ARTÍCULO ORIGINAL

 

Expresión fenotípica de las moléculas CD5 y CD6 en la leucemia linfoide crónica B-CD5+

 

The B-CD5+ chronic lymphoid leukemia related to the phenotype expression

 

 

Lic. Bertha Beatriz Socarrás Ferrer^I; Lic. Lázaro O. del Valle Pérez^I; DraC. Consuelo Macías Abraham^I; Dra. Vianed Marsán Suárez^I; Dra. Miriam Sánchez Segura^I; Dra. Rosa María Lam^I; Lic. Ruby Alonso Ramírez^II; Dr. Enrique Montero Casimiro^II y DrC. Porfirio Hernández Ramírez^I

^I Instituto de Hematología e Inmunología. Ciudad de La Habana, Cuba.
^II Centro de Inmunología Molecular. Ciudad de La Habana, Cuba.

 

 

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RESUMEN

Las moléculas CD5 y CD6 tienen función coestimuladora y muestran homología en su estructura. Se evaluó la expresión de la molécula CD6 mediante el uso del anticuerpo monoclonal anti-CD6 (T1) en el inmunofenotipaje celular de pacientes con leucemia linfoide crónica B y se comparó con la expresión de la molécula CD5. Los resultados demuestran una homología en la expresión fenotípica de ambas moléculas, CD5 y CD6, lo que asociado con que ambos receptores linfocitarios se encuentran físicamente vinculados, permite sugerir que la molécula CD6 constituye un marcador biológico de interés en la evaluación del pronóstico y la posibilidad de nuevas variantes terapéuticas en esta enfermedad.

Palabras clave: moléculas CD₅ y CD₆ , LLC-B- CD₅ ⁺, citometría de flujo.

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ABSTRACT

CD5 and CD6 molecules have a co-stimulant function and show homology in structure. We assessed CD6 molecule expression using anti-CD6 (T1) monoclonal antibody in the cellular immunophenotyping from patients presenting B chronic lymphoid leukemia, and it was compared to CD5 molecule expression. Results show a homology in phenotype expression of both molecules (CD5 and CD6), what associated with the fact that both lymphocyte receptors are physically linked, allow to suggest that CD6 molecule is a interesting biological marker in prognosis assessment, and the possibility of new therapeutic variants in this disease.

Key words: CD₅ and CD₆ molecules, LLC-B- CD₅⁺, flow cytometry.

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INTRODUCCIÓN

La leucemia linfoide crónica (LLC) se caracteriza por una proliferación monoclonal y acumulación de linfocitos pequeños de apariencia madura, en sangre periférica, médula ósea y tejidos linfoides.^1-3 El riesgo de desarrollar LLC aumenta progresivamente con la edad y es por lo general más frecuente en hombres que en mujeres.³ Es una enfermedad heterogénea con determinadas características citogenéticas, moleculares e inmunofenotípicas, y se ha observado que más del 95 % de los pacientes con LLC tienen el fenotipo B (LLC-B) y solo entre el 2-5 % de los casos se ha reportado el fenotipo T (LLC-T).^4,5

Las células leucémicas de la LLC-B tienen un patrón inmunofenotípico definido por expresión positiva de los antígenos específicos de células B, CD19, CD20, CD22; fuerte positividad del antígeno T CD5, aunque exista ausencia de otros marcadores T; expresan solo una cadena ligera de las inmunoglobulinas (k o l) y una baja densidad de inmunoglobulinas de superficie. Todos estos elementos son necesarios para un diagnóstico preciso de la LLC y su diferenciación de otros síndromes linfoproliferativos crónicos.^1,5-8

Diferentes investigaciones han demostrado que las moléculas CD5 y CD6 tienen función coestimuladora debido a su capacidad de incrementar los estímulos proliferativos inducidos por el receptor de células T (TCR).^9-12

Estos receptores muestran homología en su estructura y en su patrón de expresión, por lo que consideramos de interés evaluar y comparar los niveles de expresión de ambas moléculas (CD5 y CD6) en pacientes con el diagnóstico de LLC-B-CD5⁺.

 

MÉTODOS

Se estudiaron 18 pacientes con el diagnóstico de LLC-B-CD5⁺ procedentes del Instituto de Hematología e Inmunología y del Hospital Clinicoquirúrgico "Hermanos Ameijeiras" con edades comprendidas entre 55 y 80 años. Se utilizó como control un individuo supuestamente sano.

El estudio inmunofenotípico se realizó mediante inmunofluorescencia indirecta con un panel de anticuerpos monoclonales (AcMo) específicos para antígenos expresados en linfocitos B y T. Para evaluar la expresión de la molécula CD6 se utilizó el AcMo IOR-T1 de producción nacional. El análisis se realizó en la ventana de la población linfoide por citometría de flujo en un FaC Scan (Becton Dickinson, EE. UU.).¹³

El panel de AcMo empleados en el diagnóstico incluyó: anti-CD3(OKT3), anti-CD5(Cris1), específicos de células T; anti-CD19(B4) y anti-CD20(B1), específicos de células B (DAKO, Dinamarca) y el anti-CD6 (IOR-T1) (CIMAB, S.A.). Se evaluó la expresión de las moléculas CD3, CD19, la combinación de CD20 con CD19; CD6 con CD3 y CD19 y CD5 con CD3 y CD19. La lectura se realizó mediante la adquisición de 10 000 células en cada tubo. Cada marcador se consideró positivo si un porcentaje superior al 20 % de los linfocitos expresaba el antígeno.

