Revista Cubana de Medicina Tropical

Una actualización acerca de histoplasmosis

La histoplasmosis infección causada por el hongo Histoplasma capsulatum ha sido reportada en todos los continentes y se considera endémica en el continente americano, incluida Cuba. El hongo se desarrolla en el suelo con excretas de aves y murciélagos, donde es capaz de producir abundantes microconidios, que al ser inhalados por el hombre son capaces de causar la infección. El cuadro clínico puede variar, desde infecciones asintomáticas hasta cuadros diseminados graves que involucran a uno o varios órganos y sistemas y que afectan sobre todo a pacientes con sida, neoplasias hematológicas, con trasplantes u otras inmunodeficiencias. Los principales grupos de riesgo incluyen además, aquellos individuos que por razones ocupacionales se expongan los aerosoles contaminados con el hongo. El diagnóstico de laboratorio se basa en la observación de este en fluidos y tejidos orgánicos, en el cultivo de esos materiales y en la detección de anticuerpos y antígenos específicos. Los métodos moleculares, en especial mediante la reacción en cadena de la polimerasa, aunque no han sido suficientemente evaluados, pudieran representar un importante avance en el diagnóstico temprano de esta micosis. Para el tratamiento de las formas agudas moderadas, localizadas y respiratoria crónica se recomienda el itraconazol, mientras que para las formas graves y diseminadas la droga de elección es la anfotericina B, con preferencia en alguna de sus formulaciones lipídicas. La histoplasmosis representa hoy una de las micosis sistémicas más importante en las Américas, con una amplia distribución en todas las regiones de Cuba.

Histoplasmosis, an infection caused by the fungus Histoplasma capsulatum, has been reported all over the world and is considered endemic in the American continent, including Cuba. This fungus grows on the soils contaminated with bird and bat excreta, where it produces a great number of microconidia that could cause the infection when they are inhaled. The clinical spectrum varies from asymptomatic infections to serious disseminated diseases involving one or many organ systems and affects mainly AIDS patients, patients with hematological neoplasias, transplant recipients or other immunosuppressed patients. The main risk groups include those individuals whose working activities make them be exposed to aerosols contaminated with H. capsulatum. Lab diagnosis is based on the microscopic observation, isolation and identification of the fungus in fluid or tissue samples of patients, and on specific antigen and antibodies detection. The molecular methods based on polymerase chain reaction have not been sufficiently defined, and they could be an important advance in the early diagnosis of this mycosis. Itraconazole is recommended for treatment of moderate, localized and chronic infection whereas amphotericin B is the drug of choice for disseminated and serious manifestations, particularly in its lipidic formulations. At present, histoplasmosis is considered one of the most important systemic mycoses in the Americas, and it is widely spread over all regions of Cuba.

Convalecencia de mujeres que sufrieron dengue serotipo 3 durante el embarazo

Introducción: el dengue es una enfermedad infecciosa producida por un virus de genoma ARN, al cual se le reconocen 4 serotipos (DEN-1, DEN-2, DEN-3 y DEN-4) transmitidos por el Aedes aegypti como principal vector. En el embarazo se manifiesta clínicamente de forma similar a la población general, pero con la diferencia de estar en presencia de un ecosistema constituido por la madre y el feto, donde se introduce el virus con sus características genéticas con condiciones especiales para su desarrollo y evolución. Objetivo: investigar la evolución de los síntomas del dengue en mujeres que enfermaron durante el embarazo por 1 año de seguimiento. Métodos: se realizó una investigación observacional y descriptiva con el fin de conocer la presencia de secuelas con posterioridad a la infección por dengue 3 en mujeres que enfermaron durante su embarazo. Se estudió una cohorte de 28 embarazadas que ingresaron en el Hospital General "Dr. Juan Bruno Zayas Alfonso" durante el brote de dengue de abril a noviembre de 2006. El diagnóstico se confirmó por métodos serológicos. Resultados: se observó hasta el año de seguimiento, pérdida de memoria (25 %) y trastornos menstruales (14,3 %). La pérdida de memoria resultó significativa cuando la infección se produjo en el tercer trimestre del embarazo, p= 0,0377. Conclusión: la infección por el virus dengue 3 es capaz de dejar secuela de pérdida de memoria en mujeres que sufrieron dengue durante el embarazo, preferentemente en el tercer trimestre de gravidez.

