Servicios personalizados
Español (pdf)
Articulo en XML
Referencias del artículo
Enviar articulo por email
Citado por SciELO 
Similares en
SciELO 
Permalink
Introducción
En el mundo contemporáneo, el envejecimiento constituye uno de los acontecimientos demográficos más importante desde finales del siglo XX y en el presente siglo.1,2) En Cuba el 21,6 % de la población total rebasa los 60 años de edad3 y se estima que para el 2025 se incremente el porcentaje de adultos mayores en más del 25 %.4
El envejecimiento es un proceso caracterizado por la aparición de diversas y progresivas transformaciones morfológicas, fisiológicas, bioquímicas y psicológicas a través del tiempo en todo ser humano; es individual, deletéreo, asincrónico y se inicia en el mismo momento de la concepción.2,5 Los cambios que ocurren son producidas por la interrelación entre factores genéticos y ambientales, asociados a factores de riesgo a lo largo de la vida.5) Se produce una disminución progresiva del funcionamiento máximo y la capacidad de reserva de todos los órganos del cuerpo, incluso la piel.6) La piel es el órgano más extenso del cuerpo humano y participa de forma activa en la defensa del organismo. En la mayor parte de las ocasiones es la primera barrera frente a disímiles agresiones externas. Posee otras funciones como inmunológica, metabólica, melanogénica, termorreguladora y sensorial.7
El envejecimiento de la piel comprende dos fenómenos distintos. El envejecimiento intrínseco, es un cambio universal, solo atribuible al paso del tiempo; el envejecimiento extrínseco es la superposición del envejecimiento intrínseco y los cambios atribuibles a agresiones ambientales crónicas, como la exposición al sol y el efecto de los carcinógenos ambientales presentes en el aire. El envejecimiento cutáneo extrínseco (fotodaño), produce cambios significativos en la piel. La dermis es la zona más afectada.
El envejecimiento cutáneo afecta el recambio celular epidérmico, el grosor y la celularidad de la dermis, el funcionamiento de las glándulas sebáceas y sudoríparas, la termorregulación, la respuesta inmune, entre otras funciones, que hace que su prevención o al menos la modulación de sus efectos, mejore ostensiblemente la calidad de vida. Por este motivo, los componentes dérmicos de la piel han sido objeto de gran interés en los últimos años, con la esperanza de identificar marcadores biológicos del envejecimiento.
En las últimas décadas debido al aumento del tiempo libre, la tendencia a la exposición solar y al aumento del tabaquismo, el envejecimiento cutáneo se ha convertido en un problema social de importancia creciente y en un motivo frecuente de demanda sanitaria.8
Las características de la piel como órgano han sido ampliamente estudiadas, al tener en cuenta los aspectos morfofuncionales. Sin embargo, aunque se han realizado estudios de carácter cuantitativo, sobre este órgano,9 su proceso de envejecimiento,10,11,12 sobre neoplasias malignas de la piel,13 aún son insuficientes, si se tiene en cuenta las potencialidades que brinda la morfometría.
La Morfometría representa un campo de estudio en el que se realiza cuantificación de las características morfológicas de un objeto e incluye un grupo de métodos de estudio que pueden ser aplicados a los estudios histológicos e histopatológicos. Bien empleada puede aportar valiosa información para la comprensión de procesos fisiológicos y patológicos.14
En la Universidad de Ciencias Médicas de la provincia Holguín, en colaboración con otras instituciones del territorio, existe una larga trayectoria investigativa en estudios morfométricos, en diferentes tejidos y órganos: piel,13 mama,15 tiroides,16) con buenos resultados; por tanto hay antecedentes y experiencia en este tipo de estudios.
A partir de lo expuesto con anterioridad y con la finalidad de aportar al estudio de la piel, en particular la dermis, que constituye una región muy vulnerable a los cambios producidos por el envejecimiento, se realiza la investigación, con el objetivo de caracterizar la dermis papilar sana, en pacientes de diferentes edades y sexo, al tener en cuenta los indicadores morfométricos.
