Revista Cubana de Plantas Medicinales

**Sedative effect of cycloartanol triterpene obtained from Pedilanthus tithymaloides (L.) Poit. leaves**

INTRODUCCIÓN: Pedilanthus tithymaloides (L.) Poit. (ítamo real) es una planta ampliamente distribuida en Cuba y constituye una fuente sustentable para la obtención de principios activos. OBJETIVO: evaluar el efecto neurosedante del triterpeno cicloartanol, obtenido a partir del extracto diclorometano de las hojas de esta planta. MÉTODOS: se emplearon los modelos de conducta exploratoria, sueño barbitúrico, convulsiones inducidas por pentilenotetrazol y estereotipias inducidas por anfetamina. El cicloartanol fue administrado por vía oral 30 min antes de cada ensayo. RESULTADOS: se obtuvo inhibición de la conducta exploratoria a dosis superiores a 100 mg/kg, inhibición de las estereotipias inducidas por anfetamina a dosis de 200 mg/kg, se potenció el sueño inducido por tiopental a dosis superiores a 50 mg/kg y no se observó protección frente a las convulsiones inducidas por pentilenotetrazol. CONCLUSIONES: los resultados obtenidos en los diferentes ensayos muestran un efecto depresor del sistema nervioso central en animales tratados con cicloartanol, sin embargo, el efecto sedante no parece estar mediado por el sistema GABAérgico, tampoco se observaron efectos antidepresivos.

INTRODUCTION: Pedilanthus tithymaloides (L.) Poit. (known as ítamo real) is a widely distributed plant in Cuba and at the same time a sustainable source of active principles. OBJECTIVE: to evaluate the neurosedative effect of cycloartanol triterpene from dichlorometane extract obtained from Pedilanthus tithymaloides (L.) Poit. leaves. METHODS: models based on exploratory behaviour, barbiturate-induced sleep, pentilenotetrazol-induced seizures and amphetamine-induced stereotyped behaviours were used. Cyclocartanol was orally administered 30 minutes before every test. RESULTS: exploratory behaviour was inhibited at over 50 mg/kg dose; amphetamine-induced stereotyped behaviours were inhibited at 200 mg/kg dose; thiopental-induced sleep was potentiated at over 50 mg/kg dose, however, protection against pentilenotetrazole-induced seizures was not observed. CONCLUSIONS: the results of several tests indicate a depressing effect on the central nervous system of laboratory animal treated with Cycloartanal; however, the sedative effect does not seem to be mediated by the GABAergic system. Anti-depressive effects were not observed either.

**Acciones celulares cardíacas de la quebrachidina, un alcaloide indólico aislado de Rauwolfia viridis Roem et Schult.**

INTRODUCTION: the search for new drugs with safer therapeutic profiles in Cardiology is still a need and natural products, particularly from plants, constitute an excellent source of new compounds. OBJECTIVE: to study the cardiac cellular actions of quebrachidine an indole alkaloid, extracted from the roots of Rauwolfia viridis R et S, known as Quebrachidine, which is structurally related to the antiarrhythmics ajmaline and prajmaline. METHODS: several complementary experimental approaches to evaluate the effects of quebrachidine on the electrophysiological and contractile properties of cardiac tissues and cells were used. RESULTS: quebrachidine increased the ventricular fibrillation threshold in anaesthetized rabbits. It decreased the maximum rate of depolarization and increased the duration of the ventricular action potential in different species. These actions were accompanied by a positive inotropic effect over a broad concentration range and were consistent with the increase in Ca2+ currents recorded in single ventricular cardiomyocytes. CONCLUSIONS: the present results demonstrate that quebrachidine keeps the antiarrhythmic profile of ajmaline and prajmaline but also demonstrates a net positive inotropic action on cardiac tissues predictive of better therapeutic safety margin. Our results suggest that ajmalan-like molecular structures could provide a sound basis for the search of effective antiarrhythmics with positive inotropic effect.

