Revista de Protección Vegetal

**Desempeño biológico y reproductivo de Oebalus insularis Stal (Hemiptera: Pentatomidae) en diferentes plantas hospedantes**

La obtención de huevos de Oebalus insularis Stal. destinados para la multiplicación de Telenomus podisi Ashmead, depende de la calidad de alimento proporcionado por diversas plantas hospedantes. Por lo que, se determinó el desempeño biológico y reproductivo de O. insularis, en Oryza sativa L. y Echinochloa colona (L.), a 28+2°C de temperatura, 80 + 5% de humedad relativa y fotofase de 12 horas. La duración del período de eclosión de la ninfa hasta la emergencia del adulto de O. insularis, fue de 20,9 y 21,2 días, para E. colona y O. sativa, respectivamente. La longevidad de hembras y machos de O. insularis, fue estadísticamente semejante, en ambas plantas hospedantes. La longevidad de la hembra fue superior a la registrada por el macho, de 15 y 12 días, respectivamente. Las hembras de O. insularis alimentadas con E. colona, presentaron mayor número de huevos por postura, número total de huevos por hembra y la tasa de eclosión de ninfas fue superior. Los parámetros biológicos y reproductivos de este insecto, confirman su adaptación al hospedante alternativo E. colona, optimizando la producción de huevos sometidos al parasitismo de T. podisi.

Obtaining eggs of Oebalus insularis Stal., for the multiplication of Telenomus podisi Ashmead depends on the quality of the food provided by diverse host plants. Therefore, the biological and reproductive performance of O. insularis on Oryza sativa L. and Echinochloa colona (L.) was determined at 28+2°C, 80 + 5% of relative humidity and 12 hours photophase. The duration of the period of nymph eclosion until the emergence of the adult of O. insularis varied between 20,9 and 21,2 days, for O. sativa and E. colona, respectively. The longevity of the female and male of O. insularis was statistically similar on both host plants. The female longevity was higher than that shown by the male, varying between 15 and 12 days, respectively. The O. insularis female fed with E. colona presented a high number of eggs per batch, total number of eggs per female and the eclosion rate of nymphs was higher. The biological and reproductive parameters of this insect confirmed their adaptation to the alternative host E. colona, optimizing the production of eggs subjected to T. podisi parasitism.

Evaluación de dos técnicas para la detección molecular de rickettsia asociada a la enfermedad del cogollo arrepollado del papayo en Cuba

El objetivo de este estudio fue optimizar una técnica de diagnóstico para rickettsia-PBT, bacteria asociada a la enfermedad cogollo arrepollado del papayo (PBT), basada en la hibridación de ácidos nucleicos no radiactiva (HANS-PBT), y comparar la factibilidad de su uso con respecto a la PCR convencional. Se optimizó un procedimiento de HANS-PBT que permitió la detección específica de hasta 15 pg de ADN del gen sdhA de rickettsia-PBT. La evaluación de 141 controles caracterizados mediante PCR convencional (PCR-PBT), mostró parámetros de desempeño de la HANS-PBT favorables, con una especificidad diagnóstica (ED) de 97,2% y sensibilidad diagnóstica (SD) de 98,5%. Los análisis simultáneos mediante las dos técnicas de 179 muestras colectadas mayormente en plantaciones del occidente de Cuba evidenciaron la presencia de rickettsia-PBT en 118 plantas. Los parámetros de desempeño de la PCR-PBT y HANS-PBT en la evaluación de estas muestras fueron similares, 96% y 98% de ED, 89% y 75% de SD, respectivamente. Aunque la HANS-PBT mostró valores de sensibilidad menores a la PCR-PBT, es factible su uso para programas de mejoramiento genético o prospecciones en estudios epidemiológicos de la diseminación de la bacteria.