Métodos
Se realizó un estudio de una serie de casos constituida por 12 pacientes con carcinoma basocelular, diagnóstico confirmado por el servicio de Anatomía Patológica del Hospital Provincial Vladimir Ilich Lenin de la provincia Holguín, en el año 2019, a los que se les realizó biopsia escisional de la lesión y de márgenes anchos de piel sana alrededor de la misma.
Los pacientes que conformaron la muestra no probabilística a conveniencia cumplieron los siguientes criterios:
- Pacientes a quienes se les extirpó el tumor con un margen de seguridad amplio de piel.
- Biopsia realizada de la piel sana tomada de la zona del margen de seguridad de tejido extirpado y diagnóstico realizado por el especialista en Anatomía Patológica del servicio de la institución, quien garantizó seguridad en la resección total del carcinoma basocelular.
Los pacientes incluidos según sexo se distribuyeron en tres grupos de edades comprendidas entre 31 a 50 años, 51 a 70 años y 71 a 90 años.
Entre los métodos teóricos se emplearon la revisión documental, análisis-síntesis de la información seleccionada y el método histórico-lógico para resumir e interpretar la misma. Del nivel empírico la observación y la Morfometría.
Del total de los bloques de parafina con las muestras de piel sana de cada paciente incluidas en ellos, se realizó la selección de los que cumplieron con los elementos de calidad requeridos que permitieran el estudio histológico y morfométrico posterior.
A los bloques escogidos de cada paciente se les realizaron cortes histológicos de 8-10 micrómetros de grosor, con un micrótomo vertical HistoLine modelo MR 3 000, colocando de tres a cuatro cortes por portaobjeto. A partir de esto se seleccionaron cuatro portaobjetos de cada muestra, en los que se empleó coloración con hematoxilina y eosina.
Se mantuvo control sobre la calidad del proceso en todos los pasos, así como en sus resultados, al tener en cuenta la no existencia de artefactos en la preparación que pudieran interferir luego en la observación o atentar en la definición de sus características. Se tuvo en cuenta además la presencia de las dos capas básicas o esenciales de la piel: epidermis y dermis.
El estudio histológico cualitativo de la piel se realizó mediante la observación de las imágenes en un microscopio chino Motic, modelo BA-210 con cámara de tres megapíxel de la compañía Motic y con aumentos de 40X, 100X, 400X y 1000X (este último con lente objetivo de 100X de inmersión en aceite). A partir de esto se realizó descripción de las características histológicas de la dermis estudiada.
Después del análisis cualitativo, las imágenes se descargaron en una computadora Acer, al que estaba acoplado el sistema de captura del microscopio.
El aumento total (At) de observación de las imágenes capturadas en la computadora se calculó por () Fórmula 1
Donde:
At: Aumento total.
Ao: Aumento del lente objetivo.
ALR: Aumento del lente reductor (0,5).
LP: Largo de pantalla (340 mm).
SC: Sensor de la cámara digital (8 mm).
De esta manera el aumento total con el que se trabajaron las imágenes histológicas fue de: 2125 x con lente objetivo de 100x.
Para la realización de las mediciones del indicador morfométrico se empleó la aplicación ImageJ, versión 1.49p del National Institutes of Health, USA, 2015.
La calibración del lente objetivo empleado se realizó con un portaobjeto de calibración milimetrado múltiple de la compañía Motic.
Los parámetros morfométricos estudiados en la dermis papilar fueron:
- Densidad de área de células.
- Densidad de área de sustancia amorfa.
Los conteos y mediciones se hicieron con un aumento total de 1000 x.
Densidad de área de células:
Es un indicador morfométrico de carácter estereológico, en el que se calcula la relación que guarda el área ocupado por células respecto a un área constante de tejido.
Su fórmula se puede presentar como (Fórmula 2):
Donde:
DAC: Densidad de área de células.
