INTRODUCCIÓN
La inclusión de aditivos probióticos, prebióticos y simbióticos ha ganado popularidad en la producción avícola mundial. Estos agentes bioterapéuticos catalogados como productos de origen natural, beneficiosos para la salud, con propiedades biológicas activas y con capacidad preventiva y terapéutica definida representan, sin duda, una alternativa eficaz al uso indiscriminado de antibióticos promotores del crecimiento animal (El Jeni et al., 2021; Melara et al., 2022).
La aplicación de estos aditivos mantiene un microbioma beneficioso para la salud animal. Su función va dirigida a equilibrar el medio intestinal e incrementar la población de bacterias benéficas, productoras de ácido láctico, que favorezcan la eubiosis. Además, mejoran los procesos metabólicos y digestivos, así como la modulación del sistema inmune. Estos efectos permiten incrementar los rendimientos productivos y por ende, la disponibilidad y calidad de leche, carne y huevos destinados a la población (Milián et al., 2019; Iñiguez et al., 2021).
En Cuba, desde hace varios años, grupos multidisciplinarios trabajan en la introducción de estos biopreparados en la producción animal, no solo por los efectos que causan en el rendimiento y la salud de los animales, sino por la utilización de una tecnología económicamente viable para las condiciones cubanas. En este sentido, el Centro de Estudios Biotecnológicos (CEBIO) de la Universidad de Matanzas (UM) obtuvo y patentó la metodología de elaboración del aditivo simbiótico PROBIOLEV® (Pérez et al., 2006).
La evaluación del potencial simbiótico de este aditivo natural (PROBIOLEV®) se inició en pollos de ceba y mostró mejoras en la respuesta de algunos indicadores microbiológicos, fermentativos, morfométricos, hematológicos, inmunológicos y productivos (Pérez, 2000 , Pérez et al., 2005 y Castillo et al 2014). A pesar de conocer las ventajas que ofrece su empleo, no se produce ni se aplica a escala de producción. Sin embargo, impulsar la avicultura cubana representa una de las vías más importantes para el consumo de proteína animal.
La avicultura en Cuba, a pesar de no producir carne de pollo a gran escala, cuenta con una Genética Avícola propia, hecho que la distingue entre muchos países, incluso los desarrollados. Dicha empresa atiende los procesos de selección y mejora de las Líneas Puras, así como la crianza de los Pies de Cría para garantizar el genofondo y el reemplazo de todas las aves básicas del sistema nacional. De ahí que el objetivo del presente trabajo fue evaluar el efecto simbiótico de PROBIOLEV® en aves Líneas Puras Pesadas durante la madurez.
MATERIALES Y MÉTODOS
Elaboración del aditivo simbiótico PROBIOLEV®: A partir de la crema de destilería de alcohol (Saccharomyces cerevisiae) ajustada al 20% de materia seca (MS) y un crudo enzimático de Bacillus subtilis E44, se elaboraron 25 L de PROBIOLEV® según la metodología descrita y patentada por Pérez et al. (2006). Una vez elaborado el biopreparado se realizaron tinciones para ver endosporas de bacilo y células de levadura, así como la medición del pH, para comprobar la calidad del biopreparado. Este se envasó en frascos plásticos estériles con tapa de rosca (capacidad 5 L) y se conservó a temperatura ambiente hasta su traslado y utilización en la unidad de producción.
Condiciones experimentales y tratamientos: El experimento se desarrolló en la Unidad Genética Avícola “Sierra Maestra” perteneciente al municipio Pedro Betancourt, en la provincia de Matanzas. La evaluación, in vivo del biopreparado simbiótico, se realizó durante 90 días en un periodo comprendido entre los meses mayo a julio de 2021. Durante este periodo, la temperatura media fue de 32 ºC ± 2; la máxima, de 35ºC ± 1; y la mínima, de 30ºC ± 3. La humedad relativa promedio fue de 72 % ± 3.
