Revista Cubana de Medicina Tropical

La emergencia de la fiebre hemorrágica del dengue en las Américas. Reemergencia del dengue

El dengue es en la actualidad, la arbovirosis humana de mayor importancia, constituye la principal causa de hospitalización y muerte entre los niños del sudeste de Asia. En el mundo 2/5 de la población mundial viven en áreas en riesgo para el dengue. En 1997, más de 100 países reportaron epidemias y se estimaron más de 50 000 000 de casos y 25 000 defunciones. En las Américas se sigue hoy en día el mismo camino por el que transitaron los países asiáticos hace 40 años. En 1997, 27 países del área reportaron casos de dengue y en 14 de ellos se documentaron casos de dengue hemorrágico, se registraron en total 387 459 casos de dengue clásico y 11 645 casos de dengue hemorrágico. En las últimas 2 décadas el dengue ha aumentado de forma significativa en nuestra región con altas y bajas en la incidencia anual desde 1981. Una observación interesante es que cada 3 ó 4 años hay disminución y aumento posterior de la incidencia en forma cíclica, aunque la tendencia es ascendente. En relación con el dengue hemorrágico, la situación no es más favorable. La epidemia cubana de 1981 fue totalmente extemporánea en la región. En 1989, 8 años después, ocurre en Venezuela la segunda epidemia importante de dengue hemorrágico, y a partir de ese momento la tendencia de esta forma clínica de la enfermedad ha sido creciente. A pesar de la gravedad de la situación, en nuestra área no se vislumbran perspectivas favorables para el control del dengue. Los factores de emergencia y reemergencia están presentes y se incrementan año tras año. Las políticas neoliberales y la consecuente privatización de los servicios de salud en la mayoría de los países nos permiten avizorar, en nuestra región, un futuro sombrío en cuanto al desarrollo del dengue y su forma grave, la fiebre hemorrágica del dengue/síndrome de choque del dengue.

Dengue is at present the most important human arbovirosis. It is the main cause of hospitalization and death among children from southeast Asia. Two fifth of the world population live in dengue risk areas. In 1997, over 100 countries reported epidemic and more than 50 000 000 cases and 25 000 deaths were estomated. Nowadays, the Americas is passing through the same situation Asia faced years ago. In 1997, 27 countries reported cases of dengue, and in 14 of them cases of dengue hemorrhagic fever were documented. In all, 387 459 cases of classic dengue and 11 645 of dengue hemorrhagic fever were registered. During the last 2 decades dengue has increased significantly in our region with ups and downs in the annual incidence since 1981. It should be remarked that every 3 or 4 years there is a cyclic decrease and a further increase of the incidence, though it trends to rise. As regards dengue hemorrhagic fever, the situation is not more favorable. The Cuban epidemic that appeared in 1981 was completely untimely in the region. In 1989, 8 years later, the second important dengue hemorrhagic fever epidemic emerged in Venezuela, and from that moment on there has been an increasing tendency of this clinical form of the disease. The factors of the emergence and reemergence are present and rise year after year. The neoliberal policies and the consequent privatization of the health services in most of the countries allow us to watch a gloomy future in relation to the development of dengue and its severe form, the dengue hemorrhagic fever/dengue shock syndrome.

Origen bacteriano de la enfermedad diarreica aguda en Mérida, Venezuela

En el período comprendido entre julio de 1993 y mayo de 1995, se estudiaron 464 muestras de heces procedentes de niños menores de 5 años con enfermedad diarreica aguda (EDA) y 149 que conformaron el grupo control, éstas fueron recolectadas en la Emergencia Pediátrica del Instituto Autónomo Hospital Universitario de Los Andes Mérida, Venezuela. Se investigó la presencia de los agentes bacterianos, parasitarios y virales recomendados internacionalmente. Las bacterias aisladas como patógenos únicos con mayor frecuencia fueron: Shigella (42,85 %), Shigella sonnei fue la especie más encontrada (66,67 %); le siguieron en orden de frecuencia las Campilobacterias termotolerantes, Aeromonas sp. y Escherichia coli enteropatógena, con 15; 15 y 13,5 %; respectivamente. Se encontró además, 6,5 % de parásitos y 24,12 % de Rotavirus. Se concluye que en el lapso estudiado el origen infeccioso y sobre todo el bacteriano es una causa importante de EDA en Mérida.