AC: Área ocupada por células que se encuentra en ATt.
ATt: Área total de tejido.
Para cumplir un principio esencial de la morfometría, la aleatoriedad de las mediciones, se utiliza con la opción Grid del submenú Plugins de la aplicación ImageJ que permite superponer sobre la imagen digital un conjunto de herramientas como: un cuadriculado, una malla de puntos, una malla de cruces o un sistema de líneas paralelas, entre otras.
En el estudio se utiliza la malla de cruces, lo que permite contar solo aquellos núcleos sobre los que coinciden las cruces de la malla. El área que representa cada cruz fue de 50 micrómetros cuadrados (Figura 1).
Figura 1 Presentación de una imagen capturada para mostrar el sistema de aleatoriedad empleado. Imagen a 2125x de dermis papilar sana. Tinción H y E. (Imagen de los autores).
Se contaron los núcleos que quedaron incluidos en un área total de tejido de 11 870.51 µm2 (el área la calcula automáticamente el sistema), el total de núcleos se multiplica por 50 µm2 (área que representa cada cruz de la malla) y el resultado se divide por el área total de tejido, de manera tal que sus resultados expresan la densidad de área ocupada por células, como lo muestra la fórmula descrita.
Densidad de área de sustancia amorfa:
Se calcula sumando los valores de las densidades de áreas ocupadas por células y fibras colágenas y restando ese valor al área total de tejido.
Su fórmula es (Fórmula 3):
Donde:
DASA: Densidad de área de sustancia amorfa.
DAC: Densidad de área de células.
DAF: Densidad de área de fibras colágenas.
ATt: Área total de tejido.
Para el cálculo de la densidad de área de fibras colágenas se realizó igual procedimiento, que el explicado para el cálculo de la densidad de área de células, a través de la malla de cruces, lo que permite contar solo aquellas fibras sobre las que coinciden las cruces de la malla según mostró figura 1.
La densidad de área de fibras colágenas es un indicador morfométrico de carácter estereológico, en el que se calcula la relación que guarda el área de las fibras colágenas respecto a un área constante de tejido.
Su fórmula se puede presentar como(Fórmula 4):
Donde:
DAF: Densidad de área de fibras colágenas.
AF: Área ocupada por fibras colágenas que se encuentra en ATt.
ATt: Área total de tejido.
El editor estadístico utilizado fue el MyStat versión 12 del 2015 de la compañía SyStat. Se aplicaron cálculos de estadística descriptiva para resumir la información, como media aritmética, desviación estándar, coeficiente de variación e intervalo de confianza del 95 %, con una p ≤ 0,05. Se empleó estadística inferencial en el análisis de la varianza para la comparación por grupos de edades y la prueba de diferencias entre medias para la comparación por sexo.
Se tuvo en cuenta los principios éticos para la investigación médica con datos provenientes de seres humanos de la World Medical Association Declaration of Helsinki y la Guía de OMS para los Comité de Ética de las Investigaciones, establecida por el Council for International Organizations of Medical Sciences (CIOMS) en el 2002.
Resultados
La descripción cualitativa de las láminas histológicas empleadas en la investigación, constituye un método de gran utilidad que permite corroborar, la resección total del tumor, definir conducta terapéutica, pronóstico y ajustar el tratamiento de acuerdo a las normas.
La caracterización cualitativa de la dermis papilar de la piel sana de los pacientes objeto de estudio, permitió sintetizar las siguientes características: Los núcleos de fibroblastos se observan con menor frecuencia que en los patrones de piel joven; de forma general la matriz extracelular se aprecia con una mayor densidad; se observa compactación de las fibras colágenas, lo que le brinda un aspecto más denso que en los patrones de piel joven (Figura 2).
Figura 2 Microfotografía óptica de corte histológico de piel sana. Coloración H y E. Aumento 2125x. Leyenda: flecha roja dermis papilar. (Imagen de los autores).
