Revista Cubana de Medicina Tropical

Sociedad Cubana de Microbiología y Parasitología

**Prevalencia de infección por Entamoeba histolytica en escuelas públicas de la ciudad de Maceió, Alagoas, Brasil**

Introducción: la prevalencia de amebiasis ha tenido que ser reevaluada desde que fue demostrada la existencia de dos especies de Entamoeba indistinguibles morfológicamente, pero diferentes en cuanto a su capacidad de producir enfermedad: Entamoeba histolytica (patógena) y Entamoeba dispar (no patógena). Con el empleo de procedimientos capaces de identificar características antigénicas específicas es posible hacer la diferenciación y evaluar la prevalencia real de amebiasis (es decir, de infecciones producidas por Entamoeba histolytica). Objetivo: determinar la prevalencia de infección por el complejo E. histolytica/E. dispar y, más tarde, de infección por la especie Entamoeba histolytica en muestras fecales de estudiantes de escuelas públicas de Maceió, Alagoas, Brasil. Métodos: primero se realizó la detección microscópica de infección por el complejo E. histolytica/E. dispar en muestras fecales de 1 798 estudiantes (para ello, se empleó la técnica de concentración en formol-éter). A continuación, se confirmó la infección por el mencionado complejo mediante el empleo del ensayo inmunoenzimático ENZYMEBA. Posteriormente, a las muestras confirmadas positivas al complejo E. histolytica/E. dispar se les aplicó el procedimiento inmunoenzimático E. histolytica II®, que detecta de modo específico una adhesina de la especie Entamoeba histolytica. Resultados: el empleo de la observación microscópica de heces y del ensayo ENZYMEBApermitió demostrar una prevalencia de infección por el complejo E. histolytica/E. dispar de 3,8 %. La utilización del procedimiento E. histolytica II® condujo al hallazgo de una prevalencia de infección por la especie Entamoeba histolytica de 1,0 %. La observación microscópica de heces presentó un bajo valor predictivo positivo (26,4 %) para la detección de Entamoeba histolytica respecto al ensayo E. histolytica II®. Conclusiones: aunque las cifras de prevalencia encontradas son bajas, este estudio demuestra por primera vez la ocurrencia de infección por Entamoeba histolytica en Maceió, Alagoas, Brasil. A pesar de que el examen microscópico de heces no es un procedimiento apropiado para el diagnóstico de amebiasis, puede ser utilizado como prueba de descarte en estudios epidemiológicos. La demostración de infección por Entamoeba histolytica en muestras positivas a infección por el complejo E. histolytica/E. dispar puede ser realizada mediante ensayos para la detección específica de coproantígenos del parásito, como Entamoeba histolytica II®.

Introduction: distribution of amebiasis has been reevaluated since it was demonstrated that two morphologically indistinguishable species of Entamoeba exist, but they differ in their capacity to cause disease: Entamoeba histolytica (pathogenic) and Entamoeba dispar (nonpathogenic). The use of techniques to identify specific antigenic characteristics makes it possible to establish differential diagnosis and to assess the actual prevalence of amebiasis cases (caused only by Entamoeba histolytica). Objective: to determine the prevalence of infection by Entamoeba histolytica/Entamoeba dispar complex and, in a second phase, the prevalence of infection by Entamoeba histolytica in stool samples of students from public schools in Maceió, Alagoas, Brazil. Methods: screening of Entamoeba histolytica/Entamoeba dispar complex infection cases was carried out by formol-ether concentration technique on stool samples of 1 798 students. The infection caused by this complex was confirmed with an enzyme linked immunosorbent assay (ENZYMEBA). Positive samples were then analyzed with a specific ELISA (Entamoeba histolytica II®) in order to detect an adesin only present in Entamoeba histolytica. Results: the microscopic observation of feces and the Enzymeba test allowed demonstrating the prevalence of Entamoeba histolytica/Entamoeba dispar infection amounting to 3.8 %. The Entamoeba histolytica II procedure showed the prevalence of infection by Entamoeba histolytica of 1.0%. Therefore, the microscopy presented a low predictive positivity value (26.4%) for detection of Entamoeba histolytica compared to Entamoeba histolytica II® method. Conclusions: although the prevalence figures are not high, the study shows for the first time the occurrence of Entamoeba histolytica in Maceió, Alagoas, Brazil. In spite of the fact that the optical microscopic test of feces is not the appropriate technique for amebiasis diagnosis, it can be used as a screening method in epidemiological studies. Cases of Entamoeba histolytica infection in positive samples by microscopy can be confirmed by using a specific test for detection of the parasite coproantigen like Entamoeba histolytica II®.

Aplicación de herramientas serológicas y moleculares para el diagnóstico de coriorretinitis por Toxoplasma gondii