The aim of this study was to develop a technique based on non radioactive nucleic acid hybridization for the diagnosis of rickettsia-PBT bacterium associated to the papaya bunchy top disease (NASH-PBT), and to evaluate its use compared with the conventional PCR. The optimized NASH-PBT method allowed the specific detection of 15 pg of sdhA gen DNA of rickettsia-PBT. The validation parameters in the evaluation of 141 controls previously characterized by PCR evidenced the reliability of the technique, showing diagnosis sensitivity (DS) of 97.2% and diagnosis specificity (DE) of 98.5%. The simultaneous analysis by the NASH-PBT and conventional PCR (PCR-PBT) of 179 samples recovered from commercial fields, mostly of the western region of Cuba, evidenced the presence of rickettsia-PBT in 118 plants. The parameters of validations of PCR-PBT and NASH-PBT in the analysis of these samples were 89% and 75% for DS and 96% and 98% for DE, respectively. Despite the lower sensibility value showed respect to NASH-PBT PCR-PBT, its use for genetic improvement programs or surveys in epidemiological studies of this pathogen is realiable.

**Tabla de vida de Macrolophus basicornis (Hemiptera: Miridae) teniendo como presas a Myzus persicae (Sulzer) y Macrosiphum euphorbiae (Thomas) (Hemiptera: Aphididae)**

Data obtained in studies on the biology and reproduction of Macrolophus basicornis (Heteroptera: Miridae) preying on Myzus persicae (Sulzer) and Macrosiphum euphorbiae (Thomas) on tomato at 28°C, were used to construct life tables for this polyphagous mirid. When M. euphorbiae was preying on M. persicae, the net reproductive rate (Ro) was 4.75, the intrinsic rate of increase (r m) 0.02 (hembra/hembra/day), the mean generation time (T) and the doubling time (DT) 73.91 and 32.9 days, respectively. The corresponding values when it was feeding on M. euphorbiae were 2.57, 0.01, 1.014 days and 49.35 days, respectively. The results demonstrated that M. basicornis could survive and reproduce with M. persicae as well as M. euphorbiae as preys, although the number of females obtained by generation will be smaller with M. euphorbiae. The number of females increased twice in front of M. persicae, what demonstrated that this latter prey had greater acceptance by the predator.

A partir de los datos obtenidos durante los experimentos de biología y reproducción de Macrolophus basicornis (Heteroptera: Miridae) se evaluaron las características de las tablas de vida del mirido usando como presa Myzus persicae (Zulser) y Macrosiphum euphorbiae (Thomas), en plantas a 28°C. Cuando la presa fue M. persicae la tasa neta reproductiva (Ro) fue 4,75 hijas hembras por cada madre, la tasa intrínseca de incremento (r m) fue de 0.02 (female/female/day, el tiempo medio generacional (T) y el doble tiempo generacional (DT) fueron de 73,91 y 32,9 días, respectivamente. Los valores correspondientes para M. basicornis cuando se alimenta de M. euphorbiae fue de 2,57, 0,01; 1,014 días y 49,35 días. Los resultados han demostrado que M. basicornis puede sobrevivir y reproducirse teniendo como presa tanto a M. persicae como a M. euphorbiae, aunque la cantidad de hembras obtenidas por generación será más pequeña teniendo como presa a M. euphorbiae; sin embargo, el número de hembras se incrementa dos veces cuando la presa es M. persicae, lo que demuestra que el depredador tiene mayor aceptación por esta presa.

Nesidiocoris tenuis **Reuter (Hemiptera: Miridae) y Cycloneda sanguinea limbifer (Casey) (Coleoptera: Coccinellidae): comportamiento y actividad predadora sobre Myzus persicae Zulzer (Hemiptera: Aphididae)**

