Revista de Protección Vegetal

Trichoderma spp. and their role in the control of crop pests

El objetivo del trabajo fue resumir los aspectos teóricos y prácticos de mayor importancia, sobre el género Trichoderma Persoon y su función como agente de control biológico de hongos y nematodos, su acción como inductor de resistencia en las plantas y estimulador de crecimiento, entre otros. No obstante, la ubicación taxonómica de las especies resulta difícil cuando se emplean solo aspectos morfológicos y en la actualidad se recurre también a la utilización de herramientas moleculares, que contribuyen a la identificación específica. Las especies de Trichoderma, de manera general, crecen rápidamente, producen conidios abundantes y tienen amplia gama de enzimas, que les permite habitar en casi todos los suelos agrícolas y en otros ambientes, demostrando gran plasticidad ecológica. Como su hábitat es el suelo, se le enmarcó como control biológico de patógenos presentes en el mismo; no obstante se demostró que tiene acción, contra hongos causantes de enfermedades foliares. Estas bondades como agente de control dependen más de las cepas de Trichoderma, que de la especie, pues estas pueden presentar diferencias en sus modos de acción, aún perteneciendo a una misma especie. Esto refuerza la necesidad de efectuar una correcta selección de los aislamientos respecto a sus dianas y ambientes, para obtener resultados consistentes en condiciones de campo.

The objective of this work was to summarize the most important theoretical and practical aspects of the genus Trichoderma Persoon and the role as a biological control agent of fungi and nematodes, as well as its action as an inductor of resistance in plants and a stimulator of growth, among others. However, the taxonomic position of the species is difficult to define when using only morphological aspects, and, currently molecular tools are also used, which contribute to the specific identification. In general, Trichoderma species grow quickly, produce abundant conidia and have wide range of enzymes. This allows them to live in almost all the agricultural soils and in other environments, showing their great ecological plasticity. Trichoderma is a soil fungus, and so it has been framed as a biological control of soil-borne pathogens; however its action against fungi causing leaf diseases has been shown. Trichoderma attributes are more dependent on the strain that on the species, because strains of the same species can have different action modes. This reinforces the necessity of a correct selection of the isolates depending on the targets and environments to get consistent results under field conditions.

Mass rearing of phytoseiidae predatory mites: challenges and perspectives in Cuba

Los ácaros de la familia Phytoseiidae son los enemigos naturales más comunes de los ácaros fitófagos. El estudio de esta familia en Cuba, se inició en los años 70 del siglo pasado, cuando especialistas cubanos comenzaron su identificación taxonómica, lo cual permitió informar la presencia de 20 géneros y más de 60 especies. En orden cronológico le siguieron los estudios poblacionales en cultivos de interés, como cítricos, plátano, papa y arroz, donde se evidenció su impacto en la regulación de las poblaciones de los fitoácaros. En la década del 90 se iniciaron los estudios biológicos de Phytoseiulus macropilis (Banks), demostrándose su eficacia como biorregulador de Tetranychus tumidus Banks y Panonychus citri (McGregor) en viveros de plátano y cítricos, respectivamente. En los primeros años del presente siglo, se emprendió la caracterización de Amblyseius largoensis (Muma) sobre Polyphagotarsonemus latus (Banks) y se evidenció su alta capacidad depredadora sobre este tarsonémido en la producción protegida del pimiento. La utilización de estos depredadores en estrategias inoculativas en la práctica agrícola cubana se ha visto limitada por la escasa disponibilidad de estos agentes de control biológico, a pesar de que se han evaluado diferentes alternativas para su reproducción masiva con resultados alentadores. Con la presente reseña se pretende abordar las tendencias internacionales en la reproducción comercial de los ácaros depredadores, compendiar los principales resultados obtenidos en Cuba y finalmente, examinar los retos y perspectivas que tiene el desarrollo de estos agentes de control biológico en el país.

