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Vaccimonitor
versão On-line ISSN 1025-0298
Resumo
SOTO, Carmen et al. Validación de una técnica colorimétrica para la determinación de carbohidratos. Vaccimonitor [online]. 2002, vol.11, n.3, pp. 11-14. ISSN 1025-0298.
La adecuada estandarización de un ensayo analítico, seguido de la validación del método y la homogeneidad de los reactivos químicos y biológicos a lo largo de los diferentes estudios, son elementos imprescindibles para alcanzar óptimos resultados. En este trabajo se seleccionó una metodología para la validación del método analítico empleado en la determinación de ribosa por el método del orcinol y se utilizó una solución estándar de ribosa (0,025 mg/mL). Se realizó un análisis de los criterios fundamentales de validación: linealidad, precisión, exactitud, sensibilidad, especificidad, límites de detección y robustez. Se comprobó la utilidad de dicho procedimiento y se demostró mediante el diseño experimental y los procedimientos estadísticos empleados que dicho método es lineal (r2>0,98), exacto (Fexp.< Ftab. y texp. < ttab.), preciso (CV<3 %), sensible (LD = 1 ug/mL y LC = 3.3 ug/mL) y específico (respuesta no significativa), por lo cual es confiable. La determinación de ribosa es una técnica colorimétrica que cuantifica pentosas y se emplea con el objetivo de conocer el contenido exacto de la misma en una muestra de producto purificado. Además es empleada como control final según la OMS en las vacunas conjugadas de Haemophilus influenzae.
Palavras-chave : Orcinol; ribosa; validación; Haemophilus influenzae.