Introduction: dengue is an infectious disease caused by ARN genome virus and has 4 recognized serotypes (DEN-1, DEN-2, DEN-3 and DEN-4) that are transmitted by Aedes aegypti as the main vector. The clinical manifestations of dengue in pregnancy are similar to those of the general population, except that the ecosystem is made up by the mother and the fetus where the virus with its genetic characteristics is introduced and finds special conditions for development and evolution. Objective: to study the progression of the dengue symptoms in women who got sick during their pregnancy for one year of follow-up. Methods: an observational descriptive research was conducted to find out the existence of sequelae in women who were infected with dengue 3 during their pregnancy. A cohort of 28 pregnant women, who had been admitted to "Juan Bruno Zayas Alfonso" General Hospital at the time of the dengue outbreak from April to November 2006, was studied. The diagnosis was serologically confirmed. Results: after one-year of follow-up, it was observed that amnesia (25 %) and menstrual disorders (14.3 %) affected these women. Amnesia was significant when the infection occurred in the third trimester of pregnancy, p= 0.0377. Conclusions: dengue 3 infection may cause amnesia in pregnant women who suffered this disease, particularly in their third trimester of pregnancy.

Propiedades biológicas de cepas de virus dengue serotipo 2 aisladas durante la epidemia en Santiago de Cuba, 1997

Introducción: durante la epidemia cubana de dengue ocurrida en Santiago de Cuba, 1997, se evidenció un incremento de la severidad en el tiempo en términos de proporción de casos graves y muertes por dengue hemorrágico, que pudiera estar dado por la aparición de mutantes de escape a la neutralización, con mayor potencial virulento. Objetivos: estudiar algunas propiedades biológicas de cepas aisladas en diferentes momentos de la epidemia de Santiago de Cuba en 1997. Métodos: se estudiaron 9 cepas de DENV-2, se evaluó el efecto citopatogénico y el crecimiento viral en las líneas celulares C6/36 HT y Vero, tamaño de las placas virales, sensibilidad a la temperatura, neurovirulencia en ratones lactantes y la influencia del pH en la unión del virus a la célula, así como en el medio de multiplicación. Resultados: las cepas del final de la epidemia mostraron propiedades que las diferencian de las aisladas al inicio, entre las que se encuentran un mayor efecto citopatogénico en células C6/36 HT, títulos virales superiores y una mayor neurovirulencia en ratones lactantes. Por otra parte, en la unión del virus a la célula las cepas del inicio de la epidemia resultaron favorecidas por un pH ácido mientras que a las cepas del final de la epidemia las favoreció un pH básico. Conclusiones: pudo demostrarse que además de los cambios genotípicos observados previamente, existen diferencias fenotípicas entre cepas de distintos momentos de la epidemia, que pudieran estar asociados con diferencias en cuanto a la adecuación viral de estas y(o) en su potencial virulento.

Introduction: during the Cuban epidemic that occurred in Santiago de Cuba in 1997, there was observed increasing severity in the course of time, in terms of proportion of serious dengue haemorrhagic cases and deaths that could be due to the emergence of escape mutants to neutralization with greater virulent potential. Objective: to study some biological attributes of a group of strains isolated at different points of time during the Santiago de Cuba epidemic in 1997. Methods: nine DENV-2 strains were studied. The cytopathogenic effect, the viral growth in C6/36 HT and VERO cell lines, the virus plaque sizes, the sensitivity to temperatures, the neurovirulence in newborn mice and the influence of the pH in the union of the virus to the cell as well as in the multiplication medium were all evaluated. Results: the strains isolated at the end of the epidemic differed from those of the beginning showing increased neurovirulence in newborn mice and higher viral titers and greater cytopathogenic effect in HT C6/36 cells. On the other hand, the virus and the cell union was favored by acid pH when testing strains from the beginning of the epidemic, whereas this union was favored by the basic PH in the strains isolated at the end of the epidemic Conclusions: the present study managed to show that in addition to the previously observed genotypical changes, there were phenotypical differences among the strains isolated at different points of time in the epidemic; all these aspects may be associated with differences in the viral fitness and/or in the virulent potential of these strains.

Nuevas evidencias en la susceptibilidad a la infección por dengue asociadas al polimorfismo HH del receptor FcgRIIa