464 stool specimens from children under 5 with acute diarrheal disease and other 149 specimens from the control group were studied from July, 1993, to May, 1995. The specimens were collected at the Pediatric Emergency Departmen of the Autonomous Institute of the Teaching Hospital of Los Andes, Mérida, Venezuela. The presence of the internationally recommenden bacterial, parasitary and viral agents was investigated. The commonest bacteria isolated as unique pathogens were: Shigella (42.85 %), Shigella sonnei, the most found, (66.67 %), and the thermotolerant Campylobacter, Aeromonas sp. and enteropathogenous Escherichia coli, with 15; 15 and 13.5 %, respectively. 6.5 % of parasites and 24.12 % of Rotavirus were also found. It was concluded that in the period of time under study the infectious and mainly, the bacterial origin is an important cause of acute diarrheal disease in Mérida.

Respuesta humoral específica en ratones Balb/c inoculados con una librería genómica de expresión de Trypanosoma cruzi

Se construyó una librería genómica de expresión de Trypanosoma cruzi (T. cruzi) utilizando como vector el plásmido pcDNA3, con la cual se inmunizaron ratones machos de la línea isogénica Balb/c por la vía intramuscular. Se empleó un grupo control positivo al que se le administró antígenos solubles de T. cruzi y otros 2 grupos que recibieron ADN genómico y plásmido, respectivamente; un grupo no recibió inmunización. A todos los animales se les extrajo sangre semanalmente hasta la cuarta semana y 2 semanas después de la reinmunización, para estudiar la respuesta de anticuerpos específicos contra los antígenos del microorganismo mediante un ensayo inmunoenzimático indirecto (ELISA). Se evidenció un aumento significativo de anticuerpos específicos en los animales reinmunizados con 50 myg de la librería y en el grupo inmunizado con los antígenos solubles de T. cruzi.

A genomic expresion library of Trypanosoma cruzi (T. cruzi) was made using plasmid pcDNA3 as a vector, with wich male mice from the Balb/c isogenic line were intramuscullary inoculated. It was used a positive control group that was administered soluble antigens of T. cruzi. Other 2 groups received genomic and plasmid DNA, respectively. One group was not immunized. Weeckly blood samples were obtained from all the animals until the fourth week and 2 weeks after reinmunization to study the response of specific antibodies against the microorganism antigens by an indirect immunoenzimatic assay (ELISA). It was observed a significant increase of specific antibodies in the animals reinmunized with 50 mug of the library, as well as in the group immunized with soluble antigens of T. cruzi.

Análisis comparativo de la resistencia a insecticidas en cepas de Culex quinquefasciatus, provenientes de Camagüey

Se estudiaron los niveles de resistencia a insecticidas organofosforados, carbamatos y piretroides en 14 cepas de Culex quinquefasciatus provenientes de Camagüey, mediante bioensayos y pruebas bioquímicas en larvas con y sin sinergistas. La utilización de electroforesis en gel de poliacrilamida (PAGE) permitió identificar 8 patrones de esterasas destacándose: A3A6B6, B1B6 y B1A6B6 con las mayores frecuencias de aparición. Se apreció que después de 6 años de haber sido suspendida la aplicación de malatión, aún se mantiene la resistencia a este químico. También existió resistencia cruzada a propoxur y comienzan a desarrollarse mecanismos de detoxificación para deltametrina. Los mecanismos fisiológicos más importantes resultaron ser: esterasas elevadas en la resistencia a malatión, AchE modificada para propoxur y oxidasas de función múltiple para deltametrina. En relación con las frecuencias génicas, el mecanismo de la AchE modificada se encontró más extendido que el de las esterasas elevadas, en estas poblaciones de mosquitos de la región central de Cuba.

The organophosphate, carbamate and pyrethroid resistance levels in 14 strains of Culex quinquefasciatus from Camagüey were studied by bioassays and biochemical tests in larvae with or without synergists. The use of electrophoresis in polyacrylamide gel (PAGE) allowed to identify 8 patterns of esterases, among which A3A6B6, BiB6 and BlA6B6 were the most frequent. It was observed that 6 years after the suspension of malathion, there is still resistance to this product. There was also cross resistance to propoxur. Detoxification mechanisms for deltamethryn are being developed. The most important physiological mechanisms were: elevated esterases in the resistance to malathion, modified AchE for propoxur and oxidases of multiple function for deltamethryn. In relation to the genic frequencies, the modified AchE mechanisms was more extended than that of the elevated esterases in these populations of mosquitoes of the central region of Cuba

