Revista de Salud Animal

Análisis del cumplimiento de las Buenas Prácticas de faenado en cinco mataderos municipales de Manabí, Ecuador

En Ecuador el faenado se realiza en mataderos públicos municipales que, por lo general, tienen condiciones inadecuadas y no existe una guía de Buenas Prácticas (BP) aprobada de manera oficial en el país. Este trabajo propone una Guía de BP y evaluó su cumplimiento en cinco mataderos municipales de Manabí, Ecuador. La Guía se confeccionó con la participación de un grupo de expertos que identificaron los factores claves y los componentes que debía contener a través de una Tormenta de Ideas y un Diagrama de Espina de Pescado. Los requisitos de cada componente se seleccionaron a partir de seis guías de BP internacionales. Se establecieron puntajes para la ponderación y comparación del cumplimiento de cada establecimiento. La concordancia de los expertos se comprobó por el coeficiente de Kendall. La evaluación se realizó con una lista de chequeo de los requisitos de la guía. Los cinco mataderos estudiados tuvieron deficiente cumplimiento de los requisitos de la Guía. Los por cientos de incumplimiento estaban en un intervalo entre el 40% y el 80% y los puntajes alcanzados estuvieron entre 0 y 630, de un total de 1000. Las instalaciones y los equipos tuvieron los más bajos por cientos de cumplimiento. Los mataderos quedaron clasificados con un nivel de implantación de las BP de bajo y muy bajo.

Animal slaughter in Ecuador is done in public municipal slaughterhouses where, generally, the conditions are inadequate and an officially adopted guide for Good Practices (GP) is nonexistent. A Guide for GP evaluated for its compliance in five municipal slaughterhouses at Manabi, Ecuador, was proposed in this paper. The guide was produced with the participation of a group of experts who identified the key factors and components to be included through a Brainstorm and a Fishbone Diagram. Each component requirements were selected from six international GP guides. In collaboration with experts and using the Delphi method, scores for weighting and comparing the performance of each slaughterhouse were established. The concordance of experts was determined by Kendall's coefficient. The evaluation was performed with a checklist of the guide requirements. A deficient compliance of the guide requirements was shown by the five slaughterhouses. The non-compliance percentages ranged between 40% and 80%, and the scores achieved were between 0 and 630 of a total of 1000. The facilities and equipment had the lowest compliance percentages. All the slaughterhouses were classified as of low or very low level of implementation of the Good Practices.

Calidad e inocuidad en la leche cruda de una cadena de producción de una provincia occidental de Cuba

En el sector lechero de Cuba se han producido cambios sustanciales a partir de la implementación de un nuevo sistema de pago y organización en la cadena lechera. Esto motivó la necesidad de determinar la calidad e inocuidad en el sistema de producción actual. Con este objetivo se realizó un estudio en una cooperativa de la región occidental con tradición en la producción de leche. Se seleccionaron 30 productores, dos acarreadores y un punto de venta que constituyen los eslabones principales de esta cadena. En cada uno de ellos se tomaron muestras de leche, mensualmente, durante un año y se determinaron los indicadores físico-químicos e higiénico-sanitarios en las muestras. El análisis de los macrocomponentes lácteos se realizó con el equipo MilkoScan minor por infrarrojo cercano y los análisis microbiológicos a través de normas internacionales para la determinación de microorganismos a 30°C, coliformes totales, Staphylococcus coagulasa positivo, Escherichia coli y Salmonella spp. Los resultados mostraron que la calidad físico-química de la leche en la producción primaria es adecuada, pero se produce un deterioro en el punto de venta asociado a la adulteración por aguado e insuficiente calidad higiénico-sanitaria y presencia de bacterias patógenas en la leche cruda de la cadena estudiada, lo cual evidenció la necesidad de establecer los requisitos de Buenas Prácticas Lecheras establecidos en el Programa Integral para la Mejora de la Producción y Calidad de la leche (PROCAL), para el control de la inocuidad de este alimento a lo largo de la cadena de producción.

Substantial changes have been produced in the dairy sector of the country from the implementation of a new payment system and organization in the dairy chain. This led to the need of determining the quality and safety in the current production system. With this purpose, a study was conducted in a dairy cooperative of the western region of the country with tradition in milk production. Thirty producers, two carriers, and a point of sale, main links in the chain, were selected to be sampled. Milk samples were taken monthly for a year, and the physicochemical and hygienic-sanitary indicators were determined. The analysis of milk macrocomponents was made by MilkoScan minor by near infrared and the microbiological analyses through international standards for determining at 30°C microorganisms, total coliforms, coagulase positive Staphylococcus spp., Escherichia coli, and Salmonella spp. The results showed that the milk physicochemical quality in the primary production was adequate, but milk deterioration occurred at the point of sale associated with adulteration with water and an inadequate hygienic quality by the presence of pathogenic bacteria in the raw milk. The results made evident the need of introducing the requirements of the Good Dairy Farming Practice established in the Integral Program for the Improvement of Milk Production and Quality (PROCAL) to control the safety of this product along the production chain.

