Revista Cubana de Medicina Tropical

Efectos de 3 formulaciones de insecticidas en el desprendimiento y eclosión de las ootecas de Blattella germanica (Dictyoptera: Blattellidae)

Se estudiaron diferentes formulaciones de insecticidas usadas para el control de la cucaracha alemana, Blattella germanica (L.), con el objetivo de conocer sus efectos sobre hembras grávidas de la mencionada especie. Los insecticidas ensayados fueron baygón 20 % EC, diazinón 60 EC e icón 2,5 % EC. La exposición a cada uno de los insecticidas mostró un efecto en el desprendimiento de las ootecas (p < 0,001). Las hembras grávidas tratadas con baygón mostraron el mayor tanto por ciento de ootecas desprendidas (71 %) mientras que el diazinón causó el menor porcentaje (33,5 %). Las dosis utilizadas de los insecticidas baygón, diazinón e icón mostraron que de las ootecas desprendidas sólo el 19,01; 34,32 y 39,11 % respectivamente, eclosionaron. De las ootecas retenidas por las hembras tratadas, el menor porcentaje de eclosión fue causado por el baygón (13,79) al compararse con los insecticidas diazinón e icón que mostraron los mayores porcentajes de eclosión con el 39,84 y 47,82; respectivamente. Por lo tanto, los efectos de los insecticidas sobre las hembras que transportan ootecas podrían ser considerados cuando se seleccione un insecticida para el control de la cucaracha alemana.

Different insecticide formulations used for the control of German Cockroach, Blatella germanica (L.) were studied to know their effects on the gravid females of this species. The insecticides assayed were baygon 20 % EC, diazinon 60 EC, and licon 2,5 % EC. Exposure to each insecticide showed an effect on the oothecal drop (p < 0,001). Gravid females treated with baygon had the highest percent of oothecae detached (71 %); whereas diazinon caused the lowest percent (33,5 %). Doses of baygon, diazinon, and icon used showed that among the oothecas detached hatching ocurred only in 19,01 %;34,2 % and 39,11 %, respectively. Of the oothecas retained by treated females, the lowest hatching percent was produced by baygon (13,79 %) compared with diazinon and icon insecticides, which presented the highest hatching percents with 39,84 and 47,82, respectively. Therefore, the effects on insecticides on females bearing oothecas may be considered at the time of selecting an insecticide to control the German cockroach.

Estudio taxométrico de especies del género Mycobacterium aisladas en Cuba

Se estudiaron 40 cepas del género Mycobacterium correspondientes a 12 especies las cuales fueron sometidas a 62 pruebas microbiológicas y bioquímicas, consideradas cada una como un carácter. Como resultado de los coeficientes de similitud y su agrupación se obtuvieron 9 fenones, representados por: Fenón I (Mycobacteriu fortuitum), Fenón II (Complejo MAI), Fenón III (Mycobacterium phlei), Fenón IV (Mycobacterium triviale), Fenón V (Mycobacterium smegmatis), Fenón VI (Mycobacterium gordonae), Fenón VII (Mycobacterium szulgai), Fenón VIII (Complejo MAI) y Fenón IX (Mycobacterium scrofulaceum). El trabajo de identificación de las cepas fue coherente con la agrupación desde el punto de vista fenético.

40 straing of the Mycobacterium genus corresponding to 12 species, which were subjected to 62 microbiological and biochemical tests, were studied. Each one was considered as a character. As a result of the similitude coefficient and their grouping, 9 phenomes represented by: Phenome I (Mycobacterium fortitum), Phenome II (MAI Complex), Phenome III (Mycobacterium phlei), Phenome IV (Mycobacterium triviale), Phenome V (Mycobacterium smegmatis), Phenome VI (Mycobacterium gordonae), Phenome VII (Mycobacterium szulgai), Phenome VIII (MAI Complex), and Phenome IX (Mycobacterium scrofulaceum), were obtained. The strain identification work was consistent with grouping from the phenotypic point of view.

