Revista Cubana de Investigaciones Biomédicas

Rediseño y estandarización de un método inmunoenzimático para detectar anticuerpos anti-estreptoquinasa en muestras de suero humano

Se procedió a estandarizar un método inmunoenzimático, heterogéneo, cualitativo, tipo sandwich de doble antígeno para la detección de anticuerpos contra la estreptoquinasa en muestras puras de suero humano. Se ensayaron diferentes concentraciones del antígeno de recubrimiento y diluciones del conjugado, así como diferentes tiempos y temperaturas de incubación de las muestras. Se estableció el valor de corte del ensayo y su límite de detección y se comprobó si existían inespecificidades. Se determinó como concentración óptima de recubrimiento 0,1 µg/mL para una dilución del conjugado de 1:100 000. Las condiciones óptimas de incubación de las muestras fueron 30 min a temperatura de laboratorio y no se comprobaron interferencias de otros analitos con la técnica. Se establecieron como valores normales de la técnica las densidades ópticas que se encuentran entre 0,282 y 0,654.

A sandwich, heterogenous, qualitative, doble antigen immunoenzimatic method was standardized to detect anti-streptokinase antibodies in pure samples of human serum. Different concentrations of the recovering antigen and conjugate dilutions, as well as various times and temperatures of incubation of the samples were assayed. The cut-off value of the assay and its detection limit were established and it was proved if there were some unspecificities. 0.1 mg/mL was determined as an optimal recovering concentration for a conjugate dilution of 1:100 000. The optimum conditions of incubation of the samples were 30 min at lab temperature and there were no interferences of other analytes with the technique.The optical densities between 0.282 and 0.654 were established as normal values of the technique.

Comportamiento de las hormonas tiroideas y el malonildialdehído en la evolución del trasplante de médula ósea

Se estudiaron 10 de los pacientes seleccionados para realizarles un trasplante de médula ósea, ellos reciben radiaciones corporales previas con dosis que los lleven a la fase crítica del síndrome agudo por radiación, con el propósito de destruir su médula y con ella las células malignas que han dado origen a su enfermedad de base. Se les extrajeron muestras de sangre en ayunas antes y después de la irradiación, y en el postrasplante inmediato y mediato para la determinación de los valores de hormonas tiroideas (T3 y T4), tirotropina y la concentración de malonildialdehído. La concentración de las hormonas tiroideas se comportó como en otros pacientes graves, con la particularidad de su aumento, imputable a la radiación, en los primeros días. Los valores de malonildialdehído disminuyeron notablemente en los pacientes sobrevivientes al trasplante, y se mantuvieron por encima del rango normal en los pacientes que fallecieron con posterioridad. Los valores de malonildialdehído y hormonas tiroideas fueron visiblemente diferentes entre los grupos de sobrevivientes y fallecidos, como en otros pacientes críticos. La tirotropina no muestra grandes variaciones, aunque sí una cierta tendencia a aumentar en los sobrevivientes, y a mantenerse sin cambio en los fallecidos. Las relaciones de T3 y T4 con la concentración de malonildialdehído hace pensar que estas hormonas tienen relación con el estrés oxidativo que sufren los pacientes sometidos a un trasplante de médula ósea.

10 of the patients selected to undergo a bone marrow transplantation were studied. They previously received body radiations at doses that took them to the critical stage of the acute syndrome by radiation in order to destroy their marrow and with it the malignant cells that caused the base disease. Blood samples were taken during fasting before and after the irradiation and on the immediate and and mediate posttransplantation to determine the values of thyroid hormones (T3 and T4), thyrotropin and the concentration of malonydialdehyde. The concentration of thyroid hormones behaved as in other severe patients, with the particularity of its increase, imputable to radiation in the first days. The malonyldialdehyde values decreased significantly among those patients that survived the transplantation and they were over the normal range in the patients who died later. The malonyldialdehyde and thyroid hormones values were visibly different between the groups of the survivors and the deceased, as in other critical patients. Thyrotropin did not show great variations, although it was observed a certain trend to rise in the survivors and to keep invariable in the dead. The relations of T3 and T4 with the concentration of malonyldialdehyde make us think that these hormones are related to the oxidative stress suffered by the patients undergoing a bone marrow transplantation.

Relación entre las distintas subpoblaciones celulares, la enzima superóxido dismutasa y la calidad seminal

Se realizó un estudio de 554 hombres infértiles en el que se determinó la presencia de leucocitospermia y además análisis seminal. Se determinó el efecto de las distintas subpoblaciones celulares sobre la calidad del semen y sobre la producción de superóxido dismutasa. Se encontró un aumento de la frecuencia de leucocitospermia (16,4 %) en relación con estudios anteriores. Los leucocitos peroxidasa positivos se correlacionaron negativamente con la movilidad (r = -0,35 p < 0,05). Además se encontró una correlación negativa entre las células NK y la movilidad (r = -0,35 p < 0,045). Sin embargo, los macrófagos mostraron una correlación positiva con la prueba de hinchamiento hiposmótico (r = 0,68 p < 0,01) y con la morfología espermática (r = 0,65 p < 0,01). La enzima superóxido dismutasa mostró una correlación negativa con el número de leucocitos peroxidasa-positivos (r = 0,33 p < 0,04), no correlacionándose con ningún otro tipo celular. Los resultados demuestran que la presencia de distintos leucocitos en semen puede afectar de manera diferente los parámetros seminales, y la producción de la enzima superóxido dismutasa.

