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INTRODUCCIÓN
Una de las especies de insectos que afectan a las semillas de frijol, en el período de almacenamiento, y que puede mencionarse como una de las principales plagas es Zabrotes subfasciatus (Boheman, 1833) (gorgojo pinto), perteneciente al orden Coleoptera, familia Chrysomelidae (Valdés, 2012).
Ramírez et al. (2017) refieren que Zabrotes subfasciatus (Boheman), tienen como hospedante principal a Phaseolus vulgaris, en su fase de semilla; aunque también puede alimentarse de otras especies de leguminosas en condiciones de aislamiento como es el caso de Vigna unguiculata (L.).
Ortega-Nieblas et al. (2014) refieren el combate de este insecto con aceites esenciales de orégano (Origanum vulgare L.), pero esto pasa primero por buscar soluciones en resistencias varietales.
Valdés (2012) menciona que el deterioro del grano como consecuencia del ataque de este insecto sucede cuando sus larvas se alimentan exclusivamente de semillas, lo que afecta considerablemente los cotiledones. Las semillas cubiertas de huevos, presentan perforaciones debido a la alimentación de los insectos, provocando la disminución del peso, cantidad de nutrientes y calidad de grano (CIAT, 1988). Por consiguiente, su cotización en el mercado disminuye, lo que conlleva a pérdidas económicas considerables que alcanzan un 35 % (Permuy et al., 2008).
Un método para controlar las afectaciones provocadas por este insecto es el uso de variedades resistentes, estrategia muy apropiada a tener en consideración por los pequeños agricultores para controlar gorgojos (Espinal et al., 1993). Según Valencia (2006) una variedad resistente o menos susceptible es aquella que al ser comparada con otra, en iguales condiciones de laboratorio y constitución genotípica, resulta menos afectada por el ataque de un determinado organismo.
Un elemento importante es la resistencia varietal, sin embargo, los bioensayos para caracterizar la resistencia de un genotipo pueden ser difíciles de realizar (Guzzo et al., 2015).
Debido a lo antes expuesto, fue necesario evaluar la preferencia de Z. subfasciatus por semillas de 23 cultivares de frijol común para su reproducción.
MATERIALES Y MÉTODOS
El experimento se realizó en el Centro de Investigaciones Agropecuarias (CIAP), perteneciente a la Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad Central “Marta Abreu” de Las Villas, durante los meses de febrero a junio de 2018.
Se tomaron 20 parejas de insectos adultos de Z. subfasciatus procedentes de una cría continuada (en el laboratorio de Patología de Insectos) en granos de frijol común. Los insectos fueron colocados en frascos de cristal de 2 L de capacidad, con una malla 60 mesh que facilitó la aireación y evitó el escape de los insectos, y se les suministró semillas de frijol variedad Mulangri-112 con vistas a lograr su multiplicación, por la tecnología de Singh et al. (1979) citado por Valdés (2012).
Siguiendo la técnica propuesta por Rodríguez et al. (2000) citado por Valdés (2012), cada dos meses se introdujeron cinco parejas de insectos adultos nacidos de nuevas crías logradas en semillas de frijol infestadas por Z. subfasciatus, para conservar la heterocigosis. Estos fueron extraídos de granos almacenados por pequeños agricultores del municipio de Santa Clara.
Para el ensayo se tomaron al azar adultos de la población referida. La identificación de hembras y machos se realizó mediante el dimorfismo sexual de la especie (Valencia, 2006).
Se utilizó 0,5 kg de semillas sanas de cada cultivar de P. vulgaris, seleccionadas sin deformaciones u otros daños y no tratadas con ningún insecticida (Tabla). Una vez seleccionadas las semillas sanas se mantuvieron por un mes de forma independiente por variedad, en frascos de cristal transparente de 1 L de capacidad, para evitar su infestación por insectos. Los recipientes con granos contaminados por plagas en su interior fueron descartados para el montaje del experimento. Los cultivares de frijol utilizados (23 en total) fueron donados por la colección de cultivares del CIAP.
