Vaccimonitor

Introducción de un ELISA como ensayo alternativo en la determinación de la potencia de vacunas antitetánicas

Por más de medio siglo de uso, la vacunación con el toxoide tetánico ha mostrado un elevado porcentaje de eficacia en la prevención del tétanos. Este trabajo pretende introducir un ensayo inmunoenzimático en fase sólida (ELISA) como método alternativo a la prueba de seroneutralización in vivo utilizada en la evaluación de la potencia de las vacunas antitetánicas.Se desarrolló un ELISA de tipo indirecto para la cuantificación de antitoxina tetánica en suero de curiel a partir de un estándar con 29 UI/mL, previamente calibrado. Se determinó la precisión, exactitud y linealidad del ensayo. Se analizó la correlación entre el ELISA y la prueba biológica mediante la evaluación de un total de 75 muestras de sueros por ambos métodos. Por último, se estudió la respuesta individual de un grupo de animales contra 15 lotes de toxoide tetánico. El ensayo demostró ser preciso y exacto, con imprecisiones inferiores al 20% y valores de recuperación entre el 90-110%. Las desviaciones del paralelismo mostraron coeficientes de variación alrededor del 10%. El análisis por regresión lineal mostró una buena correlación entre el ELISA y el ensayo biológico (R2= 0,989). El método alternativo desarrollado probó ser una herramienta útil para la determinación de la potencia de vacunas antitetánicas a partir de la evaluación independiente de la respuesta de cada animal contra el toxoide tetánico.Los niveles de seroprotección alcanzados se encontraron entre el 83-100%.

An indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was developed to quantify tetanus antitoxin activity in guinea pig sera based on a previously calibrated standard. This test is proposed as an alternative to the traditional in vivo neutralization assay used for potency evaluation of tetanus vaccines.The accuracy, precision and linearity of our ELISA were determined. Both methods were used to evaluate 75 guinea pig sera and the results were compared by linear regression analysis. The individual immunological responses against different lots of tetanus vaccine were also studied. The ELISA showed an excellent accuracy, with recovery values between 90-110%; intra, inter and total-assay imprecision ranging around 10% and parallelism deviations below 10%. A high correlation was found between our ELISA and the in vivo neutralization assay (R2= 0,989). The seroprotection levels of the tetanus vaccines tested were over 83%. All those results indicate our ELISA is an excellent alternative procedure for potency testing of tetanus toxoid vaccines.

Seguimiento de la reactogenicidad de la vacuna DTP cubana, utilizando dos métodos paralelos

Con el objetivo de caracterizar la reactogenicidad de la vacuna Antidiftérica-Antitetánica- Antipertusis (DTP) cubana, desarrollada por el Instituto Finlay, se realizó un estudio utilizando dos métodos o fuentes de información diferentes y paralelos. La primera se obtuvo de un ensayo clínico (EC) Fase IV, abierto, no controlado, en el que se incluyeron 57 lactantes. La segunda fuente de información se obtuvo de los reportes de los eventos temporalmente asociados a la vacunación (ETAV), recepcionados por la Unidad Coordinadora Nacional de Farmacovigilancia (UCNFv) que incluyen a 86 lactantes que fueron atendidos por sospechas de ETAV. En el EC se aplicaron 167 dosis, los eventos adversos esperados e inesperados se observaron en un escaso número de lactantes, fueron mayoritariamente ligeros y autolimitados en el tiempo y su frecuencia de aparición se redujo en la 2da y 3ra dosis. El dolor fue el evento local más frecuente y la fiebre fue el evento general que más se presentó. No se reportaron vómitos y la anorexia, la somnolencia, y el llanto persistente aparecieron en un número limitado de sujetos vacunados.Se presentaron 12 eventos no esperados, solo en 2 de ellos se consideró que existía relación causal con la vacunación. Se reportó un evento adverso grave (niña hospitalizada por síndrome febril prolongado postvacunación, que se estudió y demostró que fue causado por una sepsis urinaria persistente provocada por una malformación vesico-ureteral). Los 86 reportes recepcionados por la UCNFv incluían un total de 141 ETAV, dentro de los síntomas locales, el eritema alcanzó un 9,30% y la induración un 5,81%, la fiebre fue un síntoma frecuente aunque no se especifica la temperatura corporal alcanzada. Aunque existen varias diferencias con relación a las condiciones en que se realiza la vigilancia de eventos adversos en un EC o en la práctica clínica habitual, los resultados aquí analizados nos confirman que la reactogenicidad de la vacuna es escasa comparada con los beneficios que reporta su aplicación en lactantes.

