Revista Cubana de Medicina Tropical

Vigilancia seroepidemiológica de los Parainfluenza virus humano (PIVh) tipos 2 y 3 en una población infantil seleccionada en Ciudad de La Habana

The presence of antibodies against human parainfluenza viruses type 2 and 3 was studied in 1 793 sera from an infantile population under 14 years old. The hemagglutination inhibition technique was used for screening the clinical samples. Of the total of analyzed sera, 1 382 (77.1 %) were positive. The presence of antibodies against type 2 was confirmed in 320 of them (17.8 %), and against type 3 in 334 (18.6 %). The simultaneous seropositivity predominated in 805 (44.9 %). The circulation of human parainfluenza viruses was corroborated during all the months of the year and in all the analyzed age groups. It was observed an increase in the positivity percentages with age.

Estudio de la estabilidad genética del sistema de expresión de la proteína E del virus dengue 4 en la levadura metilotrófica Pichia pastoris

Se realizó el análisis de la estabilidad plasmídica de la levadura metilotrófica Pichia pastoris que expresa la proteína recombinante E del virus dengue 4. Para ello se estimó el número de generaciones desde el proceso de crecimiento en placa petri hasta la propagación en zaranda, así como el proceso de fermentación. Además se determinó en las colonias seleccionadas el patrón de integración por Dot-Blot y secuencia nucleotídica del gen E del virus dengue 4. Este estudio permitió comprobar la conservación e integridad de la secuencia aminoacídica de la proteína E, a pesar de encontrarse cambios genéticos producidos por mecanismos moleculares de la levadura; por otra parte, formó parte del control y chequeo realizado al banco de células primario de levadura que contiene el gen de interés, actualmente utilizado en el proceso de expresión de la proteína E del virus dengue 4.

The plasmidic stability of methyltrophic yeast Pichia pastoris expressing the recombinant protein E of dengue virus 4 was analyzed. To this end, the number of generations from the growth process in petri plaque to the propagation in zaranda was estimated, as well as the fermentation process. Besides, in the selected colonies the integration pattern was determined by Dot-Blot and neuclotide sequence of the gene E of dengue virus 4. This study allowed to prove the conservation and integrity of the aminoacid sequence of protein E, despite the genetic changes produced by molecular yeast mechanisms. On the other hand, it was also part of the control and checking of the primary bank of yeast cells that contains the gene of interest used at present in the process of expression of protein E of dengue virus 4.

Aplicación de la prueba rápida de glutamato descarboxilasa para la confirmación de Escherichia coli aisladas a partir de muestras clínicas

Se evaluó una prueba rápida, en el diagnóstico de Escherichia coli, en diferentes tipos de muestras infecciosas, así como su comparación con los métodos bioquímicos de identificación tradicionales. Se ha reportado que la enzima glutamato descarboxilasa (GAD) es muy específica (97-99 %) para la identificación de Escherichia coli, sin embargo su empleo en la actualidad es muy limitado. Se analizaron 461 muestras clínicas de diferente origen en un hospital pediátrico. En general, con mayor frecuencia Escherichia coli fue aislada en muestras de urocultivo, coprocultivo, vaginales y uretrales. La sensibilidad diagnóstica del método fue de 100 %. Todas las cepas enterotoxigénicas y enterohemorrágicas de Escherichia coli aisladas en muestras de heces fecales también dieron los resultados positivos a la prueba rápida. La especificidad diagnóstica resultó ser de 82,8 %, debido a los resultados falsos positivos proporcionados por 34 cepas de Shigella del grupo D aisladas en coprocultivos. Las ventajas de la aplicación de esta prueba, comparadas con otras pruebas convencionales y comerciales, están dadas por su bajo costo, su rapidez y su alta sensibilidad, especificidad y exactitud diagnósticas, lo que permite ahorro de personal, de materiales y del tiempo empleado en la identificación.