Introducción: Toxoplasma gondii, agente causal de la toxoplasmosis, es un protozoario intracelular obligado que puede afectar al globo ocular, siendo la causa más común de uveítis posterior. Objetivo: determinar la utilidad de las técnicas serológicas y moleculares para el diagnóstico de la toxoplasmosis ocular en pacientes con uveítis. Métodos: se diseñó un estudio de corte transversal para comparar un grupo de pacientes afectados por coriorretinitis toxoplásmica y otro con signos sugestivos de coriorretinitis no toxoplásmica. En ambos grupos se utilizaron métodos serológicos como la inmunofluorescencia indirecta y la prueba de inmunoensayo enzimático (ELISA), y la reacción en cadena de la polimerasa para el diagnóstico de la toxoplasmosis ocular. Resultados: las técnicas serológicas permitieron detectar los anticuerpos IgG anti-Toxoplasma en 100 % de los pacientes con coriorretinitis toxoplásmica, de ellos fueron positivos a los anticuerpos IgM solo 3 pacientes y 1 tuvo un resultado débil a la avidez IgG. La reacción en cadena de la polimerasa detectó el ADN de Toxoplasma gondii en 15 de los 47 pacientes para una sensibilidad de 31,9 %. Conclusiones: se reporta la detección de anticuerpos anti-Toxoplasma, en todos los casos de coriorretinitis toxoplásmica a través de los métodos serológicos, aunque la técnica más sensible fue la inmunofluorescencia indirecta. Se empleó la detección molecular del ADN de Toxoplasma gondii en pacientes con toxoplasmosis ocular, por primera vez en Cuba. Los resultados permiten sugerir el uso de técnicas serológicas y moleculares que ayuden a confirmar el diagnóstico de infección por Toxoplasma en pacientes con coriorretinitis.

Introduction: Toxoplasma gondii, the causative agent of toxoplasmosis, is an intracellular protozoan that can affect the eye, and be the most common cause of posterior uveitis. Objective: to determine the usefulness of serological and molecular techniques for the diagnosis of ocular toxoplasmosis in patients with uveitis. Methods: a cross-sectional study was designed in order to compare a group of patients with toxoplasmic retinochoroiditis and another affected by non-toxoplasmic retinochoroiditis. In both groups serological methods such as indirect immunofluorescence assay, immunoassay (ELISA), and the polymerase chain reaction were used for the diagnosis of ocular toxoplasmosis. Results: serological techniques allowed detecting anti-Toxoplasma IgG antibodies in 100 % of patients with toxoplasmic retinochoroiditis, and only 3 patients were positive to IgM antibodies. Finally, only one had a weak result for IgG avidity. The polymerase chain reaction detected DNA from Toxoplasma gondii in 15 out of 47 patients for a sensitivity of 31.9 %. Conclusions: this paper reports the detection of anti-Toxoplasma antibodies in all toxoplasmic retinochoroiditis cases by serological methods; but the most sensible method was immunofluorescence assay. The molecular detection of Toxoplasma gondii`s DNA in patients with ocular toxoplasmosis was employed for the first time in Cuba. The results suggest that serological and molecular techniques can be applied to confirm the diagnosis of Toxoplasma infection in patients with toxoplasmic retinochoroiditis.

Hallazgos epidemiológicos en infecciones parasitarias intestinales de un grupo de niños ingresados por diarreas

Introducción: la enfermedad diarreica es aún una causa importante de mortalidad en países en desarrollo, en los que afecta principalmente a los niños menores de 5 años de edad. En Cuba, aunque la mortalidad por esta causa se ha reducido, puede ser un importante problema de salud en ciertas épocas del año. Entre los grupos de agentes biológicos que se pueden encontrar en niños con diarreas están los parásitos, de los cuales no siempre se conoce bien su papel como agente causal. Objetivo: determinar algunas características epidemiológicas de las infecciones parasitarias en niños ingresados con diarrea. Métodos: se realizó un estudio observacional descriptivo en niños ingresados con diarrea en la sala de gastroenterología del hospital pediátrico "William Soler" de La Habana, desde noviembre de 2006 a octubre de 2007. A todos los niños se les recogieron muestras de heces para estudios parasitológicos y se les llenó un cuestionario con datos clínicos y epidemiológicos. Resultados: se encontró una mayor frecuencia de infecciones por protozoos para todas las edades (p< 0,01); el grupo mayor de 2 años resultó el más frecuente infectado en general (68,52 %) y el más parasitado por Giardia lamblia (35,18 %), mientras que los lactantes presentaron la menor frecuencia de parasitismo intestinal (18,18 %). Las infecciones por protozoos en general y por el complejo Entamoeba histolytica/Entamoeba dispar en particular, fueron más frecuentes en la estación de lluvia que en la de seca (p< 0,05). Por último, se encontró que los niños asistentes a círculos infantiles y a escuelas primarias, presentaron una mayor frecuencia de infección con Giardia lamblia que por Entamoeba histolytica/Entamoeba dispar y Cryptosporidium (p< 0,05). Conclusiones: se encontró un predominio de infecciones por protozoos en niños ingresados con diarreas, las cuales se presentaron más frecuentes en los mayores de 2 años y en la estación de lluvia.

Introduction: acute diarrhea is a major cause of mortality in developing countries, and children aged less than five years are the most affected. Despite of decreasing mortality rates in Cuba, this illness may be an important health problem in some periods of the year. Among the groups of biological agents found in children with diarrhea are the parasites but their role as etiological agent is not always well recognized. Objective: to determine some epidemiological characteristics of parasitic infections in hospitalized children due to diarrhea. Methods: an observational descriptive study was performed on children who had diarrhea and were admitted to the gastroenterology service ward in "William Soler" pediatric hospital in Havana from November 2006 to October 2007. Their stool samples were collected for parasitological studies, and some questionnaires were filled out with corresponding clinical and epidemiological data. Results: the frequency of protozoan infections was higher than that of helminthic ones for all the age groups(p< 0.01), and children aged over 2 years was the most frequently infected with all types of parasites in general (68.52 %), and with Giardia lamblia (35.18 %) in particular whereas the infant group was the less frequently infected with intestinal parasites (18.18 %). The infections caused by protozoa and by Entamoeba histolytica/Entamoeba dispar were more frequent in the rainy season than in the dry season (p< 0.05). Finally, a higher prevalence of infections with Giardia lamblia than with Entamoeba histolytica/Entamoeba dispar or Cryptosporidium was found in day care and primary school children (p< 0.05). Conclusions: a higher prevalence of protozoan infections was observed and they occur more frequently in children aged more than two years old and during the rainy season.

