Revista Cubana de Medicina Tropical

Epidemiology of human leptospirosis in Colombia, 2012-2016

RESUMEN Introducción: La leptospirosis en una enfermedad zoonótica, bacteriana de amplia distribución mundial, con impacto socioeconómico desconocido por la falta de estudios epidemiológicos que ofrezcan datos de mortalidad y morbilidad más cercanos a la realidad. Objetivo: Describir el comportamiento de casos de leptospirosis humana notificados al Sivigila en Colombia durante los años 2012 a 2016. Métodos: Estudio observacional descriptivo, mediante el cual se analizaron los registros de los informes anuales de evento de leptospirosis notificados al Sivigila durante los años 2012 al 2016 en Colombia. Para ello se utilizó la hoja de cálculo Excel. Resultados: Durante el quinquenio observado se notificó un total de 10 435 casos de leptospirosis. Según características sociodemográficas el mayor número se presentó en hombres, el 49,8 % pertenecía al régimen subsidiado, la mayoría se presentó en la cabecera municipal y la población más afectada correspondió a “sin identificación étnica”. Dentro de los antecedentes epidemiológicos más importantes se halló el contacto con caninos, ratas en el domicilio y actividades de río. Conclusiones: La compilación de los datos epidemiológicos de la vigilancia de leptospirosis humana demuestra que sigue siendo un problema de salud pública, lo cual genera preocupación y demanda mejoras en las estrategias nacionales de prevención y control.

ABSTRACT Introduction: Leptospirosis is a zoonotic bacterial disease of broad worldwide distribution. Its socioeconomic impact is not known, due to the lack of epidemiological studies providing reliable mortality and morbidity data. Objective: Describe the evolution of cases of human leptospirosis reported to Sivigila in Colombia from 2012 to 2016. Methods: An observational descriptive study was conducted based on the records of annual reports of leptospirosis notified to Sivigila in Colombia from 2012 to 2016. Use was made of Microsoft Excel spreadsheets. Results: A total 10 435 cases of leptospirosis were reported during the five-year period analyzed. Sociodemographic characterization showed that the largest number of cases were men, 49.8 % belonged to the subsidized regime, most occurred in the municipal capital, and the most commonly affected population was the group "without ethnic identification". The most relevant epidemiological antecedents were contact with canines, rats in the household and fluvial activities. Conclusions: Gathering of epidemiological data about surveillance of human leptospirosis revealed that this disease continues to be a worrisome public health problem that demands improved national prevention and control strategies.

Cloning and expression in Escherichia coli of the full-length and deletion variants of a human papillomavirus 18 L1 gene isolated from a Cuban patient

ABSTRACT Introduction: Human papillomavirus (HPV) vaccines are based on the L1 major capsid protein. Objectives: To clone the HPV-18 L1 gene from a Cuban female HPV-18-infected patient and to express the full-length and deletion variants of the cloned HPV-18 L1 gene in Escherichia coli. Methods: The full-length HPV-18 L1 gene was PCR-amplified from total DNA isolated from a Cuban patient, cloned and finally subcloned into the E. coli expression vector pET26b. Three deletion mutants were constructed, which encode truncated proteins lacking 30 amino acids at the C-terminus in combination with 5, 6 or none deleted residue at the N-terminus. Production of L1 proteins in E. coli BL21(DE3) and E. coli SHuffle T7 was assessed by SDS-PAGE and Western blotting. Results: The cloned HPV-18 L1 gene was 99.9 % similar to the African variant EF202152 and probably shares a common origin with the B lineage of genotype 18. The three truncated variants of HPV-18 L1 were produced at higher levels than the full-length HPV-18 L1 protein, attaining higher levels in E. coli BL21(DE3) and higher solubility in E. coli SHuffle. The C-terminus-only truncated variant, L1∆C30, was produced at similar levels to the HPV-18 L1s truncated at both termini. E. coli SHuffle produced about three times more amounts of L1∆C30 when grown under autoinduction conditions with respect to conventional induction and thus, amounts were comparable to those obtained in E. coli BL21(DE3) under conventional induction. Conclusions: Truncation of thirty amino acid residues at the carboxy-terminus of the HPV-18 L1 made a major contribution to the production and solubility of this wild-type protein in E. coli. This is the first report about soluble production of HPV-18 L1 protein in an E. coli SHuffle strain. However, higher amounts of L1 are needed to scale-up its production for developing an HPV vaccine candidate.

RESUMEN Introducción: Las vacunas contra el virus del papiloma humano (VPH) se fundamentan en la proteína principal de la cápsida L1. Objetivo: Clonar el gen L1 del VPH-18 a partir de una paciente cubana infectada con VPH-18 y expresar las variantes de longitud completa y delecionadas del gen L1 del VPH-18 en Escherichia coli. Métodos: El gen L1 del VPH-18 de longitud completa se amplificó por PCR a partir de ADN total aislado de un paciente cubana, se clonó y finalmente se subclonó en el vector de expresión de E. coli pET26b. Se construyeron tres mutantes de deleción, que codifican para proteínas truncadas que carecen de 30 aminoácidos por el extremo carboxilo, en combinación con 5, 6 o ningún residuo delecionado por el extremo amino. La producción de las proteínas L1 en E. coli BL21(DE3) y E. coli SHuffle T7 se evaluó mediante SDS-PAGE y Western blot. Resultados: El gen L1 del VPH-18 clonado fue 99.9 % similar a la variante africana EF202152 y probablemente comparte un origen común con el linaje B del genotipo 18. Las tres variantes truncadas de la proteína L1 del VPH-18 se produjeron a mayores niveles que la proteína L1 del VPH-18 de longitud completa, alcanzando mayores niveles en E. coli BL21(DE3) y mayor solubilidad en E. coli SHuffle. La variante truncada solo por el extremo carboxilo, L1(C30, se produjo a niveles similares a las proteínas L1 del VPH-18 truncadas por ambos extremos. E. coli SHuffle produjo aproximadamente tres veces más cantidades de L1(C30 cuando creció en condiciones de autoinducción, con respecto a la inducción convencional y, por ende, las cantidades fueron comparables a las obtenidas por E. coli BL21(DE3) bajo inducción convencional. Conclusiones: La truncación de treinta residuos de aminoácidos por el extremo carboxilo de la proteína L1 del VPH-18 tuvo una importante contribución a la producción y solubilidad de la proteína L1 nativa en E. coli. Este es el primer informe sobre la producción soluble de la proteína L1 del VPH-18 en una cepa de E. coli SHuffle. Sin embargo, se necesitan mayores cantidades de la proteína L1 para escalar su producción para desarrollar un candidato vacunal contra el VPH.