The aim of this work was to evaluate the predation and behavior activities of the predatory bug Nesidiocoris tenuis Reuter and the lady beetle Cycloneda sanguinea limbifer (Casey) on the aphid. Myzus persicae Zulzer, as well as their effect on this prey dispersal. The experiments were carried out in an acclimatized room at 23.7±1, 8ºC, RH 62,6±5% and 12 h photofase. The number of aphids on the infested and non-infested plants was recorded after 24 hours. Behavioral activities such as moving, searching, resting, encountering aphids, feeding, encountering aphid exuviae, and cleaning, and the time spent in each one were recorded. C. sanguinea limbifer was more voracious than N. tenuis on M. persicae. The ladybeetle led to more aphid dispersion than N. tenuis; however, the highest aphid dispersion occurred when a higher number of both predatory species was used. Significant differences were not observed in the time spent by both predators in moving, encountering and feeding activities, but the time spent in feeding by N. tenuis was longer than that spent by C. sanguinea limbifer. N. tenuis spent longer time in resting activity than C. sanguinea limbifer (p=0,0088). The lady beetle spent longer time searching for the prey than the predatory bug (p=0,0007), but the time needed by C. sanguinea limbifer for cleaning its mouthparts with its front legs was longer than that used by N. tenuis for cleaning its whole body (p=0,0218). The results showed that M. persicae dispersion was an effect of its antipredator behavior in the presence of the predator.

El objetivo del trabajo fue evaluar las actividades de conducta y depredación de la chinche Nesidiocoris tenuis Reuter y la cotorrita Cycloneda sanguinea limbifer (Casey) sobre el áfido Myzus persicae Zulzer, así como su efecto sobre la dispersión de la presa. Los experiementos se realizaron en una sala climatizada a 23,7±1,8ºC, 62,6±5% de HR y fotoperíodo de 12 horas. El número de áfidos encontrado sobre las plantas sanas e infestadas fue registrado a las 24 horas. Se registró la duración del tiempo dedicado en actividades de conducta como: moverse, buscar, descansar, encuentro con áfidos y exuvias y limpieza. C. sanguinea limbifer fue más voraz que N. tenuis sobre M. persicae. La cotorrita permitió mayor dispersión de áfidos que la chince; sin embargo, la mayor dispersión ocurrió cuando un mayor número de depredadores fue usado en ambas especies. El tiempo dedicado en actividades como moverse, encuentros y aliementación en ambos predadores no mostró diferencias significativas, pero el tiempo dedicado por N. tenuis en alimentarse fue mayor al empleado por C. sanguinea limbifer. N. tenuis gasta más tiempo en descansar que C. sanguinea limbifer (p=0,0088). La cotorrita emplea más tiempo en buscar la presa que la chinche (p=0,0007), pero el tiempo necesitado por C. sanguinea limbifer para limpiar sus piezas bucales con sus patas delanteras fue mayor que el usado por N. tenuis para limpiar todo su cuerpo (p=0,0218). Los resultados mostraron que la dispersión de M. persicae es un efecto de su conducta antipredadora, en presencia de los predadores.

Antagonismo in vitro de cepas de Trichoderma spp. frente a Sarocladium oryzae (Sawada) W. Gams & D. Hawksworth

Se evaluaron 27 aislamientos de Trichoderma spp. frente a dos de Sarocladium oryzae (Sawada) W. Gams & D. Hawksworth (S. o-2 y S. o-4) utilizando la técnica de cultivo dual, comparando el crecimiento de las colonias de Sarocladium para determinar los modos de acción, en diferentes fases de la interacción. El análisis estadístico de los datos se realizó mediante la prueba T- Student. El 81,48% de los aislamientos de Trichoderma presentó competencia por el sustrato, el 25,93% antibiosis y el 11,11% micoparasitismo, frente a los aislados S. o-2 y S. o-4. Para el aislado S.o-4 hubo dos aislamientos de Trichoderma T4 y T5 con los tres tipos de antagonismo, mientras que estos mismos aislamientos presentaron competencia por el sustrato para S.o-2, evidencia de variabilidad en la sensibilidad de los aislados del fitopatógeno frente al antagonista. Entre los aislamientos de Trichoderma más promisorios se encuentran: el T.29 con un marcado efecto antibiótico y el T.6 con más de dos tipos de antagonismo, para ambos aislados del fitopatógeno.

