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Revista Cubana de Medicina Tropical
versión On-line ISSN 1561-3054
Resumen
SARDINAS MORALES, Ruxana; MONDEJA RODRIGUEZ, Brian Arturo; RAMIREZ CINTRA, Yenys y RODRIGUEZ PREVAL, Nadia María. Implementación de un método molecular para la identificación de Mycoplasma pneumoniae resistente a macrólidos. Rev Cubana Med Trop [online]. 2022, vol.74, n.3 Epub 01-Dic-2022. ISSN 1561-3054.
Introducción:
Mycoplasma pneumoniae es causa frecuente de infecciones respiratorias en niños y jóvenes. Los macrólidos son la primera línea de tratamiento. La rápida emergencia de resistencia a estos antimicrobianos ha motivado el desarrollo de métodos moleculares para su detección en muestras clínicas positivas a este patógeno.
Objetivo:
Implementar un método de reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (RT-PCR) para la detección de resistencia a macrólidos a partir de muestras clínicas positivas a M. pneumoniae.
Métodos:
Se implementó una RT-PCR para la detección de las mutaciones A2058G y A2059G en el ARNr 23S de M. pneumoniae. Se analizaron 24 muestras clínicas positivas a M. pneumoniae, que provenían de pacientes con síntomas respiratorios. Se evaluó la sensibilidad, especificidad, repetibilidad y reproducibilidad de la RT-PCR.
Resultados:
La RT-PCR mostró un 100 % de especificidad para M. pneumoniae y un 92 % de sensibilidad, con un límite de detección de 2 copias/µL, que equivale a 10 copias/reacción. Además, se demostró la reproducibilidad y repetibilidad de estos resultados. Se obtuvo una correcta identificación de los genotipos salvaje y mutante, correspondientes a cada control. De las muestras clínicas positivas a M. pneumoniae, el 77,3 % (17/22) se identificó como sensible a macrólidos y el 22,7 % (5/22) como resistente.
Conclusiones:
La alta sensibilidad y especificidad del método de RT-PCR implementado permite que el Laboratorio Nacional de Referencia de Micoplasmas del Instituto de Medicina Tropical Pedro Kourí cuente con un método eficaz para el diagnóstico de M. pneumoniae resistente a macrólidos.
Palabras clave : Mycoplasma pneumoniae; RT-PCR; ARNr 23S; resistencia a macrólidos.