Revista Cubana de Plantas Medicinales

Editorial

Phytochemical screening, antiinflammatory activity and acute toxicity of extracts from leaves of Annona squamosa L.

Annona squamosa L. (anón) es una especie conocida y cultivada por sus frutos en todas las regiones tropicales. Tradicionalmente se emplea como antidiarreico, antiespasmódico, antiinflamatorio y analgésico, de ahí que fue de interés realizar esta investigación para validar la actividad analgésica y antiinflamatoria de la hoja de esta especie. Fueron identificados, además, los principales grupos de metabolitos secundarios presentes en el extracto acuoso (decocción) y en el fluido (etanol 30 %), de hojas frescas y secas, mediante un tamizaje fitoquímico. Ambos extractos fueron evaluados en los modelos farmacológicos de granuloma inducido por algodón en ratas, contorsiones por ácido acético 0,75% (0,1 mL/10 g intraperitoneal) en ratones; las dosis administradas por vía oral fueron equivalentes a 500 y 1 000 mg de material vegetal/kg de peso corporal, respectivamente. Se realizó un estudio de toxicidad aguda sistémica según el método de las Clases Tóxicas Agudas en ratas. Se encontraron diferencias en la composición de metabolitos secundarios entre ambos extractos. La decocción inhibió significativamente y de manera dosis dependiente la respuesta inflamatoria en el granuloma por algodón y las contorsiones inducidas por ácido acético intraperitoneal, el extracto fluido fue inactivo. No hubo evidencia de toxicidad aguda causada por ninguno de los 2 extractos, en la dosis máxima administrada por vía oral y equivalente a 10,0 y 15,67 g de material vegetal/kg, respectivamente. Estos resultados permiten validar el empleo y la seguridad del uso tradicional de la decocción de hoja fresca de A. squamosa para tratar problemas de salud relacionados con dolor e inflamación.

Annona squamosa L. (sugar apple, sweetsop) is a species cultivated and known by its fruits in all the tropical regions. It is traditionally used as an antidiarrheal, antispasmodic and analgesic. That's why we were interested in making this research to validate the analgesic and antiinflammatory effect of this leave. The main groups of secondary metabolites present in the aqueous extract (decoction) and in the fluid extract (ethanol 30 %) of fresh and dry leaves, respectively, were identified by a phytochemical screening. Both extracts were evaluated in the pharmacological models of cotton pellet-induced inflammation in rats, and writhing test induced by acetic acid 0,75 % (0,1 mL/10 g intraperitoneal) in mice. The orally administered doses were equivalent to 500 and 1 000 mg of plant material/kg of body weight, respectively. A study of systemic acute toxicity was conducted according to the method of Acute Toxic Classes in rats. Some differences were found in the composition of secondary metabolites between both extracts. The decoction significantly inhibited in a dose dependant way the inflammatory response in the granuloma caused by cotton and in the contortions induced by intraperitoneal acetic acid. The fluid extract was inactive. There was no certainty of acute toxicity produced by any of the two extracts in the maximum dose administered by oral route and equivalent to 10,0 and 15,67 g of plant material/kg, respectively. These results allow to validate the utilization and safety of the traditional use of decoction of fresh leaves of A. squamosa to treat health problems related to pain and inflammation

Toxic and genotoxic evaluation of the fluid extract from Ocimum gratissimum L.

Se evaluó la toxicidad aguda y la actividad genotóxica del extracto fluido de hojas de Ocimum gratissimum L. a través de 2 sistemas de ensayo a corto plazo, uno in vitro con la cepa D-30 de Aspergillus nidulans y otro in vivo, el ensayo de micronúcleos en médula ósea de ratón. La toxicidad aguda del extracto quedó demostrada por la mortalidad observada que alcanzó el 50 % de los animales en la dosis 3g/kg, que fue dosis dependiente. Se encontró una respuesta genotóxica poco acentuada del extracto fluido al 30 % de O. gratissimum. Los resultados permitieron concluir que este extracto mostró efectos tóxicos agudos y signos histológicos de hepatotoxicidad y nefrotoxicidad y no resultó genotóxico sobre la cepa D-30 de Aspergillus nidulans en el ensayo de segregación mitótica y tampoco en el ensayo de micronúcleos en médula ósea de ratón.