A study using two different and parallel information sources or methods was carried out with the purpose of assessing the reactogenicity of the Cuban diphteria-tetanus-Petussis vaccine, developed at Finlay Institute. The first was an open, non-controlled Phase IV Clinical Assay (CA) in which 57 small babies were included. The second information source was the reports of the vaccine temporally associated events (VTAE) received at the National Pharmaceutical Surveillance Coordinating Unit (NPSCU) which includes 86 babies examined for VTAE suspicion. In the CA, 167 vaccine doses were administered. Expected and unexpected adverse events were observed in a very small number of babies and were mainly mild and limited in time. Their frequency of appearance was reduced for the second and third doses. Pain was the most frequent local event and fever, the most frequent general one. Vomiting was not reported and anorexia, drowsiness and persistent crying appeared in a small number of vaccinated subjects. Twelve unexpected events occurred, only two of them were considered to be causally related to the vaccination. One severe adverse event was reported. A girl was hospitalized with a severe prolonged post-vaccination fever syndrome. It was found to be a persistent urinary sepsis caused by a vesico-ureteral malformation. The 86 reports received at the NPSCU included 141 VTAE. Among the local symptoms erythema reached 9.3% and induration, 5.81%. Fever was a frequent symptom although the body temperature was not reported. Although there are different ways for carrying out the surveillance for adverse events in a CA or in routine clinical practice, these results confirm that vaccine reactogenicity is scarce when compared to the benefits of its use in small babies.

Estudio de tolerancia local de la vacuna vax-TyVi® en ratas Sprague Dawley

La vacuna antitifoídica vax-TyVi® consiste en una preparación de polisacárido capsular Vi de Salmonella typhi, el cual es diluido en una solución buffer isotónica solución amortiguador, a la que se le añade fenol como preservo. Cada dosis de 0,5 mL contiene 25 μg de polisacárido como sustancia activa. En nuestro país el esquema de vacunación contra la fiebre tifoidea con vax- TyVi® se aplica a los alumnos de 9-10 años (5to grado), una 2da dosis a la edad de 12-13 años (8vo grado) y una 3ra dosis a la edad de 16-17 años (11no grado). Además, es vacunado el personal de riesgo de Salud Pública y el personal que manipula alimentos. En el presente trabajo se describe el ensayo de tolerancia local llevado a cabo con la vacuna vax-TyVi® durante su fase de estudios preclínicos, actualmente utilizada en la vacunación contra la fiebre tifoidea en Cuba. Se empleó un total de 170 ratas que fueron tratadas con la vacuna, su placebo (todos los componentes, excepto la materia prima activa), o que no recibieron tratamiento alguno (controles). Se realizaron observaciones clínicas diarias durante todo el ensayo, se determinó el consumo de agua y alimentos y se realizaron investigaciones anatomopatológicas a animales sacrificados 3, 7, 14, 21, 28, 35 y 42 días después de la inoculación. No se observaron muertes ni síntomas de toxicidad; no se encontraron diferencias estadísticamente significativas entre los pesos vivos, el consumo de agua ni el de alimentos entre los grupos del ensayo. Tampoco se observaron lesiones anatomopatológicas que indicaran toxicidad por parte del producto inoculado. Los resultados permitieron concluir que la potencialidad de la vacuna vax-TyVi® para producir efectos adversos locales es baja.

The anti-typhoid vaccine vax-TyVi® consists in the Vi capsular polysaccharide of Salmonella typhi, which is diluted in an isotonic buffer solution with phenol as a preservative. Each dose of 0,5 mL contains 25μg of polysaccharide as an active component. The vaccination schedule in Cuba against typhoid fever includes the application of vax-TyVi® to 9-10 year-old students (5th grade, primary school), a second dose for 12-15 year-olds (8th grade, secondary school ) and the third dose for 16-17 year-olds (11th grade). The high-risk population is additionally immunized. The present work describes the local tolerance assay undertaken for vax-TyVi® as part of its preclinical safety studies. A total of 170 rats were treated with either the vaccine, the placebo (all components, but the active ingredient) or were not treated and served as controls. Clinical observations were made daily during the whole study. Water and food intakes were measured and anatomopathological studies were conducted on animals that were sacrificed 3, 7, 14, 21, 28, 35 and 42 days after the inoculation. No animal died or showed symptoms of toxicity. Body weight and the intakes of food and water were statistically similar in the three experimental groups and there were no tissue changes indicative of local or systemic toxicity. Results suggest that vax-TyVi® is potentially innocuous at the inoculation site.