INTRODUCCIÓN: la búsqueda de nuevos fármacos con perfiles terapéuticos más seguros en cardiología, es aun una necesidad y los productos naturales, particularmente de plantas, constituyen una fuente excelente de nuevos compuestos. OBJETIVOS: estudiar las acciones celulares cardíacas de la quebrachidina, un alcaloide indólico extraído de las raíces de Rauwolfia viridis R et S, el cual está estructuralmente relacionado con los antiarrítmicos ajmalina y prajmalina. MÉTODOS: se utilizaron diferentes modelos experimentales complementarios para evaluar los efectos de la quebrachidina sobre las propiedades electrofisiológicas y contráctiles de tejidos y células cardíacas. RESULTADOS: la quebrachidina incrementó el umbral para la fibrilación ventricular en conejos anestesiados. Este alcaloide redujo la velocidad máxima de despolarización y aumentó la duración del potencial de acción ventricular de diferentes especies. Estas acciones estuvieron acompañadas de un efecto inotrópico positivo en un amplio rango de concentraciones y asociadas a un incremento en las corrientes de Ca2+ en cardiomiocitos ventriculares aislados. CONCLUSIONES: estos resultados demuestran que la quebrachidina conserva el perfil antiarrítmico de la ajmalina y la prajmalina pero muestra un efecto inotrópico positivo neto en tejidos cardíacos lo cual predice un mejor margen de seguridad terapéutico. Los resultados sugieren que las estructuras moleculares con núcleo ajmalano pueden constituir una base firme para la búsqueda de antiarrítmicos con efecto inotrópico positivo.

Use of extracts of medicinal plants and oil of Eucalyptus in the control in vitro of Microsporum canis

INTRODUÇÃO: Microsporum canis é o causador mais comum de dermatofitose canina e felina apresentando assim um importante papel zoonótico. OBJETIVOS: o presente estudo teve como objetivo determinar a ação antifúngica de extratos de plantas medicinais e óleo de eucalipto frente ao fungo patogênico Microsporum canis. MÉTODOS: os extratos brutos foram preparados utilizando-se 300 g de folhas, previamente lavadas e 450 mL de água deionizada. O material vegetal foi misturado, triturado, coado e filtrado e em seguida, esterilizados e conservados a 10 ± 2 ºC. Depois de esterilizado, o meio Sabouraud dextrose (Difco) atingiu a temperatura de 55 ± 1 ºC. Foram adicionados 15 mL em placas de Petri contendo os extratos em concentrações que correspondiam a um, dois, três, quatro e cinco ml. Uma vez solidificado o meio, o fungo foi inoculado. As placas inoculadas foram mantidas em incubadora B.O.D. a temperatura de 36 ± 0,5 ºC até o desenvolvimento do fungo na placa de controle. RESULTADOS: os extratos de romã, manga e eucalipto diminuíram o crescimento do fungo, mas os de citronela, cravo de defunto, arruda, tiririca, graviola e folhas e flores de calêndula, promoveram o desenvolvimento do fungo. O restante dos extratos e o óleo de eucalipto, não apresentaram ação fungicida nem promoveram o crescimento micelial. CONCLUSÕES: a maioria dos extratos testados e o óleo de eucalipto não apresentam efeito inibitório no desenvolvimento de Microsporum canis tornando inutilizável o uso destes fitoterápicos no controle deste fungo; enquanto que os extratos de citronela, cravo de defunto, arruda, tiririca, graviola e de folhas e flores de calêndula induziram o desenvolvimento do fungo, mostrando que a utilização de fitoterápicos deve ser realizada de uma maneira correta pois em caso contrário podese agravar o problema. Os extratos de manga, romã e eucalipto podem ser usados como substâncias fungistáticas no controle de M. canis.