Effect of temperature and salinity on the eclosion and survival of Aedes aegypti (L) (Diptera: Culicidae) from Western Mexico

RESUMEN Introducción: Aedes aegypti (L) (Diptera: Culicidae), es una especie cosmopolita y vector de arbovirosis. Las variaciones de la temperatura y salinidad del agua influyen en la eclosión y supervivencia de fases larvales. Objetivo: Evaluar el efecto de diferentes temperaturas y salinidades en la eclosión de huevos y la supervivencia de larvas, pupas y adultos bajo condiciones de laboratorio. Métodos: Se colectaron larvas de Ae. aegypti, de reservorios artificiales en la zona periurbana de Puerto Vallarta, Jalisco, México, y se mantuvieron hasta la fase adulta. Los huevos obtenidos se sometieron a ocho temperaturas (15, 17, 20, 25, 27, 30, 32 y 35 °C). Se colocaron 15 huevos por quintuplicado y se evaluó la eclosión durante 96 h. Se colocaron 100 huevos con agua ajustada a 0.3, 2, 5, 10, 15,18 y 22 ups y se evaluó la eclosión hasta las 96 h. Adicionalmente se utilizaron larvas del estadio IV, por quintuplicado, sometiéndose a las mismas salinidades y se evaluó la supervivencia hasta las 48 h. El efecto de la salinidad en la ovoposición de las hembras se llevó a cabo introduciendo recipientes con las mismas concentraciones salinas, dentro en las jaulas entomológicas. Resultados: Se registró el 100 % de eclosión a las 24 y 48 h; la temperatura de 35° C no registró eclosión. Las salinidades de 22 y 18 ups, provocaron mortalidad del 100 % a las 24 h. En la salinidad de 15 ups, sobrevivió el 50 %. Las concentraciones de 2, 5 y 10 ups demostraron 100 % de supervivencia hasta la fase de adulto. La supervivencia de larvas del estadio IV en los tratamientos 2, 5 y 10 fue del 100 % y en 15,18 y 22 ups disminuyó a 50, 80 y 100 %, respectivamente (p˂ 0,05). Las diferentes concentraciones salinas no afectaron significativamente la ovoposición. La eclosión solo se presentó en las concentraciones de 0,3; 2; 5 y 10 ups. Los huevos ovopositados en concentraciones de 15, 18 y 22 ups no eclosionaron hasta que fueron transferidos a agua dulce con porcentajes de eclosión de entre el 80 y 90 %. Conclusiones: Los embriones de Ae. aegypti poseen una amplia plasticidad para soportar cambios drásticos de temperatura y salinidad. El control efectivo de sus poblaciones debe incluir la revisión de charcas o reservorios que contengan aguas salobres hasta 18 ups.

ABSTRACT Introduction: Aedes aegypti (L) (Diptera: Culicidae) is a cosmopolitan species and a vector of arboviruses. Variations in the temperature and salinity of the water affect eclosion and survival during the larval stages. Objective: Evaluate the effect of different temperatures and salinities on the eclosion of eggs and the survival of larvae, pupae and adults in laboratory conditions. Methods: Ae. aegypti larvae were collected from artificial reservoirs in a peri-urban area of Puerto Vallarta, Jalisco, Mexico, and maintained until the adult stage. The eggs obtained were subjected to eight temperatures (15, 17, 20, 25, 27, 30, 32 and 35 °C). Fifteen eggs were placed in quintuplicate and eclosion was evaluated for 96 h. One hundred eggs were placed with water adjusted to 0.3, 2, 5, 10, 15, 18 and 22 psu and eclosion was evaluated until 96 h. Additionally, stage IV larvae were used in quintuplicate, subjecting them to the same salinities and evaluating survival until 48 h. The effect of salinity on oviposition by females was determined by introducing containers with the same salinity into the entomological cages. Results: 100 % eclosion was recorded at 24 and 48 h, whereas no eclosion occurred at a temperature of 35 °C. Salinities of 22 and 18 psu caused 100 % mortality at 24 h, whereas 50 % survived at a salinity of 15 psu. At concentrations of 2, 5 and 10 psu 100 % of the larvae survived until the adult stage. Survival of stage IV larvae in treatments 2, 5 and 10 was 100%, whereas in 15, 18 and 22 psu it fell to 50, 80 and 100 %, respectively (p˂ 0.05). The different salinities did not affect oviposition significantly. Eclosion only occurred at concentrations of 0.3, 2, 5 and 10 psu. Oviposited eggs at concentrations of 15, 18 and 22 psu did not eclose until they were transferred to fresh water, where eclosion percentages ranged between 80 % and 90 %. Conclusions: Ae. aegypti embryos have great plasticity to endure drastic changes in temperature and salinity. Effective control of their populations should include inspection of ponds and reservoirs containing brackish water of up to 18 psu.