Mites of the family Phytoseiidae are the most common predators of the phytophagous mites on most plant species. The study of this family in Cuba began in the years 70 of the last century, when Cuban specialists started its taxonomic identification. Twenty genera and more than 60 species have been reported up today. In a chronological order, population studies in several crops of economic interest, such as citrus, banana, potato and rice, have followed making evident their impact on the regulation of phytophagous mite populations. In the decade of the 90's, the determination of the biological parameters of Phytoseiulus macropilis (Banks) was initiated. This phytoseiid mite showed its efficacy as a biological control agent of Tetranychus tumidus Banks and Panonychus citri (McGregor) in nurseries of banana and citrus, respectively. In the first years of the present century, the biological characterization of Amblyseius largoensis (Muma) on Polyphagotarsonemus latus (Banks) was carried out evidencing its high predatory ability on broad mites in the protected production of pepper. The use of these predatory mites in inoculation strategies in the agricultural practice in Cuba have been limited by the scarce availability of these biological control agents, although different alternatives for their mass rearing with promising results have been evaluated. With the present review, it is intended to tackle the international tendencies in the commercial reproduction of predatory mites, to summarize the principal results obtained in Cuba, and finally, to examine the challenges and perspectives that the development of these biological control agents represent to our country.

**Biology and vertical life table of Diaeretiella rapae McIntosh under laboratory conditions**

Diaeretiella rapae McIntosh es un parasitoide de áfidos, entre sus hospedantes más comunes se encuentran Lipaphis erysimi (Kalt), Aphis gossypii Glover, Myzus persicae (Sulzer) y Brevicoryne brassicae (Linnaeus) en cultivos hortícolas. Con vistas a conocer las potencialidades de este insecto en la regulación de las poblaciones de áfidos, el presente trabajo estuvo encaminado a determinar algunos de sus principales parámetros biológicos en condiciones de laboratorio, a temperaturas de 26,5±1,85°C y 28,06±1,49°C y humedades relativas de 59,7±8,63% y 63,13±11,81% respectivamente, así como sus parámetros demográficos con y sin suministro de alimento, a partir del cálculo de la tabla de vida vertical, a 23,8±0,33°C de temperatura y 69,2±6,9% de humedad relativa. La duración del desarrollo de D. rapae fue de 11,48 y 8,7 días, el ciclo biológico fue de 14 y 11,2 días respectivamente y la longevidad se mantuvo de 2-3 días. La producción de progenie fue de 61 y 65 individuos en cada caso y los parámetros poblacionales l x, Lx, Tx, e x, r m, R0 y Tc alcanzaron valores superiores en la población que recibió suplemento alimentario. Estos resultados evidenciaron que D. rapae cuenta con parametros biologicos que favorecen su reproduccion masiva y la importancia del alimento en el desarrollo de sus poblaciones.

Diaeretiella rapae McIntosh is a parasitoid of aphids and among its most common hosts in Cuban horticultural areas are Lipaphis erysimi (Kalt), Aphis gossypii Glover, Myzus persicae (Sulzer) and Brevicoryne brassicae (Linnaeus). To know the potential of this insect in regulating aphid populations, a study was designed to determine some of its key biological parameters under laboratory conditions at temperatures of 26,5±1,85°C and 28,06±1,49°C and relative humidity of 59,7±8,63% and 63,13±11,81%, respectively as well as its demographic parameters with and without food supply, based on the calculation of the vertical life table at 23,8±0,33°C of temperature and 69,2±6,9% RH. In both temperature conditions, the duration of Diaeretiella rapae development was 11,48 and 8,7 days, the cycle was 14 and 11,2 days, respectively, and the longevity remained in 2-3 days. The progeny production was 61 and 65 individuals in each case, and the population parameters l x, Lx, Tx, e x, r m, R0 and Tc reached higher values in the population that received food supplement. These results showed the potential of this parasitoid as a future bioregulator of aphid populations in vegetables.

First report of Cylindrocarpon destructans (Zinss) Scholten affecting avocado (Persea americana Mill) seedling in Colombia