Introducción: las variantes polimórficas del receptor FcgR IIa han sido asociadas con la susceptibilidad a padecer diferentes enfermedades infecciosas. Recientemente se reportó la asociación entre el polimorfismo de este receptor y la susceptibilidad a padecer la fiebre hemorrágica por dengue. Objetivos: explorar si la asociación a la susceptibilidad o protección de las variantes homocigóticas del receptor, pudieran estar relacionadas además, con los títulos de IgG y la exposición a diferente número de infecciones. Métodos: se hizo un estudio de tipo analítico retrospectivo a individuos infectados por virus dengue 4 en Ciudad de La Habana durante la epidemia de 2006, que se contactaron en 2008. Se reclutó un total de 97 individuos, de los cuales 68 habían padecido fiebre dengue y 29 fiebre hemorrágica de dengue.Se les extrajo una muestra de 10 mL de sangre total en anticoagulante que se empleó en el aislamiento de ADN. Se determinó el polimorfismo genético del receptor FcgRIIa, los títulos de anticuerpos totales IgG anti-dengue y el antecedente de infección por dengue. Resultados: se evidenció, de modo interesante, una relación directamente proporcional y muy significativa (p< 0,0001) entre los altos títulos de IgG anti-dengue con el número de infecciones padecidas. Este comportamiento fue característico en los individuos con la variante homocigótica HH. Conclusiones: al parecer, en aquellos individuos con polimorfismo para el receptor FcgRIIa-H/H podría haber una tendencia a la no eliminación de los anticuerpos IgG a través del FcgRIIa, la cual está asociada con el número de infecciones.

Introduction: polymorphic variants of FcgRIIa receptor have been associated to susceptibility to develop several infectious diseases. The relationship between the polymorphism of this receptor and the susceptibility to dengue hemorrhagic fever was recently reported. Objectives: to explore whether the association of the homocygotic variants of the receptor to susceptibility to or protection from a disease could be also related with the IgG antibody titters and the exposure to a number of infections. Methods: a retrospective analytical study was performed on individuals who had been infected with the dengue virus 4 during the 2006 epidemic in the City of Havana and were tracked down in 2008. A total number of 97 individuals were recruited of whom 68 had suffered dengue fever and 29 had had dengue hemorrhagic fever. A 10 mL blood sample was taken from each of them and then placed in EDTA anticoagulant for DNA isolation and 5ml placed in dry tubes to obtain serum. The genetic polymorphism of FcgRlla receptor, the total anti-dengue IgG antibody titers and the antecedent of dengue infection were determined. Results: it was interesting to note that there was very significant direct relation (p< 0.0001) between high anti-dengue IgG antibodies titers and the number of infections suffered by these people. This behaviour was present in those individuals with the HH homocygotic variant. Conclusion: it seems that those individuals with polymorphism in FCgRlla-H/H receptor would tend to non-elimination of IgG antibodies through this receptor, which is associated to the number of infections suffered by the individual.

Estudio serológico en localidades cubanas con infecciones confirmadas al virus del Nilo Occidental

Introducción: las primeras infecciones por el virus del Nilo Occidental en Cuba se reportaron en 2004. Objetivo: monitorear y conocer la prevalencia del virus del Nilo Occidental en áreas con casos confirmados de este. Métodos: el estudio se llevó a cabo en la municipalidad de Jatibonico y en la ciudad de Sancti Spiritus. Un total de 14 personas, 8 caballos y 41 aves se estudiaron para la detección de anticuerpos a flavivirus y específicos al virus del Nilo Occidental. Resultados: se confirmó la presencia de anticuerpos específicos a virus del Nilo Occidental en 4 muestras de suero de aves y 4 de caballos. Una persona se confirmó como 1 caso de infección por virus del Nilo Occidental asintomático. Conclusiones: la presencia de anticuerpos específicos al virus del Nilo Occidental en aves residentes, caballos y humanos en áreas con casos confirmados demuestran el establecimiento de un ciclo de amplificación local establecido en Cuba antes de este estudio.

Introduction: First infected cases caused by West Nile virus were reported in Cuba in 2004. Objective: to monitor and learn about the prevalence of the West Nile virus in those areas with confirmed cases. Methods: the study was conducted in Jatibonico municipality and in the city of Sancti Spiritus. A total number of 14 persons, 8 horses and 41 birds were researched to detect antibodies to flavivirus and specific antibodies to West Nile virus. Results: the presence of specific antibodies to West Nile virus was confirmed in 4 samples of sera from birds and in 4 from horses. One person was confirmed as one case of asymptomatic West Nile virus infection. Conclusions: the presence of specific antibodies to West Nile virus in birds, horses and persons residing in areas where there are confirmed cases showed that a local amplification cycle had been established in Cuba before this study.