Haemostatic alterations caused by the venom of Lansberg's hognosed pitviper (Porthidium lansbergii hutmanni) in Venezuelan patients

ABSTRACT Objective: to describe the haemostatic characteristics of the venom as well as the potency appraisal of the polyvalent antiophidic serum against haemotoxicity from Porthidium lansbergii hutmani experimental envenomation. Methods: Evaluation was performed of the venom's lethality, haemorrhagic activity, effects on coagulation and platelet aggregation, proteolytic activity, and neutralization by the commercial antivenom available in the country. Results: Several components with haemostatic activities were found in Porthidium l. hutmanni venom when a study of fibrinogenolytic, haemorrhagic and proteolytic activities was conducted of a pool of P.l.h venom. Porthidium l. hutmanni venom lacked the coagulant and defibrinating activities that are characteristic of bothropic venoms. Porthidium l. hutmanni venom showed very high haemorrhagic and anticoagulant activities. These findings could be related to the presence of multiple metalloproteases, which was evidenced in this study, and also the possible presence of phospholipases or other anticoagulant activity proteins that were not defined here. They inhibited platelet aggregation, suggesting that the venom had some proteins with marked effects on haemostasis. The commercial antivenom proved to be of little effectiveness in neutralizing the crude venom haemorrhagic activity. Conclusions: These toxins cause many physiopathological alterations in bitten patients, creating a clinical picture characterized by oedema, local and systemic haemorrhages, and even necrosis, comparable to that seen in bothropic envenomation. Porthidium l. hutmanni venom has no in vitro procoagulant activity, typical of bothropic venoms, suggesting there are variances in its protein conformation. Porthidium l. hutmanni venom is used for horse immunization. However, in order to preserve the patient's life, it is necessary to improve the immunization process to produce antivenom containing high avidity and specificity antibodies against the major toxins present in this venom. Porthidium l. hutmanni venom has demonstrated being a venom with high lethal, haemorrhagic, proteolytic and procoagulant activities, whose description will have enormous utility among clinicians who deal with these accidents in its geographical distribution areas.

RESUMEN Objetivo: Describir las características hemostáticas del veneno y evaluar la potencia del suero polivalente antiofídico contra la hemotoxicidad provocada por el envenenamiento experimental por Porthidium lansbergii hutmanni. Métodos: Se realizó una evaluación de la letalidad, actividad hemorrágica, efectos en la coagulación y agregación plaquetaria, actividad proteolítica y neutralización por el antiveneno disponible comercialmente en el país. Resultados: Se encontraron varios componentes con actividad hemostática en el veneno de Porthidium l. hutmanni al realizarse un estudio de la actividad fibrinogenolítica, hemorrágica y proteolítica de una muestra de veneno de Porthidium l. hutmanni. El veneno de Porthidium l. hutmanni no mostró la actividad coagulante o defibrinante característica de los venenos botrópicos. El veneno de Porthidium l. hutmanni mostró una elevada actividad hemorrágica y anticoagulante. Estos resultados podrían estar relacionados con la presencia de múltiples metaloproteasas, la que quedó demostrado en el estudio, y también a la posible presencia de fosfolipasas u otras proteínas de actividad anticoagulante que no se definen en el mismo. La inhibición de la agregación plaquetaria sugiere que el veneno contiene algunas proteínas con un marcado efecto sobre la hemostasis. El antiveneno comercial mostró poca efectividad en la neutralización de la actividad hemorrágica del veneno crudo. Conclusiones: Estas toxinas provocan muchas alteraciones fisiopatológicas en las víctimas de mordeduras, creando un cuadro clínico caracterizado por edema, hemorragias locales y sistémicas e incluso necrosis comparable con la que ocurre en el envenenamiento botrópico. El veneno de Porthidium l. hutmanni no tiene la actividad procoagulante in vitro típica de los venenos botrópicos, lo que apunta a variaciones en su conformación proteica. El veneno de Porthidium l. hutmanni de utiliza en la inmunización de los caballos. Sin embargo, para preservar la vida del paciente, es necesario mejorar el proceso de inmunización con vistas a producir un antiveneno que contenga anticuerpos de elevada avidez y especificidad contra las principales toxinas presentes en el veneno. El veneno de Porthidium l. hutmanni ha mostrado ser un veneno de elevada actividad letal, hemorrágica, proteolítica y procoagulante, cuya descripción tendrá una enorme utilidad para los médicos que atienden esos accidentes en sus áreas de distribución geográfica.

Antiophidic activity of extracts from Myrsine guianensis, Jatropha curcas and Zanthoxylum monogynum

RESUMEN Objetivo: evaluar la inhibición de los venenos de las serpientes Bothrops alternatus y Bothrops moojeni por los extractos vegetales de Jatropha curcas, Myrsine guianensis y Zanthoxylum monogynum, en relación con las actividades coagulante, fosfolipasa y hemorrágica. Métodos: Los extractos vegetales se obtuvieron a partir del liofilizado de hojas de Jatropha curca, Myrsine guianensis y Zanthoxylum monogynum. Se realizaron ensayos de inhibición in vitro con un grupo de control positivo (10 μg de veneno crudo), grupos experimentales que recibieron una mezcla del veneno con cada uno de los extractos, en concentraciones de 5 a 500 μg y un grupo de control negativo (500 μg de extracto). Se realizaron ensayos in vivo con grupos de ratones Balb/c (n = 4). A los ratones del grupo de control positivo se les inyectó solamente el veneno (25 μg); a los de los grupos experimentales, una mezcla del veneno con cada uno de los extractos, en concentraciones de 25 a 500 μg; y a los del grupo de control negativo, solamente extracto (500 μg). Resultados: Jatropha curcas y Myrsine guianensis inhibieron significativamente la actividad fosfolipasa a partir de la proporción 1:0,5 (veneno:extracto). Por otro lado, las actividades coagulante y hemorrágica, fueron inhibidas expresivamente a partir de las proporciones 1:1 y 1:5 con Myrsine guianensis y Jatropha curcas, respectivamente. Las actividades fosfolipasa y coagulante fueron inhibidas con Zanthoxylum monogynum a partir de las proporciones 1:5 y 1:10, respectivamente. Conclusiones: Los extractos analizados inhibieron los venenos de Bothrops alternatus y Bothrops moojeni debido a la presencia de moléculas con posibles propiedades antiofídicas.

