Revista Cubana de Farmacia

The pharmaceutical care in cancer patients

Microneedles and Transcutol® as transdermal penetration enhancers of sibutramine formulated in a transdermal patch

Introducción: la principal barrera de permeación que tenemos es la piel. A pesar de ser una barrera casi impermeable para la mayoría de sustancias, se han buscado maneras para mejorar su permeabilidad utilizando nuevas tecnologías como es el uso de microagujas o promotores químicos como el Transcutol®. Objetivo: desarrollar y caracterizar un parche transdérmico a base de clorhidrato de sibutramina como fármaco modelo, usando Transcutol® y microagujas como agentes promotores de la penetración transdérmica. Métodos: se realizó la caracterización fisicoquímica de los parches mediante estudios de microscopia con luz polarizada, estudios de bioadhesión y resistencia a la ruptura. Los estudios de difusión se efectuaron en celdas de difusión verticales tipo Franz, utilizando piel abdominal humana como membrana entre ambos compartimentos. La cuantificación del principio activo se realizó mediante electroforesis capilar. Resultados: se obtuvieron parches bioadhesivos, con una adecuada estabilidad del activo en la matriz polimérica de quitosán al no precipitarse. El uso de Transcutol® y microagujas incrementó el paso de clorhidrato de sibutramina a través de piel humana con respecto al parche control. Se obtuvieron valores de flujo de 0,0649 mg.cm-2.h-1 y 0,0816 mg.cm-2.h-1 en el parche con agente promotor y microagujas de 1 y 2 mm respectivamente, en comparación con los valores de flujo de 0,0527 mg.cm-2.h-1 y 0,0554 mg.cm-2.h-1 para el parche sin agente promotor (control) utilizando microagujas de 1 y 2 mm respectivamente. Conclusiones: los resultados ponen de manifiesto la posibilidad de usar Transcutol® y microagujas para incrementar el paso de fármacos potentes y con estructura similar a la sibutramina por vía transdérmica, lo que genera de esta manera nuevas alternativas a las formas farmacéuticas orales para el tratamiento de padecimientos y enfermedades.

Introduction: the main permeation barrier is the skin. Although it is almost an impermeable barrier to most substances, new ways have been examined to improve its permeability by using new technologies such as microneedles and chemical enhancers like Transcutol®. Objective: to develop and to characterize a transdermal patch containing sibutramine hydrochloride as model drug and using microneedles and Transcutol® as transdermal drug delivery enhancers. Methods: Physicochemical characterization of sibutramine hydrochloride patches using polarized light microscopy, bioadhesion, tensile strength studies. The diffusion studies were performed in Franz-type diffusion cells with human abdominal skin as a sort of membrane between both compartments. The active ingredient was quantified through capillary electrophoresis. Results: bioadhesive patches were obtained, with adequate stability of sibutramine hydrochloride in the polymer matrix of chitosan. The use of microneedles and Transcutol® increased sibutramine hydrochloride delivery through the human skin when compared with the control patch. The flow rates were 0.0649 mg.cm-2.h-1 and 0,0816 mg.cm-2.h-1 in the enhanced patch by using 1 and 2 mm microneedles respectively, in comparison with flow rates of 0,0527 mg.cm-2.h-1 and 0.0554 mg.cm-2.h-1 for the control patch having no enhancing agent with 1 and 2 mm microneedles respectively. Conclusions: the results show that it is possible to use Transcutol® and microneedles to increase the delivery of potent drugs having a structure similar to that of sibutramine through transdermal administration. All this generates new alternatives to oral pharmaceuticals in order to treat ailments and diseases.

Assessment of chromatographic methods for the chemical stability of a new miconazol nitrate cream

Objetivo: evaluar los métodos cromatográficos para la estabilidad química del nitrato de miconazol en una nueva crema al 2 %. Métodos: en primer lugar se aplicaron diferentes condiciones degradativas al nitrato de miconazol materia prima a fin de obtener los posibles productos de degradación del fármaco y evaluarlos por un método diseñado por cromatografía en capa delgada, el cual se validó para identificar productos de degradación en la crema. Se evaluó el desempeño del método oficial informado en la Farmacopea Británica 2010 por cromatografía líquida de alta resolución para la valoración del nitrato de miconazol en la crema, analizando su selectividad frente a los posibles productos de degradación. Ambos métodos cromatográficos fueron aplicados al análisis de muestras de crema procedentes de los tres lotes pilotos sometidos a estrés térmico durante 30 días. Resultados: ambos métodos mostraron elevada selectividad frente a los excipientes y los productos de degradación del fármaco. Se obtuvo degradación del nitrato de miconazol frente a hidrólisis ácida, termólisis y fotólisis y el límite de detección fue de 1 µg para cromatografía en capa delgada. No se mostró degradación del analito según los resultados cualitativos y cuantitativos en ninguno de los tres lotes analizados. Conclusiones: los métodos utilizados son válidos para el objetivo con el cual se proponen, por lo que pueden emplearse en el estudio de estabilidad química de las cremas de nitrato de miconazol al 2 %.