Twenty seven isolates of Trichoderma spp. were evaluated against two of Sarocladium oryzae (Sawada) W. Gams & D. Hawksworth (S. o-2 y S. o-4) in dual culture. The action modes in the different interaction phases was determined by comparing the growth of Sarocladium colonies. The data were analyzed using Student`s t test. With isolates S. o-2 and S.o 4,competition by the substrate was shown by 81,48% of the Trichoderma isolates, 25,93% antibiosis and 11,11% mycoparasitism. Two Trichoderma isolates (T.4 and T.5) against the isolate S. o -4 showed the three antagonism types, whereas against S. o-2, they showed only competition for the substrate. This is an evidence of sensitivity variability of the phytopathogen isolates against the antagonist. Among the Trichoderma isolates, T.29 ,with a marked antibiotic effect, and T.6, with more than two antagonism types, were the most promising against both pathogen isolates.

Variabilidad molecular de aislamientos venezolanos de nematodos entomopatógenos y sus bacterias simbiontes

El objetivo del trabajo fue conocer la variabilidad molecular en una colección de aislamientos venezolanos de nematodos entomopatógenos y sus bacterias simbiontes, a través de la aplicación de los marcadores RAPD. Los ADN de los nematodos y bacterias fueron extraídos siguiendo una modificación del método de Dellaporta descrita por Salazar et al. Los RAPD se desarrollaron con los cebadores de los juegos de reactivos OPA y OPB. Se determinaron las huellas genéticas de los aislados del nematodo y de la bacteria simbionte. El total de bandas amplificadas para nematodos fue de 493 y para bacterias 496, con 99,18 y 100% de polimorfismo, respectivamente. El agrupamiento obtenido para los nematodos estuvo relacionado con la altitud sobre el nivel del mar a la que fueron colectados, mientras que para la bacteria se encontró tendencia al agrupamiento según el tipo de suelo del que provenían.

The aim of this study was to determine the molecular variability in a collection of Venezuelan isolates of entomopathogenic nematodes and their symbiont bacteria through the application of RAPD markers. The DNA of nematodes and bacteria were extracted by a modification of the method described by Salazar et al. RAPD assay was developed with the primers from the kits OPA and OPB. Genetic fingerprinting of isolates of the nematode and symbiotic bacteria were determined. The total amplified bands for nematode was 493 and 496 for bacteria, with 99,18 and 100% polymorphism, respectively. The clustering obtained for the nematodes was related to the altitude above the sea level at which they were collected, while for the bacteria, the clustering was in general related to the type of soil from which they came.

Efecto de concentraciones de NaCl sobre el crecimiento micelial y la esporulación de Pochonia chlamydosporia (Goddard) Zare y Gams en medio PDA y suelo

Las sales presentes en aguas y suelos agrícolas, pueden conferirle efectos desfavorables a los agentes microbianos utilizados para el control de plagas presentes en el agroecosistema. Por esta razón, se propuso determinar los efectos de las concentraciones de NaCl sobre el desarrollo micelial y la esporulación de P. chlamydosporia en medio PDA y suelo. Para ello, se realizaron dos ensayos por separado y los tratamientos consistieron en cuatro concentraciones de NaCl (40, 80, 120 y 160 mmol.L-1) y un control. Se determinó la inhibición del crecimiento micelial y la esporulación, las mismas se analizaron mediante ANOVA unifactorial y se compararon con la prueba de Duncan. En el primer ensayo, la menor inhibición se obtuvo a la concentración de 40 mmol.L-1 de NaCl, la cual afectó el área de la colonia en 6,55%, la esporulación en 21,57% y el tratamiento de 160 mmol.L-1 causó las mayores afectaciones con valores de 51,35% y 85,17%, respectivamente. En el segundo ensayo, la menor inhibición del área de la colonia 11,59% se alcanzó con la concentración de 40 mmol.L-1 y la mayor 33,50% se constató a 160 mmol.L-1. En todas las concentraciones de NaCl evaluadas P. chlamydosporia produjo clamidosporas sobre el suelo Fluvisol. Los resultados obtenidos señalaron las potencialidades que posee este hongo de persistir y proliferar bajo los efectos de altas concentraciones de NaCl en medio PDA y suelo, convirtiéndolo en un candidato promisorio para el biomanejo de Meloidogyne spp., en agroecosistemas con problemas de salinidad.