ABSTRACT Objective: Evaluate the inhibition of venoms from the snakes Bothrops alternatus and Bothrops moojeni by plant extracts from Jatropha curcas, Myrsine guianensis and Zanthoxylum monogynum in terms of coagulant, phospholipase and hemorrhagic activities. Methods: The plant extracts were obtained by lyophilization of leaves of Jatropha curca, Myrsine guianensis and Zanthoxylum monogynum. In vitro inhibition tests were performed with a positive control group (10 μg of crude venom), experimental groups receiving a mixture of the venom with each of the extracts at concentrations of 5 to 500 μg, and a negative control group (500 μg of extract). In vivo tests were performed with Balb/c mice (n = 4). The mice in the positive control group were injected only the venom (25 μg), the experimental groups received a mixture of the venom with each of the extracts at concentrations of 25 to 500 μg, and the negative control group received only extract (500 μg). Results: Jatropha curcas and Myrsine guianensis significantly inhibited phospholipase activity at a 1:0.5 (venom:extract) proportion. Coagulant and hemorrhagic activities were markedly inhibited at 1:1 and 1:5 proportions with Myrsine guianensis and Jatropha curcas, respectively. Phospholipase and coagulant activities were inhibited with Zanthoxylum monogynum at 1:5 and 1:10 proportions, respectively. Conclusions: The extracts analyzed inhibited the venoms from Bothrops alternatus and Bothrops moojeni due to the presence of molecules with possible antiophidic properties.

Evaluation of entomological indices with electronic tools in Villavicencio, Meta, Colombia

RESUMEN Objetivo: Determinar la eficacia de dos herramientas electrónicas en el levantamiento de índices aédicos en la ciudad Villavicencio. Métodos: Se realizó un estudio de tipo observacional, analítico en dos barrios de la ciudad Villavicencio: Quintas de San Fernando y Cedritos. El formato de levantamiento de índices aédicos de la secretaría de salud fue diseñado en dos medios electrónicos. La eficacia fue determinada mediante datos efectivos recogidos y tiempo de entrega. Se calcularon índices aédicos, Breteau, vivienda y pupas. Se realizó encuesta para determinar actitudes frente a arbovirosis. Se realizó estadística descriptiva, pruebas de chi cuadrado y t-Student (p< 0,05). Resultados: Se evaluaron 67 predios en dos barrios. El índice de datos efectivos fue mejor en donde el acceso a internet era permanente (100 % vs. 23,9 %); el tiempo de entrega también se afectó por esta conexión. Se encontraron diferencias significativas en el número de viviendas positivas para Aedes aegypti entre los dos barrios (p= 0,0052); y para el número de tanques bajos positivos (p= 0,0123). De los encuestados, el 16,4 % (IC95 % 8,9 %-27,5 %) sabía que la transmisión fue por picadura de Ae. aegypti. Para el 79,1%, cada familia fue responsable de eliminar criaderos. Conclusiones: El uso de herramientas electrónicas permite acelerar el flujo de la información y crear un sistema eficaz, de fácil acceso y seguridad que podría implementarse permanentemente en la vigilancia entomológica y de salud pública.

ABSTRACT Objective: Determine the effectiveness of two electronic tools for the evaluation of aedic indices in the city of Villavicencio. Methods: An observational analytic study was conducted in two districts in the city of Villavicencio: Quintas de San Fernando and Cedritos. The form designed by the Ministry of Health to evaluate aedic indices was digitalized into two electronic media. Efficacy was determined on the basis of effective data collected and delivery time. An estimation was made of aedic indices, Breteau, household and pupae. A survey was conducted to determine attitudes to arbovirus infections. Use was made of descriptive statistics, chi-squared tests and Student's t-test (p< 0.05). Results: Sixty-seven households were evaluated in two districts. The effective data index was better in areas where access to the Internet was permanent (100 % vs. 23.9 %). Delivery time was also affected by Internet connection. Significant differences were found between the two districts in the number of positive households for Aedes aegypti (p= 0.0052), as well as in the number of positive ground water tanks (p= 0.0123). Of the respondents, 16.4 % (95% CI, 8.9 %-27.5 %) were aware that transmission had been by the bite of Ae. aegypti mosquitoes. For 79.1 % each family was responsible for eliminating the breeding sites. Conclusions: Use of electronic tools speeds up the flow of information and creates an effective, easily-accessible and safe system which could be permanently implemented for entomological and public health surveillance.

Catheter-related bacteremia by methicillin-resistant Staphylococcus aureus in patients with advanced chronic kidney disease