Objective: to assess the chromatographic methods for the chemical stability of a new 2 % miconazol nitrate cream. Methods: various degradation conditions were firstly used in the raw material miconazole nitrate in order to obtain the possible degradation products of this drug and to evaluate them by thin layer chromatography-based method, which was validated to identify the degradation products in the new cream. The performance of the official method based on high resolution liquid chromatography and reported in British Pharmacopeia 2010 was evaluated, and its selectivity against the possible degradation products were also analyzed. Both chromatographic methods were applied to the analysis of cream samples from the three pilot batches under heat stress for 30 days. Results: the two methods showed high selectivity against excipients and degradation products of the drug. Miconazol nitrate was degraded against acid hydrolysis, thermolysis and photolysis, being the detection limit of 1 µg for the thin layer chromatography. No degradation of the analyte was observed in any of the three analyzed batches according to the qualitative and quantitative results. Conclusions: these methods are valid for the submitted objective, so they may be used in the chemical stability study of 2 % miconazol nitrate creams.

Stability study of Raloxifene tablets

Introduction: Raloxifene is a selective estrogen receptor modulator from the benzothiophene family. Several clinical trials have shown that raloxifene reduces bone loss rate in the spinal column and may increase bone mass at certain sites. Objective: to determine the physical and chemical stabilities of raloxifene tablets. Methods. three pilot scale batches of 5 kg each were prepared. In vitro dissolution, chemical stability, photostability and humidity studies were carried out. Samples were collected at 0, 1, 2, 3 and 6 months for the accelerated stability study and at 0, 6, 12, 18 and 24 months for the shelf life stability study. Chemical stability was determined using high performance liquid chromatography analytical method, which was developed and validated prior to the study. Results: in the accelerated stability study, the percentages of dissolved drug were more than 90 % and drug content porcentages were between 90 % and 110 %. Humidity conditions affected the chemical stability of the tablets. Conclusions: All raloxifene tablet batches formulations were stable for 24 months in the studied containers stored at 32 ± 2 ºC and waterproof. In vitro drug release dissolution showed good results for 24 months.

Introducción: el raloxifeno es un modulador selectivo del receptor estrogénico perteneciente a la familia de los benzotiofenos. Varios ensayos clínicos han mostrado que el raloxifeno reduce la pérdida del hueso en la espina dorsal y puede aumentar la masa de hueso en ciertos sitios. Objetivo: determinar la estabilidad física y química de las tabletas de raloxifeno. Métodos: se prepararon tres lotes a escala piloto de 5 kg cada uno. Se realizaron estudios de disolución in vitro, estabilidad química, fotoestabilidad y humedad. Se colectaron las muestras al tiempo 0, 1, 2, 3 y 6 meses para el estudio de estabilidad acelerado y a tiempo 0, 6, 12, 18 y 24 meses para la estabilidad por vida de estante. Se determinó la estabilidad química aplicando un método de análisis por cromatografía líquida de alta resolución, desarrollado y validado previamente. Resultados: en estudio de estabilidad acelerada, el ensayo de disolución in vitro mostró disolución del ingrediente activo en concentraciones mayores al 90 %, mientras que la concentración se mantuvo entre el 90 y 110 %. Los estudios en condiciones de humedad afectaron la estabilidad química del medicamento. Conclusiones: todos los lotes de la formulación de tabletas de raloxifeno resultaron estables por 24 meses en los envases estudiados, almacenados a la temperatura de 32 ± 2 ºC y protegidos de la humedad. Las tabletas presentan una buena disolución in vitro durante los 24 meses.

Analysis of the biological occupational risk perception through a dedicated informatics system

Introducción: la no disponibilidad e insuficiente flexibilidad de las herramientas de estudio de percepción de riesgo es limitante para alcanzar su generalización en diferentes ámbitos. Objetivo: diseñar un sistema informático para evaluación de percepción de riesgo flexible y demostrar su capacidad a través de aplicaciones a varios casos de estudio. Métodos: a partir del método de evaluación de percepción de riesgo ocupacional (EPRO), se elaboró el algoritmo base del código RISKPERCEP. Resultados: el método EPRO, informatizado a través de RISKPERCEP, se aplicó a escenarios diversos con peligro biológico asociado, como una empresa de producción de productos biológicos, un banco de sangre y las labores de las brigadas de vigilancia y lucha antivectorial. Se obtuvo en general, un perfil de subestimación de los peligros entre el personal ocupacionalmente expuesto. Conclusiones: la herramienta computarizada identificada como RISKPERCEP facilita la evaluación de percepción de riesgo, de manera que flexibiliza el análisis y permite su extensión a diferentes escenarios con riesgo biológico.

