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Vaccimonitor
versión On-line ISSN 1025-0298
Resumen
ESPINOSA-VINALS, Carlos et al. Validación y aplicación de un ELISA para la cuantificación de anticuerpos IgG contra polisacárido capsular Vi de Salmonella Typhi. Vaccimonitor [online]. 2015, vol.24, n.1, pp. 21-32. ISSN 1025-0298.
Como parte de las etapas de investigación y desarrollo de un candidato vacunal conjugado contra Salmonella Typhi, se desarrolló un ELISA indirecto para la cuantificación de anticuerpos IgG contra el polisacárido Vi de esta bacteria. En este trabajo se presentan los resultados del proceso de validación, en el que se determinaron el intervalo y linealidad de la curva, la precisión intra e interensayo, la exactitud, la especificidad, el límite de detección y la robustez. La curva de calibración, generada con un suero estándar interno, presentó un buen ajuste a una función polinómica y un intervalo entre las diluciones 1/100 y 1/3200. Los coeficientes de variación en los ensayos de precisión y robustez y los porcentajes de recobrado estuvieron en los intervalos establecidos para cada uno (=10%, =20% y 90-110% respectivamente). El ensayo presentó una especificidad óptima, obteniéndose señales de DO superiores a 1,3 para sueros positivos contra Vi y bajas para sueros contra antígenos no relacionados. Los resultados avalan el empleo de este ELISA cuantitativo en ensayos de inmunogenicidad para la liberación de lotes de conjugados de Vi. Igualmente, sustentan su uso para la evaluación de la inmunogenicidad de formulaciones de polisacárido Vi y conjugados de polisacárido Vi a proteínas en fases de investigación y desarrollo.
Palabras clave : ELISA; Salmonella Typhi; polisacárido Vi; validación; cuantificación.