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INTRODUCCIÓN
La germinación de semillas resulta una de las etapas más importantes para lograr el éxito del establecimiento de plantaciones forestales. La semilla es la responsable de la siguiente generación de plantas, mantiene el germoplasma y mejora la capacidad de prodón y diversidad de especie (Sharififar et al., 2015; Rifna et al., 2019; Rehmani et al., 2023). Sin embargo, las semillas de muchas especies tropicales exhiben diversos mecanismos de latencia que inciden en la germinación de manera uniforme (Venâncio y Martins 2019) y retardan la germinación de semillas viables (Nazari et al., 2015). Por lo que es necesario alguna forma de tratamiento previo a la semilla, a fin de acelerar y obtener altos porcentajes de germinación.
Los tratamientos pregerminativos mejoran la germinación, optimizan la calidad y cantidad de plantas (Abdala et al., 2020). Es por ello que, seleccionar un tratamiento pregerminativo de bajo costo, rápido y altamente eficiente para romper la latencia de las semillas (Venâncio y Martins 2019) implica una mayor producción de plántulas y un aumento sustancial en su calidad (Jiménez et al., 2017).
El método más empleado para aumentar el porcentaje de germinación es la escarificación mediante tratamientos químicos, pero resulta perjudicial para la salud de las personas y causa impactos negativos al ambiente (Chiu, 2015; Pandiselvam et al., 2020; Dziwulska-Hunek et al., 2020). En este contexto, la comunidad científica se ha enfocado a la búsqueda de alternativas ecológicas que puedan ser empleadas como tratamiento pregerminativo de semillas. En los últimos tiempos, se han reportado una alta variedad de tratamientos físicos ecológicos y amigables con el ambiente (Liu et al., 2016; Rifna et al., 2019). Entre ellos se encuentra la aplicación de técnicas de ultrasonido que permite aumentar los porcentajes de semillas germinadas (Mihaylova et al., 2021; Trakselyte rupsiene et al., 2021; Abd-Elrahman et al., 2023; Nogueira et al., 2024; Liu et al., 2016).
Las técnicas de ultrasonido como tratamiento pregerminativo, consisten en colocar las semillas en un dispositivo que emite ondas ultrasónicas, al cual se le puede ajustar la frecuencia, potencia, temperatura y el tiempo de sonicación, con la finalidad de alterar la actividad fisiológica de las semillas (Chen et al., 2013; Wang et al., 2019). Las ondas ultrasónicas provocan la fragmentación de la cubierta de la semilla, lo que ayuda a mejorar la hidratación de semillas inactivas (Yaldagard et al., 2008) también modifica la estructura de las moléculas enzimáticas (Liu et al., 2021), promueve la catálisis enzimática y acelera la germinación de semillas (Wang et al., 2019; Yaldagard et al., 2008).
La especie Vismia baccifera (L.), conocida comúnmente como sangre de gallina es un árbol de la familia Hypericaceae de importancia ecológica y económica, típicamente de la selva amazónica. Es comúnmente utilizada como planta medicinal por la población indígena para la curación de varias enfermedades (Handrini et al., 2018) y su madera se utiliza para carpintería y construcción (Guzmán et al., 2023). En los últimos tiempos ha sido ampliamente utilizada por los productores de la provincia de Pastaza para la producción de pallet, lo cual implica la tala indiscriminada de sus poblaciones naturales y ocasiona un grave deterioro del bosque. A su vez, se ha observado que presenta baja tasa de regeneración natural y son pocas las semillas que tienen la posibilidad de completar su ciclo de vida una vez que los árboles fueron talados. Los estudios de germinación de la especie son escasos o nulos y los productores refieren bajos porcentajes de germinación, por lo que el uso de tratamientos pregerminativos con ultrasonido permitirá estimular la germinación. De ahí que se reconoce el potencial de la especie y la necesidad de uso en la reforestación previo tratamiento pregerminativo. Por lo que el objetivo de este trabajo es evaluar el efecto del tratamiento pregerminativo con ultrasonido sobre la germinación de semillas de la especie V. baccifera.
MATERIALES Y MÉTODOS
Ubicación del experimento y recolección de semillas
El experimento se realizó en las instalaciones del Laboratorio de Química de la matriz principal de la Universidad Estatal Amazónica, parroquia Puyo, cantón y provincia de Pastaza, ciudad de Puyo, Vía Napo Km 2 ½, Paso Lateral S/N. Para el desarrollo de la investigación se recolectaron semillas de árboles de la especie V. baccifera, ubicados en la parroquia Fátima cantón y provincia de Pastaza, Ecuador.