En visita de campo a un cultivo de aguacate ubicado en el departamento de Antioquia en Colombia, se observaron plántulas con menos de un mes de trasplante al campo con síntomas de amarillamiento foliar, flacidez de las hojas, retraso en el crecimiento y pudrición de raíces, sintomatología asociada a la marchitez del aguacate. Basado en un diagnóstico de campo, las plantas enfermas se sometieron al tratamiento habitual para Phytophthora cinnamomi Rands,patógeno comúnmente asociado a la marchitez, sin obtener respuesta positiva. A partir de estas plantas se tomaron muestras de raíces y se trasladaron al Laboratorio de Sanidad Vegetal de la Universidad Nacional de Colombia sede Medellín, donde se procesaron y se sembraron en los medios semi-selectivos para Phytophthora spp. V8-PARPH y V8-NARPH y PDA-acidificado (APDA) y V8 para hongos. Se aisló consistentemente el hongo Cylindrocarpon destructans (Zinss) Scholten y en ningún caso P. cinnamomi. El aislamiento se inoculó en plantas de aguacate, las cuales mostraron amarillamiento y flacidez de las hojas, retraso en el crecimiento y pudrición de raíces, sintomatología común a la marchitez, que además concuerda con lo informado para la enfermedad conocida como pudrición negra de raíces de aguacate. De los tejidos de plantas inoculadas se pudo re-aislar el hongo confirmando todos los postulados de Koch. Los resultados encontrados en este trabajo sugirieron la presencia de esta enfermedad por primera vez en Colombia.

In a visit to an avocado plantation located in the department of Antioquia in Colombia, seedlings with less than one month of being transplanted to the field were observed with leaf yellowing, leaf flaccidity, growth delay and root rot, symptoms associated with avocado wilt. Based on a field diagnosis, the diseased plants were subjected to the habitual treatment for Phytophthora cinnamomi Rands, a pathogen commonly associated with the wilt, without a positive response. Samples were taken from these plants and transferred to the Plant Protection Laboratory of the National University of Colombia, headquarters Medellin, where they were processed and cultured on the semi-selective media for Phytophthora spp. V8-PARPH and V8-NARPH and acidified PDA (APDA) and V8 for fungi. Cylindrocarpon destructans (Zinss) Scholten was the fungus consistently isolated; in any case, P. cinnamomi was isolated. The isolate was inoculated in avocado plants, and they showed leaf yellowing, leaf flaccidity, growth delay and rotten roots, symptoms commonly observed in avocado wilt, and which, in addition, are similar to those reported for avocado black root rot disease. From the inoculated tissues, the same fungus could be re-isolated confirming Koch´s postulates. The results observed in this work suggested the presence of this disease in Colombia for the first time.

Co-existence of potyviruses and begomoviruses in the pepper crop (Capsicum annuum L.) in Cuba

El objetivo del trabajo fue determinar la distribución de potyvirus y begomovirus en áreas productoras de pimiento (Capsicum annuum L.) en Cuba. Se colectaron 600 muestras con síntomas virales durante el periodo 2006-2010. Las muestras se evaluaron mediante el método UMELISA-DAS utilizando un anticuerpo policlonal a PVY para detectar su presencia y de estas se evaluaron 50 plantas positivas con los cebadores universales (PolyT/Poty 4) en una RT-PCR para confirmar el resultado. También se extrajo el ADN total de las plantas y se analizó mediante la técnica de HAN no radiactiva con una sonda de la región intergénica del TYLCV, cuyos resultados se confirmaron en 50 muestras positivas utilizando una PCR con cebadores genéricos (Palv1978/PARc496). La evaluación mediante UMELISA-DAS mostró que del total de plantas colectadas el 78,33% estaba infectado por potyvirus y los resultados obtenidos en la RT-PCR lo confirmaron. El análisis por HAN mostró un 46,17% de infección por begomovirus y se obtuvieron amplicones de la longitud esperada en la PCR. Se determinó la presencia de infecciones mixtas en el cultivo en el 39,17 % de las muestras. Los potyvirus y begomovirus se encontraron presentes en los principales macizos productores del cultivo en Cuba, evidenciándose la prevalencia de los potyvirus en las áreas estudiadas, y un alto porcentaje de infecciones mixtas entre estos. Este estudio integral contribuirá al perfeccionamiento de los programas de manejo integrado de plagas y mejoramiento genético del cultivo en el país.

