Vaccimonitor

Adverse events temporally associated to VA-MENGOC-BC®. La Lisa municipality, 1998-1999

Con el objetivo de describir la frecuencia de eventos temporalmente asociados a la vacuna cubana VAMENGOC- BC®, se realizó un estudio observacional de tipo descriptivo, cuyo universo estuvo constituido por los lactantes en las edades comprendidas de tres (3549) y cinco meses (3832) de edad de las áreas de salud del Municipio La Lisa en Ciudad de La Habana. Hubo un 3,21% de niños con eventos adversos, con una mayor frecuencia después de la primera dosis; sin diferencias apreciables por sexo. La clasificación fue de un 52% de tipo sistémico, locales un 19% y no solicitados un 29%. La mayor parte de los niños afectados fue en las primeras 72 horas posteriores a la vacunación, y desaparecieron antes de 72 horas desde su comienzo. Las manifestaciones más frecuentes fueron fiebre (predominó entre todos los eventos adversos con 1,53 casos por 100 vacunados); la induración (0,31 por 100 vacunados), eritema (0,30 por 100 vacunados) y el dolor (0,136 por 100 vacunados) en el sitio de administración de la vacuna; irritabilidad (0,244 por 100 vacunados) y pérdida de apetito (0,311 por 100 vacunados). Los eventos no solicitados más frecuentes fueron la Enfermedad Respiratoria Aguda (0,637 por 100 vacunados), la Enfermedad Diarreica Aguda (0,311 por 100 vacunados) y la Otitis Media (0,176 por 100 vacunados). Los eventos adversos serios fueron infrecuentes. No hubo fallecidos y todos los casos se recuperaron en menos de diez días, sin secuelas, discapacidades ni minusvalías.

In order to describe the temporally associated adverse events after the use of VA-MENGOC-BC® a descriptive and observational study was done. The universe was 3549 children of three months of age and 3832 children of five months of age from primary health care centers of La Lisa municipality. There were 3.21% of children with adverse events in general, but the frequency was higher after the first dose without noticeable differences between sex. The 52% of those adverse events were systemic, 19% on the site of administration of the vaccine and 29% were no related to the vaccine. Most of children were affected in the first 72 hours after the vaccination, and the clinical manifestations disappeared before 72 hours since its beginning. The more frequent manifestations were fever: (the main adverse event with 1.53 cases per 100 vaccinated children); hardness (0.31 cases per 100 vaccinated children), redness (0.30 cases per 100 vaccinated children) and pain (0.136 cases per 100 vaccinated children) on the site of vaccination, irritation (0.244 cases per 100 vaccinated children) and appetite lost (0.311 cases per 100 vaccinated children). The main unrelated adverse events were acute respiratory disease (0.637 cases per 100 vaccinated children), acute diarrhea disease (0.311 cases per 100 vaccinated children) and acute middle ear infection (0.176 cases per 100 vaccinated children). Serious adverse events were scarce. There were not deaths, and all the hospitalized cases were discharged within ten days in complete recuperation without sequel, incapability or handicap.

Sodium Caprylate Stabilization of Albumin

A partir de plasma humano se obtuvo albúmina mediante un método de termocoagulación selectiva. Se utilizaron diferentes combinaciones de caprilato de sodio y un tanto por ciento de etanol, lo cual permitió precipitar las globulinas manteniendo la albúmina en solución. En todas las pruebas se fijaron los parámetros siguientes: pH 6,9, temperatura 69 °C y tiempo de calentamiento 30 min. Los mejores resultados de concentración de proteínas y rendimiento proteico se obtuvieron a una concentración de caprilato de 0,004 M, 5% de etanol, pH 6,9 y 30 min de calentamiento. En la pasteurización 10 h a 60 °C los mejores resultados se obtuvieron con caprilato de sodio 0,04 M y la mezcla de caprilato de sodio 0,02 M y acetiltriptofanato de sodio 0,02.

An albumin preparation was obtained from human plasma by a selective thermocoagulation method. We used different combinations of sodium caprylate and ethanol concentrations, which allowed the precipitation of globulins, while the albumin remained in solution. We establish the following parameters as constants: pH 6,9, temperature 69 °C and 30 min as the heating time. The best results of protein concentration and yield, was obtained with 0,004 M sodium caprylate, 5% ethanol, pH 6,9 and 30 min heating time. During the pasteurization for 10 h at 60 °C, the best results were obtained with 0,004 M sodium caprylate and a mixture of 0,02 M sodium caprylate and 0,02 M sodium acetyltryptophanate.