Virus de la inmunodeficiencia humana-sida en pacientes diagnosticados con herpes zoster en Gabón, África

Introducción: el herpes zoster es consecuencia de la reactivación del virus de la varicela zoster en el ganglio de los nervios sensitivos, generalmente asociada a la depresión del sistema inmunológico, como en el sida. Objetivo: determinar la positividad para el VIH en pacientes afectados por herpes zoster. Métodos: se realiza un estudio observacional descriptivo de corte transversal en el que se incluyeron todos los pacientes de los 2 sexos de 15 años o más, que asistieron al servicio de urgencias del centro hospitalario regional de Mouila, Gabón, con lesiones características de herpes zoster. Resultados: el 74,13 % de los pacientes con herpes zoster presentó positividad para el VIH, predominó el sexo masculino y la edad media fue de 29,9 años. El dolor constituyó el síntoma inicial en el mayor porcentaje de los casos y la localización torácica la más frecuente. La localización en varios dermatomas estuvo presente en 16,27 %. La neuralgia pre-herpética tuvo un promedio de 3,209 días, variando en dependencia del dermatoma afectado; el craneal fue el de menor duración. La complicación más frecuente resultó la neuritis pos-zosteriana. Predominó el VIH tipo 1, los LTCD4+ estuvieron entre 200 y 499 células/mm³. La respuesta al tratamiento fue inadecuada en pacientes donde se asociaron los dos tipos de VIH y la cuenta de LTCD4+ estuvo por debajo de 500 células/mm³. Conclusiones: la ocurrencia de herpes zoster en personas jóvenes residentes en áreas de alta incidencia de VIH/sida, puede ser un indicador clínico de seropositividad y una de sus manifestaciones.

Introduction: herpes zoster results from the viral reactivation of the zoster´s varicella in the ganglion of the sensitive nerves, and is regularly associated to depression of the immunological system as is in the case of AIDS. Objective: to determine positivity for HIV in patients with Herpes Zoster. Methods: an observational, descriptive and cross-sectional study, which included all the 15 years-old or over patients of both sexes who went to the emergency service of the regional hospital in Mouila, Gabon and who presented characteristic herpes zoster lesions, was conducted. Results: in the studied patients, 74.13 % with herpes zoster were HIV-positive, males prevailed and the average age was 29.9 years old. In the majority of the cases, pain was the initial symptom and the more frequent location was the thorax. The location of several dermatomes was found in 16.27 % of the patients. Pre herpetic neuralgia averaged 3,209 days depending on the type of affected dermatome, being the cranial one the shortest. The most frequent complication was the post-zoster neuritis. Type I HIV was predominant; the LTCD4+ values ranged 200 to 499 cell/mm³. The treatment response was inadequate in patients with two types of HIV and the LTCD4+ count was below 500 cell/mm³. Conclusions: the presence of herpes zoster in young persons living in high AIDS/HIV incidence areas could be both a good clinic indicator of seropositivity and one of the disease manifestations.

Validación del sistema UMELISA HBsAg PLUS utilizando muestras de suero de cordón umbilical

Introducción: la selección y el desarrollo de métodos analíticos siempre ha sido un tema importante para los laboratorios de ensayo. Para adoptar un método se hace necesario validarlo, porque el objetivo de la validación es probar la aptitud de los métodos, así como la competencia del laboratorio para realizar determinado ensayo. El sistema UMELISA HBsAg PLUS no contempla dentro de su aplicación el empleo de muestras de suero obtenidas a partir de sangre del cordón umbilical, sin embargo, con este tipo de muestra se certifica el uso de la placenta como materia prima. Objetivo: teniendo en cuenta la necesidad de demostrar que el cambio no afecta los parámetros de desempeño del sistema, se hizo su validación para muestras de suero de cordón umbilical. Métodos: se emplearon tres paneles de muestras en los estudios de especificidad, concordancia con el sistema de referencia Hepanostika HBsAg Uni-Form II, robustez, precisión a dos niveles de repetibilidad (intraensayos) y precisión intermedia (interensayos), y límite de detección. Resultados: la validación del sistema mostró los siguientes indicadores: especificidad y concordancia del 100 %, sistema robusto frente a los cambios de temperatura entre 35 y 38 °C, elevada precisión intraensayos (4,65 %) e interensayos (CV menores que 20 %), límite de detección correspondiente a una dilución de 1/10 000. Conclusiones: los resultados demostraron que el sistema UMELISA HBsAg PLUS se puede emplear para la detección de HBsAg en muestras de suero de cordón umbilical.

Introduction: the selection and the development of analytical methods have always been an important issue for testing laboratories. The adoption of a method requires validation because the objective is to prove the capability of a method as well as the competencies of the laboratory to make an specific assay. The range of applications of UMELISA HbsAg PLUS system does not include the use of serum samples taken from the umbilical cord blood; however the use of placenta as raw material is certified with this kind of sample. Objective: to validate this system for umbilical cord serum sample taking into account the need of proving that this change does not affect the performance parameters of the system. Methods: three panels of samples were used to study specificity, agreement with the reference system Hepanostika HbsAg Uni-Form II, robustness, precision at two levels of repeatibility (intrassay) and intermediate precision (interassay) and detection limit. Results: validation of the system showed the following indicators: specificity and agreement of 100 %, robust system against temperatures changes between 35 and 38 °C, high intraassay precision (4.65 %) and interassays (VC less than 20 %), detection limit corresponding to 1/10 000 dilution rate. Conclusions: obtained results showed that UMELISA HbsAg PLUS system may be used to detect HBsAg in umbilical cord serum samples.

