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Revista Archivo Médico de Camagüey

versión On-line ISSN 1025-0255

AMC vol.17 no.3 Camagüey mayo-jun. 2013

 

ARTÍCULOS ORIGINALES

 

Hallazgos de Micoplasma hominis y Ureaplasma urealyticum en mujeres con infecciones urogenitales

 

Mycoplasma hominis and Ureaplasma urealyticum found in women with urogenital infections

 

 

Dra. Alexis Sanchén CasasI; Dra. Olga María Rodríguez FernándezII; Lic. Luisa Deysi Torrez FrómetaI; Téc. Luz María Pérez HechavarríaI

ICentro Provincial de Higiene y Epidemiología. Camagüey, Cuba.
IIHospital Pediátrico Universitario Dr. Eduardo Agramonte Piña. Camagüey, Cuba.

 

 


RESUMEN

Fundamento: los micoplasmas constituyen uno de los agentes bacterianos implicados en infecciones urogenitales. Entre las especies de importancia médica se citan: Ureaplasma urealyticum, Micoplasma genitalium, y Micoplasma hominis.
Objetivo: determinar la frecuencia de micoplasmas en mujeres con infecciones urogenitales, las asociaciones con otros agentes biológicos y la resistencia antimicrobiana a drogas potentes.
Método: el estudio se realizó en el laboratorio de Microbiología del Centro Provincial de Higiene, Epidemiología y Microbiología de Camagüey. El universo fue de 655 pacientes y la muestra de 135. Se utilizó el Kitt diagnóstico de micoplasma de los laboratorios italianos Lio FILCHEM.
Resultados: se identificaron 135 aislamientos de micoplasma. Las especies más frecuentes fueron: Ureaplasma urealyticum (45,9 %), Micoplasma hominis (8,9 %), y el complejo Micoplasma hominis + Ureaplasma urealyticum (45,2 %). El 55,5 % de las especies tuvieron asociaciones con Chlamydias, Gardnerella vaginalis, Trichomonas vaginalis y levaduras. Hubo emergencia de cepas resistentes en mayor o menor grado frente a ofloxacina (33,3 %), eritromicina (17,8 %), claritromicina (11,2 %), y otros.
Conclusiones: se comprobó la afectación de especies de micoplasma en las mujeres estudiadas, el poder de asociación de esta bacteria con otros patógenos genitales y la emergencia de cepas resistentes hacia antimicrobianos de uso terapéutico.

DeCS: MYCOPLASMA HOMINIS; INFECCIONES BACTERIANAS; SISTEMA UROGENITAL/microbiología; ENFERMEDADES UROGENITALES FEMENINAS; EPIDEMIOLOGÍA DESCRIPTIVA.


ABSTRACT

Background: mycoplasmas constitute one of the bacterial agents involved in the urogenital infections. Among the species of medical relevance can be mentioned Ureaplasma urealyticum, Mycoplasma genitalium, and Mycoplasma hominis.
Objective: to determine the frequency of appearance of mycoplasmas in women with urogenital infections, the association with other biological agents, and the antimicrobial resistance to powerful drugs.
Method: the study was conducted at the Microbiology Laboratory of the Provincial Center of Hygiene, Epidemiology, and Microbiology of Camagüey. The universe was composed of 655 patients and the sample included 135. The diagnostic kit of micoplasma from the Italian laboratories Lio FILCHEM was used.
Results: 135 isolations of micoplasma were identified. The most frequent species were Ureaplasma urealyticum, Micoplasma hominis, and the complex of Micoplasma hominis + Ureaplasma urealyticum.  The 55.5 % percent of the species were associated to Chlamydia, Gardnerella vaginalis, Trichomonas vaginalis and yeasts. There was an emergence of strains resistant to ofloxacin, erythromycin, clarithromycin and others in a greater or lesser degree.
Conclusions: the affectation of mycoplasma species in the studied women, the power of association of these bacteria with other genital pathogen, and the emergence of resistant strains to therapeutic antimicrobial, were confirmed.

DeCS: MYCOPLASMA HOMINIS; BACTERIAL INFECTIONS; UROGENITAL SYSTEM/microbiology; FEMALE UROGENITAL DISEASES; EPIDEMIOLOGY, DESCRIPTIVE.