The acute toxicity and the genotoxic activity of the fluid extract of leaves of Ocimum gratissisum L. were evaluated by two short-term assay systems, one in vitro with the strain D-30 from Aspergillus nidulans, and another in vivo, the micronucleus test in mouse bone marrow. The acute toxicity of the extract was proved by the mortality observed that rose to 50 % in the 3g/kg dose, which was dose dependant. It was found a little accentuated genotoxic response of the fluid extract of O. gratissimum 30 %. The results allowed to conclude that this extract showed acute toxic effects and histologic signs of hepatotoxicity and nephrotoxicity. It was not genotoxic neither for the strain D-30 from Aspergillus nidulans in the mitotic segregation test, nor in the micronucleus test in mouse bone marrow.

Evaluation of the genotoxic potential of Boerhavia erecta L.

Se evaluó la actividad mutagénica de un extracto acuoso de follaje liofilizado de Boerhavia erecta L. Se emplearon 2 pruebas: de Ames e inducción de micronúcleos en médula ósea de ratón. En el ensayo de Ames, los resultados fueron negativos en todas las cepas probadas de Salmonella typhimurium: TA 1535, TA 1537, TA 98 y TA 100, con un protocolo de incorporación en placa y concentraciones hasta 5 mg de liofilizado/placa. En el ensayo de micronúcleos, se hicieron 2 administraciones orales a razón de 10 mL/kg, separadas 24 h, con sacrificio 24 h después de la última aplicación. Las dosis fueron 500, 1 000 y 2 000 mg de liofilizado/kg. No se observaron variaciones en la relación entre eritrocitos policromáticos y eritrocitos normocromáticos, indicador de toxicidad medular. Tampoco se encontraron alteraciones significativas en la frecuencia de eritrocitos policromáticos micronucleados entre los distintos grupos de tratamiento. Se comprobó que el extracto acuoso de follaje liofilizado de B. erecta no parece inducir efectos mutagénicos en los 2 sistemas de ensayo donde se evaluó.

The mutagenic activity of an aqueous extract of freeze-dried foliage of Boerhavia erecta L. was evaluated. 2 tests were used: Ames' test and micronucleus induction in mouse bone marrow. In Ames' test, the results were negative in all the tested strains of Salmonella typhimurium : TA 1535, TA 1537, TA 98 and TA 100, with a protocol of incorporation to plaque and concentrations up to 5 mg of freeze-dried/plaque. In the micronucleus test, 2 oral doses of 10 mL/kg were administrated separated by 24 hours, with sacrifice 24 hours after the last application. The doses were 500, 1 000 and 2 000 mg of freeze-dried/kg. No variations were observed in the relation between polychromatic erythrocytes and normochromatic erythrocytes, an indicator of medullary toxicity. No significant alterations were observed in the frequency of the micronucleated polychromatic erythrocytes among the different treatment groups. It was proved that the aqueous extract of freeze-dried foliage of B. Erecta does not seem to induce mutagenic effects in the two assay systems where it was assessed.

Efecto de plantas usadas etnomédicamente sobre la actividad hemorrágica y proteolítica inducida por Bothrops asper

Se evaluó la capacidad para neutralizar la acción hemorrágica y proteolítica causada por el veneno de la serpiente Bothrops asper de extractos acuosos de 5 plantas utilizadas etnomédicamente para tratar este problema. Este trabajo forma parte de un estudio de tamizaje farmacológico sobre las plantas usadas por los curanderos para tratar las mordeduras de serpientes. Se usaron extractos liofilizados de las hojas de Buddleja americana H.B.& K. (Buddlejaceae), Mikania guaco Humb. & Bonpl. (Asteraceae), Piper darienense C.DC. in DC. (Piperaceae), Vernonia patens Kunth (GCI) (Asteraceae), y de la raíz de Echinacea purpurea (L.) Moench (Asteraceae) . Se usó el modelo de Kondo modificado para evaluar la actividad antihemorrágica y 2 métodos para determinar el efecto sobre la actividad proteolítica a saber, en tubo y en microplato con caseína y caseína biotinilada, respectivamente. Se encontró que el extracto de hojas de Vernonia patens produjo disminución, aunque no significativa de la actividad antihemorrágica y que algunos otros extractos por el contrario, mostraron aumento de la hemorragia o indujeron edema. Ninguna de las plantas estudiadas fue capaz de inhibir la actividad proteolítica del veneno de B. asper