**Enfermedad pulmonar por especies del complejo Mycobacterium avium intracellulare y correspondencia terapéutica**

Introducción: la preocupación mundial ante las enfermedades causadas por micobacterias ambientales es creciente, debido a las dificultades diagnósticas y de tratamiento. Objetivos: determinar el comportamiento de la enfermedad pulmonar por especies del complejo Mycobacterium avium intracellulare y la correspondencia con la terapéutica recibida en el Hospital Neumológico Benéfico Jurídico de La Habana, durante el período 2000-2010. Métodos: se realizó un estudio descriptivo retrospectivo, que abarcó 55 pacientes con el diagnóstico de la enfermedad, los cuales cumplieron con los criterios de inclusión-exclusión predefinidos; la tendencia en el registro de diagnósticos se basó en el coeficiente de correlación lineal; en las variables cualitativas y cuantitativas discretas se usaron distribuciones de frecuencia con el cálculo del porcentaje y su respectivo intervalo de confianza de 95 %. Resultados: se obtuvo una tendencia decreciente en el diagnóstico de enfermedad pulmonar por especies del complejo Mycobacterium avium intracellulare, el 47,3 % de los pacientes estudiados se encontraba entre los 50 y 69 años de edad. La mayor parte del grupo no tenía ocupación de riesgo epidemiológico y la comorbilidad pulmonar se detectó en 97,9 %, sobresaliendo la tuberculosis pulmonar. Se comprobó la no correspondencia entre la terapéutica recibida y el régimen recomendado por la American Thoracic Society, en 100 % de los pacientes. Conclusión: la instauración de un programa ajustado a las normativas de tratamiento internacionalmente aceptadas, constituye en el Hospital Benéfico Jurídico, una necesidad para la atención a este grupo de enfermos.

Introduction: the global concern about diseases caused by environmental mycobacteria is growing since their diagnosis and treatment are difficult. Objectives: to determine the behavior of Mycobacterium avium intracellulare complex pulmonary disease, and the therapeutic match with the treatment given at Benéfico Jurídico Pneumological Hospital, during the 2000-2010 period. Methods: a retrospective descriptive study of 55 patients diagnosed with the disease, who met the previously defined inclusion/exclusion criteria. The diagnostic registration trend was based on the linear correlation coefficient; the qualitative quantitative discrete variables used frequency distributions with percentage calculations and their respective 95% confidence intervals (CI). Results: a decreasing trend in the diagnosis of pulmonary disease from Mycobacterium avium-intracellular complex species; 47.3 % of the studied patients aged 50 to 69 years. Most of the group had no occupation with epidemiological risk, and the pulmonary comorbidity was detected in 97.9 % of patients, mainly pulmonary tuberculosis. A mismatch between the received therapy and the recommended treatment by the American Thoracic Society (ATS) was proved in 100% of patients. Conclusion: the introduction of a therapeutic program adapted to the internationally accepted standards of treatment is a must for the care of this group of patients in Benefico Juridico Hospital.

Caracterización fenotípica de enterobacterias aisladas en pacientes con el virus de la inmunodeficiencia humana/sida

Introducción: en pacientes con el virus de la inmunodeficiencia humana/sida se incrementa el riesgo de padecer infecciones por enterobacterias. Objetivo: caracterizar fenotípicamente las enterobacterias causantes de infecciones en estos pacientes. Métodos: se realizó un estudio descriptivo prospectivo, en el Instituto "Pedro Kourí", de marzo de 2010 a marzo de 2011. Se procesaron muestras de esputo, lavado bronquial, secreciones faríngeas, óticas y vaginales, orina, fecales, lesiones de piel, sangre y catéteres, en 65 pacientes (ambulatorios y hospitalizados). La identificación bacteriológica y la susceptibilidad antimicrobiana de los 73 aislamientos, se determinaron mediante sistema VITEK 2 Compact (bioMérieux, Francia). Resultados: se identificaron Escherichia coli (30), Klebsiella spp. (19), Enterobacter spp. (15), Proteus spp. (7) y Serratia spp. (2). Prevalecieron las sepsis en pacientes hospitalizados (87,7 %). Menos de 50 % de las enterobacterias resultaron resistentes a las cefalosporinas, excepto Klebsiella spp. y Enterobacter spp. (68,4 % y 93,3 % de resistencia a cefepima y cefoxitina, respectivamente), y más del 80 % se mostró sensible a la amikacina. Se observó resistencia a piperazilina/tazobactam y ciprofloxacina en 27,3 % y 15 %, respectivamente. Se detectó 34,2 % de cepas productoras de betalactamasas de espectro extendido. Conclusiones: Escherichia coli y Klebsiella spp. causan frecuentemente infecciones en pacientes VIH/sida. El estudio de la sensibilidad antimicrobiana por VITEK 2 Compact, sugiere que las cefalosporinas, aminoglucósidos, quinolonas y piperacilina/tazobactam, pudieran constituir una alternativa terapéutica en estos casos.