Efecto de productos fitosanitarios sobre parámetros biológicos de Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. (Hypocreales: Cordycipitaceae)

El objetivo de este trabajo fue determinar la interacción y los efectos de los productos fitosanitarios comerciales en la concentración recomendada (CR), a la mitad (0,5CR) y el doble de la misma (2CR), y extractos acuosos y alcohólicos vegetales (Rosmarinus officinalis L. - romero, Cymbopogon citratus Stapf - zacate de limón, caña santa, C. winterianus Jowitt - citronella, Laurus nobilis L. - laurel, Azadirachta indica A. Juss - nim, Ricinus communis L. - ricino, higuereta, Melia azedarach L. - melia, paraiso, Corymbia citriodora Hook. - eucaliptus, Ruta graveolens L. - ruda, Curcuma longa L. - cúrcuma, Cinnamomum zeylanicum Blume - canela) y basiodiocarpos del hongo Pycnoporus sanguineus (oreja de palo) (L.) Murrill, todos en la concentración 10%, sobre el hongo entomopatógeno Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. En todos los tratamientos se realizaron pulverizaciones sobre el hongo inoculado previamente en medio de cultivo (BDA). Se evaluaron los parámetros germinación, UFC, crecimiento vegetativo y producción de los conidios. Los productos fitosanitarios comerciales, a pesar de que algunos parámetros fueron afectados se mostraron compatibles con el hongo, así como los extractos acuosos y alcohólicos. Sin embargo, se debe evitar el uso conjunto o aplicaciones subsecuentes de los productos aquí evaluados en menos de 48 horas después de la aplicación del hongo.

This study was aimed at evaluating the effect of different commercial pesticides, the aqueous and alcoholic extracts of several plants, and basidiocarps of Pycnoporus sanguineus L. on Beauveria bassiana Bals. Vuill. The commercial pesticides studied were Agro-mós, Agro-fos, Bion, Biogermex, Citronella oíl, Forth, Pironim, Bordeaux mixture, Planta Clean, and Sulphur-lime mixture, at the concentration recommended in the product labels (RC), the half of this concentration (1/2 CR), and the two-fold concentration (2 CR). The plant extracts were from Rosmarinus officinalis L., Cymbopogon citratus Stapf, C. winterianus Jowitt, Laurus nobilis L., Azadirachta indica A. Juss, Ricinus communis L., Melia azedarach L., Corymbia citriodora Hook, Ruta graveolens L., Curcuma longa L., Cinnamomum zeylanicum Blume) All the extracts and the basidiocarps of P. sanguineus were used at a 10% concentration. All the products were sprayed over B. bassiana previously inoculated to the culture medium (BDA). The parameters evaluated were germination, CFU, vegetative growth, and conidia production. Despite the deleterious effect of the commercial phytosanitary products on some of the parameters, they were compatible with B. bassiana, the same as the plant extracts were. However, the combined use or subsequent applications of the products here tested must be avoided before the 48 hours of B. bassiana application.

Inducción de enzimas hidrolíticas en una cepa de Lecanicillium lecanii (Zimm.) Zare & W. Gams en medio líquido

En el presente trabajo se evaluó la inducción de quitinasas y b-1,3-glucanasas en la cepa Vl-01 de Lecanicillium lecanii (Zimm.) Zare & W. Gams en tres medios de cultivo con diferentes inductores: medio basal, medio basal suplementado con quitina al 0,5% y medio basal suplementado con gelatina al 0,2%. Las actividades enzimáticas se determinaron a las 24, 72, 120 y 168 horas. El medio suplementado con gelatina produjo los niveles más altos de actividades enzimáticas quitinasas y glucanasas.