Validation of an ELISA for the quantitative determination of tetanus antitoxin in human serum

Se desarrolló un ensayo inmunoenzimático en fase sólida (ELISA) de tipo indirecto para la cuantificación de antitoxina tetánica en suero humano, con el empleo de un estándar previamente calibrado. Las imprecisiones intra e interensayo fueron de alrededor del 10%. Este ensayo mostró una excelente exactitud, con valores de recuperación entre 90% y 110%. Las desviaciones del paralelismo estuvieron por debajo del 10%; éstas se evaluaron mediante diluciones que involucraban el rango de trabajo de la curva estándar. El límite de detección fue 0,0016 Unidades Internacionales por mL (UI/mL). El ensayo mostró una buena correlación con la prueba de neutralización (R2=0,9862). La ecuación de ajuste lineal fue: ELISA = 0,993 ensayo de neutralización - 0,2143. Se cuantificó la antitoxina tetánica en muestras de suero de 408 niños entre 1 a 5 años de edad,aleatoriamente seleccionados en Ciudad de La Habana y cada edad se analizó por separado. La mayor respuesta se alcanzó a los 2 años de edad, al completarse el esquema básico de inmunización. Todos los niños presentaron valores superiores al nivel mínimo protector (0,01 UI/mL).

An indirect solid-phase enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was developed for the quantitation of tetanus antitoxin in human serum on the basis of a previously calibrated standard. Intra and inter-assay imprecision ranged around 10%. This assay showed an excellent accuracy with recovery values between 90% and 110%. Parallelism deviations were below 10%. They were evaluated by dilutions that covered the working range of the standard curve. The detection limit was 0.0016 International Units per mL (IU/mL). A good correlation was found between the ELISA and the neutralization test (R2= 0,9862). The fitting linear equation was: ELISA = 0,993; neutralization test - 0,2143. Tetanus antitoxin was quantified in serum samples from 408 children, 1-5 year-olds, randomly selected in Havana City. Each age was separately analyzed. The maximum response was reached at 2 years, after finishing the basic scheme of immunization. All children showed antitoxin values higher than the minimum protective level (0,01 IU/mL).

Histhopatologic study in non-vaccinated and vaccinated mice using Salmonella typhi polysaccharidic and whole cell variants by different inoculation routes

La fiebre tifoidea constituye una enfermedad propia del hombre. La misma es causada por Salmonella typhi y produce una respuesta inflamatoria en el tracto intestinal. Con el fin de establecer su control por vacunación el Instituto Finlay ha desarrollado una vacuna a partir del polisacárido capsular Vi. Para su estudio experimental no existe un modelo animal que reproduzca los síntomas y la patogenia de la enfermedad. El desarrollo de modelos experimentales y los estudios histopatológicos aportan informaciones al conocimiento de la enfermedad y a la interpretación de los procesos inmunológicos. Nos propusimos caracterizar el cuadro histopatológico en los ratones utilizados en las pruebas de potencia de la vacuna antitifoídica basada en polisacárido Vi purificado y su comparación con la vacuna de células enteras. Se utilizaron 240 ratones de ambos sexos pertenecientes a la línea C57BL/6 procedentes del Centro Nacional para la Producción de Animales de Laboratorio (CENPALAB), con un peso comprendido entre 18 y 22 g. Se evaluó la protección comparativa entre las vías intraperitoneal y subcutánea utilizando dos inmunógenos, a partir del polisacárido Vi y con la variante de células enteras. Se logró una considerable eficacia en ratón C57BL/6 para reproducir las lesiones compatibles con Salmonella typhi en hígado y bazo. La sobrevivencia del grupo no vacunado fue de un 15%. La sobrevivencia de los ratones correspondientes al grupo vacunado con polisacárido Vi osciló entre 90% y 100% para ambas vías, mientras que los vacunados con células enteras variaron entre 50% y 100% para la vía subcutánea y entre 60% y 100% para la vía intraperitoneal todo lo cual evidencia la superioridad de la vacuna a partir del polisacárido capsular Vi sobre la variante de células enteras en la especie ratón C57BL/6.

Typhoid fever is a human disease caused by Salmonella typhi which produces an inflammatory response in the intestinal tract. In order to control the disease, Finlay Institute has developed a vaccine using Vi capsular polysaccharide. There is no animal model available that reproduces the symptoms and pathogenesis of the disease and may be used for experimental studies. The development of experimental models and histopathological studies contribute to the knowledge of the disease and to the interpretation of the immune processes. For this reason, the histopathological pattern present in C-57 BL/6 line female and male mice, weighing 18-22 g and used in the potency tests for the typhoid fever vaccine based on purified Vi capsular polysaccharide, was characterized. The protection conferred by subcutaneous and intraperitoneal administrations were evaluated and compared, as well as between the immunogen based on Vi polysaccharide, and the whole cell variant. Considerable efficacy in reproducing the Salmonella typhi lesions in liver and spleen, was achieved in C-57 BL/6 mice. Survival of mice vaccinated with the Vi polysaccharide vaccine ranged between 90-100% using both routes. In those mice vaccinated with whole cells it was of 50-100% for the subcutaneous route, and 60-100% for the intraperitoneal route. These data show that the capsular Vi polysaccharide vaccine is superior to the whole cell variant in the C-57 BL/6 line mice.