El diseño del experimento fue completamente aleatorizado, con dos tratamientos: T-1 (dieta basal o control) y T-2 (dieta basal más PROBIOLEV®), en dosis de 75 mL por kilogramo de concentrado. Se utilizaron un total de 128 aves hembras de la línea Pura Pesada B4, en etapa de madurez (162- 252 días) distribuidas en 64 aves por tratamiento.
Alimentación de las aves: El alimento consumido se ofreció en forma de harina, una vez al día, en horas tempranas de la mañana. La composición de la dieta (pienso reproductor) se muestra en la tabla 1. Recibieron el agua (ad libitum), tratada con hipoclorito de calcio al 0,1%, mediante tetinas automáticas y el alimento se dispuso en comederos lineales. El concentrado se aplicó a razón de 163 g/ ave al día según la norma establecida por UCAN -IIA (1998).
Nutrientes | Unidad de medida | Proporción | |
---|---|---|---|
Mínima | Máxima | ||
Proteína Bruta | % | 15.5 | 18.8 |
Energía metabolizable | MJ/kg | 11.30 | 11.70 |
2700 | 2800 | ||
Fibra | % | 2 | 8 |
Grasa | % | 2 | 6 |
Ácido linoléico | % | 1.0 | 1,0 |
Calcio | % | 1.2 | 1.5 |
Fosforo disponible | % | 0.45 | 0.90 |
Fosfato dicálcico | % | 1,90 | |
Tiamina | % | 0.74 | 0,75 |
DL-metionina | % | 0.37 | 0,5 |
Metionina + cistina | % | 0.65 | 0,63 |
PROBIOLEV® (aditivo simbiótico) se suministró diariamente (con frecuencia única) en la ración del grupo T-2. El mismo se aplicó directo a los comederos por encima del alimento ofrecido. La dosis del aditivo (75 mL/Kg de concentrado) se ajustó según los criterios propuestos por Pérez (2000).
Manejo de las aves: El manejo para ambos grupos de animales fue homogéneo en cuanto a: alimentación, iluminación, operario y condiciones ambientales. Lo cual coincide con lo establecido en el Instructivo Técnico Nº 7 UCAN -IIA (1998) para la especie y categoría evaluada. Las aves se encuentran ubicadas en jaulas independientes de 48 X 24 cm de espacio vital y 24 cm de frente de comedero, a razón de un ave por jaula. Cada jaula se encuentra enumerada y se corresponde con el número de banda del ave. Este número de banda es un código, debajo del ala, que tiene cada ave para mantener el control de producción y reproducción durante la etapa.
Las aves en etapa de adultez reciben 16 horas de luz al día, alternando la luz natural y la artificial. Las aves son sometidas a inseminación artificial. El semen del gallo se extrae de forma rápida, sin traumas para el animal, manteniendo la calidad y efectividad. Para la inseminación se emplea una varilla plástica, se inocula aproximadamente 0,25 ml de semen por hembra, no excediendo los 20 minutos entre la extracción y la inseminación. Se utiliza un gallo por cada 10 o 15 hembras y la inoculación se repite entre cuatro y cinco días.
Determinación de los indicadores productivos y de salud: Para determinar in vivo el efecto del biopreparado en indicadores productivos y de salud se registró, semanalmente, los huevos por ave, producción de huevos promedio por cada tratamiento, cantidad de aves incorporadas a la reproducción, consumo de alimento y conversión en huevo por kilogramo de alimento consumido, mientras que la mortalidad y la viabilidad se observaron durante todo el período experimental. Estos indicadores se calcularon como se describe en el Instructivo Técnico para la crianza del pollo de ceba (UCAN- IIA, 1998).
