Revista Cubana de Farmacia

**Old, present and future anti-Pseudonomas antimicrobials**

Publications of the Drug Regulatorty Authority and their impact

El Centro para el Control Estatal de la Calidad de los Medicamentos (CECMED), tras 22 años de creado, se encuentra en un proceso de transformaciones que ampliará el alcance de su actividad de regulación y control, por lo que es importante conservar y difundir su historia como Autoridad Reguladora de Medicamentos Nacional (ARN). Se desarrolló una investigación con el objetivo de recuperar y compilar los artículos y libros que han reflejado las diferentes facetas de trabajo del centro y su impacto regulador. Se incluyeron los documentos publicados y aceptados para publicar desde 1989 hasta 2011 en revistas nacionales y extranjeras con Número Internacional Normalizado, en los que aparecen explícitamente temas relacionados con el funcionamiento de la institución y la regulación cubana de medicamentos y diagnosticadores. Se compilaron 171 artículos en revistas cubanas y extranjeras y un libro. Se destacaron el Anuario Científico del CECMED con más de 100 artículos y la Revista Cubana de Farmacia y el Boletín InfoCECMED, con casi 20 artículos. Se concluye que las publicaciones sobre la obra del CECMED como parte de su imagen pública muestran el desarrollo histórico de la institución, constituyen una evidencia del impacto del cumplimiento de sus funciones, y contribuyen a testimoniar su participación en disímiles tareas, a divulgar sus logros y a perpetuar la trayectoria de su trabajo.

The Center for the State Control of Drug Quality (CECMED in Spanish) is undergoing a process of changes after 22 years of its inception. This process will broaden the scope of its regulatory and control activity, so it is important to keep and disseminate the history of this agency as the National Regulatory Authority of Drugs. To this end, a research study to retrieve and gather those articles and books reflecting different work stages of CECMED and their regulatory impact was conducted. One book and a large number of articles, published and accepted for publication in national and foreign journals with ISSN from 1989 to 2011, were included. They explicitly dealt with subjects related to Cuban regulation for drugs and diagnostic means. The compilation amounted to 171 articles in Cuban and foreign journals and one book. Anuario Científico del CECMED with over 100 articles was the most used journal, followed by Revista Cubana de Farmacia and Boletín InfoCECMED, with almost 20 articles. It was concluded that these publications on the CEDMED work are part of the public image of the institution, show its historical development, provide evidence about the effects derived from the fulfillment of its functions, and contribute to disseminate its participation and achievements as well as preserve the working history of this agency.

Improvement of Furane derivate dissolution rate using spray drying technique

Objetivo: incrementar la solubilidad en agua del 2-bromo-5-(2-bromo-2-nitrovinyl)-furano (G1), un ingrediente farmacéuticamente activo sintetizado por el Centro de Bioactivos Químicos de la Universidad Central de Las Villas, con potente acción bactericida y fungicida, mediante la elaboración de macropartículas de dispersiones sólidas utilizando un proceso de secado por atomización. Métodos: se realizó un ensayo preliminar de secado por atomización de la suspensión de G1, compuesta por: 10 g de G1, 1 g de Aerosil (Aerosil®, Degusa, Bélgica), 1 g de laurilsulfato de sodio y 100 mL de agua. La atomización se efectuó en un equipo de laboratorio (Buchi Mini Dryer spray) a 90 ºC. La dispersión sólida obtenida fue caracterizada físico-químicamente mediante difracción de rayos X, granulometría láser por el método de difracción angular, calorimetría diferencial de barrido, microscopia electrónica de barrido y espectrofotometría de absorción infraroja. Resultados: las partículas obtenidas presentaron un pequeño tamaño, forma esférica y un incremento de la cristalinidad del G-1; no se encontraron interacciones entre los componentes de la dispersión ni presencia de productos de degradación, y la solubilidad del G-1 en agua resultó notablemente incrementada. Conclusiones: el producto obtenido por la técnica de secado por atomización incrementó apreciablemente la solubilidad del G1 sin afectar los grupos funcionales, responsables de la actividad terapéutica que se le reportan al ingrediente activo estudiado. Estos alentadores resultados sugieren la necesidad de continuar estudios para la optimización del proceso y realizar al producto obtenido ensayos de estabilidad con el objetivo de su futura inclusión en formas farmacéuticas de dosificación.