Reporte de la resistencia a las drogas en cepas de Mycobacterium tuberculosis aisladas de pacientes en Irán

Se estudiaron 6 472 muestras clínicas de pacientes con sospecha de tuberculosis entre marzo de 1993 a marzo de 1994. Se obtuvieron resultados positivos en 443 pacientes; 238 correspondieron al sexo femenino (53,7 %) y 205 (46,3 %) al masculino, predominó el grupo de edad entre 30 y 39 años (31,5 %). La prueba cutánea de sensibilidad al derivado proteico purificado (PPD) fue positiva en 178 pacientes con un rango de 10-14 mm. Se encontraron imágenes radiológicas anormales en 222 pacientes (50,1 %). Se detectó mayor frecuencia de resistencia en las cepas de Mycobacterium tuberculosis en casos con tuberculosis pulmonar. Cuarenta y dos cepas (9,5 %) fueron resistentes a la isoniacida y 31 (7,0 %) a la estreptomicina. Se registró resistencia a 1 droga en 25 aislamientos (5,4 %). Pocas cepas (1,3 %) resultaron resistentes a 3 drogas y 1 de ellas a 5 drogas. Los datos clínicos y epidemiológicos sugieren que la resistencia a las drogas en la tuberculosis comienza a ser un problema importante en la región. El diagnóstico rápido de esta infección y el uso de antibióticos con un espectro reducido puede facilitar el control de esta forma de tuberculosis.

6 472 clinical samples of patients with tuberculosis suspicion between March, 1993 and March, 1994, were studied. Positive results were obtained in 443 patients; 238 females (53,7 %) and 205 males (46,3 %). The predominant age group was that between 30 and 39 years (31,5 %). The cutaneous test of sensitivity to the purified protein derivate (PPD) was positive in 178 patients with a range of 10-14 mm. Abnormal radiological images were found in 222 patients (50,1 %). Higher resistance frequency was detected in Mycobaterium tuberculosis strains among cases suffering from pulmonary tuberculosis. 42 (9,5 %) strains were resistant to isoniazid and 31 (7,0 %) to streptomycin. Resitance to one drug was observed in 25 isolations (5,4 %). A few strains (1,3 %) were resistant to 3 drugs, and 1 of them to 5 drugs. Clinical and epidemiological data suggest that resistance to drugs in tuberculosis is becoming an important problem in the region. The fast diagnosis of this infection and the use of antibiotics with a reduced spectrum may enable the control of this form of tuberculosis.

Purificación de la proteína de 24 KD natural (P24) del virus de inmunodeficiencia humana tipo-1 (VIH-1) utilizando inmunoafinidad

En el seguimiento de las personas infectadas con el VIH-1 resulta de gran utilidad el empleo de sistemas para detectar la presencia de proteína de 24 KD y los niveles de anticuerpos a ésta; para el desarrollo de estos sistemas es necesario contar con esta proteína purificada. El presente trabajo describe la purificación de p24 a partir de lisado viral semipurificado sobre gradiente de sacarosa, empleando cromatografía de inmunoafinidad con anticuerpos monoclonales acoplados a Sefarosa 4B activada con bromuro de cianógeno. Para la caracterización del producto purificado se utilizó electroforesis en gel de poliacrilamida con tinción de plata e inmunoelectrotransferencia. Como resultado de este trabajo se obtuvo p24 útil para ser empleada en el desarrollo de medios diagnósticos y anticuerpos monoclonales.

The use of systems to detect the presence of 24kd protein as well as the levels of antibodies to it, is very useful in the follow-up of HIV-1 infected individuals. To develop these systems it is necessary to have this protein purified. The present paper describes the purification of p24 starting from the semipurified viral flattening on saccaharose gradient, using immunoaffinity chromatography with monoclonal antibodies coupled to Sepharosa 4B activaded with cyanogen bromide. For the characterization of the purified product it was used polyacrylamide gel electrophoresis with silver staining and immunoelectrotransference. As a result, it was obtained p24 which can be used for the development of diagnostic tools and monoclonal antibodies.