Tabla Cultivares de P. vulgaris utilizados para determinar la atracción de Z. subfasciatus
| Cultivar | Color de la testa | Código de colección | Cultivar | Color de la testa | Código de colección |
|---|---|---|---|---|---|
| BAT 304 | Negro | 2 | Selección N 26 | Negro | 66 |
| Delicias 364 (Doritta) | Rojo | 3 | Pilón | Blanco | 73 |
| Cuba Cueto 25 - 9 B | Blanco | 4 | Turrialba 4 | Negro | 76 |
| Tazumal (BAT 58) | Negro | 5 | Carrillo | Negro | 87 |
| Holguín 518 | Negro | 9 | BAT 202 | Rojo pequeño | 106 |
| INIVIT Punti blanco | Jaspeado grande, fondo rojo, moteado apical blanco | 14 | Selección N 31 | Negro | 116 |
| Mulangri 112 | Jaspeado mediano | 19 | P 2765 (I 1) | Negro | 120 |
| Milagro villaclareño | Negro | 25 | P 2170 | Negro | 205 |
| Lengua de fuego | Jaspeado mediano | 26 | Quivican | Blanco | 238 |
| Güira 89 | Negro | 27 | L6 (8) N | Negro | 50 |
| ICA Pijao | Negro | 30 | BAT 448 | Negro | 60 |
| ICTA Tamazulapa | Negro | 49 |
Para la determinación de la preferencia y atracción para la puesta de huevos del insecto en diferentes cultivares de frijol, se siguieron los métodos referidos por Mazzonetto y Boiça Jr. (1999) y Mazzonetto (2002). Para ello se utilizaron placas de Petri de 17,5 cm de diámetro por 2,5 cm de altura, conteniendo en su interior recipientes de 2 cm de diámetro y 1 cm de altura, colocados en la periferia al azar según los puntos cardinales, equidistantes uno de otro. En cada uno de los recipientes se colocaron 1,5 g de semillas de uno de los granos, de forma independiente. Posteriormente se situó una pareja de insectos adultos en el centro de la placa, y se realizaron evaluaciones durante 40 días.
El bioensayo contó con 15 réplicas. En el mismo se observó la posición de los insectos cada 24 horas, en aras de establecer la atracción de los mismos.
Pasados 15 días del montaje, se evaluó el número de puestas de huevos sobre las semillas de cada cultivar, huevos fértiles e infértiles, porcentaje de fertilidad y cantidad de huevos por semillas; y la emergencia de adultos por cultivar.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Z. subfasciatus mostró preferencia para ovopositar por las semillas de Mulangri 112, seguido de INIVIT Punti blanco, P 2765 (I 1), L6 (8) N y Quivican. Esos cultivares poseen testas de diferentes colores y se puede constatar que las hembras, en su predilección, no buscan solamente las semillas oscuras. Las semillas con menor cantidad de huevos fueron de ICA Pijao (testa negra), Selección N 26 (testa negra), Pilón (testa blanca) y BAT 304 (testa roja), resultado que permite confirmar la particularidad de este insecto para poner sus huevos (Figura 1).
El 84 % de las plantas hospedantes conocidas de Z. subfasciatus son leguminosas y según Cárdenas et al. (2008) las hembras de este insecto prefieren granos de fríjol común para poner sus huevos, independientemente de la variedad. Aunque Valdés (2012) expresa que el insecto muestra cierta preferencia por las variedades de testa negra u oscura, este resultado no coincide con los obtenidos en este trabajo. No obstante, Carvalho y Rossetto (1968) y Hopkins (1983), refieren que el patrón típico es que una especie de brúquido ataque solo a una especie hospedante y como Z. subfasciatus tiene poca capacidad de dispersión, ataca exclusivamente frijoles almacenados.
Valencia (2006) refiere que este insecto puede encontrarse infestando diversos granos almacenados, principalmente de especies de plantas de los géneros Phaseolus y Vigna.
Lüthi et al. (2013) refieren que incluso el frijol Vigna unguiculata modificado genéticamente al gen αAI-1 no fue efectivo para Zabrotes subfasciatus que se mostró tolerante.
Autores como Cardona (1994) y Sperandio y Zucoloto (2004) describen que la ovoposición de la hembra de Z. subfasciatus alcanza su valor máximo hacia el tercer día, en el cual puede colocar hasta nueve huevos como promedio, declinando después la puesta de huevos con valores que oscilan entre uno y cuatro durante los 11-12 días sucesivos.