Objective: to increase the solubility of 2-bromium-5(2-bromium-2-nitrovinyl)-furane (G1), one pharmaceutically active ingredient with potent bactericidal and fungicidal action, synthesized through the preparation of solid dispersion macroparticles based on spray-drying process in the Center of Chemical Bioactives of the Central University in Las Villas province. Methods: a preliminary spray-drying test of GI suspension made up of 10 g of G1, 1g of Aerosil (Aerosil®, Degusa, Bélgica), 1g of sodium laurylsulphate and 100 ml of water was made. A piece of lab equipment known as Buchi Mini Dryer spray served for the spraying at 90 ºC. The solid dispersion was characterized from the physical and chemical viewpoints through X-ray diffraction, laser granulometry based on angular diffraction method, differential scanning calorimetry, electronic scanning microscopy and infrared spectrophotometry. Results: the obtained particles were small, spherical and had increased G1 crystallinity. No interactions were found in the dispersion components; there were no degradation products, and G1 solubility was significantly increased. Conclusions: the product obtained from spray-drying technique substantially raised the solubility of G1 without affecting the functional groups, which are responsible for the reported therapeutic action of the studied active ingredient. These encouraging results endorse the need for further studies to optimizing the process and carrying out stability tests for the product to be included in the pharmaceutical forms of dosing in the future.

Chromium (III) phosphate labelled with several radionuclides for use in radiosynoviothersis

Introducción: la radiosinoviortesis se utiliza en el tratamiento de la sinovitis crónica, complicación frecuente en enfermedades sistémicas como artritis reumatoide y hemofilia. En la práctica clínica internacional se emplean diferentes coloides y suspensiones radiactivas, pero su número es reducido y su disponibilidad limitada. Objetivo: obtención y caracterización físico-química de suspensiones de fosfato de cromo (III) marcadas con radionúclidos como potenciales radiofármacos para uso en radiosinoviortesis. Métodos: las suspensiones se obtuvieron por síntesis química, los radionúclidos se añadieron al inicio de la reacción o después de finalizada esta. El tamaño de partículas se estimó mediante microscopia óptica y filtración por membranas. Asimismo se evaluó por espectrofotometría la estabilidad de la suspensión al ser resuspendida en distintos medios. La pureza radioquímica se determinó por cromatografía de papel. Resultados: se obtuvo y caracterizó una suspensión de fosfato de cromo (III). El producto obtenido presentó un tamaño de partículas predominante entre 0,8-5 µm y que al ser suspendidas en solución de gelatina al 2 % en tampón acetato 1 mg/mL no sedimentó en menos de 3 h. Se estableció la tecnología para la obtención de formulaciones de fosfato de cromo (III) marcado con 32P e 90Y y se demostró la factibilidad de marcar la suspensión obtenida con otros radionúclidos trivalentes como 177Lu y 68Ga. Conclusiones: los resultados permiten considerar al fosfato de cromo (III) una suspensión base para la obtención de radiofármacos para uso en radiosinoviortesis en diferentes articulaciones, en función de las características físico-nucleares de los radionúclidos que se empleen.

Introduction: radiosynoviorthesis is used in treating chronic synovitis, a frequent complication of some systemic diseases as rheumatoid arthritis and hemophilia. There are different colloids and radioactive suspensions recommended in the international clinical practice, but the number is reduced and the availability limited. Objective: obtaining and physical-chemical characterization of suspensions of chromium phosphate (III) labeled with several radionuclides as potential radiopharmaceuticals for using in radiosynoviorthesis. Methods: the suspensions were obtained by chemical synthesis. Radionuclides were added at the beginning or after concluding the reaction. The particle size was estimated by means of optic microscopy and membrane filtration. Similarly, the stability of suspension when re-suspended in several media was evaluated by spectrophotometry. The radiochemical purity was determined by paper chromatography. Results: a suspension of chromium (III) phosphate was obtained and characterized. It was found that the obtained product had a predominant particle size range of 0,8 to 5 µm and that when suspended in 2 % gelatin solution in 1mg/ml acetate buffer, it settled in no less than 3 hours. Technologies for the preparation of radiopharmaceuticals of Chromium (III) Phosphate labeled with 32P and 90Y were described. There was demonstrated the feasibility of labeling the obtained suspension with other trivalent radionuclides such as 177Lu and 68Ga. Conclusions: the results allow considering the obtained Chromium (III) Phosphate suspension as a matrix for the preparation of radiopharmaceuticals to be used in radiosinoviorthesis aimed at various joints, depending on the physical and nuclear characteristics of the radionuclides.