A rapid test was evaluated in the diagnosis of Escherichia coli in different types of infectious samples, and a comparison with the biomedical methods of traditional identification was made. It has been reported that glutamate decarboxylase (GAD) is very specific (97-99 %) for the identification of Escherichia coli; however, its use is very limited nowadays. 461 clinical samples of different origin were analyzed in a children’s hospital. In general, Escherichia coli, was more frequently isolated from urine, fecal, vaginal and urethral specimens. The diagnostic sensitivity of the method was 100 %. All the enterotoxigenic and enterohemorrhagical strains of Escherichia coli isolated from feces samples were also positive to the rapid test. The diagnostic specificity was 82.8 %, due to the false positive results yielded by 34 strains of Shigella of the group D isolated from feces. The advantages of the application of this test compared with other conventional and commercial tests are its low cost, its celerity and its high diagnostic sensitivity, specificity and accuracy, which allow to save personnel, materials and the time used in the identification.

Validación de un ensayo tipo ELISA para la cuantificación de anticuerpos contra el polisacárido capsular de Haemophilus influenzae tipo b

Se llevó a cabo el estudio de validación de un ensayo tipo ELISA -aceptado internacionalmente para este propósito-, con el objetivo de disponer de un método para la cuantificación de anticuerpos contra el polisacárido capsular de Haemophilus influenzae tipo b (Hib), en los ensayos clínicos previstos para demostrar la inmunogenicidad de una nueva vacuna conjugada, compuesta por un antígeno sintético. La validación fue conducida en el Laboratorio Nacional de Referencia para Haemophilus, en el Instituto de Medicina Tropical “Pedro Kourí”, La Habana, Cuba, y se diseñó para ello un protocolo en el cual se consideró la determinación de la precisión, exactitud, linealidad y límite de detección del ensayo. En la preparación de la curva patrón estándar se empleó el suero de referencia internacional Hib Lote 1983. Para la repetibilidad y reproducibilidad del sistema se observaron índices de dispersión inferiores a 10 y 20 %, respectivamente. El límite de detección fue de 3,6 ng/m, y los ensayos de recuperación y linealidad revelaron la alta exactitud del método. Se concluyó que durante la evaluación clínica del candidato a vacuna, obtenido por síntesis química, la cuantificación de anticuerpos contra el polisacárido capsular de Hib podía ser afrontada con apropiada precisión y exactitud mediante el método propuesto.

Actividad inhibidora del crecimiento in vitro de Plasmodium falciparum de extractos de algas del género Laurencia

Se prepararon extractos etanólicos mediante maceración de ejemplares de Laurencia obtusa y Laurencia corallopsis y se evaluó su acción inhibidora in vitro sobre la cepa de Plasmodium falciparum susceptible a cloroquina F32/Tanzania, para determinar la presencia de actividad antimalárica en algas del género Laurencia en Cuba. En este género han sido identificados varios terpenoides con actividad antimalárica, los cuales proceden de plantas colectadas principalmente en las Filipinas y Brasil, sin embargo, este género es uno de los más complejos desde el punto de vista químico a escala mundial. La concentración mínima inhibitoria (CMI) contra P. falciparum de los extractos de Laurencia estuvo en el rango entre 44 y 162 µg/mL y en todos los casos se observó una relación dosis-respuesta apropiada, determinándose valores de las CI50 de los extractos de las 2 especies entre 14,82 y 51,3 µg/mL, los cuales muestran resultados comparables a numerosos estudios realizados con extractos de plantas terrestres con acción antipalúdica. La cloroquina presentó una CMI de 100 ng/mL in vitro, resultados no superados por las preparaciones crudas. En las muestras de L. obtusa se acentuó la respuesta a los ensayos para los terpenoides y/o esteroides y a los análisis de compuestos lactónicos y/o coumarinas, pero también se pudo detectar la presencia de alcaloides, azúcares reductores, saponinas y flavonoides. Teniendo en cuenta que varias moléculas pudieran contribuir a la actividad antiplasmodial del extracto total, se realizarán estudios para lograr la identificación de las sustancias activas.