 

 

INTRODUCCIÓN

Los microrganismos del género Micoplasma constituyen uno de los agentes bacterianos involucrados en las infecciones genitales. Se conocen más de 60 especies de micoplasmas en la clase Mollicutes y familia Micoplasmataceae.1 Existen cuatro especies de importancia médica que afectan al hombre, estas son: Micoplasma pneumoniaea, Micoplasma hominis, Micoplasma genitalium, y Ureaplasma urealyticum. De éstas, Micoplasma hominis y Ureaplasma urealyticum pueden ser aisladas del tracto genitourinario de hombres y mujeres asintomáticas como comensales, pero también son considerados actualmente como agentes etiológicos de uretritis no gonocócica, prostatitis, epididimitis, vaginosis, inflamación pélvica, abortos, partos prematuros, corioamnionitis, salpingitis, fiebre puerperal, infertilidad, pielonefritis, e infecciones en el recién nacido.1-4

Los micoplasmasson los procariotas de vida libre más pequeños que se conocen (125-250nm). No poseen pared celular, el contenido del citoplasma esta rodeado por una membrana plasmática altamente desarrollada, por lo que son organismos pleomórficos. Atraviesan los filtros bacteriológicos, se reproducen en medios libres de células y su ausencia de pared celular los hace resistentes a las penicilinas, cefalosporinas y otros antimicrobianos. Los micoplasmas tienen afinidad por las membranas celulares de los mamíferos.1-4

Estos microrganismos resultan difíciles de diagnosticar por los métodos bacteriológicos convencionales; su morfología varía según la técnica utilizada (Giemsa, campo oscuro, fluorescencia, medios sólidos o líquidos). Se ha preconizado el cultivo en caldo peptona con infusión de corazón, 2 % de agar y 30 % de líquido ascítico incubado a 37°C durante 48–96 horas, pero son engorrosos.4

Los micoplasmas requieren de lipoproteínas y esteroles para crecer. Utilizan también la glucosa como fuente de energía. Micoplasma hominis descarboxila la arginina y Ureaplasma urealyticum necesita de urea para vivir. 4

En humanos se han clasificado especies de micoplasmas mediante métodos bioquímicos, serológicos y de biología molecular a través de la utilización de sondas de ácido desoxirribonucleico (DNA) hibridación de ácidos nucléicos y la reacción en cadena de la polimerasa.1-4

Las dificultades en el aislamiento del germen provocaron que investigadores de algunos países confeccionaran Kitts diagnósticos para la identificación de micoplasmas. Los reportes de Nailet, et al, 2 en Venezuela y Dalmarco, et al, 3 en Brasil utilizaron medios de cultivo para el hallazgo de este agente, y demostraron que tanto Micoplasma hominis como Ureaplasma urealyticum son patógenos importantes en infecciones urogenitales.2,3,5

En nuestra provincia, no poseemos datos acerca de estudios de micoplasmas y su relación con infecciones urogenitales en humanos. Por tal motivo realizamos el presente trabajo con el objetivo de mostrar los hallazgos del germen en mujeres con infecciones urogenitales, los tipos de asociaciones de micoplasmas con otros patógenos y la resistencia antimicrobiana in vitro hacia diferentes drogas.

 

MÉTODOS

Se realizó un estudio descriptivo, observacional de corte transversal en el laboratorio de Microbiología del Centro Provincial de Higiene, Epidemiología y Microbiología de Camagüey, durante el período comprendido desde el 1º de abril de hasta el 31 de agosto del 2010. El universo de trabajo estuvo representado por un total de 655 pacientes y la muestra fue de 135 casos positivos a micoplasmas. Se aplicó el muestreo aleatorio simple.

Criterios de inclusión: todas las mujeres con sospecha de infecciones urogenitales, procedentes de diferentes consultorios del médico de la familia, de varias áreas de salud, y que presentaron síntomas de prurito genital, leucorrea, dolor en bajo vientre, y ardor al orinar. Se excluyeron las féminas que no cumplían los requisitos anteriores.

Procedimiento

A las pacientes con sospecha clínica de infección urogenital se les tomó muestra a través del exudado de secreción endocervical, para el estudio de micoplasmas mediante la utilización de un Kitt denominado Micoplasma system plus5 de los laboratorios italianos Liofilchen, suministrados por el Instituto de Medicina Tropical Pedro Kourí de La Habana.