Estimación del título de anticuerpos IgG a Adenovirus utilizando una curva patrón y un ensayo de ultramicroELISA indirecto

Se logró normalizar un procedimiento que combinaba un ensayo de ultramicroELISA indirecto con una curva patrón y que permitió estimar el título de anticuerpos IgG a Adenovirus en muestras de suero humano utilizando una sola dilución de éstos. Basándose en el título a punto final previamente determinado para un panel de 117 muestras de suero, se seleccionaron 90 de éstas (r² = 0,98) para construir 4 curvas patrones que relacionaron el logaritmo natural de las respuestas de fluorescencia y el logaritmo natural del título a punto final para un rango amplio de diluciones del suero (1:40 hastra 1:320). Se seleccionó la curva correspondiente a la dilución 1:40 del suero (r² = 0,81), la cual posibilitó una óptima utilización de los accesorios diseñados para la manipulación de los volúmenes en el rango ultramicro y, por tanto, la automatización de todo el procedimiento. Los resultados obtenidos con respecto a la técnica de fijación del complemento (100 % de sensibilidad y 97,3 % de especificidad) respaldan la utiización de este método como una herramienta complementaria en la ejecución de estudios seroepidemiológicos a gran escala y con fines diagnósticos.

It was possible to standardize a procedure which combined an indirect microELISA assay with a standard curve and that allowed to estimate the titre of IgG antibodies to Adenovirus in samples of human serum, using only one dilution of these. Based on the end-point titre previously determined for a panel of 117 serum samples, we selected 90 of these samples (r² = 0,98) to build 4 standard curves that related the natural logarithm of the fluorescence responses to the natural logarithm of the end-point titre for a wide range of serum dilutions (1:40=1:320). It was selected the curve corresponding to serum dilution 1:40 (r² = 0,81), which made possible an optium utilization of those accessories designed to handle the volumes in the ultramicro range and, therefore, the automation of the whole procedure. The results obtained as regards the complement fixation test (100 % of sensitivity and 97,3 % of specificity) support the use of this method in our laboratory as a complementary tool to carry out seroepidemilogical studies on a large scale and with diagnostic ends.

Vigilancia de las encefalitis de San Luis, equina del este y equina del oeste en la provincia Ciego de Avila

Se realizaron estudios serológicos utilizando las técnicas de inhibición de la hemaglutinación y neutralización con el objetivo de conocer la dinámica de circulación de algunos Arbovirus, con el empleo de los antígenos de encefalitis equina del este, equina del oeste y San Luis en sueros humanos de personas sanas y sintomáticas, así como de aves centinelas, en el período de 1987 a 1991 y durante el año 1994. El 1,7 % de las personas asintomáticas testadas presentaron anticuerpos neutralizantes a equina del este y un 4,8 % a encefalitis de San Luis. Se detectaron 16 pacientes con seroconversión por inhibición de la hemaglutinación al virus de San Luis. La vigilancia con aves centinelas demostró que durante los años 1988, 1989 y 1994 circuló San Luis en los municipios de Morón, Bolivia y Chambas, mientras que en este último municipio en los años 1988 y 1989 circuló la encefalitis equina del este. Se detectaron en personas sanas anticuerpos por inhibición de la hemaglutinación a encefalitis equina del oeste, al parecer por anticuerpos heterólogos, ya que no hubo presencia de anticuerpos neutralizantes contra este virus.