Reducción de la mastitis subclínica con el empleo de implante de catgut en el punto de acupuntura Estómago 29

Se realizó un estudio observacional de diseño transversal en la población bovina del Rancho Lupita, Aguascalientes, México, en el periodo junio-julio de 2013, con el propósito de reducir la prevalencia de mastitis e incrementar la recuperación de cuartos y animales, a través del empleo de acciones y procedimientos de prevención y control. Para determinar la prevalencia, se diagnosticó la mastitis por examen físico individual, mediante la prueba de California, por el conteo de células somáticas y por aislamiento bacteriológico. Para la reducción de la mastitis se instauraron medidas preventivas y de control de la enfermedad y se evaluó la recuperación de los cuartos y animales afectados por medio del implante de catgut en el punto acupuntural E-29. Se logró recuperar el 65% de los animales tratados mediante la aplicación del implante de sutura reabsorbible en el punto de acupuntura E-29 para el tratamiento de la mastitis subclínica en vacas de la raza Holstein. La investigación permitió verificar la reducción de la prevalencia de mastitis subclínica con el empleo de acciones y procedimientos de prevención y control.

A study with a transversal design was carried out on the bovine population of Rancho Lupita, Aguascalientes, México, from June to July, 2013.The objective was to reduce mastitis prevalence and to increase the recovery of quarters or animals through actions and procedures of prevention and control. To determine prevalence, mastitis was diagnosed by an individual physical exam, CMT, somatic cell counts, and bacteriological isolation. For mastitis reduction, disease control and prevention measures were applied, and the recovery of quarters and affected animals was evaluated by using the catgut implantation at the acutpoint S-29. By applying implants of absorbable sutures at the acutpoint E-29 for the subclinical mastitis treatment in cows of the Holstein race, it was possible to recover 65% of the animals treated. This research allowed verifying the reduction of subclinical mastitis prevalence by using actions and procedures of prevention and control.

Cepas de Lactobacillus spp. con capacidades probióticas aisladas del tracto intestinal de terneros neonatos

Se caracterizaron in vitro 17 cepas de Lactobacillus spp. aisladas del tracto intestinal de terneros neonatos, para seleccionar las mejores como candidatos probióticos y realizarles posteriormente los estudios in vivo. A todos los aislados se les realizó la prueba de la catalasa, la tinción de Gram y se estudió sus características culturales para su identificación preliminar. Se evaluó su capacidad probiótica mediante pruebas in vitro como fueron el crecimiento a diferentes temperaturas (30, 37 y 45°C), pH (2,5; 3,4; 5,4; 6,4) y capacidad de acidificación del medio de cultivo. Se preseleccionaron 10 cepas de Lactobacillus spp. que crecieron en todas las condiciones evaluadas. Se destaca el crecimiento de células viables de 6,7-10 log UFC/ml que disminuyeron el pH hasta valores de 3,2-4. A continuación se evaluaron sus características funcionales: la tolerancia al jugo gástrico artificial y a sales biliares (0,3% de Oxgall), así como su actividad de antagonismo microbiano ante cuatro agentes patógenos. Se obtuvo que cuatro cepas de Lactobacillus spp. mostraron potencialidades probióticas por su resistencia al tratamiento con sales biliares hasta las 24 horas, y con jugo gástrico artificial se observó crecimiento microbiano de 3,52-6,5 Log UFC/ml a los 90 minutos; además, inhibieron el crecimiento de Salmonella sp., Staphylococcus aureus, Escherichia coli y Listeria monocytogenes. Se evaluó el perfil de susceptibilidad a 13 antimicrobianos y la mayoría de las cepas reveló resistencia a tres de ellos.

