Revista Cubana de Medicina Tropical

Diagnóstico de Helicobacter pylori mediante la reacción en cadena de la polimerasa

Se hizo una revisión con el objetivo de dar a conocer la técnica de la reacción en cadena de la polimerasa en el diagnóstico de Helicobacter pylori, difundir los beneficios y futuras aplicaciones en el área. La reacción en cadena de la polimerasa es una herramienta biotecnológica muy útil para el diagnóstico de bacterias o virus de difícil cultivo in vitro. Helicobacter pylori es una bacteria gramnegativa de difícil cultivo in vitro que coloniza la parte superior del tracto gastrointestinal y cuyo diagnóstico es de suma importancia, porque su presencia por largos períodos está asociada con gastritis crónicas, úlceras pépticas y carcinomas gástricos. Ha sido utilizada para detectar la presencia de H. pylori en muestras de biopsias gástricas, jugos gástricos, heces, saliva, placa subgingival, mediante fragmentos de genes de H. pylori que amplifican determinadas regiones de ADN

The Polymerase Chain Reaction (PCR) is a biotechnological useful tool for the diagnosis of bacteria or viruses with high in vitro growth requirements. Helicobacter pylori (H. pylori) is a Gram-negative bacterium that colonizes the upper part of the gastrointestinal tract and its diagnosis is very important since it is associated with chronic gastritis, peptic ulcer, and gastric carcinomas. Because of the difficult growth requirements of the H. pylori, the PCR is being used for its diagnosis in samples of gastric biopsy, gastric juices, feces, saliva and subgingival plaque using specific H. pylori DNA fragments. This paper is a literature review that outlines the use of PCR in the diagnosis of H. pylori, the benefits and future applications of this technique in this area

HIV/AIDS in the small cities: a Brazilian epidemiology study

Se detectó al realizar el análisis de los datos sobre la conducta social y morbilidad de los individuos encontrados seropositivos en una prueba de VIH realizada en una pequeña ciudad brasileña lo siguiente: diseminación del virus de inmunodeficiencia humana por la vía heterosexual; perfil de la epidemia similar al del momento de la aparición del VIH/SIDA en el mundo subdesarrollado; cambio de la conducta sexual en las personas cuando se dieron cuenta de que tenían el VIH; la importancia del acceso a la atención de salud en la reducción de la morbilidad de los individuos afectados con el VIH y de la transmisibilidad de esta enfermedad en el seno de la comunidad. La edad de la población afectada osciló entre los 20 y los 49 años y presentó un bajo nivel socioeconómico donde el uso de drogas ilícitas no constituyó un factor de riesgo, si bien el consumo de bebidas alcohólicas fue predominante. La morbilidad por VIH fue de menos crítica a moderada y la respuesta al tratamiento fue excelente, registrándose pocos efectos colaterales. Las embarazadas tuvieron acceso al tratamiento cuando todavía disfrutaban de un buen estado de salud, pero con niveles significativos de carga viral para la transmisión vertical del VIH

Analyzing social, behavior and morbidity data of serum-positive individuals to the test anti-HIV in a Brazilian town city, they were detected: diffusion of the virus of the human immunedeficiency by via heterosexual, in epidemic profile similar to the HIV/AIDS appearance time in the world economically underdeveloped; change of sexual behavior from people when they notice they were involved with HIV; importance of the access to the attendance in the reduction of the morbidity of infected people with HIV and for the transmissibility of this disease in the community. The affected population was between 20 and 49 years and lower socioeconomic level, where the illicit use of drugs was not a risk event, the use of alcoholic drink was an important prominence. The morbidity owed HIV was from low seriousness to moderate one and the answer to the treatment was excellent, with just few collateral effects. Pregnant women had access to the treatment when they were still in good health conditions, but with levels of significant viral load for the vertical HIV transmission

Diferentes patrones de circulación dentro de los subgrupos A y B del virus sincitial respiratorio humano en algunas provincias de Cuba