Technological development of injectable cisplatin solution

Objetivo: desarrollar una formulación de cisplatino a una concentración de 1 mg/mL, estableciendo el procedimiento de preparación de la solución, para ser administrada por vía parenteral, con buena estabilidad física, química, biológica y microbiológica. Métodos: se prepararon variantes en dos formulaciones de cisplatino: una solución con tampón de acetato y otra sin el empleo de solución tampón, a las cuales se les siguió su estabilidad física y química durante 3 meses. En las formulaciones se empleó materia prima de la firma IMPEX SA, con una potencia de 99,74 %, según certificado de análisis del fabricante. Se realizaron tres lotes a escala piloto de cisplatino 10 mg en bulbos 10 R ámbar y tres lotes de cisplatino 50 mg en bulbos 50 H ámbar, empleándose una dosis de 1 mg/mL. Se usaron excipientes que le confieren isotonía y estabilidad a la formulación con ácido clorhídrico 0,1 N y como vehículo, agua para inyección. Por cromatografía líquida de alta resolución se evaluó la estabilidad para determinar la fecha de vencimiento del medicamento. Por métodos biológicos se determinó la ausencia de pirógenos y por métodos microbiológicos, la esterilidad. Resultados: en ambas formulaciones no hubo diferencias en los resultados físicos y químicos, por lo que se realizó el escalado industrial con la segunda formulación. Durante 12 meses el cisplatino 10 y 50 mg soluciones presentó buena estabilidad físico-química, comportándose sus concentraciones entre 90,0 y 105,0 % y el pH entre 3,5-6,5 a temperatura ambiente. Conclusiones: Las formulaciones de cisplatino 10 y 50 mg presentan las especificaciones de calidad físico-químicas, microbiológicas y biológicas informadas por 12 meses a temperatura ambiente. Este medicamento al cumplir con todos los parámetros de calidad, está registrado en el órgano regulador cubano para ser utilizado con seguridad en pacientes.

Objective: to develop a cisplatin formulation at 1mg/mL concentration by setting the solution preparation procedure for parenteral administration, with good physical, chemical, biological and microbiological stability. Methods: two formulation variants of cisplatin: one solution with and the other without acetate buffer. Both were followed in terms of physical and chemical stability for 3 months. The formulations used raw material from IMPEX SA company, which has 99.74 % power as certified by the manufacturer analysis. Three batches of 10mg cistoplatin at pilot scale in amber 10 R vials, 3 batches of 50 mg cisplatin in amber 50 H vials and the dose was 1mg/ml. Excipients were used to give isotony and stability to the formulation with 0.1 N chlorhydric acid and injection water for vehicle. The high performance liquid chromatography allowed evaluating the stability to determine the expiry date of the drug. The biological and microbiological methods determined lack of pyrogens and sterility respectively. Results: both formulations showed no differences in physical and chemical results, so the second formulation was used at industrial scale. During 12 months, 10 and 50 mg cisplatin solutions exhibited good physical and chemical stability, ranging its concentrations from 90.0 to 105.0 % whereas pH was 3.5 to 6.5 at room temperature. Conclusions: 10 and 50mg cisplatin formulations have the physical-chemical, microbiological and biological specifications reported in 12 months at room temperature. Since this drug meets all the quality parameters, the Cuban regulatory agency registers it as a safe drug for patients.

Validation of the biological potency test for human chorionic gonadotropin

Introducción: en el Centro de Investigación y Desarrollo de Medicamentos se cuenta con una serie de ensayos biológicos para el control de calidad que deben ser sujetos a validación, entre ellos se encuentra la valoración biológica de gonadotrofina coriónica humana. Objetivo: evaluar el desempeño del método de valoración biológica de gonadotrofina coriónica humana. Métodos: se evaluaron la exactitud, la precisión y la especificidad como parámetros de validación siguiendo la metodología descrita en la Regulación 41-2007 del Centro para el Control Estatal de la Calidad de los Medicamentos (CECMED) para la Validación de métodos de análisis. Resultados: en el estudio de exactitud no se observaron diferencias significativas entre los valores de peso del útero obtenidos al ensayar la muestra y el material de referencia a las tres dosis administradas. En el estudio de la repetibilidad se alcanzaron coeficientes de variación menor del 50 %. No se observaron diferencias significativas entre las precisiones alcanzadas por dos analistas diferentes en días diferentes. El estudio de especificidad mostró que los excipientes o sustancias auxiliares de la formulación no interfieren en la valoración biológica del producto. Conclusiones: el método biológico validado resultó ser específico, exacto y preciso en el rango de concentraciones estudiadas, lo que corrobora su calidad, teniendo un valor agregado.