Several terpenoids have been identified in the genus Laurencia showing antimalarial activity; however it is a genus of great chemical complexity worldwide. The majority of these substances have been extracted from collections made in Philippines and Brazil. In order to know the presence of antimalarial activity in organisms of this genus from the North West Coast of Cuba, we prepared extracts in ethanol with the whole plant of specimens of L obtusa and L. corallopsis and evaluated the inhibition produced by them against growth of Plasmodium falciparum, strain F32. The Minimum Inhibitory Concentrations against P. falciparum determined for Laurencia extracts were in the range of 44 and 162 µg/ml, and values of median inhibitory concentrations were between 14.82 and 51.3 µg/ml. The results are similar to those obtained for extracts from medicinal plants. The extracts did not improve chloroquine results. L. obtusa extracts gave strong reactions to the assays for terpenoids and for lactonic/coumarine compounds, but we also detected the presence of alkaloids, free reducing sugars, saponins and flavonoids. Several molecules could contribute to the observed antiplasmodial activity of the extracts, so research is in progress for the isolation and purification of new active principles.

Contenido del tracto digestivo de 4 especies de peces autóctonos y sus implicaciones como biorreguladores de larvas de mosquitos en Venezuela, 2004

Se analizó el contenido del tracto digestivo de 4 especies de peces autóctonas que presentaron características de peces larvívoros. Se encontró que 28 % de los ejemplares capturados de Aequidens pulcher presentaron en su contenido gastrointestinal restos de larvas y pupas de mosquitos combinados con otros alimentos, y 26 % contenía solo larvas y pupas; en Aequidens coeruleopunctatus 63 % de su contenido fue larvas y pupas con otros alimentos y 10 % solo larvas y pupas; 56 % de los ejemplares de Poecilia caucana contenía larvas y pupas con otros alimentos y 34 %, solo larvas y pupas; Poecilia reticulata contenía larvas y pupas con otros alimentos en 62 % y 33 %, solo larvas y pupas. Estos resultados señalan una actividad biorreguladora efectiva en estos peces identificados como larvívoros en condiciones naturales.

The content of the digestive tract of 4 authoctonous species of fishes that presented characteristics of larvivorous fishes was analyzed. It was found that 28 % of the caught specimens of Aequidens pulcher presented in their gastrointestinal content residues of larvae and pupae of mosquitoes combined with other food, and that 26 5 has only larvae and pupae. In Aequidens coeruleopunctatus, 63 % of their content was larvae and pupae with other food, whereas 10 % had only larvae and pupae. 56 % of the Poecilia caucana specimens had larvae and pupae with other food, and 34 % only larvae and pupae. Poecilia reticulata contained larvae and pupae with other food in 62 % and 33 % only had larvae and pupae. These results show an effective bioregulator activity in these fishes identified as larvivorous under natural conditions.

Control de culícidos con el empleo de Bacillus thuringiensis SH-14 var. israelensis en criaderos permanentes de la localidad de Fomento, provincia Sancti Spíritus, Cuba

Se realizó una evaluación ecológica de tendencia temporal retrospectiva y descriptiva del período 1999-2000, en 8 cuerpos de agua de la localidad de Fomento, provincia Sancti Spíritus. Para evaluar la efectividad y permanencia del biolarvicida, se utilizaron datos de muestreos sistemáticos y de acciones de control de los programas provinciales de vigilancia y lucha antivectorial, recogidos en los expedientes de cada criadero en la Unidad Municipal de Higiene y Epidemiología de la localidad. Se aplicaron dosis de 10 mL de ingrediente activo por metro cuadrado, alcanzándose la reducción y estabilización de los índices larvales y de adultos en cebo humano, de importantes especies vectoras de malaria, filariais, y fiebre del Nilo occidental. Se comprobó la extensión del rango de recuperación larval hasta las 3 semanas.