Se realizó la secuenciación nucleotídica de la región del tercio C-terminal de la proteína G de 37 muestras de exudados nasofaríngeos, de niños menores de 1 año provenientes de algunas provincias de Cuba durante 5 períodos epidémicos (1995-2000), para conocer los patrones de circulación de cepas del virus sincitial respiratorio humano; el cual se clasifica en 2 subgrupos antigénicos A y B, y cada uno contiene múltiples variantes. El subgrupo A circuló durante todos los años, el subgrupo B se detectó solamente durante el año 2000. Dentro del subgrupo A se observó la presencia de cepas con 2 tamaños diferentes de la proteína G (297 aa y 298 aa), mientras que para el subgrupo B fue observado un único tamaño (295 aa). El análisis filogenético permitió identificar 5 y 2 genotipos dentro de los subgrupos A y B, respectivamente. Los virus de Cuba se relacionaron filogenéticamente con cepas de otras partes del mundo. Dentro del subgrupo A se encontraron 2 cepas, las cuales fueron muy similares a la cepa prototipo Long. Casi todas las cepas del año 2000 de ambos subgrupos, se agruparon filogenéticamente con cepas que circularon en Sudáfrica durante ese mismo período.

The nucleotide sequencing of the protein G C-terminal region of 37 samples taken from nasopharyngeal washings of under one-year old children from some Cuban provinces was made for 5 epidemic periods (1995-2000) to find out the circulation patterns of strains of human respiratory syncytial virus that is classified in two antigenic subgroups known as A and B; each of them contains multiple variants. Subgroup A has circulated during all these years but subgroup B was detected only in the year 2000. The presence of strains with two different sizes of protein G (297 aa and 298 aa) was observed whereas subgroup B showed only one size (295 aa). Phylogenetic analysis allowed identifying 5 and 2 genotypes within subgroups A and B respectively. Viruses present in Cuba were phylogenetically related to the strains of other parts of the world. Subgroup A comprised two strains very similar to Long prototype strain. Almost all the strains of both subgroups in the year 2000 phylogenetically related with strains that circulated in South Africa during the same period

Inmunización con subgenoteca de Leishmania amazonensis protege contra el reto a ratones BALB/c

Se construyó una genoteca de Leishmania amazonensis en vector de expresión en células eucariotas (pEF1HisA, pEF1HisB, pEF1HisC). Se prepararon 2 subgenotecas con un número aproximado de 500 clones cada una y ratones BALB/c fueron inmunizados con 50 mg/0,1 mL de ADN de cada una; 2 inmunizaciones por vía IM, con 15 d de intervalo fueron realizadas. Grupos de ratones controles fueron inmunizados con ADN del plásmido vacío, con antígeno soluble del parásito (100 mg/0,1 mL) y solución salina fisiológica. Se midió el tamaño de las lesiones durante 12 semanas y al final del experimento, la carga parasitaria en los sitios de lesión fue determinada por el método de microtitulación en placas. Los ratones inmunizados con ADN 1, controlaron el tamaño de las lesiones, así como también los inmunizados con antígenos solubles, lo que alcanzó diferencia estadística (p< 0,05) en relación con el resto de los grupos, cuyas lesiones aumentaron de manera creciente. La carga de parásitos encontrada en los sitios de lesión corroboró los resultados anteriores, encontrando un número de promastigotes significativamente menor en aquellos que habían sido protegidos. Se concluyó que en la subgenoteca ADN1 deben existir genes, o fragmentos de genes, cuya expresión in vivo resulta protectora contra el reto, en el modelo murino empleado