Seventeen strains of Lactobacillus spp. isolated from the intestinal tract of neonatal calves were characterized in vitro to select the best ones as probiotic candidates and to study them in vivo. All the isolates were tested for catalase, Gram stained, and their cultural characteristics studied for their preliminary identification. Their probiotic capacity, such as growth at different temperatures (30, 37, and 45°C), pH (2.5, 3.4, 5.4, 6.4), and their capacity to acidify the culture medium, were assessed in vitro. Ten strains of Lactobacillus spp. growing under all the conditions tested were preselected, standing out growths of viable cells of 6,7-10 log CFU/ml that reduced pH values to 3.2-4.0. Then, their functional characteristics such as tolerance to artificial gastric juice and to bile salts (0.3% Oxgall), and their microbial antagonism activity against four pathogens of veterinary interest were evaluated. The result obtained showed probiotic potential in four of the Lactobacillus spp. strains tested for their resistance to treatment with bile salts until 24 hours and the microbial growth of 3.52-6.5 log CFU/ml with artificial gastric juice observed after 90 minutes; they also inhibited the growth of Salmonella sp., Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Listeria monocytogenes. The profile of susceptibility to 13 antimicrobials was evaluated, and most of the strains revealed resistance to three of them.

Desarrollo y evaluación del desempeño de una prueba rápida inmunocromatográfica para el diagnóstico de la brucelosis

Se desarrolló un sistema inmunocromatográfico de flujo lateral para el diagnóstico serológico de la brucelosis en bovinos, porcinos, ovinos y humanos. En la evaluación se emplearon 259 muestras de sueros de las cuatro especies mencionadas, 67 positivos y 192 negativos por la prueba de Rosa de Bengala (RB). La interpretación del ensayo se realizó por inspección visual entre 15-20 minutos de aplicadas las muestras. La prueba se consideró negativa si solo aparecía la línea de control, y positiva cuando aparecían la línea control y la de prueba. Para cada uno de los grupos de sueros se determinó la sensibilidad y especificidad diagnósticas y la sensibilidad y especificidad relativas a la prueba de RB. Además, se calculó el índice Kappa (k) para estimar la concordancia entre ambas pruebas. Se obtuvieron 98,5% y 99,47% de sensibilidad y especificidad diagnósticas, respectivamente. La sensibilidad y especificidad relativas a RB fue del 95,65% y 99,95% respectivamente, con un valor de k de 0,95, lo que significó una concordancia muy buena con respecto a la RB. La sensibilidad del sistema frente a sueros bovinos, porcinos, ovinos y humanos fue de 98,3%, 100%, 100% y 100%, respectivamente. De igual forma, el ensayo mostró altos niveles de especificidad en este grupo de sueros. Los resultados satisfactorios de desempeño y la simplicidad del ensayo permiten recomendar su empleo para el pesquisaje de anticuerpos contra Brucella sp. en las especies estudiadas como otra herramienta para el diagnóstico serológico de la brucelosis.

An immunochromatographic lateral flow assay for the serological diagnosis of brucellosis in cattle, swine, sheep and humans was developed. The test evaluation was carried out with 259 serum samples from the four mentioned species; 67 positive and 192 negative by rose bengal test (RB). Interpretation of the test was performed by visual inspection after 15-20 minutes of the samples being applied. The test was considered negative if only the control line appeared and positive when the test line also appeared. In general and for each group of sera, sensitivity and diagnostic specificity and sensitivity and relative specificity to RB test were determined. Kappa index (k) was also calculated to estimate the agreement between the two tests. The diagnostic sensitivity and specificity obtained were 98.5% and 99.47%, respectively. The sensitivity and specificity relative to RB were 95.65% and 99.95% respectively, with a k value of 0.95, which meant a very good agreement with respect to the RB. The sensitivity of the system to sera cattle, pigs, sheep and humans was 98.3%, 100%, 100% and 100% respectively. Likewise the test showed high levels of specificity in this group of sera. The satisfactory performance and simplicity of this assay allow recommending its use as another tool for the screening of antibodies against Brucella sp. in the serological diagnosis of brucellosis in the animal species studied.

Pesquisa serológica y molecular de Brucella sp. en un rebaño bufalino lechero en la Cuenca del Sur del Lago de Maracaibo