Introduction: the risk of infections caused by enterobacteria increases in HIV patients. Objective: to phenotypically characterize the enterobacteria responsible for infections in these patients. Methods: a prospective and descriptive study was conducted in "Pedro Kourí" Institute from March 2010 to March 2011. Samples of sputum, bronchial lavage, pharyngeal, ear and vaginal secretions, urine, stool, skin lesions, blood and catheters taken from 65 patients (ambulatory and hospital) were processed. Bacterial identification and antimicrobial susceptibility of 73 isolates were determined by automated system VITEK 2 Compact (bioMérieux, France). Results: Escherichia coli (30), Klebsiella spp. (19), Enterobacter spp. (15), Proteus spp. (7) and Serratia spp. (2) were identified. Sepsis in hospitalized patients (87.7 %) was prevalent. Less than 50 % of Enterobacteriaceae were resistant to cephalosporins, except Klebsiella spp. and Enterobacter spp. (68.4 % and 93.3 % resistance to cefepime and cefoxitin, respectively) and over 80% were sensitive to amykacin. Resistance to piperacillin/tazobactam and ciprofloxacin was observed in 27.3 % and 15 % of cases, respectively. In the study, 34.2 % of extended-spectrum beta-lactamases- producing strains was detected. Conclusions: Escherichia coli and Klebsiella spp. often cause infections in HIV patients. The study of antimicrobial susceptibility by using VITEK 2 Compact system, suggests that cephalosporins, aminoglycosides, quinolones and piperacillin/tazobactam, could be effective therapeutic alternatives in these cases.

Contribución al estudio de la criptococosis infantil en Cuba

Introducción: a partir de 1998 en el laboratorio de micología del Instituto "Pedro Kourí" se observó un incremento del número de aislamientos de Cryptococcus obtenidos de niños seronegativos al VIH con meningoencefalitis. Los reportes de criptococosis infantil a nivel mundial son infrecuentes y generalmente se encuentran asociados al sida. Objetivo: estudiar la criptococosis infantil en Cuba a través de la evaluación integral de 7 casos. Métodos: se realizó un estudio retrospectivo integral, se revisaron las historias clínicas de 7 pacientes pediátricos afectados por criptococosis menigoencefálica y se caracterizaron los aislamientos obtenidos (uno de cada paciente). A estos se les determinó la especie, variedad, serotipo, patogenicidad en un modelo murino y susceptibilidad a la anfotericina B. Resultados: la edad media de los niños fue de 5,8 años, con ligero predominio del sexo femenino (4:3). Los síntomas más frecuentes resultaron la cefalea, fotofobia, fiebre y los vómitos. En 6 pacientes el estudio citoquímico del líquido cefalorraquídeo y el examen imaginológico de cráneo evidenciaron anomalías. El diagnóstico microbiológico se realizó mediante examen directo y cultivo. Todos los aislamientos correspondieron con Cryptococcus neoformans serotipo A y la anfotericina B mostró una concentración mínima inhibitoria menor o igual que 0,125 mg/mL. El 85,7 % mostró actividad fenoloxidasa y elevada letalidad en los animales infectados (71,4-100 %). Conclusiones: el pronóstico de la meningoencefalitis por Cryptococcus está estrechamente ligado a un diagnóstico precoz. Esta realidad hace que deba tenerse siempre presente, por lo que los datos aportados bien pudieran servir de alerta a los médicos de asistencia.

Introduction: since 1998, an increasing number of Cryptococcus isolates obtained from HIV-negative children with meningoencephalitis was observed in the mycology laboratory at "Pedro Kourí" Institute. The global reports of child cryptococcosis are rare and usually associated with AIDS. Objectives: to study child cryptococosis in Cuba through the comprehensive evaluation of 7 cases. Methods: the clinical histories of seven pediatric patients with cryptococcal meningoencephalitis were examined and the obtained isolates (one per patient) were characterized. The species, variety, serotype, pathogenicity in a mouse model and amphotericin B susceptibility of the isolates were determined. Results: average age of the children was 5.8 years, with a slight female predominance (4:3). The most common symptoms were headache, photophobia, fever and vomiting. The cytochemical study of cerebral spinal fluid and skull imaging test showed abnormalities in 6 patients. The microbiological diagnosis was made through direct examination and culture. All the isolates were from Cryptococcus neoformans serotype A and amphotericin B showed a minimum inhibitory concentration £ 0.125 mg/mL. In the group, 85.7 % showed phenoloxidase activity and high lethality rate in infected animals (71.4 to 100 %). Conclusions: the prognosis of cryptococcal meningoencephalitis is closely linked to early diagnosis, therefore, this should be always kept in mind and the provided data from this study may serve as warning to attending physicians.

**Depósitos observados con larvas de Aedes aegypti durante el uso operacional del biolarvicida Bactivec**

Introducción: la determinación de los sitios de cría de Aedes aegypti constituye un factor de importancia para la aplicación de estrategias de control. Objetivo: identificar los depósitos utilizados por Aedes aegypti durante el período de uso operacional del biolarvicida Bactivec en el municipio Mariel. Métodos: de mayo 2008-2009, durante el período operacional del biolarvicida Bactivec, se realizó la búsqueda de criaderos positivos al culícido en áreas urbanas y semiurbanas de los consejos populares Boca/Mojica/Henequén, Mariel, Sabana/Zayas, Quiebra Hacha y Cabañas. Se identificaron todos los recipientes positivos al vector en las áreas en las que fueron colectados, se determinó el porcentaje de participación de cada tipo de recipiente en relación con el total de muestras positivas. Resultados: se identificaron 35 tipos de depósitos utilizados como sitio de cría del culícido. Los recipientes no útiles eliminables representaron el 54,28 %, los de almacenamiento de agua 14,29 % y los útiles 11,43 %; la presencia del vector del dengue en criaderos naturales y aguas contaminadas fue de 8,57 %. Conclusiones: los depósitos no útiles resultaron los más utilizados por el culícido para la puesta, seguido por los de almacenamiento de agua, los cuales se trataron con el biolarvicida. Se destaca la presencia de Aedes aegypti en aguas contaminadas, que también fueron tratadas con Bactivec.