The objective of this work was to determine the distribution of potyviruses and begomoviruses in areas for pepper (Capsicum annuum L.) production in Cuba. Six hundred samples were collected with viral symptoms during 2006-2010. The samples were evaluated by DAS-UMELISA method using a polyclonal antibody to PVY to detect potyvirus presence, and 50 positive plants were assessed by a RT-PCR with universal (PolyT / Poty 4) primers to confirm the result. Also, the total DNA from these plants was extracted and analyzed by non radioactive NASH method with a probe from intergenic region of TYLCV to detect the begomovirus presence; these results were confirmed evaluating 50 positive samples using a PCR with generic primers (Palv1978/PARc496). The evaluation by DAS-UMELISA showed 78, 33% of potyvirus infection from the total plants collected and the results obtained by RT-PCR allowed confirming them. A begomovirus infection of 46, 17% of was determined and the amplicons obtained by PCR corresponded in size. The mixed infections in the crop reached 39, 17%. The potyviruses and begomoviruses are present in the main producing pepper areas in Cuba, being demonstrated this in study the potyvirus prevalence in the visited areas, and a high percentage of mixed infections in this crop. This integral study will contribute to the improvement of the integrated pest management and breeding programs in the country.

Characterization of Citrus tristeza virus isolates from Colombia

Isolates of Citrus tristeza virus around the world differ widely in their biological properties. These properties may depend on strain mixtures within individual trees. Monoclonal Antibody 13 (MCA13) is an antibody that detects almost all the severe strains causing Quick Decline and Stem Pitting CTV syndromes. The objectives of this work were: I) to determine the percentage of CTV isolates reactive to the MCA13 antibody in each Colombian region evaluated and II) to analyze the genetic diversity of isolates from these regions. In almost all the regions evaluated, CTV MCA13 reactive isolates were identified; however, only one was found in Mompox area. The coat protein gene was amplified by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) and analyzed by single strain conformational polymorphisms (SSCP) patterns. In this work, at least twelve different dsRNA electrophoretic profiles and seven SSCP different electrophoretic patterns were identified. At least two different isolates were shown to be a mixture of strains. Non reactive strains to MAC13 from the Mompox region could be the best candidates for a Tristeza disease cross-protection program.

Los aislamientos de Citrus tristeza virus de diferentes regiones del mundo difieren en sus propiedades biológicas. Esas propiedades pueden depender de mezclas de cepas en el interior de árboles individuales. El anticuerpo monoclonal MCA13 detecta casi todas las cepas severas que causan los síndromes de declinamiento rápido y acanalamiento de tallos. Este trabajo tuvo como objetivos: I) determinar el porcentaje de aislamientos de CTV reactivos al anticuerpo monoclonal MCA13, en cada región Colombiana evaluada y II) analizar la diversidad genética de los aislamientos provenientes de esas regiones. En este trabajo identificamos aislamientos de CTV reactivos al MCA13 en casi todas las regiones de Colombia; sin embargo en Mompox, solamente se encontró uno. La proteína de la cápside fue amplificada por transcripción reversa seguida de la reacción en cadena de la polimerasa y los patrones de polimorfismo conformacional de una sola hebra (SSCP) fueron analizados. Se identificaron al menos 12 perfiles electroforéticos de RNA de doble hebra y siete perfiles SSCP. Se encontró que al menos dos aislamientos diferentes están compuestos de mezclas de cepas. Las cepas no reactivas al MCA13 podrían ser buenas candidatas para un programa de protección cruzada.

In vitro effect of essential oils on Alternaria solani Sorauer

Este trabajo tuvo como objetivo determinar la actividad antifúngica in vitro de diez aceites esenciales sobre Alternaria solani Sorauer, importante patógeno de las solanáceas. Se evaluó el efecto por contacto directo y por exposición a los vapores. Los bioensayos se realizaron según diseño completamente aleatorizado, se utilizó el método de discos de papel inoculados con los aceites, enfrentados a discos del fitopatógeno y se evaluó el crecimiento radial del hongo. Todos los aceites, excepto Citrus sinensis (L.) Osbeck (naranjo dulce), inhibieron el crecimiento micelial hasta los 7 días. A los 14 días se observó inhibición total en los tratamientos con los aceites de Pimpinella anisum L. (anís), Ocimum basilicum L. (albahaca blanca), Ocimum basilicum L. variedad genovese (albahaca genovesa) y Piper auritum Kunth (caisimón de anís). Los metabolitos volátiles de los aceites no mostraron efecto fungicida; no obstante se observó inhibición del crecimiento micelial de A. solani en los tratamientos con los extractos de Ruta chalepensis L. (ruda) y Piper auritum. Los resultados abren nuevas perspectivas para el control de este patógeno.