Introduction: a number of biological tests for quality control used in the Center for Drug Research and Development should be validated. Biological potency test of human chorionic gonadotropin is one of them. Objective: to evaluate the performance of the human chorionic gonadotropin biological potency test. Methods: the accuracy, precision and specificity were evaluated as validation parameters according to the 41-2007 Regulation of the Center for the State Control of Drug Quality (CEDMED) for analysis method validation. Results: in the accuracy test, no significant differences were observed between the uterus weight values from tested sample and the reference material at the 3 tested doses. Variation coefficients were less than 50 % in the repeatability test. There were no significant differences between the precision values of two different analysts at different times. The specificity test showed that excipients or auxiliary substances in the formulation did not interfere with the results of the biologic potency test of the final product. Conclusions: the validated biological method showed good accuracy, precision and specificity in the range of studied concentrations, all of which proved its quality, so it has added value.

Validation of the measuring method of local anesthetic effect

Introducción: la determinación del tiempo de anestesia local de un medicamento o principio activo en investigación se realiza empleando un ensayo biológico. Objetivo: validar el método de determinación del tiempo de anestesia local para disponer de un método de ensayo validado para la evaluación de medicamentos genéricos con esta actividad farmacológica. Métodos: se evaluaron los parámetros de exactitud, precisión, robustez, linealidad, paralelismo y especificidad siguiendo la metodología descrita en la Regulación 41-2007 del Centro para el Control Estatal de la Calidad de los Medicamentos (CECMED) para la Validación de métodos de análisis. Resultados: en el estudio de exactitud no se observaron diferencias significativas entre los resultados al ensayar la muestra y el material de referencia. En el estudio de la repetibilidad se alcanzaron coeficientes de variación menor del 50 %. No se observaron diferencias significativas entre las precisiones alcanzadas por dos analistas diferentes, en días diferentes, a tres lotes diferentes. El estudio de especificidad mostró que los excipientes o sustancias auxiliares de la formulación no interfieren en la evaluación del producto. El método resultó ser lineal en el intervalo de concentraciones de 50 a 120 % con exactitud y precisión aceptable para cada dilución y mostró paralelismo. El ensayo de robustez mostró que no existen diferencias en las respuestas obtenidas al variar diferentes parámetros. Conclusiones: el método biológico resultó ser exacto, preciso, específico, lineal y robusto.

Introduction: a biological test is used to measure local anesthesia time of a drug or an active principle under research. Objective: to validate the measuring method of local anesthesia time for the evaluation of generic drug with this pharmacological action. Methods: accuracy, precision, robustness, linearity, parallelism and specificity were evaluated according to the methodology described in 41-2007 Regulation of the Center for the State Control of Drug Quality (CEDMED). Results: in the accuracy test, no significant differences were observed between the results of tested sample and the reference material at the 3 tested doses. Variation Coefficients was less than 50 % in the repeatability test. There were no significant differences between the precision values of two different analysts at different times and in three different batches. The specificity test showed that excipients or auxiliary substances in the formulation did not interfere with the evaluation of the product. The method was linear in a 50-120 % range of concentrations, with acceptable accuracy and precision, and parallelism. The robustness test yielded no differences in the results obtained after changing various parameters. Conclusions: biological method proved to be accurate, precise, specific, linear and robust.

Lipodystrophy syndrome in HIV/AIDS patients receiving highly active antiretroviral therapy in Tepic, Mexico

Objetivo: determinar la relación entre la manifestación del síndrome de lipodistrofia y la terapia antirretroviral de gran actividad en pacientes con VIH/sida. Métodos: se realizó un estudio descriptivo, transversal y correlacional en pacientes con VIH/sida que reciben terapia antirretroviral de gran actividad, atendidos entre marzo y diciembre de 2007 en el Centro Ambulatorio de Prevención y Atención del Sida e Infecciones de Transmisión Sexual (CAPASITS) de Tepic, Nayarit, México. La definición y diagnóstico del síndrome se realizó mediante el método de The National Centre in HIV Epidemiology and Clinical Research (NCHECR) de Australia. Se utilizó la prueba de chi cuadrado para evaluar la dependencia entre el síndrome y la terapia. Se evaluaron 175 pacientes (128 hombres y 47 mujeres), de 19 a 72 años de edad. Resultados: se diagnosticaron 141 pacientes (80,6) con síndrome de lipodistrofia (IC95% 74,7-86.4 %); el 82,6 % correspondió a hombres y el 74,5 % a mujeres. Según la severidad, el porcentaje fue de 17 % de grado 1, 3 % de grado 2, 10 % de grado 3 y 51 % de grado IV. Las pruebas de chi cuadrado para evaluar dependencia entre el síndrome y la terapia resultaron no significativas. Conclusiones: el síndrome de lipodistrofia severo resulta un serio problema para la apariencia de pacientes de VIH/sida que reciben o no la terapia antirretroviral y que agrega un riesgo cardiovascular importante que debe ser considerado para intentar su prevención o tratamiento. Aunque los resultados pueden presentar sesgos y limitaciones, aportan una aproximación importante para sustentar y planificar intervenciones sanitarias que disminuirían el impacto del síndrome en la salud de los pacientes con VIH/sida.