INTRODUCTION: Microsporum canis is the most common cause of canine and feline dermatophytosis and thus has an important zoonotic role. OBJECTIVES: the aim of this study was to determine the antifungal action of medicinal plant extracts and of eucalyptus oil against pathogenic fungus Microsporum canis. METHODS: the extracts were prepared by mixing 300 g of previously washed leaves with 450 mL of distilled water. Then the material was triturated, filtered, sterilized and conserved at 10 + 2 ºC. Fifteen milliliters of sterilized medium Sabouraud dextrose (Difco) at a temperature of 55 + 1 ºC was added in Petri dishes containing the extracts in one, two, three, four and five mm concentrations. The fungus was inoculated once the medium was solidified. The inoculated dishes were maintained in B.O.D. incubator at 36 ± 0,5 ºC until the fungus developed in the controls. RESULTS: the extracts from Punica granatum, Mangifera indica and Eucalyptus spp reduced the growth of fungus, but the extracts from Cymgopogom nardus, Tagetes minuta, Ruta graviolens, Cyperus rotundus, Annona moricata and Calendula spp leaves and flowers boosted the growth of fungus. The other extracts and the eucalyptus oil neither show any fungicidal action nor encourage mycelium growth. CONCLUSIONS: the use of most tested extracts and eucalyptus oil is not suitable for the treatment of Microsporum canis dermatophytosis due to lack of inhibitory effects. The extracts from Cymgopogom nardus, Tagetes minuta, Ruta graviolens, Cyperus rotundus, Annona moricata and from of Calendula spp leaves and flowers help the development of the fungus making clear that phytotherapy should be properly used, otherwise it can worsen the problem. However; extracts from Mangifera indica, Punica granatum and Eucalyptus spp. can be used as fungistatic.

In vitro photohemolytic assessment of Cissus sicyoides L. y Achyranthes aspera

INTRODUCCIÓN: los eritrocitos son células útiles para la identificación de agentes potencialmente fototóxicos administrados por vía sistémica, así como para el estudio de los mecanismos de fototoxicidad que involucran procesos de estrés oxidativo. OBJETIVO: evaluar el efecto fotohemolítico de extractos blandos de partes aéreas de Cissus sicyoides L. (Vitaceae) y Achyranthes aspera L. (Amaranthaceae). MÉTODOS: se utilizó un protocolo in vitro que emplea como modelo biológico eritrocitos humanos, los que se irradian con luz ultravioleta durante 90 min para evaluar el daño en las membranas eritrocitarias, por detección de hemoglobina liberada al medio. RESULTADOS: se observó un leve grado de hemólisis, el efecto fotohemolítico fue inferior a los controles positivos. CONCLUSIONES: los extractos de las plantas se clasificaron como no irritantes, lo cual sugiere que la hemólisis observada puede ser causada por la inestabilidad de la membrana del eritrocito, debido a la presencia de diferentes metabolitos en los extractos estudiados.

INTRODUCTION: erythrocytes are useful cells to identify potentially phototoxic agents provided by systemic administration as well as to study the phototoxicity mechanisms involving oxidative stress processes. OBJECTIVE: to evaluate the photohemolytic effect of soft extracts from aerial parts of Cissus sicyoides L. (Vitaceae) and Achyranthes aspera L. (Amaranthaceae). METHODS: an in vitro protocol using human erythrocytes as biological model; they were ultraviolet light-radiated for 90 minutes to evaluate damage in erythrocyte membranes on the basis of detected hemoglobin released into the medium. RESULTS: mild hemolysis was observed, being the photohemolytic effect lower than that of positive controls. CONCLUSIONS: the extracts from these plants were rated as non-irritating, which suggests that observed hemolysis may be caused by unstable erythrocyte membranes resulting from the existence of different metabolites in the studied extracts.

**Volatile chemical composition of essential oil from Colombian Croton malambo H. Karst. and determination of its antioxidant activity**

INTRODUCCIÓN: el uso de las plantas con fines terapéuticos en la medicina tradicional es un importante legado que han dejado generaciones anteriores y una parte de la cultura de los pueblos. Existen numerosos estudios sobre los aceites esenciales, en los cuales se destaca su gran utilidad en diversas áreas como productos cosméticos y perfumes, saborizantes, en la industria farmacéutica, etc. Varias investigaciones reportan las diferentes actividades biológicas que presentan los aceites esenciales (insecticidas, antioxidante, efecto antibacteriano y otros). Croton malambo H. Karst., pertenece a la familia Euphorbiaceae, es un árbol pequeño, de corteza aromática que crece en la costa norte colombiana y en la región oriental venezolana. Esta especie ha presentado actividad citotóxica, proapoptótica y actividad antiinflamatoria. OBJETIVO: estudiar la composición química volátil del aceite esencial del C. malambo y evaluar la posible actividad antioxidante de su aceite esencial. MÉTODOS: el aceite esencial fue obtenido de la corteza de C. malambo por hidrodestilación, la composición química volátil fue determinada mediante cromatografía de gases acoplada a detector de espectrometría de masas. La capacidad antioxidante del aceite esencial de C. malambo se realizóa través del ensayo de decoloración del catión radical ABTS+. RESULTADOS: el compuesto mayoritario encontrado en el aceite esencial de C. malambo fue el metil eugenol (63,5 %) y el linalool (5,6 %). La actividad antioxidante total obtenida fue de 2,2 mmol trolox/kg de aceite esencial. CONCLUSIONES: el aceite esencial de C. malambo está formado por compuestos químicos de amplio uso en la industria farmacéutica. No presentó una marcada actividad antioxidante comparadas con las del BHA, BHT, a-tocoferol.