RESUMEN Introducción: Staphylococcus aureus resistente a meticilina constituye la causa principal de bacteriemia relaciona a catéter en pacientes con enfermedad renal crónica avanzada en hemodiálisis. Objetivos: Estimar la tasa de incidencia de bacteriemia relaciona con catéter por Staphylococcus aureus resistente a meticilina en pacientes con enfermedad renal crónica avanzada en el Hospital “General Freyre de Andrade”, Cuba, y vigilar los valores de concentración mínima inhibitoria de vancomicina frente a los aislados recuperados de bacteriemia. Métodos: El estudio se realizó entre mayo 2017 y febrero 2018, el cual incluyó 64 pacientes con Staphylococcus aureus resistente a meticilina (total de los atendidos en hemodiálisis). De cada uno se recogió información acerca de tipo de acceso vascular y tiempo de uso; de los que desarrollaron un episodio sugerente de bacteriemia se obtuvieron muestras de sangre para hemocultivo. Se informó bacteriemia relacionada con catéter utilizando los criterios de Bouza y otros 2004 y estas se confirmaron debidas a Staphylococcus aureus resistente a meticilina tras determinar la concentración mínima inhibitoria de oxacilina, empleando el método de microdilución en caldo y los criterios del CLSI 2017. Asimismo se evaluó la concentración mínima inhibitoria de vancomicina. Resultados: Las tasas de incidencia de bacteriemia relaciona con catéter por S. aureus y Staphylococcus aureus resistente a meticilina fueron de 0,66 y 0,59/1000 días-catéter, respectivamente. Predominaron las bacteriemia relacionada con catéter en los pacientes con accesos vasculares temporales. No se observó incremento en la concentración mínima inhibitoria de vancomicina (1 y 2 (g/mL) para los aislados responsables de bacteriemia a repetición y persistente. Conclusiones: La tasas de incidencia de bacteriemia relacionada con catéter indican que en la unidad de hemodiálisis se mantienen buenas prácticas clínicas. Los valores de concentración mínima inhibitoria de vancomicina sugieren una reducción en la eficacia de la droga en el tratamiento.

ABSTRACT Introduction: Methicillin-resistant Staphylococcus aureus is the leading cause of catheter-related bacteremia in patients with advanced chronic kidney disease undergoing hemodialysis. Objective: Estimate the incidence rate of catheter-related bacteremia by methicillin-resistant Staphylococcus aureus in patients with advanced chronic kidney disease from General Freyre de Andrade Hospital in Cuba, and survey the vancomycin minimum inhibitory concentration values for isolates obtained from bacteremia. Methods: A study was conducted of 64 patients with methicillin-resistant Staphylococcus aureus (total of those undergoing hemodialysis) from May 2017 to February 2018. For each one of them, information was collected about vascular access type and time of use. Blood culture samples were obtained from patients who developed an episode suggesting bacteremia. Catheter-related bacteremia was reported using Bouza et al (2004) criteria, and it was confirmed as due to methicillin-resistant Staphylococcus aureus after determining oxacillin minimum inhibitory concentration by broth microdilution and CLSI 2017 criteria. Vancomycin minimum inhibitory concentration was also evaluated. Results: The incidence rates for catheter-related bacteremia by S. aureus and methicillin-resistant Staphylococcus aureus were 0.66 and 0.59/1000 catheter-days, respectively. A predominance was found of catheter-related bacteremia in patients with temporary vascular accesses. No increase was observed in vancomycin minimum inhibitory concentration (1 and 2 g/mlL for the isolates responsible for recurrent and persistent bacteremia. Conclusions: The incidence rates for catheter-related bacteremia show that good clinical practices are maintained in the hemodialysis unit. Vancomycin minimum inhibitory concentration values suggest a decrease in the efficacy of the drug during treatment.

Knowledge and practices regarding dengue prevention in a Peruvian city affected by a dengue epidemic following the 2018 Coastal Child

RESUMEN Objetivo: Describir los conocimientos y prácticas sobre las medidas preventivas de dengue en los pobladores de ciudad afectada por epidemia del dengue posfenómeno de El Niño costero, Perú, 2018, y comparar los conocimientos con el cuestionario ENAPRES 2016. Métodos: se realizó un estudio descriptivo transversal en el que se recolectó información mediante dos cuestionarios consecutivos. La muestra se obtuvo con nivel de confianza del 95 %, proporción esperada 29,1 %, precisión de 4,5 %, y población de 8 210 casas, y considerando pérdidas será una muestra de 380. Resultados: La población estuvo constituida principalmente por mujeres (73,7 %), con edad promedio de 42,5 años, 41,8 % secundaria completa, 54,5 % amas de casa. El medio de obtención de información más frecuente fue el centro de salud (48,7 %). El 21,1 % manifestó conocer la enfermedad, el 75 % conocía la transmisión por zancudo y el 86,1 % que este se reproduce en aguas estancadas. Además, 69,2 % reconoció los síntomas de la enfermedad. El 9,7 % señaló medidas para eliminar criaderos, mientras el 20,5 % reconoció medidas para evitar ser picado. El 83,2 % manifestó conocer el abate y su uso. Los síntomas más identificados por la población fueron fiebre, dolor de cabeza, dolor de huesos y/o articulaciones y dolor muscular. Según la comparación realizada con el cuestionario ENAPRES 2016, hubo aumento de conocimiento de los signos de alarma (sangrado, náuseas y vómitos). Conclusiones: Los conocimientos en prevención de dengue fueron escasos y las prácticas observadas resultaron insuficientes en la población de Tumán, pero mejoró el conocimiento en algunas medidas de prevención con respecto a 2016.

ABSTRACT Objective: Describe the knowledge and practices regarding dengue prevention measures among the residents of a Peruvian city affected by a dengue epidemic following the 2018 Coastal Child, and compare the knowledge using the ENAPRES 2016 questionnaire. Methods: A descriptive cross-sectional study was conducted in which information was collected by means of two consecutive questionnaires. The sample was obtained with a 95 % confidence interval, a 29.1 % expected proportion, 4.5 % precision and a population of 8 210 households, and considering losses will be a sample of 380. Results: The population was predominantly female (73.7 %), with a mean age of 42.5 years, 41.8 % complete secondary schooling, and 54.5 % housewives. The source of information most commonly used was the health center (48.7 %). 21.1 % reported knowing about the disease, 75 % knew that it was transmitted by mosquitoes, and 86.1 % knew that mosquitoes reproduce in stagnant water. In addition, 69.2 % recognized the symptoms of the disease. 9.7 % referred to measures to eliminate breeding sites, and 20.5 % to measures to avoid being bitten. 83.2 % stated they knew about temefos and its use. The symptoms most commonly identified by the population were fever, headache, bone and/or joint pain, and muscle pain. According to the comparison made with the ENAPRES 2016 questionnaire, there was an increase in knowledge about alarm signs (bleeding, nausea and vomiting). Conclusions: Knowledge about dengue prevention was scarce and the practices observed among the population of Tumán were insufficient, but improvement was observed in the knowledge about some prevention measures with respect to 2016.