Objective: to establish the relationship between lipodystrophy syndrome and highly active anti-retroviral therapy in HIV/AIDS patients. Methods: a cross-sectional, descriptive and co-relational study was conducted in HIV/AIDS patients, who had received highly active antiretroviral therapy in Centro Ambulatorio de Prevención y Atención del Sida e Infecciones de Transmisión Sexual (CAPASITS) de Tepic in Nayarit, Méjico from March to December, 2007. The definition and diagnosis of this syndrome was based on the method developed by the National Center in HIV Epidemiology and Clinical Research (NCHECR) method in Australia. The Chi square test evaluated the dependence between syndrome and therapy. One hundred seventy five patients (128 men and 47 women) aged 19-72 years were evaluated. Results: one hundred forty one patients (80.6 %) were diagnosed with lipodystrophy syndrome (CI95%74,7-86,4 %); 82.6 % corresponded to men and 74.5 % to women. According to severity, 17 % classified as grade 1; 1.3 % in grade 2; 10 % in grade 3 and 51 % as grade IV. The Chi square tests for the evaluation of dependence between syndrome and therapy were not significant. Conclusions: severe lipodystrophy syndrome is a serious health problem for HIV/AIDS patients receiving antiretroviral therapy or not. It adds a significant cardiovascular risk that must be considered for prevention or treatment. Although the results may be biased or restricted, they represent an important approach to planning and performing health interventions that will reduce the impact of the syndrome on the health of HIV/AIDS patients.

Social contradictions in pharmaceutical care practice at hospital setting in Cuba

Introducción: en Cuba el ejercicio de las funciones clínicas y la práctica de la Atención Farmacéutica a nivel hospitalario son limitadas pues, aunque existe un acercamiento a la concepción de estas funciones en los actuales manuales de procedimientos, los profesionales farmacéuticos realizan mayormente funciones administrativas y de dirección, además de las relacionadas con el suministro de medicamentos. Objetivo: analizar las contradicciones sociales (causas) que repercuten en la práctica de la Atención Farmacéutica Hospitalaria, específicamente en Santiago de Cuba, para trazar líneas estratégicas que permitan el perfeccionamiento de esta actividad. Métodos: se aplicó una herramienta que facilita el análisis de problemas y sus soluciones, el diagrama de causa-efecto, así como el método de consenso de votación ponderada, para determinar las causas principales y secundarias que frenan dicho ejercicio a nivel hospitalario. Las principales causas analizadas fueron los recursos humanos, los métodos y estilos de dirección, los recursos materiales, los medios y las condiciones de trabajo. Resultados: los resultados de la votación ponderada mostraron que las causas de mayor ponderación en orden descendente fueron las relacionadas con los métodos y estilos de dirección con 37 puntos, los recursos humanos con 33 puntos y los recursos materiales con 18,5 puntos. Conclusiones: las contradicciones identificadas marcan caminos de investigación para resolver las problemáticas planteadas, lo que permitirá desarrollar un modelo que establezca principios para el desarrollo de la Atención Farmacéutica a nivel hospitalario diseñado sobre la base de las evaluaciones y las valoraciones realizadas y los principios de las Buenas Prácticas de Farmacia.