La recolección de semillas se realizó a partir de la selección de tres árboles de la especie V. baccifera, los cuales se encontraban aislados en remanentes de bosques naturales. La selección de los individuos se realizó tomando como criterio la evaluación de árboles semilleros, considerando los parámetros fenotípicos: fuste recto, árboles no bifurcados, dominancia del eje principal, ángulo de inserción de las ramas de 90°, forma de la copa circular y diámetro de copa promedio de 12 m (Valladolid et al., 2017).
Las semillas recolectadas de cada árbol se mezclaron en una sola muestra para su posterior análisis. Las semillas fueron sumergidas en dos vasos precipitados de 250 mL, con el fin separar físicamente las semillas de buena calidad por efecto de decantación y flotación del material infértil (Jiménez et al., 2017).
Diseño de experimento
Se realizó un diseño central compuesto (CCD) con la metodología de superficie respuesta, mediante el software Design Expert versión 12.0 (Número de serie 9847-9696-7992-6750, Stat-Ease Inc., 1300 Godward Strret North, Suite 6400 Minneanopolis, USA). Las variables independientes fueron de tipo numéricas: tiempo ultrasónico (1-10 minuros) y temperatura del agua en el baño (30-60ºC) y la variable respuesta fue el porcentaje de germinación (Tabla 1). La combinación de los factores se visualiza en la Tabla 2.
Condiciones experimentales para el tratamiento pregerminativo
En un ultrasonido (Branson 3800, serie CPXH, 130 W, 40 KHz), se sumergieron 30 semillas con tres réplicas para cada tratamiento, las cuales fueron colocadas en una malla metálica en contacto directo con el agua del baño ultrasónico. Los experimentos fueron realizados de acuerdo con cada condición experimental establecida en el diseño (Tabla 2). Las semillas sometidas a cada condición experimental como tratamiento pregerminativo (ultrasonido) fueron sembradas en cajas Petri sobre algodón estéril humedecido con agua destilada. La germinación total fue medida a los 15 días después de la siembra y se expresó en porcentaje.
Se analizaron las variables significativas con el fin de elegir los niveles óptimos de las variables independientes. Los datos experimentales se ajustaron utilizando la ecuación polinomial de segundo orden (Ecuación 1).
Donde: y representa la respuesta predicha; β0, βii y βij son los coeficientes de regresión para términos medios, lineales, de interacción y cuadráticos, calculado en función de los resultados experimentales por mínimos cuadrados Xi y Xj.
Así mismo, se aplicó el análisis de varianza (ANOVA) para evaluar la influencia de las variables independientes (P <0,05) del diseño. La validez del diseño experimental se verificó mediante experimentos adicionales con tres repeticiones, utilizando las condiciones predichas.
RESULTADOS
Influencia del tratamiento pregerminativo sobre la germinación de semillas de V. baccifera
En la Tabla 2, se muestran los resultados experimentales y los predichos para la construcción del modelo predictivo de la germinación de semillas de V. baccifera. El porcentaje de germinación bajo las condiciones experimentales osciló entre 8,9 % y 67,8 %, mientras que sin tratamiento pregerminativo resultó solo del 7,7 %.
Tabla 2. - Condiciones de las corridas experimentales del tratamiento pregerminativo con ultrasonido de la especie V. baccifera. Resultados experimentales ± error de la desviación estándar y valores predichos
| Experimento | Tiempo en el baño ultrasónico (min) | Temperatura del agua en el baño (°C) | Germinación experimental (%) | Germinación predicha (%) |
| 1 | 10 | 45 | 28,8±0,8 | 26,60 |
| 2 | 10 | 30 | 25,5±0,7 | 24,78 |
| 3 | 5,5 | 45 | 63,3±1,5 | 59,83 |
| 4 | 5,5 | 45 | 60,0±0,6 | 59,83 |
| 5 | 1,0 | 30 | 8,9±0,3 | 8,95 |
| 6 | 5,5 | 60 | 67,8±0,7 | 64,60 |
| 7 | 5,5 | 30 | 57,8±0,3 | 58,26 |
| 8 | 10 | 60 | 30,0±0,6 | 31,62 |
| 9 | 1,0 | 45 | 12,2±0,3 | 10,26 |
| 10 | 5,5 | 45 | 56,7±0,5 | 59,83 |
| 11 | 5,5 | 45 | 58,2±0,2 | 59,83 |
| 12 | 1,0 | 60 | 13,3±0,6 | 14,78 |
| 13 | 5,5 | 45 | 59,4±0,7 | 59,83 |
En la Figura 1A, se pueden observar los valores predichos y experimentales de la germinación de V. baccifera a los 15 días. La distribución de puntos corroboró la capacidad del modelo para cubrir todo el intervalo experimental. Los valores de R2 =0,9920 y Adj. R2=0,9862 (Tabla 3) de la línea de regresión indicó una buena correspondencia entre los valores experimentales y predichos del modelo en los datos experimentales. En la Figura 1B se constató que los datos experimentales cumplieron el supuesto de distribución normal.