Serological studies were carried out using the haemagylutination inhibition and neutralization tests so as to hnow the circulation dynamics of some arboviruses with the use of Western and Eastern equine encephalitis antigens and St Louis encephalitis antigens in human serum from sound and symptomatic individuals, as well as from sentinel birds, between 1987 and 1991, and during 1994. 1,7 % of he asymptomatic subjects tested presented neutralizing antibodies to to Eastern equine and 4,8 % to St Louis encephalitis. 16 patients with seroconversion by haemagglutination inhibition to St Louis virus were detected. Survellance of sentinel birds showed that during 1988, 1989, and 1994. St. Louis circulated in the municipalities of Morón, Bolivia and Chambas; whereas in the latter the Eastern equine encephalitis circulated in 1988 and 1989. Antibodies to Western equine encephalitis were detected in sound individuals by haemagglutination inhibition due seemengly to heterologous antibodies, since there were no neutralizing antibodies against this virus.

Relaciones genéticas del virus dengue 3 aislado en la epidemia de FHD en Nicaragua, 1994

Se reporta el aislamiento de 2 cepas de dengue, 3 en muestras de pacientes nicaragüenses con dengue con manifestaciones hemorrágicas, lo que significaba la reintroducción de este serotipo en la región después de 17 años sin circulación. Se reporta la caracterización genética de la cepa aislada la que se clasifica como perteneciente al grupo de cepas de dengue 3 aisladas en el sudeste asiático y que se han asociado a casos de dengue hemorrágico. Estos resultados sugieren el origen de esta cepa.

It is reported the isolation of 2 dengue strains, 3 in samples from Nicaraguan patients suffering from dengue with hemorrhagic manifestations, which showed the reintroduction of this serotype in the region after being 17 years out of circulation. It is also reported the genetic characterization of the isolated strain, which, according to its classification, belongs to the group of dengue 2 strains isolated in Southeast Asi and which have been associated to hemorrhagic dengue. These results suggest the origin of this strain.

Purificación y caracterización proteica de una cepa cubana del virus de la hepatitis A

Se purificó y se hizo la caracterización proteica de una de las cepas aisladas en Cuba del virus de la hepatitis A. Para ello se procedió a separar al virus de la célula infectada mediante pasos de extracción con detergentes, concentración por ultrafiltración y finalmente ultracentrifugación en gradiente discontinuo sacarosa-glicerol. Se determinó la concentración de proteínas, así como la actividad antigénica en las diferentes fracciones del gradiente. Para la caracterización proteica del microorganismo se analizaron, por electroforesis en gel de poliacrilamida y por Western Blotting, aquellas fraccciones con la mayor actividad específica. Se demostró que el material viral se purificó y concentró en las últimas fracciones del gradiente. Mediante la electrolisis y el Western Blotting se observaron las bandas correspondientes a las proteínas estructurales del virus de la hepatitis A.

The purification and protein characterization of one of the Cuban isolated strains of hepatitis A virus was carried out. For this, it was necessary to separate the virus from the infected cell by extraction steps with detergents, concentration by ultrafiltration and finally, ultracentrifugation in saccharoseglycerol discontinuous gradient. Protein concentration, as well as the antigenic activity in the different fractions of the gradient were determined. For the protein characterization of the microorganism, those fractions with the greatest specific activity were analyzed by polyacrylamide gel electrophoresis and by Western blotting. It was shown that the viral material was purified and concentrated in the last fractions of the gradient. Bands corresponding to the structural proteins of hepatitis A were observed through electrophoresis and Western blotting.

Uretritis por Haemophilus influenzae serotipo b: Reporte de un caso

Se presenta el caso de un paciente con antecedentes de esquistosomiasis haematobium, procedente de Mozambique, que ingresa en el Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kourí" por presentar molestias al orinar y secresión uretral purulenta. Se aisló Haemophilus influenzae serotipo b, biotipo IV, de la uretra. La cepa resultó ser sensible a la ampicilina, cloranfenicol, ceftriaxona y norfloxacina y resistente a la tetraciclina y eritromicina. El paciente evolución hacia la curación luego de recibir tratamiento con norfloxacina. Se realiza un comentario sobre el papel de este microorganismo como patógeno de transmisión sexual.