Macrocyclops albidus (Copepoda: Cyclopidae): una nueva alternativa para el control de larvas de mosquitos en Cuba

Se evaluó el copépodo ciclópodo Macrocyclops albidus como agente de control biológico sobre larvas de Aedes aegypti y Culex quinquefasciatus, culícidos que frecuentemente conviven en recipientes de uso doméstico en zonas urbanas. Los experimentos se realizaron en condiciones controladas de laboratorio. Se utilizaron recipientes plásticos con 5 L de agua declorada y 3 g de hojas secas. Se agregaron 2 densidades de copépodos y 3 combinaciones de densidades de larvas. Se hicieron 5 réplicas. El conteo de las larvas sobrevivientes y los copépodos recuperados se realizó 6 d después de comenzado el experimento. Se observó una marcada reducción de la población larval de mosquitos en todos los tratamientos con copépodos, destacándose su preferencia por las larvas de Ae. aegypti, que no fue afectada por la presencia de larvas de Cx. quinquefasciatus. Los copépodos mostraron alta supervivencia en todas las variantes ensayadas, siendo esta mayor que 100 % cuando se agregaron en la menor densidad.

The cyclopoid copepod Macrocyclops albidus was evaluated as a biological control agent of Aedes aegypti and Culex quinquefasciatus larvae, culicides that frequently live in containers of domestic use in urban zones. The experiments were made under controlled laboratory conditions. Plastic containers with 5 L of dechlorinated water and 3 g of dry leaves were used. 2 densities of copepods and 3 combinations of larvae densities were added. 5 replicas were made. The count of the suviving larvae and the recovered copepods was made 6 days after the beginning of the experiment. It was observed a marked reduction of the larval population of mosquitoes in all the treatments with copepods. It was stressed their preference for the Ae. aegypti larvae that was not affected by the presence of Cx. quinquefasciatus larvae. The copepods showed a high survival in all the assayed variants. It was over 100 % when they were added in the lowest density.

Detección de marcadores de hepatitis B y hepatitis C en pacientes VIH positivos, 2000-2004

Se estableció como objetivo conocer la coinfección entre los virus de la hepatitis B (VHB), hepatitis C (VHC) y virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) en el período estudiado. Existe una asociación marcada entre estos virus, porque la vías de transmisión y los grupos de riesgo son muy similares. Durante los años 2000-2004 se recibieron en el Laboratorio Nacional de Referencia de Hepatitis viral (IPK), 2 994 muestras de sueros de pacientes VIH (+) para investigar antígeno de superficie al VHB (HBsAg) y anticuerpos anti-VHC, ambos por la técnica de UMELISA (Centro de Inmunoensayo, CIE, La Habana, Cuba). Se realizó análisis estadístico de los resultados por el programa Epi Info (Versión 6.04). Se encontró en 10,3 % positividad al HBsAg, 10,4 % tenía anticuerpos anti-VHC y hubo coinfección VHB, VHC y VIH en 1,7 %. Se confirmó lo planteado en la literatura sobre las coinfecciones VHB, VHC y VIH.

La colección de cultivos de hongos del Instituto de Medicina Tropical “Pedro Kourí”: funciones y retos

Se hizo una reseña sobre la colección de cultivos de hongos del Instituto de Medicina Tropical “Pedro Kourí”, la cual fue creada en 1980 en respuesta a las crecientes necesidades del entonces recién establecido laboratorio de Micología de esa institución. Las colecciones de cultivos microbianos adquieren cada día mayor importancia como vía para la conservación ex situ de la biodiversidad microbiana; son las encargadas de colectar, guardar, identificar y preservar aquellas cepas que resulten de interés para las investigaciones biomédicas, la docencia, la industria, la agricultura, etc. En estos momentos la colección del instituto conserva un total de 262 cepas pertenecientes a 81 especies de hongos, actinomicetos y algas, todas de interés para la Micología Médica. Los principales métodos para el mantenimiento de los cultivos han sido la conservación en agua destilada y la liofilización, además de los repiques periódicos en medios agarizados, la refrigeración y la congelación. Entre las principales funciones desarrolladas por esta colección se encuentran: el servicio de referencia y control de calidad, la identificación de cepas, la docencia, los estudios taxonómicos y la custodia, entre otras. En la actualidad las colecciones de cultivos de hongos deben enfrentar el reto que representan los hongos patógenos emergentes, así como también la incorporación de técnicas moleculares que confirmen la calidad de los métodos de preservación de las cepas. Estas colecciones deben desempeñar un importante papel estratégico en la preservación de la biodiversidad teniendo en cuenta, además, aspectos legales y de bioseguridad.

