Resumen

BORRERO LARGER, Héctor  y  SANCHEZ GALLARDO, Lorenzo. ALTERNATIVAS CROMATOGRÁFICAS PARA LA REMOCIÓN DE ENDOTOXINAS RESIDUALES EN EL PROCESO DE PURIFICACIÓN DE INMUNOGLOBULINAS HUMANAS. Rev. CENIC Cienc. Biol [online]. 2023, vol.54, pp. 140-157.  Epub 22-Sep-2023. ISSN 2221-2450.

Se evaluaron, dos alternativas cromatográficas de intercambio iónico en modo negativo, a escala de laboratorio, para la remoción de endotoxinas en soluciones de inmunoglobulina. Se analizó la influencia de tres parámetros tecnológicos (concentración de proteínas, fuerza iónica y pH) en el comportamiento de los dos principales criterios técnicos de eficiencia del procedimiento: 1. Capacidad de remoción en endotoxinas expresada como EU (unidades de endotoxinas) totales, 2. Recobrado de proteínas expresado como mg/proteína total. El objetivo principal del trabajo fue seleccionar variantes que cumplan el requisito regulatorio para las inmunoglobulinas intravenosas, que tiene que ser < 1 UE/mL. Se evaluó en la resina cromatográfica Fractogel-TMAE la incidencia de la concentración de proteínas y la fuerza iónica frente a una carga de endotoxinas conocida en el comportamiento de ambos criterios técnicos de eficiencia. La variante con una concentración de proteína cercana al 8%, sin refuerzo de fuerza iónica resultó la mejor opción. Como segunda alternativa para una carga de endotoxinas más baja, se evaluó para una membrana cromatográfica del tipo Sartobind-Q la incidencia del pH en el comportamiento de ambos criterios técnicos de eficiencia, manteniendo la concentración de proteínas alrededor de ~8%. En este caso la variante a pH=6,5 resultó la mejor opción integral. Para soluciones de inmunoglobulinas con concentración de proteína ≤ 8,0 %, ambas alternativas son eficaces hasta 4 volúmenes de columna, en cuanto a capacidad de remoción de endotoxinas y recobrado superior al 85 %, pues cumplen la exigencia regulatoria para las inmunoglobulinas intravenosas.

Palabras clave : inmunoglobulina; endotoxinas; cromatografía; recobrado de proteínas.

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