Antimicrobial peptides in multiresistant respiratory infections

ABSTRACT Antimicrobial peptides are small cationic molecules present in almost all living organisms. They show direct or indirect (immunomodulation) activity in a wide range of pathogenic microorganisms as members of the humoral arsenal of innate immunity. In mammals they play a significant role in respiratory airways. The most abundant antimicrobial peptides in the respiratory tract of mammals are lysozymes, lactoferrin, histatins, defensins and cathelicidins. Respiratory and pulmonary infections are combated, primarily, by antimicrobial peptides like LL-37 against Gram-negative bacteria, histatin 5 against Candida albicans and human peptides from neutrophils against adenovirus, influenza and parainfluenza. This paper provides a review of the most important antimicrobial peptides in the respiratory tract and their use in the search for new effective agents against microorganisms that cause respiratory infections based on information published in MedLine, the Web of Science and Scopus in recent years.

RESUMEN Los péptidos antimicrobianos son pequeñas moléculas catiónicas presentes en casi todos los organismos vivos. Muestran actividad directa o indirecta (inmunomodulación) en una amplia gama de microorganismos patógenos como miembros del arsenal humoral de la inmunidad innata. En los mamíferos juegan un papel importante en las vías respiratorias. Los péptidos antimicrobianos más abundantes en el tracto respiratorio son lisozima, lactoferrina, histatinas, defensinas y catelicidinas. Las infecciones respiratorias y pulmonares son combatidas, principalmente, por péptidos antimicrobianos como LL-37 contra bacterias gramnegativas, histatina 5 contra Candida albicans y péptidos humanos de neutrófilos contra adenovirus, influenza y parainfluenza. Este artículo proporciona una revisión sobre los péptidos antimicrobianos más importantes en el tracto respiratorio y su empleo en la búsqueda de nuevos agentes eficaces contra microorganismos causantes de infecciones respiratorias teniendo en cuenta la información publicada al respecto en MedLine, Web of Science y Scopus en los últimos años.

Proteolysis assessment in isolated Plasmodium falciparum living cells at the asexual blood stages

ABSTRACT It has been demonstrated that proteases play crucial roles in Plasmodium falciparum infection and therefore have been considered as targets for the development of new therapeutic drugs. The aim of this study was to describe the specific proteolytic activity profile in all blood stages of P. falciparum isolated parasites in order to explore new antimalarial options. For this purpose, we used the fluorogenic substrate Z-Phe-Arg-MCA (Z: carbobenzoxy, MCA: 7-amino-4-methyl coumarine) and classic inhibitors for the different classes of proteolytic enzymes, such as phenylmethylsulfonyl fluoride (PMSF), 1.10-phenantroline, pepstatin A and E64 to study the inhibition profiles. As expected, due to the high metabolic activity in mature stages, the substrate was mostly degraded in the trophozoite and schizont, with specific activities ~ 20 times higher than in early stages (merozoite/rings). The major actors in substrate hydrolysis were cysteine proteases, as confirmed by the complete hydrolysis inhibition with E64 addition. Proteolytic activity was also inhibited in the presence of PMSF in all but the schizont stage. However, PMSF inhibition was the result of unspecific interaction with cysteine proteases as demonstrated by reversion of inhibition by dithiotreitol (DTT), indicating that serine protease activity is very low or null. To our knowledge, this is the first report aiming to describe the proteolytic profile of P. falciparum isolated parasites at all the erythrocytic cycle stages. The results and protocol described herein can be useful in the elucidation of stage specific action of proteolysis-inhibiting drugs and aid in the development of antimalarial compounds with protease inhibitory activity.

RESUMEN Se ha demostrado que las proteasas desempeñan funciones vitales en la infección por Plasmodium falciparum, y por lo tanto se consideran dianas en la elaboración de nuevos medicamentos terapéuticos. El objetivo del estudio era describir el perfil de actividad proteolítica específica de todas las etapas sanguíneas de parásitos aislados de P. falciparum con vistas a explorar nuevas opciones antimaláricas. Con ese propósito, utilizamos el sustrato fluorogénico Z-Phe-Arg-AMC (Z: carbobenzoxi, AMC: 7-amino-4-metilcumarina) e inhibidores clásicos para las diferentes clases de enzimas proteolíticas, tales como el fluoruro de fenilmetilsulfonilo (PMSF), 1,10-fenantrolina, pepstatina A y E64 para estudiar los perfiles de inhibición. Como se esperaba, debido a la elevada actividad metabólica de las etapas de madurez, el sustrato fue degradado mayormente en el trofozoíto y el esquizonte, con actividad específica ~ 20 veces superior a la de las etapas tempranas (merozoíto/ anillos). Los principales actores en la hidrólisis del sustrato fueron las cisteínas proteasas, lo que fue confirmado por la inhibición completa de la hidrólisis con la adición de E64. La actividad proteolítica también fue inhibida en presencia de PMSF en todas las etapas excepto el esquizonte. Sin embargo, la inhibición del PMSF fue resultado de una interacción inespecífica con las cisteínas proteasas, según lo demuestra la reversión de la inhibición con el ditiotreitol (DTT), lo que indica que la actividad de la serina proteasa es muy baja o inexistente. Que sepamos, este es el primer informe dirigido a describir el perfil proteolítico de parásitos aislados de P. falciparum en todas las etapas del ciclo eritrocítico. Los resultados y el protocolo que aquí se describen pueden ser útiles para dilucidar la acción específica de los medicamentos inhibidores de proteólisis en cada etapa, así como contribuir al desarrollo de compuestos antimaláricos con actividad inhibidora de la proteasa.