The aim of this work was to determine the in vitro antifungal activity of ten essential oils on Alternaria solani SORAUER. The effect by direct contact and exposure to vapors was evaluated. The bioassays were performed using a completely randomized design and the method of paper discs inoculated with the oils facing phytopathogen discs; the fungal radial growth was evaluated. All the oils, except those from Citrus sinensis (L.) Osbeck (sweet orange), inhibited the mycelial growth until the seventh day. At day 14, a total inhibition was observed in the treatments with the oils from Pimpinella anisum L. (anise), Ocimum basilicum L. (white basil), Ocinum basilicum L. var. genovese (Genovese basil), and Piper auritum Kunth (anise caisimon). No fungicidal effect was shown by the volatile metabolites of the oils; however, the inhibition of A. solani mycelial growth was observed in the treatments with the extracts of Ruta chalepensis L. (ruda) and P. auritum. These results open new perspectives for the control of this pathogen.

**Perception of the phytosanitary authorities on the control of Polyphagotarsonemus latus (Banks) in the protected production of pepper**

Con el objetivo de conocer la percepción de los fitosanitarios respecto al control del ácaro blanco (Polyphagotarsonemus latus Banks) en la producción protegida de pimiento, se aplicó una encuesta en diferentes polos productivos del país. Se examinaron aspectos generales relacionados con las características de la producción protegida de hortalizas, principales cultivos, plagas y las medidas para su control. Se prestó especial atención a las particularidades del cultivo del pimiento protegido, la problemática del ácaro blanco en estos sistemas, el conocimiento sobre los ácaros depredadores y las necesidades de capacitación sobre esta plaga. A través de la encuesta se conoció la situación fitosanitaria de 652 casas de cultivo protegido que abarcaron una superficie de 51,3 ha, lo que representa el 29% de la capacidad existente en el país para este tipo de producción. La aplicación de la encuesta permitió verificar que P. latus es el principal problema fitosanitario en la producción protegida de pimiento. Se evidenció además el desconocimiento de los fitosanitarios sobre la metodología vigente de muestreo, señalización y control de P. latus, lo que sugiere la necesidad de capacitación para aplicar adecuadamente las medidas establecidas.

In order to know the perception of the phytosanitary personnel regarding the control of the broad mite (Polyphagotarsonemus latus Banks) in the protected production of pepper, a survey was applied in different agricultural productive poles in the country. General aspects related to the characteristics of the protected production of vegetables, main crops, pests and the measures for their control were examined. Special attention was given to the particularities of the pepper protected production, the problem of the broad mite in this agricultural system, the knowledge about the predatory mites and the need for training on this pest. Through the survey, it was known the phytosanitary status of 652 protected crop facilities, which embraced a surface of 51, 3 ha, representing 29% of the country capacity for this production system. The application of the survey allowed verifying that P. latus was the main phytosanitary problem in the protected production of pepper; it also made evident the lack of knowledge of the phytosanitary workers about the methodology in use for P. latus sampling, signalling and control, suggesting the training necessity for an appropriate application of the measures established.

Selectivity of Amblyseius largoensis (Muma) to phytosanitary products used in the protected production of pepper (Capsicum annuum L.)

Con el objetivo de determinar la compatibilidad de Amblyseius largoensis (Muma) con productos químicos y biológicos utilizados en la producción protegida de pimiento, se realizó un experimento en condiciones controladas. Se extrajeron hembras grávidas de 2-5 días de edad de una cría de A. largoensis establecida sobre Panonychus citri (Mc Gregor) en el laboratorio y se colocaron en una sección de hoja de toronjo (Citrus paradisi Macf var. Marsh) con igual presa en una placa Petri de 14 cm de diámetro. Las hembras se asperjaron con los productos acaricidas; dicofol, azufre y Bacillus thuringiensis (Berliner) cepa LBt-13; los insecticidas diafentiuron, imidacloprid y cipermetrina + diazinon y los fungicidas metalaxil + mancozeb y mancozeb a las dosis máximas utilizadas en los sistemas de cultivos protegidos. Se prepararon tres réplicas con 20 hembras cada una, para un total de 60. Los productos fueron preparados con agua destilada y se le añadió Tween 80 (0,001%) como agente humectante. Se incluyó un control con agua destilada y Tween 80 solamente. Se contabilizó la cantidad de hembras de A. largoensis muertas a las 24, 48 y 72 horas de realizada la aplicación. Los resultados de mortalidad se clasificaron según la escala propuesta por la Organización Internacional de Control Biológico. A partir de los resultados obtenidos se demostró que A. largoensis es compatible con los acaricidas dicofol, azufre y la cepa LBt-13 de B. thuringiensis, el insecticida imidacloprid y los fungicidas mancozeb y metalaxil+mancozeb y que los insecticidas diafentiuron, cipermetrina + diazinon resultaron ser tóxicos al depredador.