In this work, the induction of chitinases and b-1,3-glucanases was evaluated in the strain Vl-01 of Lecanicillyum lecanii (Zimm.) Zare & W. Gams in three culture media with different inductors: basal medium, basal medium supplemented with 0,5% of chitin, and basal medium supplemented with 0,2% of gelatin. The enzymatic activities were determined at 24, 72, 120, and 168 hours. The higher enzymatic levels of both chitinases and glucanases were obtained in the basal medium supplemented with gelatin.

Cría de Neoseiulus longispinosus (Evans) sobre Tetranychus tumidus Banks utilizando el método de las bandejas

Con el objetivo de reproducir masivamente el ácaro depredador Neoseiulus longispinosus (Evans) se evaluó su multiplicación mediante el método de las bandejas bajo condiciones de laboratorio. Se utilizó como planta hospedante la variedad de Phaseulus vulgaris L. Fósforo- 40 y como presa el ácaro Tetranychus tumidus Banks. Plantas de frijol de 15 días de germinadas se infestaron con el fitófago y se esperó siete días más para comenzar el experimento de reproducción masiva. Los foliolos infestados se colocaron sobre bandejas y se liberaron 20 hembras de N. longispinosus en cada una. A los 15 días se calculó el incremento poblacional por réplica y el porcentaje de población del depredador presente en los diferentes estratos de la unidad de cría, el cual se comparó mediante análisis de comparación múltiple de proporciones. Se obtuvo una tasa intrínseca de incremento (rm) de 0,26, una tasa finita de incremento (l) de 1,30, una tasa reproductiva neta (Ro) de 49,84 y se identificó la preferencia de uno u otro estrato para cada estadio del depredador. Se demostró que N. longispinosus se pude reproducir en bandejas con valores adecuados para los parámetros demográficos evaluados. Estos resultados evidenciaron que el método de las bandejas con T. tumidus como presa puede ser una opción para la reproducción de N. longispinosus.

With the aim of mass rearing the predatory mite Neoseiulus longispinosus, the rearing of this mite was evaluated using the tray method with the Phaseulus vulgaris L. variety Fósforo-40 as host plant and Tetranychus tumidus Banks as prey under laboratory conditions. Bean seeds were planted and infested with the prey mite 15 days after germination. After seven days, the mass rearing experiment was initiated. The infested bean leaflets were placed on the trays and 20 females of N. longispinosus were released. The population increase per replica was determined after 15 days and the percentages of the predator population present in the different strata of the rearing unit were determined applying a multiple comparison analysis of proportions. The intrinsic rate of increase (rm), the finite rate of increase (l), the net reproductive rate (Ro) were 0,26, 1,30 and 49,84, respectively. The preference for the stratum for each stage of the predator was identified. It was shown that N. longispinosus could be reproduced on trays with a minimum of handling and the proper values of the demographic parameters. These results showed that the tray method with T. tumidus as prey might be an option for the reproduction of N. longispinosus.

Modelo matemático de la interacción entre Meloidogyne spp. y Pasteuria penetrans

Some aspects of Meloidogyne spp. (root-knot nematode) growth regulation by the gram-negative bacterium Pasteuria penetrans were reviewed. The study allowed the construction of a mathematical model to predict the dynamics of both organisms. The model includes 11 differential equations and 31biological constants describing the life-cycle of the nematode and its relationship with the bacterium. To simulate the real behavior of the populations, the constants, which represent biological parameters, have to be evaluated under controlled conditions similar to those of soil microcosm.

El estudio de algunos aspectos de la regulación del crecimiento de los nematodos agalleros del género Meloidogyne Goeldi por la acción de la bacteria Pasteuria penetrans, permitió proponer un modelo matemático para predecir la dinámica de ambos organismos. El modelo incluye 11 ecuaciones diferenciales y 31 constantes biológicas que describen las fases de desarrollo del nematodo y su relación con la bacteria. Para simular el comportamiento real de las poblaciones, las constantes, que representan parámetros biológicos, deberán ser evaluadas en condiciones controladas similares a la del microcosmo del suelo.