Introduction: the clinical functions and the practice of pharmaceutical care at hospital setting are limited in Cuba. Although there is an approach to the conception of these functions in the current manuals of procedures, the pharmacists mostly carry out administrative and managing functions in addition to those of drug supply. Objective: to analyze the social contradictions (causes) that have an effect on the practice of pharmaceutical care at hospital, particularly in Santiago de Cuba, in order to draw up strategies for improvement of this activity. Methods: a tool facilitating the analysis of problems and their solutions, the cause-effect diagram and the weighed voting consensus method were applied to determine the main and secondary causes that hinder the above-mentioned practice at hospital. The main analyzed causes were human resources, methods, management styles, material resources, working means and conditions. Results: the results of the weighed voting revealed that the highly weighed causes in descending order were managing methods and styles with 37 points, the human resources with 33 points and the material resources with 18.5 points. Conclusions: the identified contradictions mark paths of research to solving the stated problems, which will allow creating a model of principles for the development of pharmaceutical care at hospital setting, on the basis of evaluations and assessments carried out and on the principles of the Good Practice of Pharmacy.

Proposal of adaptation of the sheet of pharmaceutical history of Dáder method for learners

Introducción: en 2008, Freitas & Marques propusieron una hoja de historia farmacoterapéutica: el Dáder modificado. Objetivo: evaluar la aplicabilidad del Dáder modificado comparándolo con el Dáder. Métodos: las hojas de historia farmacoterapéutica fueron aplicadas a usuarios crónicos de medicamentos por estudiantes de Farmacia. Al final de la aplicación, los entrevistadores atribuyeron notas de 0 a 5 para varios aspectos de su aplicabilidad. También se evaluaron si los datos recogidos estaban completos. Resultados: las dos hojas de historia farmacoterapéutica se mostraron equivalentes, pues no hubo diferencia significativa para las tres preguntas acerca de la aplicabilidad. Conclusiones: En el contexto de la Atención Farmacéutica, la existencia de una nueva hoja de historia farmacoterapéutica ofrece la posibilidad de elegir la que mejor se adapte a las necesidades del farmacéutico.

Introduction: Freitas & Marques proposed a sheet of pharmacotherapeutical history (SPH) in 2008: the Dáder adaptation (DA). Objective: this study was aimed at evaluating the applicability of DA compared with Dáder. Methods: the sheets of pharmacotherapeutical history (SPH) were applied to chronic users of drugs by pharmacy students. At the end, interviewers attributed scores ranged from 0 to 5 points to various aspects of their applicability. The completeness or not of the collected data was also evaluated. Results: the two SPH were equivalent, because there was no statistically significant difference for the three questions about the applicability. Conclusions: In the context of pharmaceutical care, this new sheet of pharmacotherapeutical history offers possibilities to choose the one that best fits the needs of the pharmacist.

**Storage condition stability of Tamarindus indica L. leaf tablets**

Objetivo: evaluar la estabilidad física, química y microbiológica, en estante, de tabletas de hojas de Tamarindus indica L. Métodos: se evaluaron las propiedades físico-mecánicas, la concentración de polifenoles, los perfiles de disolución y la calidad microbiológica durante dos años, manteniendo las tabletas envasadas en frascos de cloruro de polivinilo de alta densidad, con tapa inviolable y almacenadas en lugar seco y fresco. Se realizaron determinaciones de cada una de las propiedades cada tres meses. Resultados: Durante el estudio, las tabletas mantuvieron el color marrón claro que las caracteriza, el mismo olor fresco a fruta madura y la misma apariencia física. Las propiedades físicas se mantuvieron intactas durante dos años: dureza mayor que 5 kg/f (Monsanto), friabilidad menor que 1 %, masa y la altura dentro de la variabilidad permitida. El tiempo de desintegración fue menor que 10 min. La cantidad de polifenoles liberada en 30 min estuvo por encima del 87 % durante el estudio. Conclusiones: se demostró que las tabletas de tamarindo 120 mg, mantienen las propiedades físico-mecánicas, la concentración de polifenoles y la calidad microbiológica y biofarmacéutica durante dos años. Para asegurar la estabilidad química de las tabletas con mayor precisión, en este momento se desarrollan estudios por cromatografía de capa delgada.

Objective: to evaluate the physical stability, chemical and microbiological stability of the Tamarindus indica L tablets on shelf. Methods: the physical and mechanical properties, the polyphenol concentrations, the dissolution profiles and the microbiological quality were evaluated for two years. Tablets were packed in high density PVP flasks and were stored in a dry and fresh place. Each of the properties was determined every three months. Results: throughout the study, the tablets kept their characteristic light brown color, the same odour resembling ripe fruit and the same physical appearance. The physical properties remained unchanged during two years: hardness was higher than 5 kg/f (Monsanto), friability lower than 1 %, mass and height were within the allowable variability. Disintegration time was less than 10min. The released percentage of polyphenols in 30 min was over 87% in the course of study. Conclusions: it was demonstrated that 120mg Tamarind tablets can keep their physical-mechanical properties, the polyphenol concentrations and the microbiological and biopharmaceutical quality for 2 years. Thin layer chromatographic studies are currently conducted to assure more precisely the chemical stability of the tablets.