Vigilancia activa de eventos adversos a la vacuna Pandemrix para prevenir la influenza AH1N1 en Cuba

Introducción: en abril de 2009, en México y Norteamérica, un nuevo virus fue identificado como causa de enfermedad respiratoria, el cual se expandió rápidamente a otros países. El 11 de junio de 2009 la Organización Mundial de la Salud notificó casos en 74 países y territorios, en 2 de sus regiones. Esta transmisión elevada y sostenida de este virus en el mundo, propició que se estableciera la fase 6 o de pandemia, lo cual indicó que la situación implicaba diseminación y no mayor gravedad. Objetivos: reportar los eventos conocidos o nuevos tras la aplicación de la vacuna A (H1N1) Pandemrix, identificar los eventos más frecuentes en las embarazadas e investigar de inmediato los eventos severos asociados. Métodos: se diseñó un estudio descriptivo prospectivo para caracterizar los eventos adversos a la vacuna Pandemrix, reportados en todo el país desde el Primero de abril hasta el 30 de junio de 2010. Se vacunaron 1 123 526 personas y se cubrió 100 % de las embarazadas. Resultados: de la vigilancia activa desarrollada en el país se reportaron 5 763 síntomas y signos en 3 401 personas (615 reportes en embarazadas). La tasa general de reportes fue de 302,7 x 100 000 dosis aplicadas. Los eventos adversos: fiebre, cefalea, dolor, inflamación y enrojecimiento en el sitio de inyección, decaimiento, artralgia, manifestaciones alérgicas, vómitos y náuseas como síntomas más frecuentes. Estos 10 síntomas y signos representan 79,1 % del total de eventos reportados. Se vacunó un total de 80 317 embarazadas, de las cuales 615 reportaron eventos adversos, lo que representa 0,8 % del total de gestantes vacunadas. En los niños la fiebre fue el síntoma que más notificaciones produjo (193), seguido de reacciones locales en el sitio de inyección (23), vómitos (20) artralgias (17), cefalea (11), decaimiento (10) y convulsiones relacionadas con fiebre (6). Se investigaron 8 eventos como severos. Conclusiones: con la aplicación de la vacuna estaban relacionados 3 eventos, otros 3 no relacionados con la aplicación de la vacuna y en 2 se decidió que eran no concluyentes (2 abortos espontáneos). No se reportaron fallecidos. Se demostró la capacidad del sistema de salud cubano para la aplicación de la vacuna con una vigilancia activa en un corto período de tiempo. En los datos derivados de la vigilancia de eventos supuestamente atribuidos a la vacunación o inmunización, no se reportó ningún evento inusual, por lo que no se sugieren problemas de seguridad relacionados con la vacuna Pandemrix.

Introduction: in April 2009, a new virus was identified in Mexico and North America as the cause of a respiratory disease. The virus quickly spread over other countries. On June 11, 2009 the World Health Organization (WHO) reported cases in 74 countries and territories located in 2 of its regions. The high sustained transmission of this virus worldwide led to establish the phase 6 or the pandemic phase, indicating that the situation had to do with spreading rather than increased severity. Objectives: to report on already known or new events after the administration of vaccine A(H1N1) called Pandemrix, to identify the most frequent events occurred in pregnant women and to research into the associated severe events. Methods: a prospective descriptive study was designed to characterize the adverse effects of Pandemrix reported across the country from April 1st to June 30th, 2010. A total of 1,123,526 people were vaccinated in which 100 % of pregnant women were included. Results: active surveillance nationwide reported 5 763 signs and symptoms detected in 3 401 people (615 reports from pregnant women). The overall rate of reports was 302.7 x 100 000 doses administered. Adverse events such as fever, headache, pain, swelling and redness at the injection site, malaise, arthralgia, allergic reactions, nausea and vomiting were reported as common symptoms. These 10 symptoms and signs accounted for 79.1 % of all the reported events. A total number of 80 317 pregnant women were vaccinated of whom 615 reported adverse effects, accounting for 0.8 % of the vaccinated pregnant women. Fever was the most notified symptom in children (193) followed by local reactions at the injection site (23), vomiting (20), arthralgia (17), headache (11), malaise (10) and high fever-related seizures (6). Eight events were analyzed as severe. Conclusions: the administration of the vaccine was related to 3 events, unrelated to other 3 events and 2 were classified as inconclusive (3 miscarriages). No deaths were reported. The capacity of the Cuban Health System for the administration of this vaccine with active surveillance in a short period of time was proved. Data from monitoring of events that were supposedly attributable to vaccination or immunization did not notify any unusual event. Therefore, no safety problem is associated to the Pandemrix vaccine.