A case of a patient with schistosomiasis haematobium history, from Mozambique, is presented. This patient was admitted in the Institute of Tropical Medicine for having urination troubles and purulent urethral secretion. Serotype B Haemophilus influenzae, biotype IV of the urethra, was isolated. The strain was sensitive to ampicillin, chloramphenicol, ceftraxione, and norfloxacin, and resistant to tetracycline and erythromycin. The patient got better after receiving treatment with norfloxacin. A comment is made on the role of this microorganism as a sexual transmission pathogen.

Identificación por ELISA de agentes productores de efecto citopático ligero aislados durante la epidemia de neuropatía en Cuba. 1991

Utilizando como referencia la cepa 44/93 aislada durante la epidemia de neuropatía en Cuba en 1991 y caracterizada como productora en cultivo celular de efecto citopático ligero (ECP-L), se logró la normalización de un ELISA para la identificación rápida de otras cepas con similar efecto. El ensayo consistió en un ELISA tipo sandwich donde las condiciones seleccionadas para cada reactivo (10 myg/mL para el anticuerpo de recubrimiento, 1 mg/mL para el antígeno y dilución 1/2 000 para el conjugado) permitieron una adecuada discriminación entre el antígeno y el control de antígeno para la cepa de referencia empleada. La evaluación de un panel de cepas virales de referencia y de otras cepas productoras de ECP-L, mostró un 100 % de coincidencia entre este método y el aislamiento en cultivo celular. Los resultados obtenidos nos permiten recomendar la utilización de este ensayo como una alternativa más precisa en la identificación de estos agentes.

Using as a reference the strain 44/93 isolated during the neuropathy epidemy in 1991 and characterized as a producer of a light cytopathic effect (L-CPE), it was possible the standardization of an ELISA for the fast identification of other strains with similar effect. The assay consisted in a sandwich-type ELISA where the conditions selected for each reactive (10 mug/mL for the coating antibody, 1 mg/mL for the antigen, and dilution 1/2 000 for the conjugate) allowed to have an adequate discrimination between the antigen and the antigen control for the reference strain used. The evaluation of a panel of reference viral strains and of other L-CPE-producing strains showed a 100 % of coincidence between this method and the isolation in cellular culture. The results obtained permit us to recommed the use of this assay as a more precise alternative to identify these agents.

Clasificación en subgrupos de cepas del virus sincitial respiratorio aisladas de un brote en Ciudad de La Habana

Se detectó un alto número de casos de enfermedades respiratorias agudas en niños menores de 1 año, ingresados en un hospital de Ciudad de La Habana. De 93 pacientes estudiados se obtuvieron 25 cepas del virus sincitial respiratorio. Los aislamientos virales fueron multiplicados en células HEP-2, y después de observarse un efecto citopático del 80 % se clasificaron en subgrupos por la técnica de inmunofluorescencia indirecta, utilizando anticuerpos anti-proteína G del virus sincitial respiratorio. Todas las muestras estudiadas se clasificaron dentro del subgrupo A. Este tipo de estudio es el primero realizado en nuestro país, lo cual nos permitió profundizar en la causa viral de estas enfermedades y conocer que durante el brote circuló el subgrupo A del virus sincitial respiratorio.

A high number of acute respiratory diseases was detected among children under one year admitted in a hospital of Havana City. 25 respiratory syncytial virus strains were obtained from 93 patients studied. Viral isolations were multiplied in HEP-2 cells and after observing a cytopathic effect of 80 %, they were classified into subgroups by the indirect immunofluorescence technique, using anti-protein G antibodies from the respiratory syncytial virus. All the samples studied were classified within subgroup A. It is the first time a study like this is conducted in our country, which allowed us to deepen into the viral cause of these diseases and to know that the subgroup A of the respiratory syncytial virus circulated during the outbreak.