A genomic library of Leishmania amazonensis in expression vector of eukaryote cells (pEF1HisA, pEF1HisB, pEF1HisC) was prepared. Also two subgenomic libraries having each 500 clones approximately were created and BALB/c mice were immunized with 50 mg/0,1 mL of DNA from each. Two immunizations were administered intramuscularly at 15-day interval. Groups of control mice were immunized with DNA from empty plasmid pEF1His, with soluble parasite antigen (100 mg/0,1 mL) and saline solution. The size of lesions was measured for 12 weeks and at the end of the experiment, the parasite load at lesion sites was determined by plaque microtitration method. In mice immunized with subgenomic library DNA1 and with soluble antigens,the size of lesions was controlled, which reached an statistical difference (p< 0,05) in relation to the rest of groups whose lesions increased. The parasite load found in lesion sites confirmed the previous results; the number of promastigots was significantly lower in those mice already protected. It was concluded that in subgenomic library DNA1 there should be genes or gene fragments whose in vivo expression induces protective immune response against the challenge in the murine model used

Determinación de la actividad glutatión-S-transferasa en cepas de Culex quinquefasciatus de Cuba y otros países de América Latina

Se optimizó el micrométodo para la determinación de la actividad específica de glutatión S-transferasa en una cepa seleccionada en el laboratorio con lambdacialotrina por 6 generaciones (SP6). Los valores de saturación para glutatión reducido y 1-cloro 2,4-dinitrobenceno fueron 15 mM y 40 mM, respectivamente; el tiempo óptimo de lectura de la reacción que permitió diferenciar la cepa resistente SP6 de la susceptible de referencia SLAB resultó de 3 min. A través del micrométodo ya optimizado se probaron 4 cepas procedentes de Cuba (SANTIAGO DE CUBA, SD4, QUIBÚ y SP6), una de Venezuela (MIRANDA), una de Colombia (MEDELLÍN) y una de Brasil (RÍO DE JANEIRO). Los más altos valores de actividad de la enzima fueron observados en la cepa MIRANDA. Sin embargo, este mecanismo de destoxificación se encontró a muy baja frecuencia en todas las cepas, indicando que no desempeña un papel importante en la resistencia a insecticidas en las cepas de estudio. Se compararon los valores de GST con las frecuencias de esterasas inespecíficas y acetilcolinesterasa modificada para cada una de las cepas estudiadas

In the present paper, we standardized a microtitration assay for the determination of specific activity of glutathione-S-transferase using a Culex quinquefasciatus strain selected in lab with pyrethroid insecticide lambdacyhalothrin for 6 generations (SP6). The saturation values for reduced glutathione and 1-chlorine 2,4-dinitrobenzene were 15 mM and 40 mM, respectively; we also estimated that 3 minutes was the optimal time in order to differentiate resistant strain SP6 from the susceptible reference strain S-Lab (p>0.05). Additionally, the optimized microtitration method allowed testing 4 Culex strains from Cuba (SANTIAGO DE CUBA, SD4, QUIBU AND SP6), one from Venezuela (MIRANDA), one from Colombia (MEDELLIN) and the other from Brazil (RIO DE JANEIRO) for glutathione-S-transferase activity. MIRANDA showed the highest activity for this detoxifying enzyme. However, the mechanism of detoxyfication in all the strains was very unfrequent, which indicates that its role in resistance to insecticide for all the studied strains is not so important. Glutathione-S-transferase values were compared with non-specific esterase and altered acetylcholinesterase frequencies for each of the studied strains

Fecal samples were weekly obtained from children under 3 years of age to isolate non-polio poliovirus and enterovirus and to expand the knowledge on circulation of vaccine-derived viruses during mass campaigns. The steady vaccination schedules allow the circulation of these viruses for long periods of time. The interference of non-polio enterovirus by vaccine poliovirus was demonstrated in children. However, the low percentages of non-polio enterovirus did not show significant differences whereas these differences were significant in high percentages of vaccine poliovirus isolated in children under one year-old in comparison with those of 1 and 2 years of age. Based on this contradiction, mathematical calculations estimated the silent circulation of poliovirus that in turn made it possible to draw simulated curves. The results were later confirmed in another research work by using immunological methods

Algunas características y opiniones de los egresados de la maestría en Epidemiología: La Habana 1984-1999