Análisis estadístico

Para comparar las medias y desviaciones estándares de los porcentajes de expresión de las moléculas CD5 y CD6 en la membrana celular de los enfermos con LLC, se utilizó el estadígrafo t de Student para muestras independientes, con un nivel de significación de 0,05.

 

RESULTADOS

Nuestros resultados mostraron homología en la expresión fenotípica de ambas moléculas, CD5 y CD6, en los enfermos con LLC-B, CD5+, al comparar las mismas no se observó diferencia estadísticamente significativa (p£0,05), como se muestra en la tabla. El patrón de expresión de la molécula CD6/CD19 en relación con CD5/CD19 en el donante sano fue también similar (2,9 % y 2,8 %, respectivamente), al igual que la expresión CD6/CD3 y CD5/CD3 (78,4 % y 73,4 %).

 

DISCUSIÓN

La LLC es una enfermedad caracterizada por la acumulación progresiva de linfocitos B morfológicamente maduros, pero inmunológicamente incompetentes a nivel de sangre periférica, médula ósea y órganos linfoides. Este aumento clonal de células B es producto de una alteración en el balance entre la apoptosis o muerte celular programada y la proliferación celular que permite la acumulación progresiva de células LLC-B, CD5+.¹⁴ La regulación mediada por citocinas y la proliferación/apoptosis relacionada con genes y señales que involucran a moléculas co-receptoras como CD6 y CD40, son importantes factores en la regulación de este balance.^1,3 Bcl-2 está sobreexpresado en la mayoría de los pacientes con LLC-B, lo cual se relaciona con la prevención de la apoptosis y la interacción CD40/CD40L estimula la proliferación de estas células.

Las moléculas CD5 y CD6 son glicoproteínas de membrana tipo I que pertenecen al grupo B de la superfamilia de receptores con dominios ricos en cisteína tipo SF-SRCR. ^15,16 Están expresadas en linfocitos T maduros, timocitos medulares y en un subtipo de células B llamada B 1a, que se encuentra implicada en la producción de autoanticuerpos polirreactivos en enfermedades autoinmunes y en procesos linfoproliferativos como la LLC-B.^17-19

La molécula CD6 se localiza en el cromosoma 11, en la región 11q13, contigua al gen CD5; existe una gran similitud en la organización de los dominios extracelulares de CD5 y CD6, lo cual sugiere que ambos genes evolucionaron a partir de la duplicación de un gen ancestral común.²⁰ Se ha demostrado que CD5 y CD6 se acumulan en la sinapsis inmunitaria durante la activación de los linfocitos T y existe unión física de estas moléculas al complejo CD3/TCR, lo cual sitúa a estas 2 proteínas en una posición óptima para modular la señalización mediada por el receptor de las células T y su participación en los procesos de activación.¹²

La asociación entre CD6 y el complejo CD3/TCR constituye una base física que corrobora la función co-estimuladora o accesoria de CD6 y lo convierte en un co-receptor capaz de modular las señales transmitidas durante la activación de la célula T. Esta molécula se puede asociar directamente y de forma independiente con CD5 o con el complejo CD3/TCR.^21-23 Diferentes investigaciones han demostrado que el CD5 también está implicado en la modulación de la activación y diferenciación de los linfocitos T y B y de diferentes señales, dependiendo del tipo celular analizado y su estado madurativo.

La asociación física de CD5 con el receptor antigénico de las células T (TCR) y B (BCR), así como con otros receptores co-estimuladores de la superficie celular, indica la capacidad de esta molécula de modular directamente las señales de ambos receptores y su influencia sobre la señalización de otros receptores asociados.¹²

La molécula CD6 se encuentra relacionada con la prevención de la apoptosis inducida por anti-IgM y se ha sugerido que esta molécula está implicada en la supervivencia de las células de la LLC-B a través de la regulación del radio Bcl-2/Bax. Las características combinadas del sistema Fas/FasL y las señales de supervivencia generadas de la interacción CD6/CD6L, puede contribuir a la acumulación de las células leucémicas y a la progresión de la enfermedad por disminución de la respuesta apoptótica.^11,22

Todo lo anteriormente expuesto y la homología en la expresión fenotípica de las moléculas CD6 y CD5 encontrada en nuestro trabajo, nos permite afirmar que estos 2 receptores pueden formar una unidad funcional compartiendo señales similares o complementarias,¹⁴ por lo que podemos considerar que el AcMo T1 anti-CD6 (CIMAB, S.A., Cuba) identifica y define un nuevo epitope dentro de la molécula CD6, el cual tiene participación en los mecanismos de activación a través de las proteínas kinasas con la inducción de la síntesis de RNAm para la interleucina 2, y que desempeña un importante rol como receptor fisiológico de la célula T para la potenciación de la respuesta inmunitaria. La molécula CD6 constituye un marcador biológico de interés en el diagnóstico, evaluación del pronóstico e incluso como posible blanco terapéutico de los enfermos con LLC-CD5+.

 

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Recibido: 12 de enero del 2009.
Aprobado: 20 de enero del 2009.

 

 

Lic. Bertha Beatriz Socarrás Ferrer. Instituto de Hematología e Inmunología. Apartado 8070, Ciudad de La Habana, CP 10800, Cuba. e-mail: [e-mail]