Effect of etnomedically used plants on the hemorrhagic and proteolytic activity induced by Bothrops asper

The capacity of aqueous extracts from 5 plants etnomedically used to neutralize the hemorrhagic and proteolytic action caused by the poison of Bothrops asper snake was evaluated. This report is part of a study of pharmacological screening on the plants used by healers to treat snake bites. Freeze-dried extracts from the leaves of Buddleja americana H.B.& K. (Buddlejaceae), Mikania guaco Humb. & Bonpl. (Asteraceae ), Piper darienense C.DC. in DC. (Piperaceae), Vernonia patens Kunth (GCI) (Asteraceae), and from the root of Echinacea purpurea (L.) Moench (Asteraceae) were used. The modified Kondo model was utilized to evaluate the antihemorrhagic activity. Two methods were used to determine their effect on the proteolytic activity: one in tube and the other in microplate with casein and biotinilated casein, respectively. It was found that the extract of leaves from Vernonia patens produced a reduction, although not significant, of the antihemorrhagic activity, and that, on the contrary, some extracts showed an increase of the hemorrhage, or induced edema. None of the studied plants was able to inhibit the proteolytic activity of the B. Asper poison.

Indolic alkaloids, terpenes, sterols and flavonoids from the leaves of Hamelia patens Jacquin (Rubiaceae)

Hamelia patens Jacquin es una planta utilizada en la medicina tradicional mexicana a la que se le asocian propiedades antimicrobianas, analgésicas y antiinflamatorias. En el presente estudio se determinó el contenido de compuestos químicos de las hojas secas de H. patens originaria de Campeche, México. En estas partes de la planta, por análisis químico, se identificaron 10 productos naturales: 24-metilenecicloartan-3ß-ol, 24-metilcicloart-24-en-3ß-ol, 2E-3,7,11,15,19-pentametil-2-eicosaen-1-ol, estigmasterol, ß-sitosterol, ácido ursólico, aricina, aricina oxindol, ácido rotúndico y catequina, que fueron extraídos mediante maceración de las hojas con acetona y purificadas por cromatografía en columna. Se utilizaron métodos espectroscópicos y espectrométricos para dilucidar las estructuras químicas de estos productos naturales. La identificación de los diferentes compuestos estableció que el contenido metabólico de esta especie esta químicamente en concordancia con el de otras especies de Hamelia y con la familia Rubiaceae, sin embargo, esta es la primera ocasión en la que se aíslan cicloartenoles y triterpenos de este género, hecho que aporta nuevas perspectivas en el conocimiento sobre la composición química de esta planta.

Hamelia patens Jacquin is a plant used in Mexican traditional medicine associated with antimicrobial, antiinflamatory and analgesic properties. In the present study, the content of chemical compounds of the dry leaves from H. Patens, which is original from Campeche, México, was determined. 10 natural products were identified in these parts of the plant by chemical analysis: 24-methylenecycloartane-3ß-ol, 24-methylcycloart-24-en-3ß-ol, 2 E - 3,7,11,15,19 - pentamethyl-2-eicosane-1-ol, stigmasterol, ß-sitosterol, ursolic acid, aricine, oxindole aricine, rotundic acid and catequine that were extracted by maceration of the leaves with acetone and purified by column chromatography. Spectroscopic and spectrometric methods were used to dilucidate the chemical structures of these natural products. The identification of the different compounds established that the metabolic content of this species is chemically in accordance with the other species of Hamelia and with the Rubiaceae family; however, it is the first occasion in which cycloartenols and tripertenes of this genus are isolated, a fact that offers new perspectives to the knowledge about the chemical composition of this plant.