Effects of D-002 on aspirin-induced ulcers and neutrophil infiltration on the gastric mucosa

Introduction: the gastric mucosa is susceptible to the effects of aggressive factors, which are counterbalanced by mucosal defensive factors. Acid peptic diseases result from the imbalance between these aggressive and defensive factors. Aspirin-induced ulcer is a model of NSAIDs-induced damage in which neutrophil infiltration plays a key role. Objective: this paper investigates the protective effect of D-002 against aspirin-induced ulcers and associated neutrophil infiltration in the gastric mucosa. Methods: rats were randomized into six groups of 8 rats each. A negative vehicle control, and five aspirin (300 mg/kg)-treated groups: a positive control, orally treated with the vehicle, three with D-002 (25, 50 and 100 mg/kg, respectively) and other with 10 mg/kg Omeprazole. Five hours after induced damage the rats were sacrificed. The stomachs were removed and opened, and lesions examined macroscopically and microscopically. Ulcer indexes and neutrophil infiltration per ulcer areas were measured. Results: all positive, none negative, controls exhibited aspirin-induced ulcers. Oral treatment with D-002 (25-100 mg/kg) dose-dependently and significantly reduced aspirin-induced gastric lesions (37 to 75 %), the mean number of microscopic ulcers (40 to 72 %) and neutrophil infiltration (41.7 to 83.1 %) in the rat gastric mucosa. Conclusion: Oral treatment with D-002 (25-100 mg/kg) effectively protects against aspirin-induced ulcers and decreases the neutrophil infiltration in the gastric mucosa induced by aspirin ulceration.

Introducción: la integridad de la mucosa gástrica depende del balance entre los factores agresivos y defensivos. La úlcera inducida por aspirina es un modelo de daño por antiinflamatorios no esteroidales en el cual el infiltrado de neutrófilos desempeña una función fundamental. Objetivo: evaluar el efecto protector del D-002 sobre la úlcera inducida por aspirina asociada al infiltrado de neutrófilos en la mucosa gástrica. Métodos: las ratas fueron aleatorizadas en seis grupos de ocho animales cada uno. Un control negativo con vehículo y cinco grupos tratados con aspirina (300 mg/kg): un control positivo, tratado por vía oral con vehículo, tres grupos con D-002 (25, 50 and 100 mg/kg respectivamente) y otro con omeprazol 10 mg/kg. Cinco horas después de inducido el daño las ratas fueron sacrificadas y se extrajeron sus estómagos para su análisis morfológico. Se determinó el índice de úlcera, el número de úlceras microscópicas y el número de neutrófilos por área ulcerada. Resultados: todos los controles positivos y ninguno negativo mostraron lesiones en la mucosa. El tratamiento por vía oral con D-002 (25-100 mg/kg) redujo de modo significativo y dependiente de la dosis el índice de úlceras gástricas (37-75 %), el promedio de úlceras microscópicas (40- 72 %) y la infiltración de neutrófilos (41,7-83,1 %) en la mucosa de las ratas. Conclusiones: el tratamiento por vía oral con D-002 (25-100 mg/kg) protege la mucosa gástrica de las ratas del daño inducido por aspirina, lo que disminuye el índice de úlcera y el infiltrado de neutrófilos.

