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Biotecnología Aplicada
versão On-line ISSN 1027-2852
Resumo
CUETARA, Elizabeth B et al. Una variante microanalítica del SOS Chromotest para la evaluación genotóxica de productos naturales y sintéticos. Biotecnol Apl [online]. 2012, vol.29, n.2, pp. 108-112. ISSN 1027-2852.
Una variante microanalítica del SOS Chromotest para la evaluación genotóxica de productos naturales y sintéticos. Los agentes que pueden dañar al ADN in vivo tienen la potencialidad de tener efectos adversos sobre la salud humana. Los mismos pueden inducir mutaciones transmisibles y cáncer. El ensayo SOS Chromotest es un ensayo basado en una fusión transcripcional de un gen SOS, sfi A y el gen de la ß-galactosidasa, así la actividad enzimática indica el nivel de inducción de la respuesta SOS response y puede estimarse el daño al ADN producido por mutágenos físicos y químicos. Nosotros presentamos y evaluamos en este trabajo una variante microanalítica del ensayo SOS Chromotest original para la detección de la genotoxicidad de muestras pigmentadas. Introdujimos dos modificaciones principales: cambiamos sustratos que desarrollan color por otros que desarrollan fluorescencia y trabajamos a escala micro-analítica. La concentración óptima de sustrato para la ß-galactosidasa utilizada fue de 1.8 mM y el tiempo de reacción fue de 40 minutos. Esta variante detectó eficientemente la genotoxicidad de mutágenos conocidos y de extractos naturales pigmentados. Los resultados son discutidos en relación a las ventajas que ofrece trabajar a escala microanalítica, reducción de costos, automatización de las lecturas y su utilidad para tamizar una larga variedad de muestras.
Palavras-chave : SOS Chromotest; muestras pigmentadas; sustratos fluorescentes.