Aloe vera (L.) Burm gel and sagu flour as a solid support of culture medium for medicinal plants

El objetivo de este trabajo fue estudiar el comportamiento del gel de Aloe vera (L.) N.L. Burm. y harina de sagú (Maranta arundinacea L.), como soportes sólidos de medio para cultivo de plantas medicinales. Para ello, se realizaron 2 experimentos en el Laboratorio de Cultivo de Tejidos de la Estación Experimental de Plantas Medicinales “Dr. Juan Tomás Roig”. Cada experimento correspondió a 1 especie determinada, (Orthosiphon aristatus Blume y Artemisia absinthium L.), especies con altas demandas por sus reconocidas propiedades medicinales. En ellos, se utilizó un diseño experimental completamente aleatorizado, con 4 tratamientos y 10 repeticiones. Los resultados demostraron que es posible la sustitución total o parcial del agar empleado tradicionalmente, por gel de A. vera y/o harina de sagú (Maranta arundinacea L.) y así contar con alternativas sostenibles sin afectar las condiciones apropiadas del medio de cultivo para el crecimiento y desarrollo óptimos de especies de plantas medicinales. Se logra, además, un alto beneficio económico, pues el agar requiere ser importado y tiene un alto precio en el mercado mundial.

The objective of this study was to analyze the behavior of Aloe vera gel and sagu flour (Maranta arundinacea L.) as solid supports of culture medium for medicinal plants. To this end, 2 experiments were made at the Tissue Culture Laboratory of “Dr. Juan Tomás Roig”. Experimental Station of Medicinal Plants. Each experiment corresponded to a specific species (Orthosiphon aristatus Blume y Artemisia absinthium L.), species that are highly demanded for their known medicinal properties. A completely randomized design with 4 treatments and 10 repetitions was used. The results showed that the total or partial substitution of the traditionally used agar with Aloe vera gel or sagu flour (Maranta arundinacea L.) is possible, having this way sustainable alternatives without affecting the appropriate conditions of the culture medium for the optimal growth and development of species of medicinal plants. A great economic benefit is also attained, since agar has to be imported and its price in the world market is high.

Influence of the use of drying coadjuvants on the yielding of the aspersion drying process of aqueous extract from Calendula officinalis L.

Para la obtención en forma de polvo de extractos de plantas, se emplea el secado por aspersión para preservar los componentes naturales presentes en estos. El uso de aditivos inertes como almidón y maltodextrina favorecen la recuperación del producto ya que actúan como coadyuvantes del secado. Los extractos vegetales secos son altamente higroscópicos, inconveniente que disminuye con la presencia de aditivos y que se traduce, a su vez, en garantía de un mayor tiempo de vida del producto. Para realizar este trabajo se utilizó extracto acuoso de Calendula officinalis L. Se realizaron diferentes corridas en un secador de spray de laboratorio, con distintas concentraciones de maltodextrina y almidón soluble. Se estudió la influencia de la concentración de aditivo sobre la recuperación del producto a través del rendimiento. Se obtuvo el mayor rendimiento con 15 % de almidón soluble respecto a los sólidos totales del extracto. Se logró obtener un producto en forma de polvo mediante secado por aspersión con un rendimiento superior a 90 %, útil para ser utilizado como materia prima en la elaboración de medicamentos de origen natural.

The aspersion drying is used to obtain plant extract powder in order to preserve the natural components present in them. The use of inert additives such as starch and maltodextrine favors the recovery of the product, since they act as drying coadjuvants. The dry vegetal extracts are highly hygroscopic, an inconvenient that decreases with the presence of additives, which guarantee a longer lifetime of the product. The aqueous extract of Calendula officinalis L. was used to do this work. Different runs were performed in a lab spray drier with different concentrations of maltodextrin and soluble starch. The influence of the concentration of the additive on the recovery of the product was studied by means of the yielding. The highest yielding was attained with 15 % of soluble starch in relation to the solid totals of the extract . A powder product was obtained by aspersion drying with a yielding over 90 % that makes it useful to be used as a raw material in the manufacturing of drugs of natural origin.