En el siguiente estudio se presentan los resultados de un protocolo de diagnóstico de Brucelosis bovina, en una finca lechera bufalina (Bubalus bubalis) con problemas reproductivos. Un rebaño total de 80 búfalos se sometió a tamizaje con la prueba rápida de Rosa de Bengala (RB) y la prueba de microaglutinación para Brucella. Los resultados obtenidos se confirmaron con el ensayo de microaglutinación con 2- Mercaptoetanol, fluorescencia polarizada (FPA) y diagnóstico molecular por PCR, con la amplificación de la región 16S ADNr del género Brucella. El tamizaje detectó 51,25% (41/80) de reactores con RB, la prueba de microaglutinación con fenol detectó 8,75% de animales positivos (7/80) y, posteriormente, las técnicas confirmatorias de 2- Mercaptoetanol y FPA detectaron 6,25% (5/80) de animales positivos. El índice de Kappa para la prueba de tamizaje RB, comparada contra 2- Mercaptoetanol, fue de 0,119; para el ensayo de microaglutinación con fenol contra 2- Mercaptoetanol de 0,820 y de FPA contra 2-Mercaptoetanol fue de 1,0. Se evidenció una baja concordancia para RB contra 2-Mercaptoetanol y de buena a excelente para microaglutinación con fenol y FPA contra 2-Mercaptoetanol. La PCR logró detectar el 100% de los animales confirmados (5/5 animales). Las técnicas serológicas como FPA y el diagnóstico directo por PCR se convierten en valiosas herramientas para estudiar la brucelosis animal en zonas de alto riesgo, sin realizar aislamiento de la bacteria.

The results of a diagnostic protocol for bovine brucellosis in a buffalo (Bubalus bubalis) dairy farm with reproductive failures are informed. A herd of 80 buffaloes was subjected to a screening with the Rose Bengal (RB) and Brucella agglutination (BMAT) tests, and the results subsequently confirmed by using the 2- mercaptoethanol agglutination test (2-ME), the fluorescence polarization assay (FPA) ) and the molecular diagnosis by PCR of the 16S rDNA region of the genus Brucella. The screening detected 51.25% (41/80) RB reactors and 8.75% positive animals (7/80) on BMAT. The confirmatory techniques (2-ME and FPA) detected 6.25% (5/80) of positive animals. The Kappa index was 0.119 for RB compared with 2-ME , 0806 for BMAT against 2-ME, and 1.0 for FPA against 2-ME. A low agreement for RB to 2-mercaptoethanol and high to excellent for agglutination with phenol and FPA was evident. The PCR detected 100% of the confirmed animals (5/5 animals). Serological techniques such as FPA and direct diagnosis by PCR become valuable tools for animal brucellosis diagnosis without bacterial isolation in high risk areas.

Índices de infestación por Varroa destructor en colmenas sin medidas de control

La varroosis de las abejas continúa siendo el principal problema sanitario de la apicultura mundial. El control químico ha sido el método de control más empleado pero puede conducir al desarrollo de cepas de ácaros resistentes a los acaricidas, elevar los costos de producción, causar efectos tóxicos en las abejas y el hombre, y contaminar los productos de la colmena, por lo que dificulta su comercialización. Con el propósito de conocer el comportamiento de los índices de infestación por Varroa en colmenas no tratadas, de un apiario de selección natural, se realizó un muestreo mensual de abejas adultas y fragmentos de panales de crías de obreras y zánganos durante 13 meses. En un grupo control se trabajó con seis apiarios con diferente tiempo postratamiento. La tasa media de infestación en abejas adultas, para el periodo, fue de 3,61% (2,10% - 5,56%), la extensidad de invasión media en crías de obreras fue 4,89% (1,43% - 15,72%), la extensidad de invasión media en crías de zánganos fue 34,94% (12,30% - 51,27%) y la tasa de infestación media en abejas adultas de los apiarios de producción fue 5,36%. Los meses de marzo y abril, periodo en el que se incrementa la producción de zánganos, mostraron los índices de infestación más altos en abejas adultas y cría, respectivamente. Después de cuatro años sin tratamiento, las colmenas supervivientes del apiario de selección natural mantienen índices de infestación por Varroa destructor por debajo del umbral de peligro, y menores que en los apiarios que recibieron tratamientos para el control del ácaro.

Varroosis of honey bee continues being the main sanitary problem of the apiculture worldwide. The chemical control has been the most used method but it may lead to the development of acaricide resistant mite strains, increases of production costs, toxicity for honeybee and man, and contamination of hive products, with consequent difficulties for its commercialization. In order to know the behaviour of the infestation rates by Varroa mite in untreated hives, adult honeybees and fragments of worker and drone brood combs were sampled monthly from a natural selection apiary for 13 months. As controls, adult honeybees from six conventional apiaries were sampled at different post treatment times. The mean infestation rate by Varroa in not treated hives was: adult honeybees = 3.61% (2.10% - 5.56%), worker brood = 4.89% (1.43% - 15.72%) and drone brood = 34.94% (12.30% - 51.27%). The mean infestation rate in adult bees of the control apiaries was 5.36%. In March and April, when drone brood increases, the higher rates of Varroa destructor infestation were observed in both adult bees and brood. After four years without treatment, the surviving hives of the natural selection apiary showed Varroa infestation rates below the threshold of danger and lower than those in the controlled apiaries.