Fig. 1. - (A) Valores experimentales y predichos de la germinación de V. baccifera. (B) Distribución normal de los datos experimentales
Los resultados del ANOVA indicaron que los factores tiempo de inmersión de las semillas en el baño ultrasónico y la temperatura del agua fueron significativos (Pd"0.05) sobre el porcentaje de semillas germinadas (Tabla 3).
Tabla 3. - Análisis de varianza (ANOVA) de los factores tiempo ultrasónico y temperatura del agua sobre la germinación de semillas de V. baccifera. Valores de P< 0,05 indican un efecto significativo
| Modelo | Suma de cuadrados | Grados de libertad | Cuadrado medio | F-valor | P-valor | |
| Cuadrático | 5841,99 | 5 | 1168,40 | 173,12 | < 0,0001 | Significativo |
| A-Tiempo ultrasónico | 400,17 | 1 | 400,17 | 59,29 | 0,0001 | |
| B-Temperatura del agua | 60,17 | 1 | 60,17 | 8,91 | 0,0203 | |
| AB | 0,2500 | 1 | 0,2500 | 0,0370 | 0,8528 | |
| A² | 4733,01 | 1 | 4733,01 | 701,27 | < 0,0001 | |
| B² | 7,10 | 1 | 7,10 | 1,05 | 0,3392 | |
| Residuo | 47,24 | 7 | 6,75 | |||
| Falta de ajuste | 24,44 | 3 | 8,15 | 1,43 | 0,3584 | No significativo |
| Error puro | 22,80 | 4 | 5,70 | |||
| Total corregido | 5889,23 | 12 | ||||
| R² | 0,9920 | |||||
| R² Ajustado | 0,9862 | |||||
| R² Predicho | 0,9602 | |||||
| Precisión adecuada | 31,5289 |
El porcentaje de germinación se ajustó a una ecuación polinómica de segundo orden. Este modelo permitió encontrar la relación entre la temperatura del agua en el baño del ultrasonido, el tiempo de inmersión y la respuesta a la germinación (Ecuación 2).
Las condiciones óptimas para lograr un porcentaje de germinación del 65 % fueron a una temperatura de 60ºC y un tiempo de 5,9 min (Figura 2). Estas condiciones se validaron experimentalmente, obteniéndose el 66,0 ±1,7 % de germinación.
DISCUSIÓN
Las técnicas de ultrasonido como tratamiento pregerminativo de semillas son una alternativa reconocida como método de estimulación física de alta eficiencia (Wang et al., 2019), además de ser respetuoso con el ambiente (Ding et al., 2018). Sin embargo, los resultados de la efectividad del tratamiento se ven limitados con las técnicas de ultrasonidos (frecuencia, duración de sonicación y temperatura del agua), ya que tienen diferentes grados de influencia en la germinación (Venâncio y Martins 2019).
Se han reportado una gran variedad de diseños de investigación con diferentes tamaños de muestras y variables medidas, además de varias condiciones ambientales que manifiestan respuestas diferenciadas en los porcentajes de germinación (Awad et al., 2012). Varios trabajos han demostrado el marcado efecto que tiene la aplicación de técnicas de ultrasonido como tratamiento pregerminativo de semillas (Rifna et al., 2019; Trakselyte rupsiene et al., 2021; Liu et al., 2021; Liu et al., 2016). La aplicación de ultrasonido en semillas forestales es escasamente reportada en la literatura. Recientemente, (Zhang et al., 2023) en un estudio de una especie forestal se comprobó que el ultrasonido promueve la germinación de semillas envejecidas de Pinus tabuliformis. La potencia del ultrasonido podría aumentar la tasa de germinación de las semillas envejecidas aproximadamente tres veces en comparación con el control. Sin embargo, hay diversos estudios en semillas de interés alimenticio.