Introduction: the unavailability and the inadequate flexibility of the risk perception analysis tools hinder their general use in different contexts. Objective: to design a flexible software system to evaluate the flexibility of risk perception and to prove its capacity in various case studies. Methods: the basic algorithm of the RISKPERCEP code was created on the basis of the evaluation method of the occupational perception risk (EPRO). Result: the ORPE method through the RISKPERCEP software was applied in different scenarios with associated biological hazards, for example, in a manufacturing company of biologicals, a blood bank or to the work of the surveillance and vector control units. Conclusion: the RISKPERCEP software facilitates the risk perception analysis and allows the extension of such method to different scenarios with biological hazards.

Working strategy to be followed in Liorad Laboratories for pharmacosurveillance since the industrial stage

Introducción: la farmacovigilancia es una responsabilidad que comparten los médicos, la industria farmacéutica, las autoridades sanitarias y los pacientes. En Laboratorios Liorad no estaba definida la implementación de esta actividad. Objetivo: establecer la estrategia de trabajo a seguir por la referida institución para asumir la farmacovigilancia desde la industria. Métodos: se trazaron las estrategias siguientes: seleccionar una persona para asumir la actividad, definir el marco regulatorio que regiría esta, establecer cómo se llevaría a cabo el flujo de la información, definir el sistema documental para obtener evidencia documentada y valorar el diseño para realizar los estudios de poscomercialización. Resultados: se definió un especialista del área de Investigación, Desarrollo e Innovación para la actividad de farmacovigilancia; así como sus funciones de trabajo. El profesional designado recibió capacitación en farmacovigilancia orientada a la industria. Se definió como marco regulatorio las normas que rigen esta acción en Cuba. Se confeccionaron, revisaron y aprobaron los documentos para facilitar la organización y dejar constancia del trabajo realizado. Por último, como diseño fundamental para realizar los estudios de poscomercialización se definió realizar la investigación de eventos adversos raros e inesperados y la detección de aumentos en la incidencia de reacciones adversas conocidas. Conclusiones: al término del trabajo existe una infraestructura organizativa en la empresa que permite asumir esta tarea desde la industria, lo que contribuirá a detectar precozmente manifestaciones inesperadas que pudieran alterar el balance riesgo-beneficio de los medicamentos fabricados en Liorad durante su empleo.

Introduction: pharmacosurveillance is a shared responsibility of the physicians, the pharmaceutical industry, the health authorities and the patients. However, Liorad Laboratories had not defined the implementation of this procedure yet. Objective: to establish the working strategy to be followed by the institution to put pharmacosurveillance into practice at the industrial level. Method: the outlined strategies were the selection of a person to take on responsibility for pharmacosurveillance, the definition of the regulatory framework to rule the same, setting up of the information flow, definition of the documentary system to obtain documented evidence and assessment of the design of aftermarket studies. Results: one specialist from the research, development and innovation division was appointed to lead the pharmacosurveillance activity as well as his/her working functions were drafted. The appointed professional was trained in industry-oriented pharmacosurveillance. The regulatory framework was defined as the set of rules governing this activity at domestic level. The documents required for facilitating the organization of this activity and recording all the work done were finally drafted, reviewed and approved. Finally, it was decided that the fundamental design to carry out the aftermarket studies would be based on the research of adverse, unusual and unexpected events and the detection of rises in the incidence of known adverse reactions. Conclusions: once the work is finished, there is an organizational infrastructure that enables the company to take on this task since the industrial phase, which will contribute to early detect unexpected events that could alter the risk-benefit balance of medicinal products manufactured at Liorad Laboratories.

Internal auditing and the quality of clinical trial documentation in Cuba

Introducción: el Centro Nacional Coordinador de Ensayos Clínicos, garantiza la calidad de la documentación generada en los ensayos clínicos que realiza, con el uso de herramientas como la auditoria. Detecta y/o previene las dificultades, con lo que garantiza la toma de decisiones para eliminar las deficiencias y cumple así con los requisitos establecidos en las normativas nacionales e internacionales. Objetivo: mostrar las principales "no conformidades" o deficiencias detectadas en auditorías a documentación. Métodos: se analizaron las 29 auditorias realizadas a la documentación de los ensayos clínicos en el período desde el año 2007 hasta el 2011. Se extrajeron las "no conformidades" de los tres acápites que conforman el informe: revisión del completamiento de todos los capítulos, revisión de la calidad de la documentación que se está archivando y ordenamiento cronológico de la información. Resultados: las principales deficiencias se encontraron en el completamiento documental de los capítulos de la carpeta del ensayo; a su vez se detectaron informaciones desactualizadas o incompletas, así como documentos archivados fuera de lugar. Conclusiones: persisten deficiencias en la documentación que se genera durante el ensayo clínico, por lo que se incumplen de este modo con los requisitos establecidos en las Directrices sobre Buenas Prácticas Clínicas en Cuba emitidas por el Centro para el Control Estatal de los Medicamentos (CECMED) que se relacionan con el protocolo del ensayo.