A review was made on the collection of fungi cultures of “Pedro Kouri” Institute of Tropical Medicine” that was created in 1980 to give an answer to the increasing needs of the newly established laboratory of Mycology of that institution at that time. The collections of microbial cultures are more important every day as a way for the ex situ conservation of the microbial biodiversity. They are in charge of collecting, saving, identifying and preserving those strains of interest for biomedical research, teaching, industry, agriculture, etc. At present, the collection of the institute has a total of 262 strains from 81 species of fungi, actinomycetes and algae, all of them of interest for Medical Mycology. The main methods for the maintenance of the cultures have been the conservation in distilled water and freeze-drying, in additions to the periodical mincing in agar media, refrigeration and freezing: The service of reference and control of quality, the identification of strains, teaching, the taxonomic studies, and the safeguard, among others, are some of the main fun ctions developed by this collection. Nowadays, the collections of fungus cultures must face the challenges represented by the emerging pathogenic fungi, as well as the incorporation of molecular techniques confirming the quality of the strain preservation methods. These collections should play an important strategic role in the preservation of the biodiversity, taking into account legal and biosafety aspects, too.

Efecto patogénico de 3 nematodos parásitos en larvas de Aedes aegypti en condiciones de laboratorio, en Cuba

Se evaluó el efecto patogénico de 3 nematodos parásitos Romanomermis culicivorax Ross y Smith, 1976, Romanomermis iyengari Welch, 1964 y Strelkovimermis spiculatus Poinar y Camino, 1986, a diferentes dosis de aplicación, en larvas de Aedes aegypti Linnaeus, 1762. Para cada unidad experimental se utilizaron 100 larvas de II estadio de este mosquito y se infestaron con nematodos preparasíticos de las 3 especies, en proporciones de 3:1, 5:1, 10:1, 15:1 y 20:1. Las medias de infestación y las tasas de parasitismo aumentaron en la medida en que se incrementaron las dosis. A bajas densidades de nematodos (3 y 5 nematodos/larva) R. culicivorax resultó ser más efectivo al compararla con las otras especies, sin embargo con una proporción de 10:1 todos los nematodos provocaron 100 % de mortalidad, siendo S. spiculatus el nematodo que provocó las medias de infestación más altas. Por esta razón, una proporción de 10:1 pudiera ser recomendada para que estos nematodos sean evaluados en condiciones naturales en recipientes artificiales no útiles como una alternativa biológica para el control de Aedes aegypti.

Muerte repentina de un niño por aspiración del contenido gástrico durante una infección con el virus de Norwalk-like

Se reportó el fallecimiento de un niño de 1,5 años de edad por broncoaspiración de contenido gástrico en el desarrollo de una infección letal por Norwalk-like virus. Las enfermedades gastrointestinales virales son comunes pero raras veces causan enfermedad severa. Investigaciones recientes demuestran que Norwalk-like virus (Noro-Virus) es el patógeno gastrointestinal más frecuente en Europa Central. El diagnóstico etiológico de la enfermedad gastrointestinal, a partir del material de autopsia, solo fue posible mediante la técnica de reacción en cadena de la polimerasa. La introducción de esta técnica permitió disminuir el número de casos de enfermedades gastrointestinales sin diagnóstico etiológico y al mismo tiempo incrementar la demostración de la ocurrencia de infección por Norwalk-like virus.