INTRODUCTION: the use of plants for therapeutic purposes in traditional medicine is an important legacy that previous generations have left and a part of the culture of peoples. There are numerous studies on essential oils, in which its usefulness in various areas such as the manufacture of perfumes, cosmetics, flavors, pharmaceutical industry, etc. are highlighted. Several researches reported on the various biological activities having essential oils (insecticides, antioxidant, antibacterial effect, etc.). Croton malambo H. Karst. belongs to the family Euphorbiaceae, it is an aromatic small tree growing in the Colombian northern coast and in eastern Venezuela. This species has cytotoxic activity, proapoptosis and anti-inflammatory activity. OBJECTIVE: to study the volatile chemical composition of essential oil of C. malambo and to evaluate the possible antioxidant activity of essential oil. METHODS: the essential oil was obtained from the Croton malambo H. Karst bark. by hydrodistillation, the volatile chemical composition was determined by gas chromatography coupled to mass spectrometry detector (GC-MS). The antioxidant potential of essential oil of C. malambo was determined by decoloration assay of stable radical cation ABTS+. RESULTS: the major components found in the essential oil of C. malambo were methyl eugenol (63,5 %) and linalool (5,6 %). The TAA obtained was 2,2 mmol trolox/kg essential oil. CONCLUSIONS: the essential oil of C. malambo is formed by chemical compounds widely used in the pharmaceutical industry. It did not provide a strong antioxidant activity compared with the activity of BHA, BHT, a-tocopherol.

**Repeated dose toxicity in Azadichfa indica A. Juss (Neem tree)**

INTRODUCCIÓN: Azadirachta indica A. Juss., conocida como árbol del Nim, tiene múltiples aplicaciones para la agricultura, la medicina veterinaria y la salud, es una especie vegetal de importancia relevante por su uso como antimicrobiano, antiparasitario e inmunoestimulante. OBJETIVO: detectar signos de toxicidad tras la administración diaria durante 28 d de la decocción de A. indica. MÉTODOS: se realizó un ensayo de toxicidad a dosis repetidas a una decocción de esta planta administrando una dosis de 1 000 mg/kg por vía oral a ratas Sprague Dawley durante 28 d. Se evaluaron los signos clínicos y el peso corporal de los animales en estudio y se realizaron exámenes de hematología, bioquímica sanguínea, análisis anatomopatológico e histopatológico. RESULTADOS: la decocción de la planta no produjo alteraciones significativas en el peso corporal, ni hubo signos clínicos indicadores de toxicidad. No se observaron alteraciones en los indicadores hematológicos y bioquímicos atribuibles a la sustancia de ensayo. Los resultados anatomopatológicos no mostraron alteraciones sobre sistemas, órganos y tejidos. CONCLUSIONES: el estudio no demostró efectos tóxicos en el modelo animal utilizado, que pudieran estar asociados a la administración repetida de la decocción de la planta A. indica en las condiciones empleadas.

INTRODUCTION: Azadirachta indica A. Juss, known as Neem tree, has various applications in agriculture, veterinary medicine and health care, thus it is a relevant vegetable species due to its antimicrobial, antiparasitic and immunostimulating properties. OBJECTIVE: to detect any signal of toxicity after daily oral administration of decoction for 28 days. METHODS: a repeated dose toxicity assay using a A. indica decoction at a dose of 1000 mg/kg, orally administered to Sprague Dawley rats for 28 days. Clinical signs and body weight of the study animals were evaluated together with hamatological, blood chemistry, anatomopathological and histopathological analyses. RESULTS: this decoction brought about neither significant change in the body weight nor clinical signs indicating toxicity. There were not altered hematological and biochemical indicators that may be attributed to the substance under testing. The anatomopathological results did not show any alteration upon systems, organs and tissues. CONCLUSIONS: the study did not reveal toxic effects in the animal model that might be connected with the repeated oral administration of A. indica decoction under the study conditions.