Introduction: the National Coordinating Center for Clinical Trials guarantees the quality of the documentation issued in clinical trials with the use of tools such as auditing. It detects and/or prevents difficulties, thus assuring decision-making to eliminate deficiencies and to fulfil the requirements of national and international regulations. Objective: to show the major "nonconformities" or deficiencies identified in audits of clinical trial documentation. Methods: an analysis of 29 audits of clinical trial documentation from 2007 to 2011. The "nonconformities" of the three sections that comprise the report were considered: review of the completion of each chapter, review of the quality of the filed documentation and chronological data arrangement. Results: the main weaknesses were found in the documentary completion of chapters in the clinical trial folder in addition to outdated or incomplete data and wrongly filed documents. Conclusions: there are still deficiencies in the documentation generated during the clinical trial, and consequently, there is non-compliance of the requirements of the Guidelines on Good Clinical Practices in Cuba issued by the Center for the State Control of Drugs (CECMED) and related to the trial protocol.

Pharmacist counseling for patients with mood disorders

Introducción: la atención farmacéutica consiste en la interacción directa del farmacéutico con el usuario a fin de lograr una farmacoterapia racional y obtener resultados definidos y mensurables, encaminados a la mejoría de la calidad de vida del paciente. La depresión es considerada una de las diez principales causas de incapacidad en el mundo, la cual limita el funcionamiento físico, personal y social. Sin embargo, pocas personas afligidas con estos problemas de salud reciben el tratamiento adecuado y orientaciones acerca de la enfermedad y tratamiento. Objetivo: evaluar el servicio de la atención farmacéutica mediante consejo farmacéutico sobre la efectividad y adhesión a la farmacoterapia. Métodos: se seleccionaron 19 pacientes, con edad entre 15 y 82 años, con trastornos de humor, atendidos en el Centro de Atención Psicosocial y Ambulatorio de UNIFENAS, Brasil. Se realizaron citas domiciliares, durante las cuales se les dieron a los pacientes orientaciones acerca de la enfermedad, reacciones adversas, interacciones medicamentosas, duración del tratamiento e importancia de adhesión a este. El inventario de depresión de Beck y la prueba de Morisky para evaluar la adhesión fueron aplicados antes y después del consejo farmacéutico. Resultados: la mayoría fueron mujeres, católicas, con hasta nueve años de estudio. Al comparar los resultados de la aplicación del inventario de depresión de Beck antes y después del consejo del farmacéutico, hubo una diferencia estadísticamente significativa (p= 0,0354), con reducción de aproximadamente 6 puntos en el escore de Beck (24,22 para 18). El nivel de adhesión entre los pacientes aumentó, pues el número de pacientes con alta adhesión pasó de 21,06 % a 42,10 %. Conclusiones: los resultados sugieren que el consejo farmacéutico puede ser útil para lograr mejores resultados de adhesión y efectividad al tratamiento.

Introduction: pharmaceutical care is the direct interaction of the pharmacist and the user in order to achieve rational drug therapy and to obtain defined measurable results aimed at improving the life quality of the patient. Depression is considered one of the ten main causes of disability worldwide since it restricts the physical, social and personal functioning of the individual. However, few people having these health problems receive proper treatment and directions about their disease and therapy. Objective: to evaluate the pharmaceutical care service through counseling on the effectiveness of and adherence to drug therapy. Methods: nineteen patients were selected, aged 15 to 82 years and with mood disorders. They were all seen at the Psychosocial and Outpatient Care Center of UNIFENAS in Brazil. They were visited at home to give instructions to them about their disease, adverse reactions, and drug interactions, length of treatment and importance of adherence to therapy. Beck depression inventory and Morisky´s test were used to evaluate adherence to treatment before and after the pharmacist counseling. Results: most of patients were Catholic women, who had been under study for up to 9 years. When comparing the results of the application of the Beck depression inventory before and after the pharmacist counseling, there was observed an statistically significant difference ((p= 0.0354), with a reduction of roughly 6 point in Beck´s score (24,22 for 18). The adherence to treatment rate increased since the number of patients who showed high rate of adherence to therapy rose from 21.06 % to 42.10 %. Conclusions: the results suggest that the pharmacist counseling could be a useful method to achieve better outcomes in adherence to and effectiveness of treatment.