Determination of biofilms and extended-spectrum beta-lactamases in Vibrio cholerae non-O1, non-O139 isolates from patients with diarrhea in Cuba

RESUMEN Vibrio cholerae no-O1, no-O139 es el tercer grupo de bacterias del género Vibrio que con más frecuencia producen diarreas. Sobrevive en los ambientes acuáticos, utilizando la formación de biopelícula como mecanismo de supervivencia que propicia la transmisión de la enfermedad diarreica. Desde 1977 se caracterizan aislados de V. cholerae con resistencia múltiple, y algunos de los mecanismos involucrados incluyen la producción de β-lactamasas de espectro extendido (BLEE). Este trabajo tuvo como objetivo determinar la formación de biopelícula en los aislados cubanos de V. cholerae no-O1, no-O139, causantes de enfermedad diarreica aguda (EDA), y detectar la producción de BLEE en aquellos con resistencia total e intermedia a ampicilina. Se realizó un estudio descriptivo de corte transversal, entre enero 2014 y junio 2015. Se estudiaron 55 aislados caracterizados previamente, que formaban parte del cepario del Laboratorio Nacional de Referencia de EDA del Instituto “Pedro Kourí”. Para la determinación fenotípica de BLEE se estudiaron 43, de los que ya se conocía su susceptibilidad a ampicilina. El 54,5 % de los aislados resultaron positivos a la formación de biopelícula, y predominaron los clasificados como formadores moderados (46,6 %) y débiles (36,6 %). De los 34 resistentes a ampicilina, 26,5 % resultaron positivos a la producción de BLEE. En el caso de los nueve aislados con resistencia intermedia a ampicilina, 44,4 % resultaron positivos. Los resultados del presente estudio contribuyen al conocimiento sobre la capacidad que tienen de persistir en el ambiente y permiten profundizar sobre los mecanismos de resistencia a los antimicrobianos.

ABSTRACT Vibrio cholerae non-O1, non-O139 is the third bacterium group from the genus Vibrio most commonly causing diarrhea. It survives in aquatic environments, using the formation of biofilm as a survival mechanism facilitating the transmission of diarrheal disease. Multi-drug resistant V. cholerae isolates have been characterized since the year 1977, and some of the mechanisms involved include the production of extended-spectrum β-lactamases (ESBLs). The purpose of the study was to determine the formation of biofilm in Cuban isolates of V. cholerae non-O1, non-O139 causing acute diarrheal disease (ADD), and detect the production of ESBLs in those with total or intermediate resistance to ampicillin. A descriptive cross-sectional study was conducted from January 2014 to June 2015. The study sample was 55 previously characterized isolates obtained from the strain collection at the ADD National Reference Laboratory of Pedro Kourí Institute. For phenotypic determination of ESBLs, 43 were studied which were known to be susceptible to ampicillin. 54.5 % of the isolates tested positive for biofilm formation, with a predominance of those classified as moderate (46.6 %) and weak (36.6 %) biofilm producers. Of the 34 isolates resistant to ampicillin, 26.5 % were positive for ESBL production. Of the 9 with intermediate ampicillin resistance, 44.4 % were positive. The results of the present study contribute knowledge about their ability to persist in the environment, and provide insight into antimicrobial resistance mechanisms.

Evaluation of the viability of Legionella pneumophila in water samples

RESUMEN Introducción: Legionella pneumophila se sitúa entre los principales agentes causales de neumonía adquirida en la comunidad y de origen nosocomial. La inhalación de aerosoles potencialmente contaminados con la bacteria, producto de la colonización de redes y otros sistemas que utilizan agua, representa un peligro para la salud de los individuos expuestos. Objetivo: evaluar la viabilidad de L. pneumophila en muestras de agua almacenadas en diferentes intervalos de tiempo para el diagnóstico por cultivo microbiológico de Legionella spp. Métodos: Se contaminaron artificialmente muestras de agua con dos cepas de L. pneumophila de serogrupos diferentes y la conformación de una mezcla de ellas, para un total de 15 muestras. Los frascos contaminados fueron procesados a las 24 h, 72 h, 7 días, 14 días y 21 días. Se realizó cultivo microbiológico según ISO 11731: 2004 y PNO 03-013: 2015. Resultados: Se demostró viabilidad de la bacteria en muestras almacenadas hasta 21 días. El método de concentración por filtración resultó tener los mayores recobrados del microorganismo. Conclusiones: El tiempo de almacenamiento de las muestras afecta la viabilidad de L. pneumophila. Sienta las bases para estudios posteriores de robustez del diagnóstico de L. pneumophila como parte del servicio que presta el Centro de Investigaciones Científicas de la Defensa Civil en los programas de prevención y control Legionella spp. en instalaciones de interés turístico e industrial.

ABSTRACT Introduction: Legionella pneumophila is one of the main causative agents of community- and hospital-acquired pneumonia. Inhalation of sprays potentially contaminated with the bacterium, due to the colonization of networks and other systems using water, is a hazard to the health of exposed individuals. Objective: Evaluate the viability of L. pneumophila in samples of water stored at various time intervals for the microbiological culture diagnosis of Legionella spp. Methods: Water samples were artificially contaminated with two strains of L. pneumophila from different serogroups and a mixture of them, for a total of 15 samples. The contaminated vessels were processed at 24 h, 72 h, 7 d, 14 d and 21 d. Microbiological culture was performed in compliance with ISO 11731: 2004 and PNO 03-013: 2015. Results: The bacterium was found to be viable in samples stored up to 21 days. The filtration concentration method obtained the greatest amount of the microorganism. Conclusions: Storage time of the samples affects the viability of L. pneumophila. The study lays the foundations for further research about the validity of L. pneumophila diagnosis as part of the service offered by the Civil Defense Scientific Research Center in Legionella spp. prevention and control programs for tourist and industrial facilities.