Procesamiento estadístico: Para analizar el % de aves incorporadas a la puesta, así como para comparar la mortalidad y viabilidad se utilizó la comparación de proporciones con la prueba binomial. Para comparar la producción de huevos por ave semanal, se aplicó la prueba de comparación de medias (t student). Ambas pruebas se realizaron según el software estadístico STATGRAPHICS Plus versión 5.0 (Statgraphics, 2002).
RESULTADOS
En la tabla 2 se presenta el porciento de aves incorporadas a la reproducción por tratamientos. Se aprecian diferencias durante las cuatro primeras semanas. En este caso el mayor número (P<0,05) de hembras que inician puesta, se corresponde con el grupo que recibió el biopreparado simbiótico en la dieta. En las restantes semanas no se encontraron diferencias entre grupos (T-1 y T-2). Además, se observa como a partir de la quinta semana, el 100% de las aves se encontraban en producción. Ambos grupos logran en el mismo periodo de tiempo (6 semanas) incorporar el total de la masa a la reproducción. Sin embargo, con el uso de PROBIOLEV® se logra incrementar la producción de huevos en las aves que se trataron en relación con el grupo control.
Semanas | Cantidad de aves en producción de huevos (%) | P-Value | ||
T-1 | T-2 | |||
1 | 14,06 | 32,81 | 0,0015 | |
2 | 28,12 | 51,56 | 0,0055 | |
3 | 68,75 | 92,19 | 0,0010 | |
4 | 84,37 | 95,31 | 0,0423 | |
5 | 96,87 | 98,43 | 0,7171 | |
6 | 100 | 100 | 1,0 | |
7 | 100 | 100 | 1,0 | |
8 | 100 | 100 | 1,0 | |
9 | 100 | 100 | 1,0 | |
10 | 100 | 100 | 1,0 | |
11 | 100 | 100 | 1,0 |
En la tabla 3 se observa el comportamiento de la puesta, a partir de la incorporación de todas las aves.
Semanas | Promedio de huevos producidos | P-value | ||
T-1 | T-2 | |||
5 | 2,74 | 2,75 | 0,472 | |
6 | 2,80 | 2,84 | 0,054 | |
7 | 3,03 | 3,48 | 0,011 | |
8 | 2,56 | 3,14 | 0, 002 | |
9 | 3,04 | 3,81 | 0,001 | |
10 | 3,08 | 3,89 | 0,002 | |
11 | 3,25 | 3,85 | 0,002 |
La producción de huevos por grupos mostró diferencias (P<0,05), la mayor cantidad de posturas está a favor del grupo tratado (Tabla 3). Durante el periodo experimental (once semanas) la producción total fue de 1516 y 1767 huevos para control (T-1) y tratamiento (T-2) respectivamente. Además, al contabilizar el indicador huevos por ave, los mejores resultados se alcanzan en el grupo que consume el aditivo simbiótico, con 27,6 y 23,7 para el grupo con la dieta convencional (control).
Otro indicador productivo evaluado, durante el periodo experimental, fue el consumo de alimento, el mismo no mostró diferencia entre grupos. Este comportamiento se debe a que las aves en etapa adulta (madurez) tienen una alimentación normada (163 g al día) y realizan un consumo total de la dieta suministrada. Sin embargo, al analizar la conversión en huevos por alimento consumido vemos que los resultados favorables corresponden al grupo donde se incluyó, en el alimento, PROBIOLEV®. En este caso se obtiene mejor (5,4) conversión alimenticia al comparar con el grupo control (6,3) que solo consumió el concentrado convencional.
La eficiencia de la conversión del alimento ya sea en masa muscular o producción de posturas tiene un impacto significativo en la industria de cría intensiva de animales, donde el concentrado representa la mayor parte de los costos de producción (Stanley y Hughes, 2012). En este sentido, la comunidad científica señala que cuando se incorporan al alimento aditivos zootécnicos, se favorece la digestión, la absorción y el aprovechamiento de los nutrientes contenidos en la dieta. Se comprobó que cuando los animales presentan un porciento elevado de microorganismos benéficos, la conversión disminuye, lo cual aporta resultados favorables (Dowarah et al., 2018; Rondón et al., 2020).