The compatibility of Amblyseius largoensis (Muma) with chemical and biological products used in the protected pepper production was determined in an experiment conducted under controlled conditions. Two to five-day- old gravid females were removed from an arena of A. largoensis on Panonychus citri (McGregor) in the laboratory and placed on a section of a grapefruit (Citrus paradisi Macf var. Marsh) leaf with the same prey in a Petri dish of 14 cm of diameter. The females were sprayed with the maximum doses used in protected cultivation systems of the miticides dicofol, sulphur, and the Lbt-13 strain of Bacillus thurigiensis (Berliner); the insecticides diafentiuron, imidacloprid and cypermethrin+diazinon, and the fungicides mancozeb and metalaxyl+mancozeb. Three replicates were prepared with 20 females each one for a total of 60. The products were prepared with distilled water and Tween 80 at 0.001% as a humectant agent only. A control of only distilled water and Tween 80 was included. The number of females of A. largoensis dead at 24, 48 and 72 hours after the application was determined. The mortality results were classified according to the scale proposed by the International Organization for Biological Control. The results showed that A. largoensis was compatible with the miticides dicofol, sulphur and the Lbt-13 strain of B. thuringiensis, the insecticide imidacloprid, and the fungicides mancozeb and metalaxyl+mancozeb. However, the insecticides diafentiuron and cypermethrin+diazinon were toxic to the predator.

Tolerance of Pochonia chlamydosporia var. catenulata (Kamyschko ex Barron and Onions) Zare and W. Gams to different levels of sodium chloride

El estudio tuvo como objetivo determinar la tolerancia in vitro a diferentes niveles de cloruro de sodio de la cepa IMI SD 187 del hongo nematófago Pochonia chlamydosporia var. catenulata (Kamyschko ex Barron y Onions) Zare y W. Gams. El experimento se desarrolló en el Centro Nacional de Sanidad Agropecuaria (CENSA), Cuba, utilizando los siguientes tratamientos: control (agua desionizada estéril 0,3dS.m-1), 2dS.m-1, 4dS.m-1, 6dS.m-1, 8dS.m-1, 10dS.m-1, 12dS.m-1, 14dS.m-1 y 16dS.m-1 de NaCl. El diseño utilizado fue completamente aleatorizado con 5 repeticiones. La relación entre la inhibición de la germinación de clamidosporas, conidios y los diferentes niveles de estrés salino fueron analizados a través de regresión lineal. Las clamidosporas fueron más tolerantes que los conidios, con inhibición de 50% de la germinación a 13dS.m-1 y 12dS.m-1, respectivamente. A partir de los resultados, se deben realizar otros estudios para determinar la efectividad de P. chlamydosporia var. catenulata como agente de control biológico de Meloidogyne spp., en suelos salinos, con el fin de recomendar la utilización integrada del hongo en los paquetes tecnológicos de producción, en agroecosistemas que tengan problemas de salinidad.

Tolerance in vitro to different levels of sodium chloride of the strain IMI SD 187 of the nematophagous fungus Pochonia chlamydosporia var. catenulata (Kamyschko ex Barron and Onions) Zare and W. Gams was determined in a trial carried out at the National Center for Agricultural Health (CENSA), Cuba. Levels of sodium chloride (2dS.m-1, 4dS.m-1, 6dS.m-1, 8dS.m-1, 10dS.m-1, 12dS.m-1, 14dS.m-1 and 16dS.m-1) and deionized water (0.3dS.m-1) as the control were used in a completely randomized desing with 5 replications. The relationship between inhibition of germination of chlamydospores and conidia and the different levels of salinity stress were analyzed by linear regression. The chlamydospores were more tolerant to salinity than the conidia, with 50% inhibition of germination at 13dS.m-1 and 12dS.m-1respectively. From the results obtained, further studies must be conducted to determine the effectiveness of P. chlamydosporia var. catenulata as a biological control agent of Meloidogyne spp., in saline soil with the purpose of recommending the integrated use of this fungus in technological packages of agricultural production in agroecosystems with salinity problems.