Introduction: the detection of breeding sites of Aedes aegypti is an important factor for the implementation of control strategies. Objective: to identify the reservoirs where Aedes aegypti mosquito was observed during the period of operational use of Bactivec larvicide in Mariel municipality. Methods: during the period of operational use of Bactivec biolarvicide from May 2008 to 2009, breeding sites positive for this mosquito were searched for in urban and semiurban areas of the people's councils Boca/Mojica/Henequen, Mariel, Sabana/Zayas, Quiebra Hacha y Cabanas. All the positive reservoirs were identified in those areas where they were collected and the percentage of involvement of each type of reservoir with respect to the total amount of positive samples was estimated. Results: thirty five types of reservoirs used as the breeding site of the mosquito were identified. The useless disposable reservoirs accounted for 54.28%, water storage reservoirs for 14.29 and the useful ones for 11.43 %. The presence of the dengue vector in natural breeding sites and in polluted waters reached 8.57 %. Conclusions: the useless reservoirs turned to be the most used by the Culicidae for egg-laying, following by the water storage ones which were treated with biolarvicide. Aedes aegypti was heavily present in polluted waters, which were also treated with Bactivec.

Descripción de las experiencias de las brigadas de control de vectores durante la epidemia de cólera en Haití

Introducción: el cólera es una de las enfermedades infecciosas más antiguas que ocasiona epidemias y pandemias de gran magnitud, sobre todo en territorios donde el consumo de agua es de mala calidad, saneamiento ambiental deficiente y hacinamiento permanente. Objetivo: describir las experiencias de los trabajadores de vectores en el control de la epidemia de cólera en Haití. Métodos: se detallaron las tareas desarrolladas por el personal de vectores en las viviendas, en los centros de tratamientos del cólera y unidades de tratamiento del cólera atendidos por cubanos durante la epidemia desde octubre de 2010 hasta marzo de 2011. Resultados: las actividades realizadas consistieron en la preparación de soluciones desinfectante para la limpieza podal y el lavado de manos; el tratamiento de agua de consumo y uso domésticos utilizando diferentes formulaciones comerciales de cloro y tabletas de Aquatab, Polintest instachlor y Sany Tabs. Otras labores incluyeron la desinfección concurrente en ropas y excretas de pacientes, desinfección terminal y disposición y desinfección final de residuales líquidos y sólidos, así como su apoyo en pesquisas activas en la búsqueda de casos en comunas de difícil acceso y actividades de control vectorial principalmente sobre Musca domestica. Conclusiones: por primera vez se describen las experiencias de este personal de salud en el control de una epidemia de cólera, que contribuyeron junto a la labor de médicos, enfermeras y personal en general a la disminución de casos de la enfermedad en Haití, a la protección de los colaboradores cubanos y la no introducción de esta enfermedad en Cuba.

Introduction: cholera is one of the oldest infectious diseases causing huge epidemics and pandemics, mainly in territories where poor-quality water consumption, deficient environmental sanitation and permanent crowding prevail. Objective: to describe the experiences gained by the vector control workers during the cholera epidemics in Haiti. Methods: details were offered about the tasks of the vector control staff in houses, cholera treatment centers and units served by Cubans during the cholera epidemics from October 2010 to March 2011. Results: the activities included preparation of disinfectant solutions for the podal cleaning and the handwashing; the treatment of drinking water and of domestic use waters through several conventional formulations of chlorine and Aquatab, Polintest instachlor and Sany Tabs tablets. Other tasks comprised concurrent disinfection in clothes and feces from patients, terminal disinfection and disposal, and final disinfection of liquid and solid wastes, as well as support to active screening for the search of positive cases in remote communes and vector control actions mainly on Musca domestica. Conclusions: for the first time, the experiences of this health staffs in the control of a cholera epidemics is described in detail; their work, together with that of physicians, nurses and other health professionals, contributed to the general reduction of cholera in Haiti, to the protection of the Cuban cooperators and to the non-introduction of this disease in Cuba.

**Evaluación de tres dietas alimentarias para el período larval de Aedes aegypti en condiciones de laboratorio**

Introducción: la alimentación en el período larval del mosquito es sumamente importante, debido a que en esta etapa almacenan los nutrientes básicos para el desarrollo de la pupa y el adulto. Objetivo: evaluar la calidad de tres dietas como fuente nutritiva y su influencia en el desarrollo de las fases preadultas de Aedes aegypti. Métodos: se evaluaron tres dietas en el insectario del Instituto "Pedro Kourí", concentrado CENPALAB, elaborado en el Centro para la Producción de Animales de Laboratorio (CENPALAB), levadura torula, subproducto de la caña de azúcar (ambas de producción nacional) y harina de pescado, producto de importación. Previamente, se determinó la calidad higiénica-microbiológica y química nutricional de las dietas. Se evaluaron variables biológicas como el número de pupas diarias por alimentos y la duración del ciclo larval; se determinó la cantidad de proteínas presentes en las larvas alimentadas con cada dieta, mediante el método de Lowry. Resultados: la calidad higiénica-microbiológica, así como la caracterización química nutricional de los 3 alimentos evaluados, aportaron resultados satisfactorios para el desarrollo de la investigación. Los valores mayores en la concentración de proteínas y en la actividad biológica en la fase larval del mosquito se obtuvieron con la harina de pescado. No se encontraron diferencias significativas en la concentración de proteínas entre las dietas en los primeros días del período larval, A partir del quinto hasta el séptimo día de vida, la harina de pescado fue superior al concentrado CENPALAB. La emergencia de pupas comenzó al sexto día para todas las dietas, obteniéndose el pico más alto al séptimo día con diferencias entre estas. El ciclo larval duró de 7 a 8 días. Conclusiones: se sugiere la utilización de las dietas de producción nacional en situaciones que lo requieran por carencia de la dieta importada, para no detener el desarrollo de las investigaciones.