Sharififar et al., (2015) resaltan el efecto de ondas ultrasónicas en la germinación de semillas de Atriplex lentiformis, Cuminum cyminum y Zygophyllum eurypterum, donde el porcentaje de germinación reveló un efecto significativo ante las exposiciones de 1, 3, 5, 7 y 9 minutos. Esto se debe a que las ondas ultrasónicas rompen la latencia de las semillas, ocasionando un impacto positivo sobre la germinación.
Por otro lado, estudios de especies de la familia Fabaceae mostraron que, para conseguir un porcentaje significativo de germinación en semillas de Medicago scutellata se utilizaron ondas ultrasónicas, bajo condiciones como: frecuencia (20 KHz), potencia (150 W) y tiempo de exposición (0 control, 3, 6, 9 y 12 minutos) donde obtuvieron porcentaje de (97,25 %) a 6 min y (98 %) a 9 minutos (Tajbakhsh et al., 2011). Además, Yang et al., (2015) afirmaron que el tratamiento con ultrasonido aumenta la tasa de germinación, longitud de los brotes y contenido de ácido gamma-aminobutírico en brotes de Glycine max.
El ultrasonido aumenta la porosidad a través de la cavitación acústica, mejora la transferencia de masa; el agua absorbida adicional reacciona libre y fácilmente con el embrión celular, lo que libera ácido giberélico y conduce a procesos metabólicos en las células de aleurona, y ayuda a movilizar nutrientes del endospermo a través de ruptura de la membrana celular (Miano et al., 2015).
Se ha encontrado que después de la exposición a 250 W, 350 W y 450 W de ondas ultrasónicas, durante cinco minutos, se puede obtener un porcentaje de germinación del 94 %, 10 0 % y 97 % respectivamente (Venâncio y Martins, 2019).
El ultrasonido también puede utilizarse como tratamiento de control microbiano, como lo demuestran Chiu y Sung (2013) quienes emplearon un baño ultrasónico a una potencia de 40 KHz por 1 minutos a 25ºC en tres variedades de Pisum sativum (arveja), lo que aumentó la germinación, disminuyó la carga microbiana y mejoró el crecimiento de los brotes de Pisum sativum, en un 97 % (Chiu y Sung, 2013).
Las semillas de Medicago scutellata fueron sometidas a la frecuencia de ondas ultrasónicas de 42 KHz en diferentes períodos de tiempo, cero minutos (control), 1, 3, 5, 7 y 9 minutos, a temperatura ambiente (25ºC). El tratamiento a exposición de siete minutos influyó de forma positiva y el de nueve minutos tuvo un impacto negativo en el porcentaje de germinación (Nazari et al., 2015).
Así también, el ultrasonido ha mejorado sustancialmente el porcentaje de brotación de Phaseolus vulgaris, ya que, a partir de una intensidad de 360 W y 60 minutos, alcanzó el 100 % (Oforiwaa et al., 2020). Por otro lado, Miano et al., (2019) aplicaron dos tecnologías: radiación ionizante (a dosis de 2,3 y 3,8 kG y utilizando rayos ÿ) y el ultrasonido (91 W L-1 y 25 KHz a 25 °C) individual y en combinación para evaluar el proceso de hidratación y germinación de Phaseolus vulgaris, revelando que la irradiación no influye significativamente en la tasa de hidratación y el tiempo latencia, pero sí afecta el ultrasonido porque redujo en un 50 % el tiempo de procesamiento. El efecto de la interacción de la tecnología de radiación y ultrasonido disminuye la humedad de equilibrio.
Otro estudio favorable realizado con dos variedades de frijol Adzuki, demostró que el uso del ultrasonido (40 KHz u 80 KHz, a 25ºC, en 1 minuto) mejora la hidratación y germinación de sus semillas, así como los contenidos de polifenoles, flavonoides, saponinas totales y aún más las actividades antioxidantes (FRAP y DPPH) de los brotes (Chiu, 2021).