In vitro **effect of different concentrations of NEMACID® on eggs and juveniles of Meloidogyne incognita (Kofoid and White) Chitwood**

Para el manejo de nematodos, se desarrolló en Cuba el producto NEMACID®, que posee como ingrediente activo metabolitos obtenidos a partir de los efluentes de la fermentación líquida de Lecanicillium lecanii (Zare & Gams) formulado con sulfato de amonio. El objetivo de este ensayo fue determinar el efecto del NEMACID® sobre los huevos y juveniles (J2) de Meloidogyne incognita (Kofoid y White) Chitwood. En el ensayo se utilizaron como controles agua destilada, sulfato de amonio ((NH4)2SO4; 1,69 mg.ml-1) y Dazomet (1g.1000ml-1); y se evaluaron cinco concentraciones de NEMACID® (18,75; 3,75; 1,875; 0, 1875 y 0,01875mg.ml-1). Los valores de LC50 y LC90, se calcularon usando el método Probit. Las evaluaciones se llevaron a cabo a las 24 horas, contabilizándose el número de J2 inmóviles y huevos no eclosionados del total. Los resultados corroboraron la acción nematicida del producto que provocó el colapso del contenido interno de los juveniles y resultó imposible su recuperación posterior. El NEMACID® a la concentración de 18,75 mg.ml-1 produjo mayor efectividad sobre la eclosión de los huevos y mortalidad de los juveniles que el Dazomet (control). El sulfato de amonio, producto que acompaña al hongo en el proceso de fermentación y forma parte de la formulación final del NEMACID®, no produjo afectación a huevos y juveniles. Las concentraciones de NEMACID® de 3,75 mg.ml-1 e inferiores no resultaron satisfactorias en el tratamiento de los huevos, donde el porcentaje de inhibición de la eclosión de los mismos estuvo por debajo del 50. Mientras que en juveniles, la concentración de 3,75 mg.ml-1 del producto ocasionó mortalidad por encima del 70%, sin diferencia significativa con el producto Dazomet.

NEMACID® was developed in Cuba for root knot nematode management. This product contains the effluents from liquid fermentation of Lecanicillium lecani (Zare and Gams) as active ingredient, and is formulated with ammonium sulfate. The objective of this test was to determine the effect of NEMACID® on eggs and juveniles (J2) of Meloidogyne incognita (Kofoid and White) Chitwood. In the test, five concentrations of NEMACID® (18,75; 3,75; 1,875; 0,1875 y 0,01875mg.ml-1) were evaluated using distilled water, ammonium sulfate ((NH4)2SO4; 1,69mg.ml-1) and Dazomet (1g.1000ml-1) as controls. The CL50 and CL90 were calculated using Probit analysis. The evaluations were done at 24h, when the total number of non mobile juveniles and non hatched eggs from the total were counted. The result corroborated the nematicide action of the product by producing the collapse of the internal content in juveniles with an impossible recovery. NEMACID® at a concentration of 18,75 mg. ml-1 showed a higher effect on egg hatching and juvenile mortality than Dazomet (control). The ammonium sulfate, a product accompanying the fungus in the fermentation process as part of the final formulation of NEMACID®, did not affect eggs or juveniles. Concentrations of NEMACID® equal to 3,75mg.ml-1 or lower did not affect the eggs, with a percentage of hatching inhibition below 50%. Meanwhile, in juveniles, the concentration of 3.75mg.ml-1 caused a mortality over 70%, without significant differences with Dazomet.

Plant pathogenic fungi affecting white ginger lily (Hedychium coronarium K.)

Lecanicillium lecanii (Zare and Gams) parasiting larvae of Agraulis vanillae insularis Maynard

**Inventory, biology and alternatives for the management of insects associated with the chikpea (Cicer arietinum L.) in the municipality Jesús Menéndez, Las Tunas**

Advance in the caracterization of Pochonia chlamydosporia var. catenulata (Kamyschko ex Barron y Onions) Zare y Gams strain IMI SD 187 and productive improvements of the bionematicide KlamiC^®