Se analizó a partir de los datos del archivo docente la edad, el sexo, la procedencia y profesión de los estudiantes cubanos, extranjeros, así como las opiniones de una muestra de egresados cubanos, hasta el año 1999 mediante un formulario de encuesta dirigido a evaluar el impacto del curso. El Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kourí" desarrolla la maestría en Epidemiología desde el año 1984. Hasta 1999 se acumularon 254 egresados, 97 extranjeros (75 de España); 54,8 % de los cubanos proceden de las provincias Ciudad de La Habana y Habana, el promedio de edad al matricular era de 31 años en los extranjeros y 36,9 en los cubanos. La gran mayoría de los encuestados cubanos mostraron satisfacción con los conocimientos y habilidades de vigilancia e investigación adquirida, señalando que alcanzaron sus expectativas, en un curso de muy buena calidad, pero algunos señalan insatisfacción y dificultad en el tiempo destinado al módulo de Técnicas Cuantitativas, Estadística y Computación. Se concluyó que las diferencias en las provincias de procedencia y la edad en los cubanos tal vez requieren la reformulación de políticas y estrategias de formación académica que incremente su eficiencia según las necesidades. No hay diferencias de género en los cubanos y predominan los médicos. En general las opiniones sobre el curso son muy favorables

Data from the Teaching Department records on, age, gender origin and basic profession of foreign and Cuban students were analyzed, including the opinions of a sample of the Cuban graduates up to 1999 , who were administered a survey designed to evaluate the impact of the course. “Pedro Kourí” Tropical medicine Institute is giving the Master ´s course on Epidemiology since 1984. Out of the 254 graduates up to 1999, 97 were foreigners (75 from Spain); 54.8% of the Cubans came from Havana City and Havana provinces. The mean age was 31 years for foreigners and 36.9 years for Cubans. Most of the students expressed their great satisfaction with the surveillance and research knowledge and skills acquired, stating that they had met their expectations in a good quality course, but others pointed out that they were not satisfied with the time allocated to Quantitative Techniques for Epidemiological Research, Statistics and Computer science modules. It was concluded that the differences in origins and age of the Cuban students makes it necessary to reformulate academic formation policies and strategies so as to increase the educational efficiency according to individual needs. No gender differences were found in the Cuban group where physicians prevailed. Generally speaking, opinions about the course were very positive

Mycrob-1000: una alternativa para la determinación rápida del urocultivo en el nivel primario de salud

Se evalúa el uso del equipo Mycrob-1000 en la determinación de las infecciones urinarias en 4 h en un centro de atención primaria de la salud. Fueron procesadas 258 muestras de orina obtenidas por micción espontánea y como método de referencia se utilizó el recuento de unidades formadoras de colonias por mililitro de orina inoculada en placa de Petri con medio CLED. Se obtuvo 92,31 % de coincidencia entre los 2 métodos y una sensibilidad y especificidad de 79,00 y 96,95 %, respectivamente. El nivel de sensibilidad alcanzado se afectó por aspectos no relacionados directamente al equipo. Los altos valores logrados de especificidad y de coincidencia con el método de referencia favorecen su aplicación en la realización de urocultivos, posibilitando descartar en 4 ó 5 h las muestras de orina negativas y centrar el trabajo y los recursos en las positivas

The use of equipment Mycrob-1000 in detecting urinary infections in 4 hours in a primary health care center is evaluated. Two hundred fifty eight urine samples obtained from spontaneous miction were processed; the reference method was counting of colony-forming units per urine millimeter inoculated in Petri plaque in CLED medium. The coincidence rate between both methods was 92,31, with sensitivity and specificity rates of 79,00% and 96,95% respectively. The level of sensitivity was affected by factors not directly dependent on the equipment. High values of specificity and of coincidence achieved by this equipment in relation to the reference method facilitates its use in urine culture, making possible to differentiate negative urine samples in 4 or 5 hours and to focus work and resources on positive samples

Susceptibilidad antimicrobiana en cepas de Haemophilus influenzae no tipables aisladas de niños sanos