Design tools for vegetable extract spray drying processes for pharmaceutical use

INTRODUCCIÓN: para la obtención en forma de polvo de los extractos y jugos de origen vegetal se emplea el secado por aspersión, porque es un método que preserva los componentes naturales presentes en estos productos. La presencia de compuestos como los azúcares impiden que estos puedan ser secados por aspersión sin que se adhieran a las superficies internas del equipo, lo que trae como consecuencia el bajo rendimiento en la recuperación del producto. El uso de aditivos inertes como el almidón soluble, celulosa o maltodextrina, favorece la recuperación del producto, elevando la temperatura de transición vítrea. OBJETIVOS: aplicar herramientas para el diseño del proceso de secado por aspersión de extractos de plantas. MÉTODOS: se determinaron las temperaturas de transición vítrea de diferentes extractos por calorimetría de barrido diferencial. Se calcularon las temperaturas de apelmazamiento y los índices individuales de secado. RESULTADOS: se determinó, que el uso de aditivos en el proceso de secado por aspersión de extractos de plantas permite obtener extractos en polvo en aquellos casos que no es posible secarlos solos. La metodología empleada, puede ser aplicada a distintos extractos. CONCLUSIONES: se demostró la factibilidad de la metodología propuesta como herramienta para definir la concentración de coadyuvante del secado y las temperaturas de secado.

INTRODUCTION: to obtain extracts and juices of vegetal origin as powders, it is necessary to use the spray drying because this method preserves the natural compounds present in these products. Compounds like sugars prevent them from being spray dried without sticking to the inner surfaces of the dryer, all of which results in poor product recovery. The use of inert additives as soluble starch, cellulose or maltodextrin, favors the product recovery by increasing the glass transition temperature. OBJECTIVES: to use design tools for plant extract spray drying process. METHODS: the glass transition temperature was estimated for different extracts by differential scanning calorimetry. Sticking temperature as well as individual drying indexes were calculated. RESULTS: it was demonstrated that the use of additives in plant extract spray drying processes allows obtaining powdered extracts when it is not possible to dry the extract alone. This methodology can be applied to various extracts. CONCLUSIONS: the feasibility of the submitted methodology as a tool for defining adjuvant concentration and drying temperatures was shown.

Bioethics in animal research to validate medicinal plant uses in the Central Laboratory of Pharmacology

INTRODUCCIÓN: la bioética de la investigación con animales de laboratorio ha tenido importantes avances internacionalmente y en Cuba. OBJETIVOS: actualizar el estado de la ética de la investigación en animales y su desarrollo en Cuba y el laboratorio de investigaciones. MÉTODOS: se realizó una búsqueda en las principales bases de datos de bibliografía científica biomédica disponibles (BVS-BIREME, PubMed, LILACS, SciELO, EBSCO) con las palabras clave bioethics and animals and experimental, así como en Google con la misma estrategia. La información fue analizada para determinar si podía emplearse para los objetivos del presente trabajo. RESULTADOS: se reseñaron los conceptos de ética y bioética, el uso de animales como fuente de conocimiento y como modelo biológico. La importancia de establecer el control sanitario, las barreras, la genética y la producción en centros certificados, las condiciones ambientales de cría y experimentación; se caracterizaron los bioterios y las ventajas de las especies más utilizadas, la importancia de los métodos alternativos conocidos como el principio de las tres R (reemplazo, reducción y refinamiento), las consideraciones éticas que deben tenerse en cuenta porque son seres vivos. Se valora la situación en Europa, Norteamérica, Latinoamérica y de Cuba con el Centro Nacional para la Producción de Animales de Laboratorio como centro rector de producción de animales de laboratorio. Se describe el Laboratorio Central de Farmacología, sus objetivos, las técnicas que se realizan, las especies de animales empleadas y se comparan las cantidades de animales utilizados antes y las actuales. CONCLUSIONES: en Cuba y el laboratorio tiene prioridad la aplicación de los principios bioéticos de la experimentación con animales de laboratorio.