Los resultados no se corresponden con Valdés (2012) cuando expresó que sobre BAT 304 las ovoposiciones fueron superior a 28 huevos, pero durante ese experimento se comparó la preferencia del insecto por cinco cultivares de frijol común y semillas de otros granos almacenados.
Al evaluar la fertilidad (Figura 2) solamente en cuatro cultivares fueron fértiles el 100 % de los huevos colocados: (Cuba Cueto 25 - 9 B, Holguín 518, ICA Pijao y Selección N 26). La mayor cantidad de huevos infértiles fue ovopositada sobre las semillas de P 2170 (negro) y BAT 202 (rojo).
Singh et al. (1979) citado por Valdés (2012) expresa que el 76 % de los huevos de Z. subfasciatus son puestos sobre las semillas de frijoles, demostrando la preferencia de este insecto por dicho grano. Igualmente, Valdés (2012) describe que la fertilidad de los huevos puestos por este insecto se encuentra entre un 86 y 96 %, resultado que difiere con los obtenidos en este trabajo sobre algunas variedades, pero que a la vez coincide con 60,86 % de los cultivares evaluados.
Los valores obtenidos nos brindan una clara idea de las relaciones y preferencias de este insecto sobre las distintas semillas. A pesar de esto, en el dendrograma elaborado para aglomerar los cultivares, según el método de conglomeración vecino más lejano, cuando se realizó un corte a la distancia de cinco, se lograron tres grupos. Estos grupos comenzaron a ramificarse a distancias bajas, lo que indica que los mismos son compactos y que la diversidad intragrupos es muy baja (Figura 3). El primer grupo, formado por ocho cultivares, representa el 34,78 % de los cultivares. El segundo grupo, conformado por 12 cultivares, representó 52,78 %; mientras que, en el tercer grupo, representado por el 13,04 % de los cultivares, agrupó a Mulangri 112, Quivican y P 2170.
Figura 3 Dendrograma obtenido a partir del efecto que ejercieron la presencia de 23 cultivares de P. vulgaris sobre Z. subfasciatus
Sobre las semillas ubicadas en el grupo I la permanencia de los adultos no supero las 2,5 horas. Igualmente, el total de ovoposiciones en el grupo fue de nueve (0,74 huevos por cultivar), con una fertilidad del 89 % y una emergencia de 6 insectos (66,66 % de emergencia de adultos), corroborando que fueron los cultivares menos preferidos por Z. subfasciatus. Los individuos del insecto estuvieron menos de 3 horas como promedio sobre las semillas de los cultivares ubicados en el grupo II. Sobre cada semilla se contaron de 2 a 3 huevos como promedio, pero nunca la cantidad de ovoposiciones sobre el conjunto de cultivares sobrepaso las 30. La fertilidad osciló por 90 %, y la nueva generación (20 insectos) fue el 71,43 % de emergencia. Los cultivares agrupados en el grupo III son los más afectados por el insecto. Las hembras son atraídas por estas semillas para realizar más del 50 % de las ovoposiciones; además, la permanencia sobre estos granos fue del 61,53 % del tiempo evaluado, sobre cada grano se encontró de 3 a 4 huevos y la emergencia de insectos adultos, fue igual a la cantidad de los huevos fértiles (100 %).
Los cultivares agrupados en el grupo menos preferido por Z. subfasciatus fueron: BAT 304, Holguín 518, Güira 89, ICA Pijao, Selección N 26, Carrillo, todos de testa negra; adicionalmente, pueden mencionarse al cultivar Pilón (testa blanca) y BAT 202 (testa rojo). Las semillas de estos cultivares pueden ser almacenadas por un periodo mayor que las ubicadas en otros grupos.
Otro elemento importante es que muchas de estas variedades pueden contener la proteína conocidas como arcelinas (Arc1, Arc2, Arc3, Arc4) presentes en las semillas de fríjol, y que se consideran como uno de los mecanismos de la antibiosis de variedades de fríjol a los brúchidos que atacan la semilla (Miranda et al., 2002). Este aspecto conllevara a nuevos estudios en estos cultivares.