En consideración con los resultados del estudio histológico cualitativo de la dermis papilar, se procedió a determinar el valor de los diferentes parámetros morfométricos definidos en el trabajo y que permiten complementar la caracterización de la mencionada región de la piel identificada como sana.
La caracterización de la densidad de área de células, según sexo y grupos de edades muestra los valores media aritmética y desviación estándar. Estos indicadores se comportaron dentro del intervalo de confianza obtenido en el estudio para cada grupo de edad, en ambos sexos. En el sexo masculino mostró los siguientes valores: 0,056 ± 0,024 de 31-50 años; 0,040 ± 0,016 de 51-70 años; 0,048 ± 0,019 de 71-90 años y en el femenino: 0,105 ± 0,011 de 31-50 años; 0,059 ± 0,025 de 51-70 años; 0,066 ± 0,026 de 71-90 años (Tabla 1).
Tabla 1 Densidad de área de células, según sexo y grupos de edades
* Representan 2 989 núcleos contados.
Al realizar el análisis de la varianza, se obtuvo en el sexo masculino, una F=3,777 y la p ≤ 0,026 y para el sexo femenino, F=5,288 y p ≤ 0,007. Al comparar la densidad de área de células, en todos los grupos de edades, por sexo, existe diferencia significativa, en el sexo femenino la densidad es mayor. Junto a ello, los resultados mostraron, que en ambos sexos la densidad de área de células tiende a decrecer según avanza la edad.
La caracterización de la densidad de área de sustancia amorfa, según sexo y grupos de edades muestra los valores media aritmética y desviación estándar. Estos indicadores se comportaron dentro del intervalo de confianza obtenido en el estudio para cada grupo de edad, en ambos sexos. En el sexo masculino mostró los siguientes valores: 0,789 ± 0,054 de 31-50 años; 0,834 ± 0,031 de 51-70 años; 0,776 ± 0,061 de 71-90 años y en el femenino: 0,740 ± 0,017 de 31-50 años; 0,796 ± 0,056 de 51-70 años, 0,808 ± 0,044 de 71-90 años (Tabla 2).
Al realizar el análisis de la varianza, se obtuvo para el sexo masculino una F =11,127 y la p ≤ 0,001. En el sexo femenino los valores de la F y la p son NS.
Al comparar la densidad de área de sustancia amorfa, en todos los grupos de edades, por sexo, no existió diferencia significativa en el sexo femenino y en el sexo masculino los resultados mostraron tendencia a decrecer.
Discusión
Las características cualitativas de la dermis papilar de la piel sana de los pacientes objeto de estudio, están en correspondencia con lo descrito en diversos trabajos,7,17,18 que han estudiado la organización histológica de la piel y particular de la dermis, así como el proceso de envejecimiento. Para la descripción cualitativa de la dermis papilar, se emplearon los indicadores definidos en el estudio de Sánchez et al.10)
Como consecuencia del envejecimiento cutáneo intrínseco a nivel dérmico, se produce una disminución de la celularidad de la misma, el número de fibroblastos es menor, (7,8,19 disminuye su capacidad mitótica, así como hay una reducción en el número y en la capacidad de biosíntesis de los mismos.19
Sánchez et al.,10 Avila y Boue,11 realizan una valoración cualitativa de las láminas histológicas de piel empleadas y describen en la dermis, que los núcleos de fibroblastos se observan con menor frecuencia que en los patrones de piel joven; resultados que coinciden con los obtenidos por los autores del trabajo.
Wolff et al.6 y Castelo y González,8) han investigado y descrito las alteraciones bioquímicas de la sustancia fundamental dérmica en la piel envejecida. La sustancia fundamental compuesta por GAG, glucoproteínas y agua disminuye y se altera.