Se estudió la susceptibilidad antimicrobiana de 79 aislamientos de Haemophilus influenzae no tipables obtenidos de niños sanos, que asistieron a 2 círculos infantiles del municipio Marianao. Se encontró resistencia frente al trimetoprim/sulfametoxazol (41,77 %), tetraciclina (18,99 %), ampicilina (17,72 %), amoxicilina/ácido clavulánico (7,59 %) y el cloranfenicol (6,33 %). Se observó multirresistencia en 25,81 % de los aislamientos. De las cepas estudiadas, 100 % fue sensible a ceftriaxona, cefuroxima y norfloxacina; 28,57 % de los aislamientos resistentes a ampicilina produjeron la enzima beta lactamasa. La resistencia a cloranfenicol estuvo mediada por la producción de la enzima cloranfenicol acetil transferasa

Antimicrobial susceptibility of 79 non-typable Haemophilus influenzae isolations obtained from healthy children that attended two day-care centers in Marianao municipality. It was found resistance to trimetoprim/sulfamethoxazole (41,77 %), tetracycline (18,99), ampicilline (17,72 %), amoxicillin/clavulanic acid (7,59 %) and chloramphenicol (6,33 %). 25,81 % of isolates showed multiresistance. 100 % of studied cases was sensitive to ceftriaxone, cefuroxime and norfloxacin. 28,57 % of ampicilline-resistent isolates produced beta-lactamase enzyme. Chloramphenicol resistance was mediated by the production of chloramphenicol acetyltransferase enzyme.

Obtención de antisueros específicos para la serotipificación de Cryptococcus neoformans var: neoformans

Se propuso la obtención de antisueros en el Laboratorio de Micología del Instituto de Medicina Tropical “Pedro Kourí”, que permitiera la rápida identificación de las variedades y serotipos de Cryptococcus neoformans, dada la importancia clínico-epidemiológica que reviste su conocimiento. Mediante la inmunización de conejos con células enteras formalinizadas de los 4 serotipos de esta levadura, se obtuvieron antisueros que fueron adsorbidos con células de los serotipos heterólogos; lográndose 3 antisueros capaces de diferenciar a la var. neoformans (anti AD) y a sus respectivos serotipos (anti-A y anti-D). Este trabajo contribuirá al conocimiento de la epidemiología de esta importante enfermedad en el medio cubano, por ser la primera vez en Cuba que se logra la obtención de antisueros útiles para la identificación de los serotipos pertenecientes a la variedad neoformans, principal agente causal de la criptococosis

The obtention of antisera at the Mycology Laboratory of “Pedro Kouri” Institute of Tropical Medicine was proposed to allow the rapid identification of the varieties and serotypes of Cryptococcus neoformans, since it is very important from the clinicoepidemiological point of view to know them. By immunizing rabbits with formalized whole cells of the 4 serotypes of this yeast, it was possible to obtain antisera that were absorbed with cells of the heterologous serotypes. 3 antisera capable of differentiating the neoformans var. (anti AD) and its respective serotypes (anti-A and anti-D) were attained. This paper will contribute to the knowledge of the epidemiology of this important disease in the Cuban setting for being the first time that useful antisera are obtained in Cuba to identify the serotypes corrresponding to the neoformans variety, which is the main causal agent of criptococcosis

Uso del análisis de restricción en el control de calidad de cepa del biolarvicida cubano BACTIVEC

Se mostró la caracterización genómica de la cepa utilizada en la producción del biolarvicida Bactivec. Se compararon los patrones de digestión de la cepa de referencia 266 de Bacillus thuringiensis de la colección del Instituto Pushkin del antiguo Leningrado y 2 cepas aisladas de 2 lotes del biolarvicida. Las digestiones del ADN cromosomal se realizaron con las enzimas HindIII y EcoRI. En todos los casos se observó el mismo patrón de restricción, lo que muestra la estabilidad genética del ingrediente activo del biolarvicida Bactivec