Introduction: feeding mosquitoes during the larval stage is an important process, since it is the stage in which basic nutrients are stored for the subsequent development of pupas and adults. Objective: to evaluate both the quality of three diets as nutritional source and the influence these diets have on the development of the Aedes aegypti in its pre-adult stage. Methods: three different diets were evaluated at the Insectarium of the "Pedro Kourí" Tropical Medicine Institute in Havana, Cuba. The diets evaluated were: CENPALAB Food Concentrate, elaborated at the Center for Laboratory Animal Production (CENPALAB, Spanish acronym) and torula yeast, a sugar cane byproduct (both of them from domestic production) as well as fish flour, an imported product. First, the hygienic-microbiological and the chemical nutritional qualities of these diets were determined. Some biological variables were also evaluated such as the number of pupae per food and the duration of the larval cycle. By means of the Lowry method, the amount of proteins present in larvae fed with each diet was measured. Results: the hygienic-microbiological as well as the chemical nutritional characterization of the three different foods evaluated showed satisfactory results for the development of the research process. The highest values of protein concentration and of biological activity during the mosquito larval stage were obtained with fish flour. There were no significant differences in protein concentration among the diets during the first days of the larval stage. From the fifth to the seventh day of life, the protein concentration with fish flour was higher than that of the CENPALAB Food Concentrate. The emergence of pupae started on the sixth day for all the diets, reaching the highest peak on the seventh day, with some differences among diets. The larval cycle lasted 7 to 8 days. Conclusions: the use of domestic-made diets is recommended in situations where imported food lack, so that the development of research work can proceed.

Diagnóstico del virus rábico en quirópteros

Introducción: los quirópteros son un importante reservorio y vector del virus rábico en el mundo. La enfermedad invariablemente lleva a la muerte, pero puede ser prevenida mediante la vacunación. Objetivo: detectar virus rábico a través de la técnica de inmunofluorescencia directa en quirópteros. Métodos: en el Centro Provincial de Higiene Epidemiología y Microbiología de la Provincia La Habana en el período de 2004 a 2009, se recibieron 651 muestras de cerebros de quirópteros para detectar el virus de la rabia. Se analizaron empleando el método de inmunofluorescencia directa. Resultados: la presencia del virus se confirmó en 5 muestras de cerebro de murciélagos. Se obtuvo 0,76 % de positividad. Conclusión: se demuestra que en Cuba circula el virus de la rabia en murciélagos y que aunque el porcentaje de positividad es bajo, se deben tomar las precauciones establecidas cuando se observen cambios de conducta en esta especie.

Introduction: the bats are an important reservoir and vector of rabies virus in the world. The infection invariably leads to death, but can be prevented with vaccination. Objective: to detect rabies virus through direct immunofluorescence in bats. Method: the provincial Center of Hygiene, Epidemiology and Microbiology of Havana received 651 bat brain samples from 2004 to 2009 to test for rabies virus, using the direct immunofluorescence method. Results: the presence of virus was confirmed in 5 bat brain samples. Positivity rate was 0.76 %. Conclusions: it was demonstrated that rabies virus circulates in Cuba in bats and that although the positivity rate is low, so the established precautions should be taken when behavioral changes are observed in this species.

Diagnóstico de malaria durante la capacitación a personal cubano en Haití

Introducción: en Haití la malaria constituye un problema de salud con más de 75 % de su población en áreas de riesgo especialmente en altitudes mayores que 500 m sobre el nivel del mar. El 98 % de la malaria diagnosticada por gota gruesa es causada por Plasmodium falciparum. Objetivo: conocer sobre el diagnóstico de malaria durante las capacitaciones realizadas a personal cubano en 7 departamentos de Haití, como parte de la asesoría brindada por Cuba después del terremoto de enero de 2010. Métodos: el trabajo se realizó en 13 comunas distribuidas en 7 departamentos y en 2 hospitales ubicados en la capital, Puerto Príncipe. El personal cubano se capacitó en el diagnóstico de malaria según la metodología descrita por el manual de diagnóstico del Ministerio de Salud de Cuba. Resultados: se capacitaron 21 colaboradores cubanos. Se examinaron 2 084 láminas, de las cuales resultaron 147 positivas (7,05 %) solo a Plasmodium falciparum. La mayor positividad se encontró en Cayes Jacmel, Petit Goave, Thomazeau y Grand Goave. De las 147 láminas positivas, 88 (59,9 %) presentaban solo trofozoitos, mientras que 31 (21,0 %) gametocitos y 1 (0,7 %) esquizonte, las 27 restantes (18,4 %) presentaron combinaciones de las distintas fases del parásito. Conclusiones: existe una gran diferencia entre la cifra de casos sospechosos de malaria que se reporta y la de casos confirmados, por lo que se necesita promover e incrementar la calidad del diagnóstico parasitológico junto con la identificación de las fases del parásito, para obtener datos confiables sobre la incidencia y el riesgo de transmisión de esta enfermedad.