Obtención de anticuerpos monoclonales contra IgA secretora humana

Con el objetivo de determinar los niveles de IgA en las secreciones, los autores se propusieron obtener anticuerpos monoclonales (AcMs) contra esta inmunoglobulina y demostrar su posible utilización en el desarrollo de métodos de cuantificación. Se obtuvieron 6 AcM, 1 contra el componente secretor (CS) y 5 contra cadena pesada (CP) de la inmunoglobulina A (IgA) humana. Se utilizó como inmunógeno IgA purificada a partir de calostro humano. A 2 AcMs, uno contra CS y otro contra CP se les determinó el isotipo de inmunoglobulina (IgG2a e IgG1, respectivamente), se les realizó electroforesis en gel de poliacrilamida en presencia de duodecilsulfato de sodio y b-mercaptoetanol, e inmunotransferencia para la determinación de su especificidad. Se detectó IgA secretora en muestras de saliva comparando el AcM anti-CS obtenido en el laboratorio del Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kourí" (IPK) con uno comercial (Sigma Chemical Co.) y se obtuvo similitud de comportamiento. El AcM contra CS (IPK) se utilizó para detectar IgA específica a LPS ogawa en personas vacunadas con una cepa atenuada de Vibrio cholerae y se encontraron diferencias evidentes entre los niveles antes y después de la inmunización. El AcM anti-CP fue utilizado para la confección de un sistema simulado, tipo ELISA. El límite de detectabilidad fue de 9,89 ng/mL.

In order to determine the IgA levels in secretions, the authors engaged themselves to obtain monoclonal antibodies against this immunoglobulin and to show their possible utilization in the development of quantitation methods. 6 monoclonal antibodies were obtained: one against the secretoy component (SC) and five against the heavy-chain (HC) of IgA. IgA purified from human colostrum was used as immunogen (HC). The immunoglobulin isotypes (IgG2a and IgG1) were determined in 2 monoclonal antibodies, one against SC and the other against HC. Polyacrylamide gel electrophoresis was performed in the presence of sodium dodecyl sulphate and b-mercapto-ethanol. Immunotrasnference was also carried out to determine their specificity. Secretory IgA was detected in saliva specimens. The anti-SC monoclonal antibody obtained in the laboratory of the "Pedro Kourí" Institiute of Tropical Medicine (IPK) was compared with a commercial one (Sigma Chemical Co.), and a similar behaviour was observed. The monoclonal antibody against SC (IPK) was used to detect IgA specific to LPS ogawa in persons vaccinated with an attenuated strain of Vibrio cholerae. Marked differences were found between the levels before and after immunization. The anti-HC monoclonal antibody was utilized to make an ELISA-like simulated system. The detection limit was 9.89 ng/mL.

Vigila: un instrumento para la vigilancia epidemiológica de enfermedades transmisibles

Se describe un instrumento para la vigilancia epidemiológica de enfermedades transmisibles (VIGILA), basado en la generalización de una modificación del modelo estadístico propuesto por Serfling para el pronóstico de los niveles endémicos de las tasas de enfermedades transmisibles en un período de 52 semanas (1 año). La comparación de las tasas observadas con las tasas pronosticadas permite detectar patrones inusuales del indicador. Se propone como señal de alerta, la observación de tasas por encima del límite superior del intervalo de pronóstico durante períodos sucesivos. La implementación de este método en un programa para computadora posibilita su introducción y aplicación en las unidades de vigilancia epidemiológica de los diferentes niveles del sistema de salud.

It is described an instrument for the epidemiological surveillance of communicable diseases (Vigila) that is based on the generalization of a modification of the statistical model proposed by Serfling for the prognosis of the endemic levels of the rates of communicable diseases in a period of 52 weeks (1 year). The comparison made between the observed rates and the prognosticated rates allows to detect unsual patterns of this indicator. The observation of rates over the higher limit of the prognosis interval during succesive periods is suggested as a signal of alert. The introduction of this method in a computer program allows its application in the epidemiological surveillance units at the different levels of the health system.