**Genotoxic assessment of the Carapa guianensis Aublet seed oil extract in the chromosomal aberrations assay performed in Balb/c mice**

Introducción: el extracto oleoso de la semilla de Carapa guianensis Aublet ha tenido diversos usos biomédicos. Recientemente fue evaluado este extracto, el cual manifestó grandes potencialidades como antioxidante en ensayos in vivo; pero poco se conoce de su efecto sobre el ADN en biomodelos experimentales. Objetivo: evaluar el potencial genotóxico del extracto oleoso de la semilla de Carapa guianensis en el ensayo de aberraciones cromosómicas de células de la médula ósea de ratones Balb/c. Métodos: se formaron cinco grupos experimentales: un grupo placebo (Tween 65 al 2 %), tres tratados con niveles de dosis del extracto (400, 1 000 y 2 000 mg/kg), administrados por vía oral durante 14 días; por último, un grupo control positivo tratado con ciclofosfamida, en dosis de 50 mg/kg por vía intraperitoneal 48 y 24 h antes de la eutanasia. Se administraron cinco animales/sexo/grupo. Después de los 14 días de administración se les efectuó la eutanasia por dislocación cervical y se les extrajo la médula ósea del fémur para proceder a realizar la técnica citogenética de aberraciones cromosómicas. Resultados: los resultados entre controles y tratados con el extracto no difirieron para los dos sexos en las variables índice mitótico, Gaps, células con poliploidías, número de células con aberraciones cromosómicas y cromatídicas y el porcentaje de células con aberraciones. Sin embargo, sí difirieron controles y tratados contra el grupo tratado con ciclofosfamida, lo que valida nuestros resultados. Conclusiones: el extracto oleoso de la semilla de la Carapa guianensis no posee potencialidades genotóxicas en la formación de aberraciones cromosómicas, sobre todo estructurales en células de la médula ósea de ratones Balb/c de ambos sexos.

Introduction: the oil extract from Carapa guianensis seed has various biomedical applications. It was recently evaluated and revealed great potentialities as antioxidant in in vivo assays, but little is known about its effect on DNA in experimental biomodels. Objective: to evaluate the genotoxic potential of the oil extract from Carapa guianensis seed in the chromosomal aberration of the bone marrow cells test performed in Balb/c mice. Methods: five experimental groups were created: one placebo group (Tween 65, 2 %), three treated with different extract doses (400, 1000 and 2000 mg/kg) orally administered for 14 days and one positive control group treated with cyclophosphamide at a dose of 50 mg/kg intraperitoneally at 48 and 24 h before euthanasia. Five animals per sex from each group were administered the set dose. After 14 days of treatment, the animals were euthanized through cervical dislocation and their femoral bone marrow was taken out to perform the cytogenetic chromosomal aberration technique. Results: the results between the control group and the groups treated with the extract did not differ between the two sexes in terms of the mitotic index variables, Gaps, polyploidy cells, number of cells with chromosome and chromatic aberrations and the percentage of aberration cells. However, the results of controls and of treated groups were different from those of the group treated with cyclophosphamide, which proved the validation of our results. Conclusions: the oil extract from Carapa guianensis seeds does not have genotoxic potential for the formation of chromosome aberrations, mainly structural, in Balb/c mice bone marrow of both sexes.

In vitro antiproliferative effect of fractions from the caribbean marine sponge Myrmekioderma gyroderma

Introduction: studies performed to Myrmekioderma genus sponges show phospholipid fatty acids, volatile compounds, sterols, bioactive cyclic diterpenes, sesquiterpenes, lineal diterpenes and glycolipid ethers. Objetive: to evaluate the antiproliferative effect of seven fractions (F1-F7) obtained by flash column chromatography from the most bioactive extract of the sponge Myrmekioderma gyroderma, and to analyze the chemical composition of the most active fraction. Methods: samples of dried sponge were extracted with two different solvents: CH2Cl2 (2 x 50 mL), and CH3OH (2 x 50 mL). Each fraction was evaluated on tumor cell derived cell lines; and the cell growth, and viability were determined by a colorimeter assay using sulforhodamine B. Fatty acids structure of the most active fraction was possible by GC-MS analysis of the methyl ester, and pyrrolidine derivatives. Results: the fraction with higher activity on the assessed tumor cell lines is F4 due to it totally inhibited MDA-MB-231, and HT29 cell line growth to 5, and 25 µg/mL concentration (IC50< 1 µg/mL). Fatty acids identified in bioactive F4 fraction of the M. gyroderma sponge can be classified on the following groups: lineal chain saturated, branched-saturated, unsaturated, and a 3-hydroxy acid. Conclusions: 43 fatty acids among saturated, branched-saturated, and unsaturated were identified out of the F4 fraction with activity on the cell lines derived of breast cancer MDA-MB-231, colon carcinoma HT29, and lung carcinoma cells A-549. These results show the growth inhibitory effect shown by the fractions, on the tumor cell lines, depends on the dose.