Los glucosaminoglucanos (GAG) y los proteoglucanos de la sustancia fundamental disminuyen respecto del peso seco o el contenido de colágeno de la piel, en especial el ácido hialurónico, quizás debido a la disminución en la secreción de hialuronidasa o a la menor capacidad de extracción de ácido hialurónico, dando lugar a la pérdida de la capacidad de retener agua en los tejidos y las células. La pérdida de agua cutánea, trae como consecuencia la aparición de xerosis, arrugas, atrofia y sequedad.6
En cuanto a los resultados obtenidos por sexo, los autores del estudio consideran, que pueden estar relacionados con las diferencias entre el envejecimiento de hombres y mujeres, los hombres están mayormente expuestos a factores de riesgo ambientales vinculados al envejecimiento extrínseco, como la exposición al sol, el tabaquismo, la contaminación ambiental y de forma general, las mujeres cuidan más de su apariencia física, utilizan con mayor frecuencia medidas de fotoprotección. Yuni y Urbano,20 han demostrado que varones y hembras tienen modos diferenciados de envejecer.
Las diferencias entre la piel masculina y femenina están influenciadas por el factor hormonal.6,21) La testosterona como hormona sexual masculina determina las características de la piel del hombre y le confiere una estructura diferente en relación con la piel femenina. En promedio la piel masculina es alrededor del 20 % más gruesa que la femenina. Contiene más colágeno y tiene un aspecto más compacto y firme.6
En la mujer, los estrógenos y la progesterona modulan la inflamación cutánea y aumentan la síntesis de colágeno .Los estrógenos mantienen la humedad de la piel a través del incremento de los glucosaminoglucanos, estimulan la proliferación de los queratinocitos y más discretamente de los fibroblastos dérmicos, así como reducen la actividad metaloproteinasa de la matriz extracelular. Esta actividad participa en cierta medida en algunos de los cambios cutáneos que se producen en el envejecimiento y la acción estrogénica podría modular la intensidad de los mismos. Luego de la menopausia, las concentraciones de estrógenos descienden más del 90 %. Como células derivadas de la piel expresan receptores de estrógenos y andrógenos, es probable que ambas hormonas desempeñen una función en la estructura y la función de la piel.6,8,21) La piel constituye el órgano no reproductivo de mayor tamaño del cuerpo femenino en que los estrógenos presumiblemente deben tener una actuación manifiesta.8 Es reconocido por Wolff et al.6 Castelo y González8 y Yuni y Urbano,20 que el déficit estrogénico posmenopáusico tiene una profunda influencia en la piel.
Aunque no existe evidencia científica en las referencias de los repositorios consultados sobre estudios morfométricos del comportamiento de la densidad de área de células y de la densidad de área de la sustancia amorfa en la dermis, los resultados obtenidos en el presente trabajo se corresponden con los relacionados en la bibliografía referida, los que están en correspondencia con los cambios que se producen en la dermis por el envejecimiento, como la disminución en el número de fibroblastos y de su capacidad sintética,7,8,19 pues son estas las células que sintetizan los componentes de la matriz extracelular, tanto amorfa (sustancia fundamental) como las fibras.21
Unido a lo anterior, los autores del trabajo consideran, que hay que tener en cuenta que la piel estudiada procede de biopsias de pacientes con carcinoma basocelular y aunque las muestras de piel sana fueron obtenidas de los márgenes anchos libres de lesión, definidos por el patólogo, el patrón de referencia para el diagnóstico de estas lesiones es solo el estudio histopatológico cualitativo, por lo que recomiendan que los resultados obtenidos en el estudio podrían ser una herramienta auxiliar para complementar el diagnóstico cualitativo que realiza el patólogo, confirmando que las lesiones fueron totalmente resecadas, al incluir los parámetros morfométricos.
Conclusiones
La densidad de área de células tiende a decrecer con la edad y fue significativamente diferente entre los sexos, mayor en el sexo femenino.
La densidad de área de sustancia amorfa decrece en el sexo masculino con el paso de los años, mientras que en el sexo femenino, no mostró diferencias significativas.