The death of a 1.5-year-old child due to bronchoaspiration of the gastric content in the development of a letal infection caused by Norwalk-like virus was reported. The viral gastrointestinal diseases are common but they rarely produce a severe disease. Recent investigations show that Norwall-like virus (Noro-Virus) is the most frequent gastrointestinal pathogen in Central Europe. The etiological diagnosis of the gastrointestinal disease, starting from autopsy material, was only possible by polymerase chain reaction. The introduction of this technique allowed to reduce the number of cases of gastrointestinal diseases without etiological diagnosis and, at the same time, to increase the demosnstration of the occurrence of infection caused by Norwalk-like virus.

Tratamiento exitoso de un caso de cromoblatomicosis verrucosa extensa con exéresis quirúrgica asociada a uso de ketoconazol

The case of a 56-year-old man with an extense verrucous chromoblastomycosis of long evolution, with lesions in the right foot that had not been cured with previous treatment, and that was successfully treated by surgical exeresis of all the lesions together with oral ketoconazole, is presented. Literature was reviewed to conclude that the treatment of chromoblastomycosis is still a challenge and that it should be selected for each case in particular.

Meningitis bacteriana y Pseudomonas aeruginosa: a propósito de un caso

Se presentó un paciente de 54 años de edad con cuadro clínico de meningitis, que en el estudio del líquido cefalorraquídeo se aisló Pseudomonas aeruginosa. La meningitis por bacilos gramnegativos ha ido incrementándose desde la década de los años 70, con una mayor incidencia en niños pequeños. Dentro de este grupo de infecciones, la causada por Pseudomonas sp. por su poca frecuencia, resulta una rareza. La meningitis por Pseudomonas aeruginosa debe tenerse en cuenta por la severidad del cuadro clínico y el incremento de las cepas resistentes.

Meningitis caused by gram-negative bacilli increased since the 1970, with a higher incidence in small children. Within this group of infections, the meningitis caused by Pseudomonas sp is rare. The case of a 54-year-old patient with a clinical picture of meningitis is reported. Pseudomonas aeruginosa was isolated from the cerebrospinal fluid. The meningitis caused by Pseudomonas aeruginosa should be taken into consideration because of the severity of the clinical picture and the high mortality and increasing strain resistance.

Delusión parasitaria: a propósito de un caso

Se notificó un caso de una mujer de 52 años de edad, blanca, con antecedentes personales y familiares de trastornos psiquiátricos y de pediculosis pubis, que fue remitida por presentar lesiones exulceradas en la piel, desde hacía 2 años. En el examen microscópico de las muestras tomadas durante su ingreso se comprobó que correspondían con restos de epitelio y pelos. La biopsia cutánea se interpretó como exulceraciones secundarias al rascado, y confirmó la ausencia de parásitos. Las interconsultas realizadas con psicología y psiquiatría evidenciaron el cuadro alucinatorio de la paciente que luego de ser estudiada se definió como delusión parasitaria (delirio parasitario dermatozoo primario, grado II, ectoparasitosis). Se reportó el caso por lo infrecuente y por la ausencia de documentación de esta patología dermatológica en Cuba.

The case of a 52-year-old white female patient with personal and family history of psychiatric disorders and pubic pediculosis that was referred for presenting exulcerated lesions of the skin during the last two years was reported. On the microscopic study, the samples taken from the patient during her admission corresponded to epithelium and hair. The skin biopsy was interpreted as exulceration secondary to scratching, and no evidence of parasites was found. Psychological and psychiatric evaluation of the patient confirmed her hallucinatory state. She was finally diagnosed a Delusional Parasitosis (II grade Primary Dermatozoal Parasitic Delirium, , ectoparasitosis). This is a very infrequent diagnosis and no documented case was found of this dermatological pathology in Cuba.