Effect of D-002 on 5-lipooxygenase (5-LOX) enzyme activity in vitro

Introducción: el D-002, mezcla de seis alcoholes alifáticos primarios de alto peso molecular purificada de la cera de abejas, ha mostrado efectos antiinflamatorios, sin gastrotoxicidad secundaria, enmodelos experimentales. El tratamiento oral con D-002 reduce las concentraciones de leucotrieno B4 (LTB4) en exudados pleurales de ratas con pleuresía por carragenina, sugiriendo que podría inhibir la actividad enzimática de la 5-lipooxigenasa (5-LOX), si bien los mecanismos de la acción antiinflamatoria del D-002 no habían sido aún explorados. Objetivo: evaluar el efecto in vitro del D-002 sobre la actividad de la 5-LOX, utilizando la fracción citosólica de homogenatos de hígado de ratas. Métodos: las condiciones de ensayo utilizadas fueron las siguientes: fracción citosólica (50 µg de proteína) disuelta en solución reguladora borato 0,2 mol/L (pH 9) y ácido linoleico (7,8-250 mmol/L) como sustrato, ensayándose muestras paralelas incubadas con Tween-20/H2O (2 %) (vehículo, muestras controles), D-002 (0,9-1 000 µg/mL) o Lyprinol (500 µg/mL) (sustancia de referencia). La actividad enzimática se evaluó mediante el cambio de absorbancia a 234 nm producido por la formación de dienos conjugados y medido en espectrofotómetro UV-visible. Resultados: la adición in vitro del D-002 produjo una inhibición significativa, dependiente de la dosis (r= 0,980; p< 0,001) (IC50= 95,34 µg/mL) e incompetitiva de la actividad de la 5-LOX, cuya inhibición máxima (70 %) se alcanzó con 500 µg/mL. Conclusiones: con este estudio se demuestra que el D-002 es capaz de inhibir la actividad enzimática de la 5-LOX, efecto que podría explicar, al menos parcialmente, su acción antiinflamatoria en modelos experimentales in vivo.

Introduction: D-002, a mixture of six high molecular weight primary aliphatic alcohols purified from beeswax, has been shown to produce anti-inflammatory effects with no secondary gastrotoxicity in experimental models. Oral treatment with D-002 was effective for lowering the concentrations of B4 leukotriene (LTB4) in pleural exudates of rats with carragenin-induced pleurisy, suggesting that it could inhibit 5-lipooxigenase (5-LOX) enzyme activity. The mechanisms of the anti-inflammatory action of D-002, however, had not been explored yet. Objective: to evaluate the effects of D-002 on 5-LOX enzyme activity in vitro by using the cytosolic preparations from rat liver homogenates. Methods: testing conditions were as follows: cytosolic fraction (50 µg of protein) dissolved in 0.2 mol/L borate buffer solution (pH 9) and linoleic acid (7.8-250 mmol/L) as substrate. Parallel samples were incubated with Tween-20/H2O (2 %) only (vehicle, control samples), D-002 (0.9-1 000 µg/mL) or Lyprinol (500 µg/mL) (reference substance). The enzyme activity, evaluated through the formation of conjugated dienes, was assessed by the absorbance changes at 234 nm (5-lox) measured in a UV-visible spectrophotometer. Results: the in vitro addition of D-002 produced a significant, dose-dependent (r=0.980; p< 0.001) (IC50= 95.34 µg/mL) and uncompetitive inhibition of 5-LOX activity, whose maximal inhibition (70 %) was achieved with 500 µg/mL). Conclusions: thisstudy demonstrates that D-002 effectively inhibits 5-LOX enzymatic activity, an effect that may partially explain the anti-inflammatory effects of D-002 in experimental models in vivo.

Pathogenic molecular processes of atherosclerosis and therapeutic alternatives for control

La aterosclerosis es una enfermedad vascular crónica que afecta las bifurcaciones de las grandes arterias. Las enfermedades cardiovasculares asociadas a esta afección representan la primera causa de mortalidad en el mundo occidental. La fisiopatología de la aterosclerosis interrelaciona una serie de fenómenos moleculares y celulares complejos que aún no están del todo esclarecidos. Sin embargo, se han postulado algunas hipótesis para dar explicación a los procesos patogénicos que tienen lugar durante la aterogénesis. El objetivo del presente trabajo es ofrecer una actualización sobre los principales cambios moleculares que ocurren durante el inicio y progreso de esta enfermedad, así como las alternativas terapéuticas para su tratamiento y control. Para ello se realizó una revisión de publicaciones científicas en la base de datos MEDLINE durante los últimos 10 años. Se profundizó en la complejidad de dicha afección y se demostró que aún no existe una terapia totalmente eficaz para su tratamiento.

Atherosclerosis is a chronic vascular disease which affects bifurcations of major arteries. Atherosclerosis-associated cardiovascular diseases represent the first cause of mortality in the western world. The physiopathology of atherosclerosis associates a variety of molecular and cellular complex events, which are not completely understood. However, some hypothesis have been postulated to explain the pathogenic events during atherogenesis. The objective of the present article is to offer an updating on the principal molecular events during the atherosclerosis development and therapeutic alternatives for its treatment and control. To this end, a literature review was made in MEDLINE database, which covered the scientific publications of the last 10 years. The complexity of this illness was analyzed in depth and it was demonstrated that there was not any completely effective therapy to treat it.

Atorvastatina

BCG inmunoterápico

Eritropoyetina humana recombinante