Introducción: los estudios realizados a esponjas del género Myrmekioderma muestran la presencia de ácidos grasos de fosfolípidos, compuestos volátiles, esteroles, diterpenos cíclicos bioactivos, sesquiterpenos, diterpenos lineales y éteres glicolipídicos. Objetivo: evaluar el efecto antiproliferativo de siete fracciones (F1-F7) obtenidas por cromatografía en columna instantánea del extracto más activo de la esponja Myrmekioderma gyroderma, y analizar la composición química de la fracción más activa. Métodos: se extrajeron las muestras de esponja seca con dos solventes diferentes: CH2Cl2 (2 x 50 mL) y CH3OH (2 x 50 mL). Se evaluó cada fracción en líneas celulares derivadas de células tumorales, y se determinó el crecimiento celular y la viabilidad mediante un ensayo colorimétrico usando sulforhodamina B. Se realizó la identificación de los ácidos grasos de la fracción más activa mediante el análisis por cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas de los derivados ésteres metílicos y pirrolididas. Resultados: la fracción más activa fue la F4, debido a que inhibió totalmente el crecimiento de las líneas celulares MDA-MB-231 y HT29 a 5 y 25 µg/mL (IC50< 1 µg/mL). Los ácidos grasos identificados se pueden clasificar en los siguientes grupos: saturados de cadena lineal, saturados-ramificados, insaturados y un hidroxiácido. Se identificaron 43 ácidos grasos entre saturados, saturados-ramificados e insaturados en la fracción con mayor actividad sobre las líneas celulares derivadas de cáncer de mama MDA-MB-231, carcinoma de colon HT29 y carcinoma de pulmón A-549. Conclusiones: los resultados muestran que el efecto inhibitorio del crecimiento de las fracciones sobre las líneas celulares evaluadas depende de la dosis.

**Development and evaluation of tablets from spray dried extract of yerba mate (Ilex paraguariensis St. Hil A)**

Introduction: yerba mate (Ilex paraguariensis St. Hil A) is a South American plant species of Aquifoliaceae family. The presence of methylxanhtines and clorogenic acids was reported in this species. These compounds have antioxidant activity and could be included in tablets, a pharmaceutical form presently unavailable in the market. Objective: to develop tablets containing yerba mate spray dried extract. Methods: the tablets were produced by direct compression with yerba mate dried extract. The dried extract was evaluated for yield, repose angle, compressibility index, residual moisture and caffeine content. The tablets were evaluated in the following parameters: external appearance, weight, hardness, friability, disintegration and caffeine content. Results: the tablets complied with the general pharmacopoeial specifications. Conclusions: this method is effective to produce tablets containing spray dried extract from yerba mate.

Introducción: la yerba mate (Ilex paraguariensis St. Hil A) es una planta de América del Sur, de la familia Aquifoliaceae. Para esta especie se informó la presencia de ácidos clorogénico y metilxantinas. Estos compuestos tienen actividad antioxidante y podría incluirse en tabletas, una forma farmacéutica que no está disponible. Objetivo: desarrollar comprimidos que contienen extracto seco por aspersión de yerba mate. Métodos: se produjeron comprimidos por compresión directa. Se determinaron al extracto seco los parámetros de rendimiento, ángulo de reposo, índice de compresibilidad, humedad y contenido de cafeína, y a los comprimidos, apariencia externa, peso, dureza, friabilidad, desintegración y contenido de cafeína. Resultados: los comprimidos cumplieron con las especificaciones generales planteadas en farmacopeas. Conclusión: el método empleado es eficaz en la producción de comprimidos que contienen extracto seco de yerba mate.

Spectroscopic characterization of D-003 obtained from the sugar cane (Saccharum officinarum L.) wax