Este test permite la identificación a las 24 horas de Micoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum, y del complejo Micoplasma hominis + Ureaplasma urealyticum.

El sistema consiste en un panel de 24 pocillos que contienen sustratos bioquímicos y antimicrobianos desecados para la determinación semicuantitativa y el antibiograma de Micoplasmas genitales. El sistema se inocula con la suspensión de la muestra clínica y se incuba a 36+/-1°C durante 24 horas. Los ensayos para la búsqueda, cálculo y antibiograma de los micoplasmas presentes en la muestra, se interpretaron con la evaluación del viraje de color de los distintos pocillos. El sistema tiene incluido también la determinación de Trichomona vaginalis y levaduras.

El antibiograma se evalúa al observar el viraje de color de los pocillos desde 7-TE a 24-AZM, los cuales contienen nueve tipos de antimicrobianos con diferentes concentraciones que son:

Tetraciclina (TE) (4 y 8 μcg/ml)
Pefloxacina (PEF) (8 y 16 μcg/ml)
Ofloxacina (OFX) (1 y 4 μcg/mL)
Doxiciclina (DO) (4 y 8 μcg/mL)
Eritromicina (E) (8 y 16 μcg/mL)
Claritromicina (CLA)(8y16 μcg/mL)
Minociclina (MN) (4 y 8 μcg/mL)
Clindamicina (CD) ( 4 y 8 μcg/mL)
Azitromicina (AZM)(4 y 8 μcg/mL)

Como investigaciones adicionles efectuamos la búsqueda de Chlamydia trachomatis según el ensayo inmunocromatográfico Chlamy-Chek 1,6 de los laboratorios franceses VEDALAB. Para ello se tomó muestras de hisopados endocervicales. Este tipo de ensayo detecta el antígeno lipopolisacárido específico del género Chlamydia. El método emplea un dispositivo con una combinación única de un conjugado colorante–anticuerpo monoclonal en fase sólida para identificar el lipopolisacárido de las muestras de hisopados, con alta especificidad y sensibilidad en un período de tiempo de 20 minutos.

En este trabajo también investigamos otros agentes como Gardnerella vaginalis de acuerdo a los criterios de Amsel, 7 así como exudado vaginal simple y diagnóstico de Neisseria gonorrhoeae según las normas de Microbiología vigentes en el país. 8 También se tomó muestra de sangre para la determinación de anticuerpos anti VIH/SIDA, según el sistema ultra-micro-analítico SUMA9 y serología de sífilis según método VDRL.10

Los datos se reflejaron en una encuesta con los elementos de identificación general de cada paciente, así como los diagnósticos de los especímenes. Los resultados se plasmaron en una microcomputadora Pentium IV según el programa EPINFO-5, se halló estadística descriptiva mediante distribución de frecuencia, porcentajes y se presentaron en tablas.

 

RESULTADOS

Con respecto a las especies de micoplasmas diagnosticados, de 135 aislamientos el 45,2 % correspondió a Ureaplasma urealyticum, el 45,9 % al complejo Micoplasma hominis + Ureaplasma urealyticum y el 8,9 % a Micoplasma hominis. (Tabla 1)

tabla 1


De la totalidad de micoplasmas aislados, más del 55,5 % de las especies interactuaron con otros agentes biológicos. (Tabla 2)

En cuanto a los microrganismos asociados a micoplasmas, del total de 75 asociaciones a otros gérmenes, 32 correspondieron a Ureaplasma urealyticum (42,6 %); el 48 % perteneció al complejo Micoplasma hominis + Ureaplasma urealyticum y el 9,4 % a Micoplasma hominis. (Tabla 3

De 19 casos con Clamydias, el 89,4 % se involucró a Micoplasma hominis + Ureaplasma urealyticum y el 10,6 % a Micoplasma hominis.

Los 18 hallazgos con Gardnerella vaginalis se integraron tanto a Ureaplasma urealyticum como al complejo Micoplasma hominis + Ureaplasma urealyticum con el 44,4 % cada una.