Sistemas serológicos rápidos utilizados para la pesquisa de leptospirosis humana en Cuba

Introducción: la leptospirosis humana necesita de un diagnóstico microbiológico rápido y oportuno por ser una enfermedad letal y frecuente en todo el mundo. Objetivo: incrementar la calidad del diagnóstico microbiológico de esta infección, ampliar el conocimiento sobre la circulación de serogrupos de leptospiras en Cuba y demostrar la utilidad de un sistema de aglutinación con partículas de látex cubano y los sistemas inmunocromatogénicos comerciales LEPTO Dipstick, Lepto Tek Lateral Flow, Lepto Tek Dri Dot y SD Leptospira IgM-IgG. Métodos: en esta investigación descriptiva se utilizaron sueros de casos controles positivos y negativos para evaluar y medir el valor diagnóstico de los sistemas serológicos rápidos con respecto al método de referencia de microaglutinación (MAT). Todas las técnicas utilizadas en este reporte aparecen descritas en el Manual de Operaciones y Procederes del Laboratorio de Leptospiras, del Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kourí". Resultados: todos los sistemas estudiados presentaron aceptables valores de sensibilidad, especificidad y concordancia en comparación con el método de referencia internacional de microaglutinación con microrganismos vivos. Se constató la amplia selectividad (reactividad antigénica) y la fiabilidad diagnóstica de los sistemas, se destacan en particular el látex mezclado de producción nacional, el LEPTO Dipstick y el SD Leptospira IgM-IgG. Conclusiones: ninguno de los procedimientos utilizados fue superado en cuanto a su sencillez, rapidez, simplicidad técnica y grado de ejecución al comparárseles con los métodos tradicionales, incluido el de referencia, y todos resultaron útiles en la pesquisa de anticuerpos frente a leptospiras.

Introduction: human leptospirosis requires rapid and early microbiological diagnosis since it is a common lethal disease worldwide. Objectives: to increase the quality of microbiological diagnosis of this infection, to expand the knowledge on the circulation of groups of leptospiras in Cuba and to show the benefits of an agglutination assay using Cuban latex particles and of commercial immunochromatogenic systems LEPTO Dipstick, Lepto Tek Lateral Flow, Lepto Tek Dri Dot and SD Leptospira IgM-IgG. Methods: this descriptive research used sera from positive and negative control cases to evaluate and measure the diagnostic value of rapid serological diagnosis systems with respect to the microagglutination method of reference (MAT). All the techniques used in this report are described in the Manual of Operations and Procedures of the Leptospira Lab in "Pedro Kourí" Institute of Tropical Medicine. Results: all the studied diagnosis systems exhibited acceptable values of sensitivity, specificity and agreement when compared to the international microagglutination method of reference with live microorganisms. The great selectivity (antigen reactivity) and the diagnostic reliability of the diagnostic systems were confirmed; particularly the mixed Cuban-made latex, the LEPTO Dipstick and the SD Leptospira IgM-IgG. Conclusions: the procedures used in this research work exceeded the traditional methods including the microagglutination method of reference in terms of easiness, rapidity, technical simplicity and level of performance, and all were useful for the screening of antibodies to leptospiras.

Carga de enfermedad por meningitis bacteriana, Cuba 2006

Introducción: la meningitis bacteriana constituye una preocupación para los médicos y los sistemas de salud en general de cualquier país, así como para los organismos internacionales. Objetivo: estimar las cargas por morbilidad y mortalidad por meningitis bacteriana en Cuba para 2006. Métodos: se utilizaron los datos de mortalidad y de incidencia de la encuesta epidemiológica de la Vigilancia Nacional de Meningitis Bacteriana del Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kourí". Los procedimientos de estimación se basaron en las recomendaciones de la Organización Mundial de la Salud con el uso del DISMOD y las hojas de cálculos establecidas al efecto. Resultados: la carga global de meningitis bacteriana se estimó en 3527,26 años de vida ajustados por discapacidad (AVAD), lo que representó la pérdida de 31,3 años por cada 100 000 habitantes. La carga por morbilidad y mortalidad de meningitis bacteriana sin ponderar la secuela resultó 2056,25 años de vida ajustados por discapacidad, 55,9 % correspondió sin agente etiológico identificado, seguida de las originadas por Streptococcus pneumoniae (30,9 %), Neisseria meningitidis (9,5 %) y por Haemophilus influenzae tipo b (3,6 %). La carga por mortalidad fue aproximadamente 2 039 años de vida perdidos (AVP) por muerte prematura, o sea 57,8 %. Los menores de 5 años aportaron la mayor carga global de años de vida ajustados por discapacidad y dentro de ellos S. pneumoniae el que generó la mayor carga. Conclusión: la carga por meningitis bacteriana resultó elevada y corroboró su alta utilidad para evaluar los problemas de salud.

