Artículos originales

Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas, Universidad Nacional de Rosario. Laboratorio de Inmunohematología, Hemorreología e Histocompatibilidad, Argentina

Frecuencia de los grupos sanguíneos A₁, A₂, A_int, B y O en individuos normales

Dra. Marcela García Rosasco,¹ Dra. Samanta Lippi² y Dra. Juana Valverde³

Resumen

Se definen como A intermedio (A_int) los hematíes que comparten caracteres con A₁ y A₂. Existen diferencias cualitativas y cuantitativas en los epitopes A. Los hematíes A₁ son aglutinados por la lectina de Dolichus biflorus (anti-A₁), los A₂ por la lectina de Ulex europaeus (anti-H), en tanto los hematíes A_int, son variablemente aglutinados por ambas de manera inesperada. Se realizó una búsqueda de individuos A_int en individuos sanos normales de acuerdo con la reacción con las lectinas mencionadas. Nuestros resultados concuerdan con observaciones previas sobre la marcada heterogeneidad de los hematíes A_int. Se estudiaron 1 301 muestras, de las cuales resultaron 703 O (54,04 %); 468 A (35,97 %); 106 B (8,15 %); 18 A₁B (1,38 %) y 6 A₂B (0,46 %). Las muestras A se subdividieron en: 346 A₁ (73,93 %); 82 A₂ (17,52 %) y 40 A_int (8,55 %). El reconocimiento de subgrupos débiles del grupo A reviste importancia en la práctica forense y en el estudio de la dinámica de poblaciones. El estudio de la variante A_int es relevante en Inmunogenética Poblacional, por su contribución al conocimiento del mestizaje con poblaciones negras.

DeCS: GRUPOS SANGUINEOS/inmunología; INMUNOGENETICA/métodos; MARCADORES GENETICOS/inmunología; SISTEMA DEL GRUPO SANGUINEO ABO/inmunología; DINAMICA DE POBLACION.

 

El sistema de grupos sanguíneos ABO sigue siendo el primero a tener en cuenta en el momento de realizar una transfusión de sangre. Las cadenas sacáridas de glucoproteínas o de glucolípidos que lo componen están presentes, salvo excepciones, en todas las membranas celulares, en particular la membrana eritrocitaria. En la mayoría de los individuos también se encuentran en secreciones y líquidos biológicos.

Los antígenos A y B son productos génicos fácilmente detectables y constituyen marcadores genéticos de gran valor. Entre los individuos A, se distinguen 2 categorías: A₁, definido por un anticuerpo particular (anti-A₁), y A₂, que no es reconocido por este anticuerpo.

Los glóbulos rojos de los individuos A₁ presentan aproximadamente 10⁶ sitios antigénicos por célula; en cambio, los A₂ sólo poseen entre 0,2 y 0,4 x 10⁶ sitios por glóbulo. Existen otros subgrupos A considerados débiles (A₃, A_x, A_end, A_m, A_el), en los que la reactividad antigénica es inferior a la de los glóbulos A₂.

La distinción entre A₁ y A₂ corresponde a una diferencia en el número y distribución de los receptores A en la membrana eritrocitaria y a una diferencia cualitativa de estructura. La diferenciación entre ambas se realiza mediante la utilización de anticuerpos monoclonales y lectinas específicas de grupo sanguíneo Dolichos biflorus (anti-A₁) y Ulex europaeus (anti-H).¹

Se definen como A intermedio (A_int) aquellos hematíes en los que se observan ciertos caracteres A₁ y ciertos caracteres A₂. El A_int presenta una mayor frecuencia en la raza negra que en caucásicos.²

Diferentes grupos de trabajo han utilizado diversos criterios para clasificar el A_int. Algunos clasifican como A_int aquellas células con reacciones débiles con Dolichos, pero con reactividad H más fuerte que las A₂, mientras que otros las clasifican por su fuerte reactividad con Dolichos y Ulex.^3-8

El objetivo del presente trabajo fue determinar la frecuencia de fenotipos A₁, A_int y A₂ en individuos normales de la ciudad de Rosario, Argentina.