Introduction: malaria in Haiti is a health problem affecting over 75% of the population in risky areas mainly located at more than 500m over the sea level. Ninety eight percent of malaria diagnosed by thick drop test is caused by Plasmodium falciparum. Objective: to learn about the malaria diagnosis during the training courses given to the Cuban staff in 7 Haitian departments, as part of the assistance work provided by Cuba after the earthquake of January 2010. Methods: the training was carried out in 13 communes distributed into 7 departments and 2 hospitals in Porto Prince. The Cuban staff was trained in diagnosing malaria according to the described methodology in the diagnosis manual of the Ministry of Health of Cuba. Results: twenty one Cuban cooperators were trained. Two thousand eighty four slides were tested, 147 of which were positive (7.05 %) to Plasmodium falciparum. The highest positivity rate was found in Cayes, Jacmel, Petit Goave, Thomazeau and Grand Goave. Out of the 147 positive slides, 88 (59.9 %) presented just trophozoites, 31 (21 %) had gametocytes and one (0.7 %) esquizonts whereas the other 27(18.4 %) exhibited combinations of several phases of the parasite. Conclusions: there are big differences between the number of suspected cases of malaria and that of confirmed cases, therefore, it is necessary to encourage and increase the quality of parasitological diagnosis together with the identification of the parasite phases, in order to collect reliable data on the real incidence and risk of transmission of this disease.

Riqueza de especies de mosquitos, distribución y sitios de cría en el municipio Boyeros

Introducción: la identificación de las especies de mosquitos en cada municipio en Cuba forma parte del Programa de Control de Aedes aegypti y Aedes albopictus, lo cual representa un factor importante en la aparición de eventos epidemiológicos o zoonóticos que involucren estos insectos. Objetivo: conocer la riqueza de especies de mosquitos y su distribución en el municipio Boyeros. Métodos: el trabajo se desarrolló en el municipio Boyeros, La Habana en el período 1982-2011. Las muestras de mosquitos se colectaron por los trabajadores del programa de control de Aedes aegypti y Aedes albopictus. Resultados: la riqueza de especies de mosquitos fue de 35, de estas 10 se encuentran distribuidas en todas las áreas del municipio. El área con mayor riqueza de especie fue Mulgoba seguida por Wajay, y la de menor correspondió a Boyeros. Se colectaron 8 especies en depósitos artificiales y naturales como hueco de árboles; mientras que 22 se colectaron en reservorios de aguas naturales, lagunas de oxidación, zanjas, arroyos, lagunatos y ríos. Del total de especies, 5 solo fueron colectadas en estadio adulto. Conclusiones: la emergencia y reemergencia de algunas enfermedades transmitidas por mosquitos es uno de los aspectos que más seguimiento tiene en estos momentos en el continente americano, por lo que conocer la fauna de mosquitos del municipio así como su distribución es importante. De presentarse algún brote o epidemia que involucren a estos insectos obligaría a establecer las estrategias de control, para evitar la propagación de enfermedades de transmisión vectorial.

Introduction: the identification of mosquito species in each municipality of Cuba is part of the Aedes aegypti and Aedes albopictus control program. This is an important factor in the occurrence of epidemiological or zoonotic events involving these insects. Objective: to identify the wealth of mosquito species and their distribution in Boyeros municipality. Methods: the study was developed in Boyeros municipality from 1982 to 2011. The mosquito samples were taken by the Aedes aegypti and Aedes albopictus control program workers. Results: the wealth of mosquito species includes 35 species of which 10 are distributed in all the areas of the municipality. The area with the largest wealth of species was Mulgoba, followed by Wajay, and the smallest one was found in Boyeros. Eight species were collected in artificial and natural reservoirs such as tree holes, whereas 22 were observed in natural water reservoirs, oxidation lagoons, ditches, streams and rivers. Of all the species, just 5 were collected in their adult stage. Conclusions: emergency and reemergence of some mosquito-borne diseases is one of the more watched aspects at this time in the American continent, thus the mosquito fauna of the municipality and its distribution is fundamental. If any outbreak or epidemic involving these insects occurs, it would be compulsory to set up control strategies to prevent the spread of vector-borne diseases.

Diagnóstico de la histoplasmosis diseminada asociada al sida

En un paciente con histoplasmosis asociada al sida y lesiones cutáneas, se procedió a realizar el diagnóstico de la micosis mediante la metodología habitualmente empleada, la cual se describe. En estos pacientes, el empleo de la escarificación de las lesiones cutáneas ofrece un método rápido, sencillo y económico para el diagnóstico de esta micosis endémica. La severa inmunodeficiencia de estos pacientes eleva la carga microbiana presente en los tejidos y materiales clínicos, lo cual facilita la aplicación de los métodos directos de diagnóstico micológico como microscopia y cultivo. La observación en las preparaciones microscópicas de levaduras intracelulares, que se tiñen de manera defectuosa con la técnica de Giemsa, orienta a un diagnóstico micológico rápido, confirmado luego a través por los cultivos y permite la administración inmediata del tratamiento antifúngico, lo cual mejora las posibilidades de éxito terapéutico.

In a patient with AIDS-related histoplasmosis, and skin lesions, the diagnosis of mycosis through usual methodology was made, which was described in this paper. The use of skin lesion scarification in these patients offers an economic, fast and simple method for diagnosis of endemic mycosis. The severe immunodeficiency of these patients raises the microbial charge present in tissues and clinical materials, which facilitates the application of direct mycological diagnosis methods such as microscopic analysis and culturing. The observation of intracellular yeast in microscopical preparations, which are irregularly stained through the Giemsa technique, leads to rapid mycological diagnosis, later confirmed by the culturing, and allows the immediate administration of antifungal treatment. All this improves the possibilities of a sucessful treatment.

Dr. Pedro Morera Villalobos (1933-2012)