En un estudio sobre germinación de frijol rojo asistido por ultrasonido para mejorar el proceso de germinación convencional y la calidad nutricional de los frijoles rojos, se empleó ultrasonido de alta intensidad (HIU) suplementado con peróxido de hidrógeno como tratamiento previo a la germinación. Los resultados mostraron que el tratamiento de 350 W-diez minutos produjo la mayor tasa de germinación (77,09 %), con una longitud de brote 81,13 % mayor que la del grupo control. El tratamiento de 350 W-10 minutos aumentó el contenido de proteínas totales, proteínas solubles y cenizas, al mismo tiempo que redujo el contenido de grasas, almidón y azúcares solubles (Athoi et al., 2024). No obstante, Miano y Duarte (2018) manifiestan que los resultados del ultrasonido dependen siempre de la intensidad (potencia y tiempo) con que se emplee, porque puede potenciar o dificultar el proceso de germinación. En este caso, utilizaron el ultrasonido con una potencia volumétrica de 91 W L-1, frecuencia de 25 KHz, a una temperatura constante a 25±1°C durante 510 min para incorporar nutrientes (hierro) en la hidratación de las semillas, en consecuencia, el porcentaje máximo de germinación disminuyó considerablemente (cerca del 50 %) debido a la alta intensidad del ultrasonido y toxicidad del hierro.
La literatura ha mostrado mayores resultados con efectos de ultrasonido para especies de alimentos o gramíneas, por ejemplo, Miano et al., (2015) determinaron el efecto de ultrasonido en la germinación y el vigor de cuatro lotes de semillas de Hordeum vulgare, resultando el lote 1 con la tasa de germinación más alta (89 %) y el lote 4 (43 %) con la más baja, a partir de las condiciones: frecuencia (20 KHz), potencia volumétrica (0,028 Wm-3) y tiempo (4h), demostrando que la tecnología de ultrasonido puede mejorar el proceso de hidratación e inducir a cambios fisiológicos que aumente el vigor de las semillas. Otro estudio logró un porcentaje de germinación del 99,4 % a 30ºC, frecuencia de 20 KHz, potencia constante de 460 W y a una intensidad del 100 % por 15 minutos (Yaldagard et al., 2008). Sin embargo, en el mismo período de tiempo (15 min) y temperatura 30ºC, pero a una mayor frecuencia (42 KHz) Pour et al., 2018), obtuvieron una tasa de germinación del 100 %, evidenciando así que la potencia no fue significativa para la germinación de Hordeum vulgare.
Oforiwaa y Ngadi (2020) reportaron que las semillas de arroz con cáscara sometidas al ultrasonido incrementaron su porcentaje de germinación dado que las ondas ultrasónicas trasladan energía a las células citoplasmáticas. De igual manera, Xia et al., (2020) examinaron la estimulación de ondas ultrasónicas (28 KHz, 17,83 W) sobre las semillas de Oryza sativa encontrando una aceleración significativa en el proceso de germinación dentro de los 5 a 30 minutos de exposición. El tratamiento ultrasónico de semillas con una frecuencia mixta de 20 a 40 KHz durante 1,5 minutos tuvo un impacto positivo en la germinación y el crecimiento del arroz aromático debido a la modulación de los atributos morfológicos y fisiológicos de las semillas.
El tratamiento ultrasónico mejora la potencialidad de germinación y el aumento de la proteína soluble en las hojas conjuntamente con la eficiencia fotosintética, lo que contribuyó a mejorar la biomasa y el rendimiento de grano del arroz (Huang et al., 2024).
Los tratamientos ultrasónicos tuvieron efectos positivos sobre el porcentaje de germinación de semillas envejecidas de Festuca arundinacea y Psathyrostaehys juncea Nevski en un 79 % y 89.3 % respectivamente, a un tiempo de sonicación de 15 minutos, una temperatura de sonicación de 45°C y una potencia de salida de 350W (Liu et al., 2016).
Las semillas de trigo fueron sometidas a ultrasónico (modelo, KQ-200VDV; frecuencia, 45 KHz; potencia, 160 W) a lo largo de diferentes dosis de vibración ultrasónica (0, 5, 10, 15 y 20 minutos respectivamente). La vibración ultrasónica en 5 y 10 minutos provocó un aumento en la tasa de germinación de la semilla (después de 20 h de exposición ultrasónica), en la concentración de clorofila y proteína, en la longitud de la raíz, del brote y en el peso fresco (Chen et al., 2013). En otro estudio, los granos de trigo germinaron en un 86 % (Guimarães et al., 2020).
Otro experimento bajo la misma frecuencia (40 KHz) y temperatura (15 o 20ºC), pero a diferentes tiempos (5, 10, 15, 30, 45 o 60 minutos) mostró que el índice de germinación en Citrullus lantanus, Triticum durum y Cicer arietinum aumentó en un 133 % (a los 45 minutos), 95 % (30 minutos) y 45 % (cinco minutos), respectivamente (Goussous et al., 2010).