Introducción: el D-003 es un ingrediente farmacéutico activo purificado a partir de la cera de caña de azúcar (Saccharum officinarum L.) con efectos como reductor del colesterol y antioxidante, el cual está compuesto por una mezcla de ácidos grasos libres saturados de elevado peso molecular, cada uno dentro de un intervalo de concentración específica determinada por cromatografía de gases (CG). La caracterización espectroscópica del D-003, sin embargo, no ha sido previamente informada. Objetivo: caracterizar el ingrediente farmacéutico activo nombrado D-003 de acuerdo con sus espectros ultravioleta (UV), infrarrojo (FTIR), resonancia magnética nuclear (RMN) y de masas (EM). Métodos: se evaluaron muestras de seis lotes de D-003 (CNIC, Cuba) mediante las técnicas de UV, FTIR, RMN-¹H, RMN-13C y CG-EM. Para obtener los espectros de masas de los ácidos del D-003, estos se derivaron como ésteres metílicos y trimetilsilil. La cuantificación de los ácidos grasos libres saturados de elevado peso molecular, analizados como ésteres metílicos, se llevó a cabo por CG con detector de ionización por llama (DILL). Resultados: los espectros UV, IR, RMN-¹H y RMN-13C mostraron que el ingrediente farmacéutico activo D00-3 está constituido por una mezcla de ácidos grasos libres saturados de elevado peso molecular, mientras las técnicas de CG-EM y CG-DILL permitieron asegurar la presencia de 13 ácidos grasos libres saturados de elevado peso molecular en proporciones definidas: C24:0 (0,2-0,6 %), C25:0 (0,4-0,9 %), C26:0 (2,0-3,1 %), C27:0 (2,1-2,7 %), C28:0 (30,0-37,5 %), C29:0 (1,5-1,7 %), C30:0 (17,0-18,6 %), C31:0 (0,9-1,2 %), C32:0 (6,9-8,9 %), C33:0 (0,9-1,3 %), C34:0 (7,2-11,1 %), C35:0 (0,3-0,6 %) y C36:0 (2,2-3,8 %). Conclusiones: a partir de las técnicas espectroscópicas de UV, FTIR, RMN, y CG-EM se demuestra que el D00-3 está compuesto por 13 ácidos grasos saturados de elevado peso molecular, entre los cuales el ácido octacosanoico es el compuesto mayoritario.

Introduction: D-003, an active pharmaceutical ingredient (API) purified from sugar cane (Saccharum officinarum L.) wax with cholesterol-lowering and antioxidant effects, is composed of a mixture of free saturated very long chain fatty acids (VLCFAs), each within specific relative concentration ranges as determined by the gas chromatography (GC). However, the spectroscopic characterization of D-003 had not been previously reported. Objective: to characterize the active pharmaceutical ingredient named D003 in accordance to its ultraviolet (UV), infrared (FTIR), nuclear magnetic resonance (NMR) and mass (MS) spectra. Methods: samples of six batches of D-003 (CNIC, Cuba) were evaluated by UV, FTIR, NMR-¹H, NMR-13C, and GC-MS techniques. For obtaining the mass spectra of D-003 acids, methyl (FAME) and trimethylsilyl ester derivatives were used. Quantification of free very long chain saturated fatty acids , analyzed as methyl ester derivatives, was made by GC with flame ionisation detector (FID). Results: UV, FTIR, and ¹H-NMR, 13C-NMR spectra showed that active pharmaceutical ingredient D-003 was composed of a mixture of free very long chain fatty acids, whereas the GC-MS and GC-FID techniques allowed ensuring the occurrence of 13 VLCFAs in set proportions: C24:0 (0.2-0.6 %), C25:0 (0.4-0.9 %), C26:0 (2.0-3.1 %), C27:0 (2.1-2.7 %), C28:0 (30.0-37.5 %), C29:0 (1.5-1.7 %), C30:0 (17.0-18.6 %), C31:0 (0.9-1.2 %), C32:0 (6.9-8.9 %), C33:0 (0.9-1.3 %), C34:0 (7.2-11.1 %), C35:0 (0.3-0.6 %) and C36:0 (2.2-3.8 %). Conclusions: evidences from the UV, FTIR, NMR and GC-MS spectroscopic techniques prove that D-003 is composed of 13 saturated very long chain fatty acids, including octacosanoic acid as the most abundant one.

**Effect in vitro of D-003 on 5-lipooxygenase (5-LOX) enzyme activity**

Introducción: el D-003, mezcla de ácidos alifáticos primarios superiores purificada de la cera de la caña, inhibe la síntesis de colesterol. Trabajos recientes han demostrado que el D-003 resulta efectivo en modelos experimentales de osteoartritis y que inhibe la actividad de las enzimas COX1 y COX2, preferentemente la COX1, sin producir gastrotoxicidad. Ha sido referido que los inhibidores duales de las enzimas COX y 5-LOX presentan efectos antinflamatorios desprovistos de gastrotoxicidad o que incluso, pueden resultar gastroprotectores. De acuerdo con estos antecedentes, el D-003 podría ser un inhibidor dual de dichas enzimas. Objetivo: investigar el efecto in vitro del D-003 sobre la actividad enzimática de la 5-LOX, utilizando la fracción citosólica de leucocitos polimorfonucleares de ratas. Métodos: se utilizaron las condiciones de ensayo siguientes: fracción citosólica (50 µg de proteína) disuelta en solución reguladora borato 0,2 mol/L (pH 9) y ácido linoleico (7,8-250 mmol/L) como sustrato, ensayándose muestras paralelas incubadas con Tween-20/H2O (2 %) (vehículo), D-003 (0,6-6 000 µg/mL) o extracto de Perna canaliculus (50 µg/mL) (sustancia de referencia). Se evaluó la actividad enzimática mediante el cambio de absorbancia a 234 nm producido por la formación de dienos conjugados y medido en espectrofotómetro UV-visible. Resultados: la adición de D-003 produjo una inhibición dosis dependiente de la actividad enzimática de la 5-LOX (r= 0,975; p< 0,05) (CI50= 23,06 µg/mL) in vitro. La magnitud de esta inhibición fue moderada, ya que la inhibición máxima, alcanzada a partir de 1 250 µg/mL, resultó de solo un 30 %. Conclusiones: el estudio demuestra que el D-003 es capaz de inhibir la actividad enzimática de la 5-LOX in vitro, pero moderadamente.