A study of 554 infertile men was conducted in which the presence of leucocytospermia was determined and a seminal analysis was made. The effect of the different cellular subpopulations on the quality of semen and on the production of superoxide dismutase was also determined. It was found an increase of the frequency of leucocytospermia (16.4 %) compared with previous studies. The positive peroxidase leukocytes were negatively correlated with mobility (r = -0.35 p < 0.05). It was also found a negative correlation between the NK cells and mobility (r= -0.35 p < 0.045). However, the macrophages showed a positive correlation with the test of hyposmotic swelling (r = 0.68 p < 0.01) and with the spermatic morphology (r= 0.65 p< 0.01). The superoxide dismutase enzyme had a negative correlation with the number of positive peroxidase leucocytes (r = 0.33 p < 0.004) and it did not correlate with any other cellular type. The results prove that the presence of diverse leucocytes in semen may affect the seminal parameters in a different way, as well as the production of superoxide dismutase.

Actividad antiinflamatoria de extracto fluido de hojas de siempreviva (Bryophyllum pinnatum)

Se indagó sobre la actividad antiinflamatoria de extracto fluido de las hojas de Siempreviva (Bryophyllum pinnatum) frente al edema por carragenina en ratas de un peso promedio de 200-250 g. Se pudo constatar que el extracto fluido con 4,5 % de sólidos totales, en dosis de 100 mg/kg de peso tiene efectividad antiinflamatoria.

The anti-inflamatory activity of the fluid extract of the leaves of Siempreviva (Bryophyllum pinnatum) against the edema caused by carrageen in rats with an average weight of 200-250 g, was investigated. It was confirmed that the fluid extract with 4.5 % of total solids at doses of 100 mg/kg of weight has an anti-inflammatory effect.

Desarrollo de un modelo de aterosclerosis inducida por inmunocomplejos de forma activa en ratones BALB/CBJ

Se emplearon ratones isogénicos de la línea BALB/CBJ, de 6 semanas de edad y un régimen de agua y comida ad libitum. Estos se dividieron en 2 grupos, a uno de ellos se les realizó el esquema de inmunización de 0-1-4 semanas por vía intraperitoneal con la vacuna cubana anti hepatitis. El otro grupo fue el control y se inmunizó de la misma forma empleando el excipiente de la vacuna, sin el antígeno de superficie de la hepatitis B (AgsHB). El grupo tratado inhaló diariamente durante 1 mes humo de cigarillo. Después de cuantificar los Ac anti-HBs y la ausencia de estos en los controles, se llevaron a cabo 7 inmunizaciones con un intervalo de 5 d entre ellas por la vena caudal, se utilizó como inmunógeno en el grupo tratado AgsHB recombinante con una dosis que duplicó la concentración de anti-HBs de cada animal. Al grupo control se le suministró solución salina con la misma metodología que en el grupo tratado. Se determinó la presencia de inmunocomplejos circulantes en plasma. Se practicó eutanasia y se comprobó la presencia de lesiones ateroscleróticas de forma macroscópica y microscópica. Con los resultados obtenidos se concluyó que se logró obtener un modelo de aterosclerosis en ratones isogénicos BALB/CBJ por formación de inmunocomplejos de manera activa.

6-week-old BALB/CBJ isogenic mice were used in this study and an ad libitum regime of water and food was established. These mice were divided into 2 groups.One of them was applied the immunization scheme of 0-1-4 weeks with the Cuban anti-hepatitis vaccine by intraperitoneal route. The control group was immunized by the same way, using the excipient of the vaccine without the hepatitis B surface antigen (AgsHB). The treated group inhaled cigarrete smoke daily during a month. After quantifying the anti-hepatitis B antibodies and proving their absence in the controls, 7 immunizations were performed with an interval of 5 days between them by the caudal vein. Recombinant AgsHB was used as an immunogen in the treated group at a dose that dobled the concentration of anti-hepatitis-B antibodies of every animal. The control group was adminstered a saline solution with the same methodology than the treated group. It was determined the presence of circulating immunocomplexes in plasma. Euthanasia was practiced and the presence of atherosclerotic injuries was proved in a macroscopic and microscopic way. According to the results obtained, it was concluded that it was possible to obtain a model of atherosclerosis in BALB/CBJ isogenic mice by the formation of immunocomplexes in an active way.