El ultrasonido también ha sido aplicado para el estudio de algunos géneros de orquídeas, en el que sus semillas son difíciles de germinar. Chiu (2015), logró el 54 % de germinación de las semillas de Paphiopedilum SCBG (joya roja) cuando las trató con ultrasonido a 40 KHz, en el lapso de ocho minutos a temperatura ambiente. Así también Lee et al., (2007) lograron germinar en un 34.8% las semillas de Calanthe tricarinata bajo las condiciones de 200 W, 44 kV, 40 KHz, en 45 minutos.
Los campos pulsátiles de ultrasonido se presentan en la literatura científica como formas de romper la latencia y el tegumento grueso de las semillas (Singureanu et al., 2015). Es por ello que Pascual et al., (2004) realizaron siete tratamientos para eliminar la dureza y cuatro para romper la latencia fisiológica de semillas de Capparis spinosa (alcaparras), donde la combinación de la escarificación mecánica con ultrasonido (Selecta Ultrasons, modelo 513, 150 w, 40 KHz) y temperatura ambiente por 30 minutos, obtuvo resultados superiores al 70 %. De la misma forma Rinaldelli, (2000) sometió las semillas de alcaparras al efecto de ondas ultrasónicas en tiempos de exposición de 10 minutos a 6 h, con temperatura entre 25 y 30 °C, con la diferencia que estas fueron previamente sometidas a escarificación con ácido sulfúrico, las semillas respondieron positivamente a esta combinación. Aunque, el mayor porcentaje de germinación, superior al 50%, se obtuvo cuando se realizó tratamiento ultrasónico en presencia de ácido giberélico (400 mgL-1).
Se realizaron tratamientos de ultrasonidos en semillas envejecidas artificialmente y sin envejecer de la especie Arabidopsis thaliana, utilizando tres tiempos de sonicación (30 s, 1 y 2 min) frecuencia de 45 KHz y temperatura constante de 24°C, las semillas sin envejecer no mostraron efectos significativos en la germinación, aunque las semillas envejecidas artificialmente aumentaron un 10 % en la germinación a partir de los tratamientos breves con ultrasonido (30 y 60 s) (López-Ribera y Vicient, 2017).
Las ondas ultrasónicas mejoran la germinación de semillas envejecidas de Ricinus communis (ricino) en condiciones de sequía y estrés salino (Babaei et al., 2023)
A las semillas de Chenopodium album, se aplicó ultrasonido con frecuencia de 35 KHz, a lo largo de 0 (control), 5, 10, 15 y 30 minutos. Se alcanzaron porcentajes de germinación de 83,25 % a los 15 minutos de exposición, cabe recalcar que si su tiempo de exposición se extiende (30 minutos), puede ser perjudicial para la semilla (Babaei-Ghaghelestany et al., 2020).
Se efectuaron estudios en especies de Dioscorea fandra H. Perrier (ñame silvestre), consistente en someter semillas a un enfriamiento (5ºC por dos semanas), para después colocar a inmersión en un baño ultrasónico (Bransonic 3210R) con 47 KHz, 130 W, a 10 minutos y 20 minutos, a 25ºC. Bajo estas condiciones, la especie obtuvo el mayor porcentaje de germinación (90%) una vez que las semillas se expusieron a diez minutos (Andriamparany y Buerkert, 2019).
También se han realizado estudios sobre el comportamiento de germinación de semillas de sésamo a través de un baño ultrasónico, variando dos factores, la duración del tratamiento (10, 20 y 30 minutos), la temperatura de germinación (15, 20 y 25°C) y frecuencia (20 KHz) como valor constante, obteniendo un máximo de 22 % de germinación, a una temperatura óptima de 15ºC a 20 minutos (Shekari et al., 2015).
En el presente estudio, el tratamiento de ultrasonido obtuvo el 67,8 % de germinación bajo las condiciones: temperatura (60°C), tiempo (5,9 minutos) siendo este un resultado novedoso para especies forestales con el uso de ultrasonido. Esto evidenció que a pesar de que es limitado los reportes en la literatura para especies forestales, se corrobora el efecto del ultrasonido para aumentar la capacidad germinativa.
CONCLUSIONES
El tratamiento pregerminativo con ultrasonido ejerció un efecto positivo en la germinación de semillas de V. baccifera con un incremento en la germinación de 7,7 % a 67,8% bajo las condiciones experimentales de 60ºC y 5,9 minutos. Este resultado indica el uso del ultrasonido como tratamiento pregerminativo para el incremento de la germinación de V. baccifera, lo que brinda nuevas alternativas de incursión para especies forestales con bajo potencial germinativo.