Inmunogenicidad de la vacuna Heberbiovac-HB a las dosis de 10,5 y 2,5 m g en niños escolares de 6 a 9 años de edad

Aplicamos la vacuna recombinante Heberbiovac-HB contra el virus de la hepatitis B, a las dosis de 10,5 y 2,5 my g a 3 grupos de niños, con edades entre 6 y 9 años, con un esquema de vacunación a los 0, 1 y 6 meses; y se comparó la inmunogenicidad alcanzada entre las dosis. La seroconversión con títulos protectores alcanzada a los 2 meses varió desde 88,9 % con 10 my g hasta 79,4 % con 2,5 my g, mientras que a los 7 meses fue superior al 98 % en los 3 grupos. La media geométrica con 10 my g fue 136,63 y 2 356,8 UI/L-1; con 5 my g de 77,62 y 1 958,9 UI/L-1; y con 2,5 my g de 32,15 y 376,3 UI/L-1, a los 2 y 7 meses, respectivamente. Se aprecia un elevado poder inmunogénico de la vacuna a las dosis de 10 y 5 my g, semejantes en sus resultados, mientras que la dosis de 2,5 my g, aunque inmunogénica, no logra una respuesta deseable. Estos resultados plantean la posibilidad de utilizar una dosis inferior (5 my g), para una población infantil de bajo riesgo, lo cual favorece el costo-beneficio.

The Heberbiovac-HB recombinant hepatitis B vaccine was administered at dosages of 10.5 and 2.5 mu g in 3 groups of children aged 6-9 with a vaccination schedule at 0, 1 and 6 months of age. The immunogenecity attained between dosages was compared. The seroconversion with protective titres obtained at 2 months varied from 88.9 % with 10 mu g to 79.4 % with 2.5 mu g, whereas at 7 months it was higher than 98 % in the 3 groups. The geometrical mean with 10 mg was 136.63 and 2 356.8 UI/L-1; with 5 mu g, 77.62 and 1 958.9 UI/L-1; and with 2.5 mu g, 32.15 and 376.3 UI/UL-1, at 2 and 7 months, respectively. A high immunogenic power of the vaccine is observed at dosages of 10 and 5 mu g with similar results. In spite of the fact that the dosage of 2.5 mu g is inmunogenic, the response is not desirable. These results state the possibility of using a lower dosage (5 mu g) for a low risk infantile population, which favors the cost-benefit.

Identificación de cepas de Aeromonas de origen clínico con perfiles fenotípicos atípicos

Un total de 47 cepas de Aeromonas aisladas de pacientes con gastroenteritis fue analizado para 40 caracteres fenotípicos y para la evaluación de la taxonomía numérica basada en 27 pruebas discriminatorias. Se evidenció que los aislamientos clínicos mostraron una relativa distancia fenotípica y los grupos de cepas que mostraron perfiles atípicos fueron comparados con las especies tipos, mediante los actuales esquemas de identificación.

A total of 47 strains of Aereomonas isolated from patients with gastroenteritis was analized for 40 phenotypical characters and for evaluating the numeric taxonomy based on 27 discriminatory tests. It was proved that the clinical isolates showed a relative phenotypical distance and the groups of strains that had atypical profiles were compared with the type species by the present identification schemes.

Evaluación de la prueba de la pirazinamidasa para la determinación de la susceptibilidad de Mycobacterium tuberculosis a la pirazinamida

Se utilizó la prueba de la pirazinamidasa para la determinación de la susceptibilidad frente a la pirazinamida en 55 cepas de Mycobacterium tuberculosis recibidas en el Laboratorio Nacional de Referencia e Investigaciones en Tuberculosis y Micobacteria del Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kourí" durante el primer semestre de 1997. Al comparar los resultados obtenidos con el método de las proporciones se obtuvo una correlación del 83,6 % de sensibilidad, con 16,4 % de falsos positivos. Se demostró que la prueba de la pirazinamidasa no debe sustituir el método de las proporciones.

The pyrazinamidase test was used to determine susceptibility to pyrazinamide in 55 strains of Mycobacterium tuberculosis received at the National Laboratory of Reference and Research of Tuberculosis and Mycobacteria of the "Pedro Kourí" Institute of Tropical Medicine during the first semester of 1997. On comparing the results obtained with the method of proportions, it was attained a correlation of 83.6 % of sensivity with 16.4 % of false positives. It was proved that the pyrazinamidase test should not replece the method of proportions.

Determinación de la concentración mínima inhibitoria de fluconazol frente a Cryptococcus neoformans

Se determinó la concentración mínima inhibitoria de fluconazol en 36 cepas de Cryptococcus neoformans var. neoformans mediante un micrométodo de dilución en caldo casitona teniendo en cuenta que es uno de los antifúngicos de mayor uso en nuestro país para el tratamiento de la meningitis criptocósica, segunda micosis oportunista en orden de frecuencia y la de más alta letalidad en los pacientes con el síndrome de inmunodeficiencia adquirida (sida). La concentración mínima inhibitoria de las cepas estudiadas osciló en un rango de 0,125 hasta más de 64 my g/mL, para una media geométrica de 2,38 my g/mL; el 50 % de las cepas fue inhibido con 4 my g/mL y la menor concentración que inhibió el 90 % fue de 16 my g/mL. Se señala la importancia de continuar este tipo de estudios in vitro para la detección de la aparición de resistencia de C. neoformans a los antifúngicos.