Introduction: bacterial meningitis is a real concern for physicians and general health systems of any country as well as the international bodies. Objective: to estimate burdens of disease from morbidity and mortality caused by bacterial meningitis in Cuba during 2006. Methods: the mortality and the incidence data of the epidemiological survey from the National Surveillance of Bacterial Meningitis of "Pedro Kourí" Institute of Tropical Medicine were used. The estimation methods were based on the WHO recommendations by using the DISMOD and the required Excel spreadsheets. Results: the global burden of bacterial meningitis was estimated at a total of 3527.26 Disability Adjusted Lost Years (DALYs), which accounted for 31.3 years lost per 100 000 inhabitants. Morbidity and mortality burden of bacterial meningitis without sequel weighing was 2056.25 disability adjusted lost years, being the 55.9 % caused by unidentified agent, followed by S. pneumoniae (30.9 %), N. meningitidis (9.5 %) and H influenza type b (3.6 %). The mortality burden was 2 039 years of life lost from premature death, that is, 57.8 % of the global burden. Children under five years of age contributed the biggest global burden of disability adjusted lost years, and S. penumoniae generated the biggest burden. Conclusion: the burden of bacterial meningitis was high. Burden of disease is an important measure to assess health problems.

Rhodococcus equi en paciente VIH/sida: primera detección molecular en Cuba

Introducción: Rhodococcus equi es reconocido como un patógeno emergente que causa importante morbilidad y mortalidad entre los pacientes inmunocomprometidos. Objetivo: confirmar la presencia de R. equi en líquido pleural mediante la técnica del polimorfismo en la longitud de los fragmentos de restricción. Métodos: se empleó muestra de líquido pleural de un paciente sida con síntomas respiratorios. Se realizaron cultivos microbiológicos, pruebas de tinción, fenotípicas, bioquímicas y la técnica del polimorfismo en la longitud de los fragmentos de restricción para el diagnóstico del microorganismo. Resultados: las técnicas de tinción, fenotípicas y bioquímicas brindaron un diagnóstico sugestivo de infección por R. equi, el cual fue confirmado por las técnicas moleculares utilizadas. Conclusiones: este trabajo reporta la detección molecular, por primera vez en Cuba, de R. equi en paciente VIH/sida. Los resultados obtenidos permiten sugerir que técnicas de biología molecular pueden ser aplicadas en el diagnóstico y la identificación de R. equi.

Introduction: Rhodococcus equi is recognized as an emerging pathogen that causes important morbidity and mortality among immunocompromised patients. Objective: to confirm the presence of R. equi in pleural fluid through the restriction fragment length polymorphism technique. Methods: the pleural fluid sample from one AIDS patient with respiratory symptoms was used. Microbiologic culture, staining tests, phenotypic and biochemical tests and restriction fragment length polymorphism technique for the diagnosis of microorganism were performed. Results: the staining technique along with the phenotypic and biochemical tests provided the presumptive diagnosis of R. equi infection, which was further confirmed by the molecular techniques. Conclusions: this paper reported the molecular detection of R. equi from one HIV/aids patient for the first time in Cuba. The results suggested that the molecular biology techniques could be used in the diagnosis and identification of R. equi.

**Detección por inmunohistoquímica de Leishmania infantum en hámster infectado experimentalmente**

Introducción: la leishmaniasis visceral se considera la forma más severa de las leishmaniasis y puede llegar a ser fatal en ausencia de tratamiento oportuno. En América Latina la infección es causada por Leishmania infantum (syn. Leishmania chagasi). El diagnóstico inequívoco y la selección de un adecuado modelo experimental son una necesidad para emprender estudios con este agente biológico. Objetivo: determinar la utilidad de la técnica de inmunohistoquímica en la identificación de Leishmania. Métodos: los animales se inocularon con promastigotes de Leishmania infantum. Se monitoreó el peso corporal de cada animal y se determinó el peso relativo de bazos e hígados. Para la identificación de amastigotes se prepararon improntas coloreadas con Giemsa y se desarrolló un protocolo de inmunohistoquímica en tejido incluido en parafina. Resultados: se reprodujo la infección en el modelo experimental. La técnica de inmunohistoquímica fue positiva en los cortes de los animales infectados y no reactiva para el grupo control. Al comparar con la tinción mediante Giemsa, esta metodología facilitó la identificación, particularmente en órganos con escasos parásitos. Conclusiones: la inmunohistoquímica es una herramienta específica para la detección de Leishmania, facilita la observación y evita confusiones en la identificación del parásito, lo que mejora la calidad del diagnóstico.