Métodos

Se enfrentaron glóbulos rojos suspendidos en plasma autólogo, al 40 %, con anti-A, B (Wiener, lote 709107), luego con anti-A (Wiener, lote 705001) y anti-B (Wiener, lote 712145) y, finalmente, con lectinas anti-A₁ (CRTSH Nancy Francia, lote 94.3) y anti-H (Laboratorio de Inmuno-hematología, lote 980805). Las lectinas anti-A₁ y anti-H fueron diluidas para asegurar su especificidad, debido a que algunas lectinas puras presentan reacciones inespecíficas.⁹

De acuerdo con la reacción con las lectinas, las muestras A fueron clasificadas en A₁ (reacción positiva con anti-A₁/reacción negativa con anti-H); A₂ (reacción negativa con anti-A₁/reacción positiva con anti-H) y A_int (reacción positiva con ambas lectinas). Todo el procedimiento fue realizado en placa, a temperatura ambiente (20 °C), por los mismos operadores, a fin de optimizar la reproductibilidad.

Resultados

Se estudiaron 1 301 muestras en las que se observaron frecuencias decrecientes de los grupos sanguíneos O, A, B y AB. Los resultados pueden observarse en las tablas 1 y 2.

Tabla 1. Distribución de los individuos estudiados según el grupo sanguíneo ABO

Grupo	No. de muestras (n total = 1 301) %
O	703 (54,04)
A	468 (35,97)
B	106 (8,15)
AB	18 A1B (1,38) 6 A2B (0,46)

Tabla 2. Distribución de los individuos estudiados según el grupo A

Grupo A	No. de muestras (n total = 468) %
A1	346 (73,93)
Aint	40 (8,55)
A2	82 (17,52)

La intensidad de la reacción de aglutinación se definió por cruces, y se transformaron luego en un valor numérico asignado según la convención: ++++ = 10, +++ = 8, ++ = 5, + = 2 y reacción negativa = 0. La tabla 3 presenta las reacciones de aglutinación obtenidas convertidas en escores cuali-cuantitativos.

Tabla 3. Escores cuali-cuantitativos de la reacción de aglutinación (media ± desviación estándar)

		Sueros y lectinas
Eritrocitos	anti-A	anti-A1	anti-H	anti-B
A1	7,7 ± 1	8 ± 1	0	0
A1B	8 ± 0	7 ± 1,5	0	7 ± 1,5
Aint	7,5 ± 1,5	6 ± 2,5	5 ± 3	0
A2B	8 ± 0	0	6 ± 1,7	2 ± 0
A2	6,8 ± 2	0	6,1 ± 2,6	0

La prueba serológica de Simonin demostró la presencia de un solo anticuerpo (anti-B) en los individuos A₁ y A_int, mientras que en los individuos A₂ este anticuerpo estaba acompañado en algunos casos por otro anticuerpo de especificidad anti-A₁, lo que coincide con la bibliografía que señala la presencia irregular de este anticuerpo.^9-12

Discusión

Las tablas 1 y 2 presentan valores de distribución poblacional para la ciudad de Rosario, referida a los distintos grupos del sistema ABO, y la tabla 3 los escores calculados a partir de la aglutinación producida para los distintos grupos A. La reacción con anti-A₁ decrece desde el grupo A₁ hacia el A_int. La reactividad con el anti-H se incrementa desde el A_int hacia el A₂.

Nuestras observaciones confirman lo expresado por Salmon^4,5 con respecto a una marcada heterogeneidad en la expresión antigénica de los hematíes A_int.

El reconocimiento de variantes débiles del grupo A reviste importancia en la práctica forense.^13,14 Consideramos importante señalar el valor de este estudio en dinámica de poblaciones por su contribución al conocimiento del mestizaje con poblaciones negras.

