Epidemiología y Microbiología de Cuba; los cuales son utilizados como cepas tipo en el control interno de la calidad de los reactivos y medios de cultivo que se producen en este centro, para su posterior empleo en la evaluación microbiológica de muestras ambientales. Este medio brinda buenos resultados para la conservación de cepas de Enterobacteriaceae y puede ser utilizado en laboratorios con limitados recursos.

26 bacterial strains from the Enterobacteriaceae family were studied to evaluate the maintenance of the cultural, tinctorial and biochemical properties of the microorganisms originally preserved in the semisolid medium of conservation since the end of the 1980's. 22 of them were viable, showing their survival for more than 10 years. The microorganisms have been maintained in this medium since their introduction into the Laboratory of Collection of Microbial Cultures of the National Institue of Hygiene, Epidemiology and Microbiology of Cuba. They have been used as pattern strains in the internal control of the quality of reagents and culture media produced in this center for their further use in the microbiological evaluation of environmental samples. This medium gives good results for the conservartion of strains of Enterobaceriaceae and may be used in laboratories with scarce resources.

Aplicación de la enzima SensiScript a un sistema RT-RCP para la obtención de ARN de VIH-1 a partir de muestras de suero almacenadas a -20 oC durante una década

Se demostró la eficacia de la enzima transcriptasa inversa SensiScript para obtener material genético útil en la secuenciación de ácido nucleico de VIH-1, a partir de sueros colectados entre 1989 y 1998 y conservados a temperatura subóptima. Con el empleo de la enzima SensiScript se obtuvo amplificación del ARN del VIH-1 en 86,5 % de las muestras estudiadas, comparado con 20 % al utilizar la enzima AMV-RT. En 13,5 % de las muestras no se obtuvo amplificación con ninguna de las 2 enzimas empleadas.

The efficiency of SensiScript reverse transciptase to obtain useful genetic material in the sequencing of the nucleic acid from HIV-1, starting from sera collected between 1989 and 1998 and kept at suboptimal temperatures, was proved. On using the SensiScript enzyme it was obtained an amplification of the RNA of the HIV-1 in 86.5 % of the studied samples, compared with 20 % on using the AMV-RT enzyme . No amplification was obtained in 13.5 % of the studied samples with any of the 2 enzymes used.

Determinación de morfotipos de Candida spp en exudados vaginales

Se tomaron muestras de exudados vaginales a 100 pacientes femeninas con sospechas de candidiasis vaginal que acudieron al Laboratorio de Microbiología del Hospital Clínico Quirúrgico "Freyre de Andrade" de Ciudad de La Habana. Estas muestras se sembraron en agar Sabouraud y agar Sabouraud trifenil tetrazolio (AST). En 45 % de las muestras se obtuvo crecimiento de colonias levaduriformes, donde Candida albicans (51,1 %) y C. glabrata (22,2 %) fueron las especies aisladas con mayor frecuencia. Se logró demostrar que el AST permite diferenciar los morfotipos de las especies de levadura, y se observó que la mayoría de las especies presentó más de un morfotipo, predominando en C. albicans las colonias lisas, de color rosado claro sin halo micelial alrededor. En este no creció C. glabrata. Esta tipificación fenotípica en AST permitirá abordar estudios epidemiológicos en un futuro.

Samples of vaginal smears were taken from 100 patients suspected of vaginal candidiasis that attended the Microbiology Laboratory of "Freyre de Andrade" Clinical and Surgical Hospital, in Havana City. These samples were cultivated in Sabouraud agar and Sabouraud triphenyltetrazolium agar (STA). In 45 % of the samples it was observed growth of the yeast-shaped colonies, where Candida albicans (51.1 %) and C. glabrata (22.2 %) were the most frequently isolated species. It was proved that STA allowed to differentiate the morphotypes of the yeast species and it was observed that most of the species presented more than one morphotype with the predominance of flat light pink colonies without mycelial halo in C. albicans, C. glabrata did not grow in it. This phenotypic typing in STA will permit to approach epidemiological studies in a future.