Introduction: visceral leishmaniasis is considered the most severe form of this disease and can be fatal if not properly treated. In Latin America, the infection is caused by Leishmania infantum (syn. Leishmania chagasi). The unequivocal diagnosis and the selection of a suitable experimental model are required to undertake studies on this biologic agent. Objective: to determine the advantages of immunohistochemistry in identifying Leishmania. Methods: hamsters were inoculated with Leishmania infantum promastigotes. The body weights of every animal were monitored, and the relative weights of their spleens and livers were estimated. For identification of amastigotes, Giemsa-stained imprints and an immunohistochemistry protocol in paraffin-embedded tissues were developed. Results: the infection was reproduced in the experimental model. The immunohistochemistry was positive in infected animal sections and non-reactive for the control group. When compared with the Giemsa staining, this methodology facilitated the identification, particularly in organs infected with few parasites. Conclusions: immunohistochemistry is a specific tool for detection of Leishmania since it facilitates observation and eliminates any confusion in the identification of the parasite, thus improving the quality of diagnosis.

Alteración de la carga eritrocitaria utilizando el método de azul Alcian en extractos de Ascaris lumbricoides

Introducción: el estudio de las interacciones hospedador-parásito es un nuevo desafío para comprender aspectos del metabolismo parasitario, los mecanismos de invasión, escape inmunológico y daño. Ascaris lumbricoides puede provocar anemia y trombosis. Previamente se demostró que este parásito altera la carga superficial eritrocitaria, lo cual indica que puede captar ácido siálico del glóbulo rojo. Objetivo: estudiar el efecto producido por extractos del parásito adulto sobre la carga eritrocitaria, utilizando el método de azul Alcian y comparar su sensibilidad con el método de Polibrene. Métodos: se trabajó con 55 extractos parasitarios [EA] y con suspensiones de eritrocitos grupo O. Se realizó el tratamiento de los glóbulos incubando el sedimento con igual volumen de [EA] a 37 ºC durante 1 h. El Control (eritrocitos sin contacto con [EA]) fue incubado con tampón fosfato pH 7,4. Se aplicó el método de azul Alcian y se determinó la carga aniónica eritrocitaria porcentual (CAE%) en el Control y en los glóbulos tratados. Se definió el coeficiente experimental de carga aniónica eritrocitaria (Cexp CAE), como el cociente entre CAE% final e inicial. Resultados: se observó que 27 de los 55 [EA] (49,1 %) modificaron la carga de los glóbulos rojos, el Cexp CAE para estos eritrocitos resultó 0,75 ± 0,1144 y para los que no mostraron variación de carga de 0,94 ± 0,04450. El análisis estadístico concluyó que los métodos de Polibrene y de azul Alcian tienen sensibilidades comparables (p> 0,20). Conclusiones: Ascaris lumbricoides es capaz de captar ácido siálico del eritrocito, lo que contribuiría a explicar la trombosis atribuida al parásito, pero también sugeriría que el nematodo lo podría utilizar en sus rutas metabólicas o en sus estrategias de evasión inmunológica.

Introduction: the study of the host-parasite interactions is a new challenge to understanding some aspects of the parasitic metabolism and the mechanisms of invasion, immunological evasion and damage. Ascaris lumbricoides may cause anemia and thrombosis. It was previously shown that Ascaris lumbricoides modified the superficial charge of erythrocytes, which means that the parasite can capture sialic acid from the red blood cell. Objective: to study the effect of adult parasite extracts on the erythrocyte charge using the Alcian Blue method and to compare its sensitivity with the Polybrene method. Methods: fifty five adult parasite extracts and Group O erythrocyte suspensions were used. The erythrocytes were treated by incubating the sediment with an equal volume of parasite extracts for one hour at 37 ºC. The control group (erythrocytes without any contact with the parasite extracts) was incubated with pH 7.4phosphate buffer solution. Alcian Blue method was applied and the percentage erythrocyte anionic charge was determined in the control group and in the treated red cells. The experimental coefficient of erythrocyte anionic charge was defined as the quotient between the initial and the final percentage erythrocyte anionic charge. Results: it was shown that 27 out of 55 parasite extracts (49.1 %) modified the charge of the red blood cells, being their experimental coefficient of the erythrocyte anionic charge 0.75 ± 0.1144 whereas the same coefficient amounted to 0,94 ± 0.0445 for those which did not show any charge variation. The statistical analysis concluded that the Polybrene and Alcian Blue Methods had comparable sensitivities (p>0.20). Conclusions: A. lumbricoides is able to capture sialic acid from the erythrocyte, which would not only explain the thrombosis attributed to the parasite, but also suggest that the nematode could use this acid either in its metabolic routes or for its strategies of immunological evasion.