Summary

Blood cells that share characteristics with A₁ and A₂ are defined as A-intermediates. There are qualitative and quantitative differences in epitope A. Blood cells A₁ are binded by Dolichus biflorus lectin(ant1-A₁), blood cells A₂ are binded by Ulex europareus lectin (anti-H) whereas A_int are indistinctively binded by both lectins in an unexpected way. A_int subjects were looked for among normal healthy individuals according to their reaction to the aforementioned lectins. Our results agree with previous remarks on the marked heterogenecity of blood cells A_int . One-thousand three hundred one samples were studied resulting in 703 from O group (54,04%); 468 from A group (35,97%); 106 from B group (8,15%); 18 from A₁B (1,38%) and 6 from A₂B (0,46%). The samples A were subdivided into 346 A₁(73,93%), 82 A₂ (17,52%) and 40 A_int (8,55%). The detection of weak subgroups within the A group has a great importance for forensic practice and the study of population's dynamics. The study of A_int variant is relevant in Population Immunogenetics because of its contribution to the knowledge of crossbreeding with Black populations.

Subject headings: BLOOD GROUPS/immunology; IMMUNOGENETICS/methods; GENETIC MARKERS/immunology; ABO BLOOD GROUP SYSTEM/immunology; POPULATION DYNAMICS.

Referencias bibliográficas

1. Goldstein IJ, Hayes CE. The lectins: Carbohydrate-binding proteins of plants and animals. Adv Carbohydr Chem Biochem 1978;35:127.

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4. Salmon Ch, Cartron JP, Rouger Ph. Les groupes sanguins chez l´homme. Paris: Ed. Masson, 1991.

5. Salmon Ch. Les groupes sanguins ou l´écriture des genes. Paris: Ed. Masson, 1997.

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8. Bencomo Hernández A, Alfonso Valdés Y, Alfonso Valdés M, González Sampedro R, Fernández Estrada J, Ballester Santovenia A. Frecuencia de los grupos sanguíneos A1, A2, Aint, Ael, B y O en donantes de sangre. Rev Cubana Hematol Inmunol Hemoter 1997;13(2):122-31.

9. Moore BPL. Techniques sérologiques et immunologiques. Société Canadienne de la Croix-Rouge, 1991.

10. American Association of Blood Banks: Technical manual 10^th ed., 1990.

11. Mollison PL, Engelfriet CP, Contreras M. Blood transfusion in clinical medicine. 9^th. ed. Oxford: Blackwell Scientific Publications, 1993.

12. Foresto P, Arriaga S, Biondi C, Racca A, Ruiz S, Viglione P, García Rosasco M, Solís E, Valverde J, Méndez N, Pivetta M. Determinación de subgrupos del antígeno A. Sus implicancias en Inmunohematología. Rev Arg Trasnf XIII 1987;3:141.

13. Brocteur J, Umani Ronchi G, André A. Importance des sous-groupes A₁, A₂ des hématies-tests lors de la recherche du facteur de groupe A dans les taches de sang. XXXer Congreso Internacional de Medicina Legal y Social de Lengua Francesa, 1965.

14. Moreau P, Brocteur J. Les possibilités et les limitations actuelles de l´expertise médico-legale dans l´investigation de paternité. XXXer Congreso Internacional de Medicina Legal y Social de Lengua Francesa, 1965.

Recibido: 21 de junio del 2001. Aprobado: 5 de septiembre del 2001.
Dra. Marcela García Rosasco. Consejo de Investigaciones de la Universidad Nacional Rosario. J.C. Sánchez 4618, piso 2 Dto. 3-2000 Rosario, Argentina. Tel. [phone].

 

¹ Doctora en Ciencias Biológicas. Investigadora Independiente. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Consejo de Investigaciones de la Universidad Nacional de Rosario.
² Auxiliar de Investigación. Laboratorio de Inmunohematología, Hemorreología e Histocompatibilidad, Rosario.
³ Doctora en Bioquímica. Profesora Titular de Inmunología. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Universidad Nacional de Rosario.