INTRODUCTION: bioethics in research involving laboratory animals has shown important advances in Cuba and worldwide. OBJECTIVES: to update information about the research ethics involving animals and its development in Cuba and in research laboratory setting. METHODS: The main scientific biomedical literature database available and also Google were reviewed (BVS-BIREME, PubMed, LILACS, SciELO, EBSCO) using key words bioethics, animals and experimental. The obtained information was analyzed to ascertain whether it could be used for the present paper. RESULTS: the concepts of ethics and bioethics, the use of animals as source of knowledge and biological models were reviewed. The importance of health control, the barriers, genetics and the production in certified centers, the environmental conditions of breeding and experimentation were stated; the bioters and the advantages of the most used species were characterized; the importance of alternative methods as the 3R principle (replacement, reduction and refining) as well as the ethical considerations that one must take into account since they are alive were also pointed out. The present situation in Europe, North America, Latin America and Cuba- where the National Center for the Production of Laboratory Animals is the leading center of lab animal production- was assessed. The Central Laboratory of Pharmacology, its objectives, the techniques and animal species used there were described. A comparison was made between the number of animals used in the past and at present. CONCLUSIONS: the implementation of bioethical principles of lab animal experimentation is a priority in Cuba.

**Assessment of scientific evidence recommending Annona muricata L. (soursop tree) for cancer prevention or treatment**

INTRODUCCIÓN: la divulgación en Internet de remedios "maravillosos", para curar enfermedades que son temidas por su posible desenlace fatal, o aquellos "curalotodo" capaces de solucionar un centenar o más problemas de salud son lamentablemente frecuentes y crean expectativas falsas en pacientes, familiares y hasta en profesionales de la salud. En la Web circula la información de que Annona muricata L. puede curar el cáncer. OBJETIVOS: determinar si existe información científica publicada que permita validar el uso de A. muricata para tratar el cáncer en pacientes. MÉTODOS: se realizó una revisión en las principales bases de datos de bibliografía científica biomédica disponibles (BVS-BIREME /11/, COCHRANE /0/, PubMed /5/, LILACS /2/, SciELO /0/, SeCiMed /0/, EBSCO /2/) con las palabras claves Anonna AND muricata AND cancer, así como en Google con la estrategia: graviola AND cancer. La información fue analizada para determinar si podía sustentar la recomendación antes señalada. RESULTADOS: encontramos que los estudios científicos publicados que pudieran sustentar la recomendación de esta planta o alguno de sus extractos son en modelos experimentales in vitro y la mayoría con principios activos puros extraídos. CONCLUSIONES: no existe suficiente evidencia para recomendar el uso de ningún extracto o principio activo de A. muricata y la divulgación infundada de sus "extraordinarias propiedades anticancerígenas" es éticamente inaceptable.

INTRODUCTION: the dissemination of information about "fantastic" remedies to cure diseases feared by everybody because of their possible fatal outcome, or those "cure all" substances that may solve more than one hundred health problems is unfortunately frequent on Internet and creates false expectations in patients, relatives and even health professionals. There are some pieces of information on the Web that Annona muricata L. is able to cure cancer. OBJECTIVES: to determine if there is published scientific information that allows validating the use of this plant in the treatment of cancer. METHODS: the main scientific biomedical literature databases available (BVS-BIREME /11/, COCHRANE /0/, PubMed /5/, LILACS /2/, SciELO /0/, SeCiMed /0/, EBSCO /2) were reviewed, using key words as Annona AND muricata AND cancer. Likewise, review was made in Google using graviola and cancer. The obtained information was then analyzed to ascertain whether it can substantiate the above-mentioned recommendation. RESULTS: it was found that the published scientific studies that might substantiate the use of this plant or some of its extracts are based on in vitro experimental models and most of them used pure extracted active principles. CONCLUSIONS: there is not enough evidence to recommend the use of any extract or active principle from A. muricata , so the groundless publication of its "extraordinary anti-cancer properties" is unacceptable from the ethical viewpoint.