Secuenciación y ensamblaje de novo de genomas bacterianos: una alternativa para el estudio de nuevos patógenos

Las tecnologías de secuenciación de nueva generación han revolucionado el campo de la genómica, permitiendo la secuenciación de un gran número de genomas en muy poco tiempo. El genoma brinda, en principio, el catálogo completo de genes que un organismo puede expresar, pero la interpretación de esta información, a todos los niveles (desde el enorme volumen de datos crudos originados por el secuenciador hasta los miles de genes identificados en paralelo asociados a diversas funciones) constituye un gran reto desde el punto de vista computacional. El ensamblaje de novo es uno de los procedimientos empleados para reconstruir genomas, principalmente bacterianos. En este artículo se revisan las principales tendencias en la secuenciación y, específicamente, en el ensamblaje de novo.

Next Generation Sequencing technologies have revolutionized the field of genomics allowing sequencing of a large number of genomes in a short period of time. The genome provides, in principle, the complete catalogue of genes which can be expressed by a microorganism. But the interpretation of this information, at each level (from the huge volume of raw data originated by the sequencer to the thousands of genes identified in parallel associated with various functions), is a major challenge from the computational point of view. De novo assembly is one of the approaches used to reconstruct genomes, particularly bacterial genomes. In this paper the main trends regarding sequencing, and specifically the de novo assembly, are reviewed.

Relación de algunos indicadores sanguíneos con la infestación de parásitos gastrointestinales en ovinos

El presente estudio se realizó con el objetivo de determinar los principales indicadores hematológicos y su asociación con el nivel de infestación por estrongílidos gastrointestinales y el grado de anemia en ovinos en pastoreo. Para ello se muestrearon 62 animales de dos entidades productivas de Rio de Janeiro, a los cuales se les extrajo heces directamente del recto, y sangre por punción de la vena yugular. Se determinó la carga parasitaria mediante el método McMaster y el conteo de células rojas (CCR), conteo de células blancas (CCB), hemoglobina (HB), hematocrito (Hto), volumen corpuscular medio (VCM), hemoglobina corpuscular media (HCM) y concentración media de la hemoglobina corpuscular (CMHC), con el empleo de un analizador automático de sangre. Los animales se clasificaron en función del Hto, con presencia de anemia moderada y severa, así como animales no anémicos. También se determinó la relación (Coeficiente de correlación Pearson) entre las variables hematológicas de la serie roja con la carga parasitaria. Se apreció que en la medida que se incrementa la infestación parasitaria, fundamentalmente por Haemonchus contortus, se afectan los indicadores de la serie roja, y los animales con anemia severa presentaron las mayores cargas parasitarias y afectaciones considerables en la cantidad de glóbulos rojos, lo que conllevó a la presencia de anemia microcíticia microcrómica. Se obtuvo una relación inversa entre la carga parasitaria la HB y el Hto (p£0.01). Se concluye que existe una relación directa entre parasitismo, fundamentalmente, Haemonchus contortus y el grado de anemia con consecuencias en la serie roja de la sangre.

The aim of the present study was to determine the main hematological indicators and their relationships with the level of infestation by gastrointestinal strongylids and the anemia degree in grazing sheep. For this, 62 animals from two productive entities in Rio de Janeiro were sampled by extracting feces directly from the rectus and blood by jugular vein puncture. The parasite load was determined by the McMaster method and the count of red (RBC) and white blood cells (WBC), hemoglobin (HB), hematocrit (Hct), mean corpuscular volume (MCV), mean corpuscular hemoglobin (MCH), and mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC) by using an automatic blood analyzer. According to the Hct, the animals were classified as animals with moderated or severe anemia and no anemic animals. Also, the relationship between the hematological variables of the red serie and the parasitic load (Pearson's correlation coefficient) was calculated. The indicators of the red serie were shown to be more affected as the parasitic infestation increased, mainly by Haemonchus contortus, and the animals with severe anemia showed the higher parasite loads and considerable affectations in the amount of red cells, which involved the presence of microcytic microchromic anemia. An inverse relationship between parasite load, the HB and the Hct (p£0.01) was obtained. It was concluded that there was a direct relationship between the parasitism, mainly Haemonchus contortus, and the anemia degree with consequences on the blood red serie.

**Detección por nPCR de Anaplasma marginale y Babesia bovis en búfalos (Bubalus bubalis) en el Occidente de Cuba**