PROBIOLEV® contiene en su composición oligosacáridos de glucanos y mananos: prebióticos promotores del crecimiento animal (Jahanian y Ashnagar 2015; Lourenço et al., 2016) y células viables de B. subtilis y sus endosporas; microorganismo probiótico que favorece el incremento de la biota intestinal benéfica y activa la respuesta inmune (Díaz et al., 2017 y Milián et al., 2019). Este biopreparado simbiótico se suministró estable, durante toda la crianza, desde el primer día de edad. Esto posibilitó la presencia de sus componentes en el tracto gastrointestinal (TGI) de las aves que lo consumieron.
Jeong y Kim (2014) plantean que los biopreparados elaborados a partir de cultivos del género Bacillus spp. y sus endosporas reciben marcada atención. Esta bacteria produce enzimas hidrolíticas que mejoran la digestión y absorción de los alimentos, incrementan la población de bacterias ácido lácticas en el TGI con la consecuente producción de AGCC, ácido láctico y la estimulación de la respuesta inmunológica. Por tanto, estos preparados biológicos provocan una mayor eficiencia en la conversión alimenticia, en la uniformidad del peso corporal y en los rendimientos productivos de los animales que lo consumen.
Diversas experiencias demuestran que el empleo de cepas de B. subtilis., en la dieta de aves, juega un rol importante para reducir e incluso prevenir la colonización intestinal de patógenos, debido a la actividad inhibitoria de los antibióticos y bacteriocinas producidas por esta cepa. Además, el suministro de Bacillus spp. y sus endosporas, propicia mejor balance microbiano (eubiosis) a nivel del TGI, proporciona un mayor rango de absorción y crea condiciones favorables para el desarrollo de especies microbianas beneficiosas como Lactobacillus spp. (Pérez et al., 2012; Rodríguez et al., 2016; Adhikari et al., 2019).
Investigaciones realizadas por Corrigan et al. (2015) demostraron que las sustancias prebióticas (mananos y glucanos) logran una fijación en los receptores de lectina de las bacterias, lo que impide que los patógenos se aniden en el tracto digestivo. Este evento ocurre mediante un proceso de exclusión competitiva, donde hay un reconocimiento e incremento de la población benéfica y por consiguiente una reducción de microorganismos perjudiciales. Una vez que se impide la fijación de las bacterias, los mananos forman un tipo de blindaje, acarrean a estas al tracto posterior y son expulsadas del organismo vía heces fecales. Este efecto se ve marcado en etapas tempranas de vida del animal al que se le suministre.
La inclusión de este bioproducto (PROBIOLEV®) en la dieta provocó la modificación de la ecología intestinal de las aves, lo que se relaciona con la mejora en los indicadores porcentaje de postura por semana, huevos por ave y conversión en huevo por cada kilogramo de alimento consumido, con respecto a los animales que no recibieron este aditivo microbiano. Debe destacarse que la producción de huevos en este tipo de crianza tiene como fin productivo la fertilidad e incubación de los mismos para generar nuevos nacimientos. En la presente investigación se logran 1 064 y 1 189 huevos fértiles para control y tratamiento, respectivamente. Este resultado demuestra el efecto positivo del aditivo empleado en esta especie y categoría animal.
A través de los años se ha trabajado en la evaluación a pequeña escala del efecto beneficioso que generan los aditivos zootécnicos en la crianza de esta categoría de aves (Líneas Puras). Suárez (2013) y Milián et al. (2021) realizaron experimentos para evaluar el efecto probiótico de una cepa de Lactobacillus salivarius (PROBIOLACTIL®) y otra de Bacillus subtilis E44 (SUBTILPROBIO®), ambas en aves de Líneas Puras Pesadas P8 y E1 respectivamente. Como resultado se observó, que las aves que ingirieron las bacterias probióticas tuvieron mejores resultados productivos que los animales controles. Estos resultados coinciden con los alcanzados en la presente investigación, pero en aves de Líneas Puras Pesadas B4.