Introduction: D-003, a mix of higher primary aliphatic acids purified from sugarcane, inhibits cholesterol synthesis. Recent studies have demonstrated that D-003 is effective in experimental models of osteoarthritis and inhibits the enzymatic activities of COX1 and COX2, mainly that of COX1, without causing gastrotoxicity. It has been mentioned that the dual inhibitors of COX and 5-LOX enzymes present with anti-inflammatory effects and no gastrotoxicity or even they can have gastroprotective actions. According to this background, D-003 could be a dual inhibitor of COX and 5-LOX enzymes. Objective: to study the effects of D-003 on the enzymatic activity of 5-LOX in vitro, by using the cytosolic fraction of polymorphonuclear leukocytes of rats. Methods: the following testing conditions were used: cytosolic fraction (50 µg of protein) dissolved into 0,2 mol/L borate buffer solution (pH 9) and linoleic acid (7,8-250 mmol/L) as substrate. Parallel samples were incubated with Tween-20/H2O (2 %) only (vehicle), D-003 (0,6-6 000 µg/mL) or green-lipped mussel (Perna canaliculus) extract (50 µg/mL) (reference substance). The enzymatic activity, evaluated by the conjugated diene formation, was assessed by the absorbance changes at 234 nm (5-LOX) measured in a UV-visible spectrophotometer. Results: by adding D-003, produced a dose dependent (r= 0,975; p< 0,05) (IC50= 23,06 µg/mL) in vitro inhibition of 5-LOX enzyme activity. The size of the inhibition was moderate, since the maximal inhibition, achieved from 1 250 µg/mL) on was only 30 %. Conclusions: this study demonstrates that D-003 may inhibit in vitro the 5-LOX enzymatic activity, but in a moderate way.

Pharmacy studies in Cuba from the 1921-1922 academic course to the 1924-1925 course

La tercera década del siglo XX fue escenario de históricos acontecimientos en La Universidad de La Habana. El primero de ellos tuvo lugar a finales de 1921, cuando los estudiantes impidieron que el Consejo Universitario aprobara el otorgamiento de títulos honoríficos que deshonrarían a la institución. Un año después comenzaría la lucha estudiantil contra las irregularidades presentes en la Universidad, reflejo de las prácticas corruptas que se habían ido adueñando del país desde el mismo nacimiento de la República en 1902. Los estudiantes demandaron insistentemente la aplicación de una profunda reforma de los estudios superiores y la aprobación de la autonomía universitaria. También exigieron la depuración del claustro mediante denuncias que presentaron contra algunos catedráticos por su actitud indigna o su incapacidad para el ejercicio de la docencia. En diciembre de 1922 tendría lugar la constitución del Directorio de la Federación de Estudiantes de la Universidad de La Habana, el cual jugó un papel fundamental en la lucha por las demandas antes mencionadas. Se presentan los principales acontecimientos acaecidos en la Universidad de La Habana y en su Escuela de Farmacia desde el curso 1921-1922 hasta el 1924-1925, así como diversas informaciones académicas sobre esta última, incluida la relacionada con las acusaciones formuladas por el Directorio Estudiantil contra uno de sus profesores.

The third decade of the 20th century witnessed historical events in Havana University. The first one took place at the end of 1921 when the university students hindered the approval of granting honorary titles that would damage the prestige of the institution. The following year was the beginning of the student´s struggle against the irregularities observed in the university, which reflected the corruption that had gradually taken the country over since the very inception of the Republic in 1902. The students persistently demanded the application of a deep reform in the higher education and the approval of the university autonomy. They also claimed for the purging of the faculty by denouncing the shameful attitudes of some professors or their lack of capacity to teaching. In December, 1922, there took place the setting up of the Directory of the Federation of Students at Havana University, an organization that played a leading role in the struggle for meeting the above-mentioned demands. The main events occurred at Havana University and at the School of Pharmacy from the 1921-1922 academic course through the 1924-1925 course, in addition to several academic pieces of information about the School of Pharmacy, including that related to allegations put forward by the Directory against one of the professors, were all presented in this article.