Los 16 diagnósticos de Gardnerella + Clamydia se asociaron al 60 % de Ureaplasma urealyticum y al 40 % del complejo Micoplasma hominis + Ureaplasma urealyticum.

Los 11 casos con levaduras se asociaron en un 72 % a Ureaplasma urealyticum; en el 18,2 % con el complejo Micoplasma hominis + Ureaplasma urealyticum y en el 9,2 % con Micoplasma hominis.

Se detectaron además asociaciones de levaduras, Gardnerella vaginalis y Clamydias con Ureaplasma urealyticum con valores entre 60 y 100 %. Trichomonas vaginalis  aportó el 100 % de afinidad con Micoplasma hominis.

No se obtuvo aislamientos de Neisseria gonorrhoeae, ni presencia de anticuerpos VIH/SIDA y tampoco se diagnosticaron sueros VDRL reactivos.
Se presentó la sensibilidad y resistencia in vitro de los 135 aislamientos de micoplasmas hacia diferentes concentraciones de drogas antimicrobianas. (Tabla 4)

Se detectó una sensibilidad mayor de 90 % frente a concentraciones variables de tetraciclina, perfloxacina, doxiciclina, minociclina, clindamicina, y azitromicina, esta última en la concentración de 8 μcg/mL.

Hubo emergencia de micoplasmas resistentes a la ofloxacina en concentraciones de 1 y 4 μcg/mL en el 33,3 % y 8,2 % respectivamente. Al igual sucedió con la eritromicina de 8 y 16 μcg/mL con 17,8 y 13,4 % y además con la claritromicina con 13,4 y 11,2 %.

La azitromicina en concentraciones de 4 y 8 μcg/mL aportó una resistencia de 5,9 y 4,4 % respectivamente.

 

DISCUSIÓN

Internacionalmente, desde inicios del milenio, investigaciones efectuadas en pacientes con infecciones urogenitales han demostrado la significación clínica de los micoplasmas, especialmente las especies Ureaplasma urealyticum, Micoplasma hominis o las asociaciones entre ambos.2-4,11

Los hallazgos en la presente investigación, acerca de las especies mencionadas fueron superiores a los obtenidos por Avelar, et al, 11  en clínicas de Brasil, quienes estudiaron 1553 muestras genitales con una positividad de 2,3 % para Micoplasma hominis y 34,5 % para Ureaplasma urealyticum.

Los resultados en este reporte fueron inferiores a los referidos por Dalmarco, et al, 3 los cuales estudiaron el contenido vaginal en 84 mujeres con leucorrea y obtuvieron una positividad de 50 % de Ureaplasma urealyticum y 20,2 % a Micoplasma hominis. No obstante a pesar de las diferencias de positividad observadas tanto en los resultados de esta investigación como en los referidos por los autores citados, el diagnóstico de las especies Ureaplasma urealyticum y Micoplasma hominis, reveló que estos agentes son patógenos urogenitales importantes, los cuales deben ser pesquisados mediante exámenes rutinarios en los laboratorios de Microbiología.3,11

Al analizar las interacciones de las especies de micoplasmas con otros agentes biológicos, es necesario recalcar que en las infecciones urogenitales los microrganismos se transmiten con gran eficiencia ya que la actividad sexual implica el contacto de la piel y mucosas genitales, la cavidad oral y el recto.11 Por tal motivo en este tipo de infecciones debe considerarse la presencia de múltiples agentes etiológicos que pueden aparecer asociados entre sí como trichomonas, levaduras, gonococos, micoplasmas, Clamydias, Gardnerella, VIH/SIDA y otros.11,12

El éxito de las asociaciones de los micoplasmas con otros microrganismos dependen de la humedad, pH, temperatura, nutrientes, adherencia a superficies mucosas, fagocitosis y otros fenómenos que ocurren a nivel del aparato urogenital.12

Así por ejemplo en la pubertad, los estrógenos facilitan la presencia de glucógeno, esto da lugar a la producción de un medio ácido y se promueve el crecimiento de la flora típica vaginal representada por lactobacilos, estreptococos aerobios, anaerobios, difteroides y especies de Ureaplasma.12