The minimum inhibitory concentration of fluconozole was determined in 36 strains of Cryptococcus neoformans var. neoformans by a casitone broth microdilution method, taking into account that it is one of the most used antifungal agents in our country for the treatment of cryptococcal meningitis, the second opportunistic mycosis in order of frequency and that with the highest lethality among AIDS patients. The minimum inhibitory concentration of the studied strains ranged 0.125 to more than 64 µg/mL for a geometrical mean of 2.38 µg/mL. 50 % of the strains were inhibited with 4 µg/mL and the least concentration that inhibited 90 % was 16 µg/mL. It is stressed the importance of continuing this type of in vitro studies to detect the appereance of resistance of C. neoformans to antifungal agents.

Diagnóstico de un brote de infección respiratoria aguda en niños menores de 3 años en Santiago de Cuba

En el mes de noviembre de 1996 se produjo un brote de infección respiratoria aguda en niños menores de 3 años en la provincia de Santiago de Cuba. Se recibieron 7 muestras de exudados nasofaríngeos para determinar el agente causal del brote, que fueron examinadas por la técnica de inmunofluorescencia indirecta (4 muestras positivas, 57,14 %). Se inocularon en cultivo de células MDCK y los casos que presentaron hemadsorción positiva (6 aislamientos, 85,71 %) fueron analizados por las técnicas de inmunofluorescencia indirecta (6 muestras positivas, 100 %) e inmunoperoxidasa (5 muestras positivas, 83,3 %). Todas las muestras positivas se clasificaron como influenza A subtipo H3N2 lo que corrobora lo reportado en la literatura con respecto a la circulación de este virus durante ese año, tanto nacional como internacionalmente. Este trabajo permitió conocer el agente causal del brote de infección respiratoria estudiado y determinar la circulación del subtipo influenza A H3N2 en la provincia analizada.

In November, 1996, there was an outbreak of acute respiratory infection in children under 3 in the province of Santiago de Cuba. 7 samples of nasopharyngeal exudates were received to determine the causal agent of the outbreak by indirect immunofluorescence technique (4 positive samples, 57.14 %). They were inoculated in MDCK cells culture and those cases that presented positive hemadsorption (6 isolates, 85.71 %) were analyzed by indirect immunofluorescence techniques (6 positive samples, 100 %) and immunoperoxidase (5 positive samples, 83.3 %). All the positive smaples were classified as influenza A (subtype H3N2) which confirms what is reported in literature in relation to the circulation of this virus during that year at the national and international level. This paper allowed to know the causal agent of the studied outbreak of acute respiratory infection and to determine the circuclation of the influenza A sybtype H3N2 in that province.

Diagnóstico serológico de la leptospirosis humana mediante 3 variantes de la técnica de hemaglutinación pasiva

Se realizó un estudio serológico para evaluar 3 variantes de la técnica de hemaglutinación pasiva (HA), con la utilización de eritrocitos de carneros frescos y formalinizados (HC) y glóbulos rojos humanos grupo O Rh negativo formalinizados (HH), no se detectaron diferencias estadísticas significativas de los resultados de la HA y la HC y entre la HC y la HH. Sólo se presentó reacción inespecífica en 2 de los 200 sueros estudiados empleando la HH y la HC. Se observaron anticuerpos heterófilos solamente en el 2,5 % de los sueros estudiados por HH y en el 100 % mediante HC. Se determinaron los parámetros cualitativos para las variantes empleadas y así se evaluó la repetibilidad y reproducibilidad de la variante más útil.

A serological study was conducted to evaluate 3 variants of the possive hemagglutination technique (HA) with the use of formalized erythrocytes of fresh lamb (HC) and of formalized Type O, Rh-negative human red blood cells (HH). No significant statistical difference were found between the results of HA and HC and between HC and HH. Unspecific reaction was only observed in 2 of the 200 sera studied by HH and HC. Heterophil antibodies were just observed in 2.5 % of the sera studied by HH, and in 100 % of the sera studied by HC. The qualitative parameters were determined for the variants used, and this way the repetition and reproducibility of the most useful variant was evaluated.

Evaluación del antígeno-RPR elaborado por la Empresa de Productos Biológicos "Carlos J. Finlay"