Evolución metabólica de pacientes diabéticos tipo 2 sometidos a un tratamiento combinado de dieta y ejercicios yoga

Se realizó un estudio con 40 pacientes diabéticos tipo 2 con la evaluación del efecto que produce una dieta enriquecida en proteína de soya y ejercicios de moderada intensidad, para lo cual se midieron algunos indicadores bioquímicos. Al término del estudio se encontró en los pacientes que realizaron ejercicios yoga una disminución significativa (p<0,05) del colesterol total, los triglicéridos, el colesterol de las lipoproteínas de baja densidad y de la creatinina, así como un aumento del colesterol de las lipoproteínas de alta densidad con respecto al grupo que realizó ejercicios aerobios. Los resultados obtenidos sugieren que esta terapia, combinada con ejercicios yoga, puede resultar efectiva en este tipo de pacientes.

A study of 40 type 2 diabetic patients was conducted by evaluating the effect produced by a soya protein-rich diet and exercises of moderate intensity. Some biochemical indicators were measured to this end. At the end of the study, it was found that the patients who practiced yoga exercises showed a significant reduction (p<0.05) of total cholesterol, triglycerides, LDL cholestherol and creatinine and an increase of HDL cholesterol compared with the group that did aerobic exercises. These results suggest that this therapy combined with yoga exercises may be effective in this type of patients.

Diabetes mellitus: tratamiento dietético

Se revisaron los aspectos relacionados con la clasificación, el tratamiento dietético, el cálculo de los requerimientos energéticos y nutrimentales, las especificaciones de la dieta de acuerdo con los diferentes tipos de diabetes, en cuanto a energía, regularidad y composición de la dieta. La dietoterapia es muy importante en el tratamiento de la diabetes mellitus, para lograr una regulación óptima del metabolismo de los hidratos de carbono, grasas y proteínas. Está dirigida a establecer una ingesta nutricional conveniente para lograr o mantener un peso adecuado, prevenir la hiperglucemia y reducir el riesgo de aterosclerosis y de otras complicaciones.

Those aspects connected with the classification, diet therapy, calculation of the energetic and nutritional requirements, as well as with the diet specifications according to the different types of diabetes as regards energy, regularity and composition of the diet, were reviewed. The diet therapy is very important in the treatment of diabetes mellitus to attain an optimal regulation of the metabolism of carbohydrates, fats and proteins. It is aimed at establishing a convenient nutritional ingestion that allows to reach or maintain an adequate weight, to prevent hyperglycemia and to reduce the risk of atherosclerosis and of other complications.

Estrés oxidativo en la infección por el virus linfotrópico de células T humano de tipo I (vlth-I)

Se reportó lo más actualizado en relación con el virus linfotrópico de células T humano de tipo I (VLTH-I), que es un retrovirus asociado entre otras enfermedades a la leucemia de células T del adulto y la paraparesia espástica tropical. La patología es el resultado de la actividad de la proteína viral Tax que participa en el incremento de la producción de especies reactivas del oxígeno requeridas para la activación de NF-kB, y que transactiva la expresión de genes virales y celulares que resulta en la transformación celular, la inmortalización y la enfermedad. La caracterización de estos mecanismos contribuye a una mejor comprensión de la fisiopatología de la infección y en la perspectiva de intervención terapéutica preventiva.

The most updated information is given about the human T cell lymphotropic virus type 1 (HTLV-1), which is a retrovirus associated with T-cell leucemia of the adult and with tropical spastic paraparesis, among other diseases. The pathology is the result of the activity of Tax viral protein that takes part in the increase of the production of reactive oxygen species required for the activation of NF-kB, and that transactivates the expression of viral and cellular genes resulting in the cellular transformation, immortalization and disease. The characaterization of these mechanisms contributes to a better understanding of the physiopathology of the infection and to the perspective of preventive therapeutic intervention.

El citoesqueleto de actina: una perspectiva desde la biología molecular del cáncer

Se realizó una síntesis de los temas que emergen en la actualidad sobre la estructura y organización del citoesqueleto de actina y las vías de señalización que participan en su regulación. La información bibliográfica consultada se ha tratado de ofrecer con un enfoque funcional, sin obviar los mecanismos moleculares involucrados. Se incluye, además, un pequeño apartado sobre la participación de las proteínas Rho en el proceso de transformación maligna, a partir del hecho conocido de que en el fenotipo transformado tumorigénico se pueden apreciar cambios morfológicos que involucran al citoesqueleto de actina.

A synthesis of the topics that nowadays deal with the structure and organization of the actin cytoskeleton and with the ways of signaling taking part in its regulation is made. The reviewed bibliographic information has been provided through a functional approach, without excluding the molecular mechanisms that are involved. It is also included a brief section on the participation of Rho proteins in the process of malignant transformation, starting from the known fact that the morphological changes involving the actin cytoskeleton may be appreciated in the transformed tumorigenic phenotype.

Requisitos uniformes de los manuscritos enviados a las Revistas Biomédicas (13 de mayo de 2000)