The genomic characterization of the strain used in manufacturing biolarvicide BACTIVET was shown in this paper. Digestion patterns of Bacillus thuringiensis reference strain 266 from the collection of Pushkin Institute located in former Leningrad and of two strains isolated from 2 batches of biolarvicide were compared. Chromosomal DNA digestion was performed by enzymes Hindlll and EcoRI. The same restriction pattern was observed in all cases, which is indicative of genetic stability of the active ingredient of biolarvicide BACTIVET

Respuesta serológica por ELISA y MAT en voluntarios cubanos vacunados con vax SPIRAL®

Se estudió la seroconversión en 408 individuos vacunados y 135 placebo, incluidos en 2 ensayos clínicos de la vacuna cubana contra la leptospirosis humana. Se estudiaron 2 dosis vacunales y 5 esquemas. Seroconvirtieron de 38 vacunados (Fase I), 11 (29 %) por MAT y 12 (32 %) por ELISA, y de 33 placebo, 2 (6 %) y 3( 9 %) respectivamente. En la Fase II de 68 vacunados (dosis de 0,25 mL) y de 65 (dosis de 0,50 mL), seroconvirtieron 21 (31 %) y 16 (25 %) por ELISA respectivamente, por MAT 9 (13 %) y 7 (11 %) individuos fueron positivos. No hubo diferencias significativas entre las dosis utilizadas. La seroconversión por MAT, en 237 individuos vacunados con diferentes esquemas, fue de 22,4 %, no existiendo diferencias significativas entre estos. En la mayoría de los individuos reactivos, se encontraron niveles de anticuerpos al menos a una de las cepas vacunales. Se recomendó, buscar y evaluar otros métodos para demostrar in vivo, el nivel de protección de esta vacuna.

The seroconversion of 408 vaccinated individuals and 135 placebo included in 2 clinical trials of the Cuban vaccine against human leptospirosis was studied. 2 vaccine doses and 5 schemes were studied. Of 38 vaccinated subjects (Phase I), 11 (29 %) seroconverted by MAT and 12 (32 %) by ELISA, whereas in 33 placebo, seroconversion was observed in 2 (6 %) and 3 (9 %), respectively. In Phase II, of 68 vaccinated individuals (doses of 0.25 mL) and of 65 (doses of 0.50 mL), seroconversion was attained in 21 (31 %) and 16 (25 %) by ELISA, respectively, 9 by MAT (13 %) and 7 (11 %) were positive. There were no significant differences between the doses used. The seroconversion by MAT in 237 subjects vaccinated with different schemes was 22.4 %. No marked differences were observed between them. In most of the reactive individuals, antibody levels were found in at least one of the vaccine strains. It was recommended to search and evaluate other methods to show in vivo the level of protection of this vaccine.

Ingestión de larvas de Culex quinquefasciatus (Diptera: Culicidae), por Girardinus metallicus (Cyprinodontiformes: Poecilidae

Se obtuvieron datos sobre la ingestión de larvas de Culex quinquefasciatus, Say 1823 por Girardinus metallicus, Poey 1854 en condiciones de laboratorio y de campo, comparándose con lo reportado por otros autores para la misma especie. Se observó que en la captura de las larvas, G. metallicus no muestra la agresividad que presentan otras especies de peces larvívoros; el consumo de larvas es mayor en las hembras, mientras que los machos prefieren alimentarse de la vegetación. Por las características bioecológicas de la especie, resistencia al manejo y sobrevivencia a las siembras, más que por su actividad larvívora, se propone utilizar a G. metallicus como biorregulador de larvas de mosquitos

Data on ingestion of Culex quinquefasciatus Say 1823 larvae by Girardinus metallicus, Poey 1854 under lab and field conditions were obtained and compared to those reported on the same species by other authors. It was observed that G. metallicus is not so aggressive as other species of larvivorus fish in capturing larvae. The consumption of larvae is higher in females since males prefer feeding on vegetation. Because of the bioecological characteristics of the species, resistance to management and survival in cultural conditions, G. metallicus is recommended to be used as bioregulator of mosquito larvae