FasciDIG. Timely and effective diagnosis of human fasciolosis

RESUMEN El diagnóstico de fasciolosis humana, enfermedad zoonótica causada por el parásito Fasciola hepatica reúne los resultados de las técnicas: concentración por sedimentación (copa-cónica), FasciDIG en heces y FasciDIG en suero, además de los criterios clínico-epidemiológicos. FasciDIG constituye un ensayo inmunoenzimático que detecta antígenos de excreción-secreción de F. hepatica a partir de muestra de suero y heces. Permite diagnosticar la infección en cada una de las formas clínicas de la enfermedad y presenta una sensibilidad diagnóstica superior a las técnicas convencionales que detectan huevos del parásito (copa-cónica), por lo que se consideró oportuno abordar algunos conceptos relacionados con esta técnica inmunodiagnóstica y analizar su aplicabilidad para el diagnóstico oportuno y eficaz de esta parasitosis.

ABSTRACT Diagnosis of human fasciolosis, a zoonotic disease caused by the parasite Fasciola hepatica, combines the results of the following techniques: conical cup, feces FasciDIG and serum FasciDIG, as well as clinical-epidemiological criteria. FasciDIG is an enzyme immunoassay that detects F. hepatica excretion / secretion antigens in serum and feces samples. It makes it possible to diagnose infection at each of the clinical stages of the disease with a higher diagnostic sensitivity than conical cup. Therefore, it was considered appropriate to address a number of concepts regarding this immunodiagnostic technique and analyze its applicability in the timely and effective diagnosis of this helminth infection.

Dengue lethality in health care centers from the Peruvian Social Security during the Coastal Child, Northern Peru, 2017

Atypical presentation of non-Hodgkin's lymphoma in a patient with AIDS

RESUMEN El linfoma no Hodgkin es la segunda neoplasia más frecuente en pacientes con sida. Sus formas clínicas sistémicas asociadas con el virus de inmunodeficiencia humana casi siempre tienen un alto grado una malignidad. La participación del sistema nervioso central es un hecho frecuente en pacientes con este tipo de linfoma. El objetivo es describir una forma atípica de presentación del linfoma no Hodgkin en un paciente con sida. Se informa acerca de un paciente de 28 años, VIH positivo, con linfoma no Hodgkin de células grandes B difuso que se presentó con parálisis aislada del III par craneal como principal manifestación inicial, la enfermedad progresó rápidamente y en pocos días tuvo un desenlace fatal. Se concluye que es necesario considerar el diagnóstico de linfoma no Hodgkin en pacientes con sida y parálisis del III par craneal, para de esta forma realizar un diagnóstico temprano e iniciar tratamiento oportuno debido a la rápida evolución y mal pronóstico de la enfermedad.

ABSTRACT Non-Hodgkin's lymphoma is the second most common neoplasm in patients with AIDS. Its systemic clinical forms associated with the human immunodeficiency virus almost always have a high degree of malignancy. Involvement of the central nervous system is a frequent occurrence in patients with this type of lymphoma. The purpose of the study is to describe an atypical presentation of non-Hodgkin's lymphoma in a patient with AIDS. A case is reported of a male 28-year-old HIV-positive patient with diffuse large B-cell non-Hodgkin's lymphoma who presented with isolated cranial nerve III palsy as the main initial manifestation. The disease progressed rapidly and had a fatal outcome some days later. It is concluded that it is necessary to consider the diagnosis of non-Hodgkin's lymphoma in patients with AIDS and cranial nerve III palsy, in order to make an early diagnosis and initiate timely treatment, in view of the rapid evolution and poor prognosis of the disease.

Presentation of Q fever simulating severe leptospirosis

RESUMEN La fiebre Q aguda es una zoonosis ubicua, que habitualmente se presenta con cuadros febriles autolimitados. En presencia de un cuadro séptico con manifestaciones de disfunción multiórgano, hepatitis colestásica, distres respiratorio o la insuficiencia renal como semiología dominante y cultivos negativos se piensa habitualmente en leptospirosis. La alta prevalencia de fiebre Q en el Servicio de Medicina Interna del Hospital Universitario de Gran Canaria “Doctor Negrín”, que ha requerido evaluación hospitalaria -unos 50 casos al año en un área de 400 000 habitantes-, motivó la realización de serología para fiebre Q y leptospirosis en presencia de cuadros sépticos con cultivos negativos. De manera que se han encontrado durante los seis últimos años, tres casos de fiebre Q simulando leptospirosis. La rápida respuesta a la asociación de esteroides y doxiciclina ha sido el común denominador de estos tres casos. El contexto global con la rápida respuesta al tratamiento expuesto es el motivo de esta presentación.

ABSTRACT Acute Q fever is a ubiquitous zoonosis which often presents with self-limited febrile episodes. In the presence of a septic episode with manifestations of multiple organ dysfunction, cholestatic hepatitis, respiratory distress or renal failure as the prevailing semiology, and negative culture results, leptospirosis is usually suspected. The high prevalence of Q fever cases requiring evaluation at the Internal Medicine Service of Doctor Negrín University Hospital in Gran Canaria -about 50 cases per year in an area of 400 000 inhabitants- led to the indication of serological tests for Q fever and leptospirosis in septic cases with negative culture results. In the last six years, three cases have been found of Q fever simulating leptospirosis. A rapid response to the association of steroids and doxycycline was the common feature of these three cases. The study was aimed at describing the global context of the rapid response to the treatment indicated.