Las levaduras como Cándida y protozoarios como Trichomonas vaginalis, pueden hallarse en poca cantidad sin hacer daño, pero al aumentar la concentración de ellos y romperse el equilibrio ecológico de la vagina, ésta se hace vulnerable a la adquisición de patógenos potenciales y entre ellos, los micoplasmas, los cuales a su vez incrementan el riesgo de colonización de otros agentes biológicos.12

De los ocho tipos de interacciones de micoplasmas la asociación a Clamydias fue la más frecuente. La literatura revisada cita a esta bacteria intracelular como la más diagnosticada. Se involucra con los micoplasmas y está implicada cerca del 50 % de casos de uretritis no gonocócica, cervicitis muco-purulenta conjuntamente con Trichomonas vaginalis.13

La Gardnerella vaginalis es otro microrganismo en orden de aparición que se asocia a todos los hallazgos de micoplasmas. Son coco-bacilos pleomórficos gramnegativos relacionados a la vaginosis bacteriana, infección polimicrobiana que involucra a bacterias anaerobias. Puede diagnosticarse en el 40 % de mujeres sanas. Está relacionada a infecciones ginecológicas y obstétricas como parto prematuro, bajo peso al nacer, endometritis y sepsis. El examen en fresco de la secreción vaginal maloliente, con olor a pescado, revela la presencia de células guías cargadas de cocobacilos gramnegativos a gram variable.14,15

Gardnerella vaginalis, Clamydias y levaduras tuvieron gran poder de asociación con las especies Ureaplasma urealyticum y el complejo Micoplasma hominis + Ureaplasma urealyticum. Sin embargo, Trichomonas vaginalis mostró predilección con las levaduras y Micoplasma hominis.

El protozoario piriforme y flagelado Trichomonas vaginalis afecta alrededor del 20 % de las féminas en edad fértil.14 La infección puede cursar asintomática o debutar como uretritis y vaginitis en mujeres y como prostatitis en los hombres.16

El fenómeno de drogo-resistencia surge con la introducción de antimicrobianos para combatir las enfermedades infecciosas. Las bacterias son eficientes en sus capacidades de multiplicación y transmisión de genes de resistencia hacia diferentes antimicrobianos. Este hecho se ha observado en los cocos piógenos, enterobacterias, bacilos gramnegativos no fermentadores de la lactosa y otros agentes biológicos entre los que figuran los micoplasmas, en cuyo tratamiento se recomiendan los macrólidos, como azitromicina, claritromicina y eritromicina.17

Según Brooks, et al, 4 casi todas las especies de micoplasmas son sensibles a las fluoroquinolonas  y tetraciclinas. Sin embargo, se han descrito cepas resistentes hacia eritromicina, tetraciclinas y fluoroquinolonas como ofloxacina, droga potente que actúa directamente sobre el DNA bacteriano.4

Como se comprobó en este reporte, la drogo-resistencia se hace extensiva a los micoplasmas, en mayor o menor grado hacia algunas drogas de uso terapéutico. Si a esto se le añade, las múltiples asociaciones de los micoplasmas con microrganismos causales de infecciones urogenitales como Clamydias, Gardnerella vaginalis, Trichomonas vaginalis y levaduras, el problema se agrava más, se hace necesario el uso racional y controlado de las drogas antimicrobianas ante toda afección clínica por micoplasmas.

 

CONCLUSIONES

Las especies diagnosticadas de micoplasmas causales de infecciones urogenitales en mujeres fueron: Ureaplasma urealyticum, Micoplasma hominis y el complejo Micoplasma hominis + Ureaplasma urealyticum. Más de la mitad de estos microrganismos mostraron asociaciones con otros agentes Clamydias, Gardnerella vaginalis, levaduras, y Trichomonas vaginalis.

Se evidenció la emergencia de cepas resistentes de micoplasmas en mayor o menor grado frente a drogas antimicrobianas potentes como eritromicina, ofloxacina, claritromicina y otras por lo que es necesario el empleo controlado y racional de esos medicamentos.

 

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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Recibido: 23 de marzo de 2013
Aprobado: 30 de mayo de 2013

 

 

Dra. Alexis Sanchén Casas. Especialista de II Grado en Microbiología. Máster en Enfermedades Infecciosas. Profesor Asistente. Centro Provincial de Higiene y Epidemiología. Camagüey, Cuba. Email: sanchen@finlay.cmw.sld.cu

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