Rodríguez et al. (2019), evaluaron el potencial antibacteriano de PROBIOLEV® en pollos machos de la raza Ross 300 expuestos con Salmonella enterica FVE1284, y demostraron que la aplicación de este aditivo simbiótico redujo la infección por la bacteria patógena (p<0,05) e incrementó la población (2,47x1011) de bacterias beneficiosas (Lactobacillus spp.). Además, se generó una respuesta fisiológica favorable, al mejorar los patrones fermentativos en el ciego (pH 6,6) y la estimulación del estado inmune, a través de un mayor tamaño de los órganos linfoides (bolsa de Fabricio y bazo) y la concentración de inmunoglobulina M (1,12 g.L-1) en el plasma sanguíneo de las aves.
Estos resultados se pueden asociar a que los probióticos y prebióticos, una vez que se suministran, inducen en el tracto gastrointestinal (TGI) numerosos mecanismos mediante los que se favorece el balance de los microorganismos intestinales, y se proporciona una mejor respuesta de los procesos digestivos en el hospedero (Rondón et al., 2020).
En la tabla 4 se muestran las proporciones de mortalidad y viabilidad. Para ambos indicadores se presentan diferencias del T-1 con respecto al T- 2. Se constató que las aves que consumieron el biopreparado mostraron una reducción de la mortalidad y mayor viabilidad que el grupo control. El grupo de aves que no consumió el aditivo, no solo resultó con menor viabilidad, sino que, no logró alcanzar el porcentaje requerido (85%) por el estándar de la línea, empleado como criterio de comparación. Uno de los efectos marcados que tienen los aditivos zootécnicos es el de incidir positivamente en la microbiota intestinal, a favor de la disminución de la presencia de gérmenes perjudiciales, al tiempo que se incrementa la presencia de bacterias beneficiosas (Li et al., 2016; Medina et al., 2017). Esto hace favorable el indicador viabilidad y, por ende, disminuye el número de muertes.
Indicadores de salud | Proporciones | P-Value | ||
T 1 | T 2 | |||
Mortalidad | 0,30b | 0,13a | 0,019 | |
Viabilidad | 0,70b | 0,88a | 0,012 |
Resultados muy semejantes a los de la presente investigación fueron reportados por Rodríguez et al. (2016) al evaluar, en esta misma especie y categoría animal, el efecto de una mezcla probiótica compuesta por Lactobacillus salivarius C65 y Bacillus subtilis E44. Los autores observaron que la inclusión de la misma, en la dieta de las aves, reportó mejoras en el porcentaje de mortalidad y viabilidad. En este caso, los estudios realizados promovieron un mayor ingreso económico para la crianza de Líneas Puras Pesadas B4, en su etapa de inicio.
Los resultados alcanzados, en la etapa de madurez con las aves de Líneas Puras Pesadas, son consecuente con el empleo del aditivo zootécnico PROBIOLEV® desde el inicio de crianza. La inclusión de este bioproducto en la dieta tuvo repercusión positiva en la salud y productividad animal. Rodríguez et al. (2016) refieren que suministrar microorganismos probióticos, desde las primeras horas de vida de las aves, provoca la modificación de la ecología intestinal, lo cual contribuye a una mejor capacidad de absorción de nutrientes y superiores respuestas en el rendimiento del ave; resultados que se corresponden con los obtenidos en la presente investigación.
CONCLUSIONES
Los resultados obtenidos en este estudio confirman el potencial simbiótico de PROBIOLEV® en la mejora de los indicadores productivos y de salud de aves Líneas Puras Pesadas. Este aditivo natural constituye una opción biotecnológica de interés para la producción animal en Cuba.