**Comportamiento clínico-terapéutico de Fasciola hepatica en una serie de 87 pacientes**

Introducción: la fasciolosis, por Fasciola hepatica, muestra a escala mundial un incremento en la incidencia de enfermos en los últimos años. Cuba se encuentra entre aquellos países donde se reportan casos esporádicos y algunos brotes epidémicos. Objetivo: describir el comportamiento clínico-terapéutico de esta trematodiosis de trasmisión digestiva en una serie de 87 pacientes ingresados en el Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kourí" desde enero de 1996 a diciembre de 2005. Método: los pacientes se dividieron en 2 grupos atendiendo al fármaco prescrito, dihidroemetina o triclabendazol. Se recogieron las variables clínicas al inicio del diagnóstico y 90 d después del tratamiento; se hallaron las medias y la desviación estándar. Resultados: el sexo masculino predominó discretamente con 54 % en nuestra serie de pacientes ingresados en el servicio de medicina tropical del instituto. La ingestión de berro (Nasturtium officinale) estuvo presente en casi la mitad de los pacientes. El dolor abdominal, fiebre y astenia resultaron los síntomas de mayor frecuencia. El triclabendazol y la dihidroemetina fueron útiles en el tratamiento. Conclusiones: se comprobó la utilidad de los exámenes de laboratorio en el diagnóstico y seguimiento de los enfermos. Los antiparasitarios dihidroemetina y triclabendazol resultaron efectivos a las dosis utilizadas con efectos adversos menores.

Introduction: in the last few years, the Incidence rate of fascioliosis caused by Fasciola hepatica has increased worldwide. Cuba is one of the countries that have reported sporadic cases and also some outbreaks of fasciolosis. Objective: to describe clinical and therapeutic features of this trematodiasis of digestive transmission found in 87 patients, who had been admitted to "Pedro Kourí" Institute of Tropical Medicine from January 1996 to December 2005. Methods: patients were divided into 2 groups according to the prescribed drug, that is, triclabendazole and dihydroemetine. The clinical variables were collected at the time of diagnosis and 90 days after treatment; the means and the standard deviation were estimated. Results: males was slightly predominant (54) in our series of patients admitted to the institute service. Consumption of watercress (Nasturtium officinale) was found in almost half of the patients. Abdominal pain, fever and malaise were the most frequent symptoms. Both drugs were useful to treat F. hepatica. Conclusions: this study showed the usefulness of lab tests for diagnosis and follow-up of patients after treatment. The anti-parasitic drugs dihydroemetine and triclabendazole proved to be effective at the prescribed doses in this research with minor adverse effects.

Tratamiento eficaz con tintura de añil 5 % de una paciente infestada por Pediculus capitis

Introducción: en Cuba se reportaron altas frecuencias de pediculosis capitis desde finales de los años noventa, particularmente en algunos grupos de escolares y sus convivientes. Estos últimos se involucran en la cadena de transmisión de esos insectos y pueden desempeñar, en la actualidad, una función importante como reservorios del parásito. Objetivo: reportar la eficacia del tratamiento con añil cimarrón en una paciente infestada de Pediculus capitis. Métodos: se describe un caso de infestación persistente con pediculosis capitis en una paciente de 55 años de edad, tratada con solución de permetrina 1 % y posteriormente con tintura de añil cimarrón 5 %. Resultados: la identificación microscópica de adultos y estadios pre-adultos del parásito confirmaron la presencia de Pediculus capitis. El tratamiento del cabello con permetrina 1 % no fue eficaz en 2 aplicaciones realizadas. Como alternativa de tratamiento, se aplicó tintura de añil 5 %, lo que permitió disminuir la población de ectoparásitos adultos y logró eliminar la infestación después de una segunda aplicación, con la constante extracción de las liendres realizada por el personal paramédico encargado del caso. Conclusión: la aplicación de este procedimiento inocuo podría servir como alternativa terapéutica para esta afección.

Introduction: pediculosis capitis was very frequently reported in Cuba since the end of the 90's, particularly in some groups of school children and their relatives. The latter are involved in a chain of transmission of these insects and may play an important role at present as parasite reservoirs. Objective: to report on the efficacy of the treatment of one female patient suffering from Pediculus capitis by using 5 % Indigofera suffruticosa Mill (añil cimarrón) tincture. Methods: a case of persistent infestation with pediculosis capitis was described in which a 55 years-old patient was firstly treated with 1% permethrin solution and later with 5 % Indigofera suffruticosa Mill tincture. Results: the microscopic identification of adult parasites and pre-adult stages of the parasite confirmed the presence of pediculus capitis. The hair treatment with 1 % permethrin was not effective after two applications. As an alternative, 5 % Indigofera suffruticosa Mill tincture was used and then the population of adult ectoparasites was reduced and the infestation was eliminated after the second application, with the paramedical staff continuously taking the nits out from the patient's hair. Conclusion: the use of this innocuous method may become a therapeutic alternative to treat this illness.