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Revista de Salud Animal

Print version ISSN 0253-570XOn-line version ISSN 2224-4700

Abstract

FERNANDEZ TORRES, José Miguel et al. Anticuerpo policlonal de conejo contra la proteína Erns para la detección del virus de la peste porcina clásica. Rev Salud Anim. [online]. 2019, vol.41, n.3, e10.  Epub Dec 01, 2019. ISSN 0253-570X.

La peste porcina clásica (PPC) es una enfermedad endémica en numerosos países. Una herramienta clave para la confirmación en laboratorio de la PPC es el diagnóstico diferencial entre cerdos vacunados y los que están realmente infectados. Muchos ensayos inmunoadsorbentes ligados a enzima (ELISA) están basados en la captura de anticuerpos en los sueros, pero estos ensayos no pueden utilizarse en aquellos animales que están persistentemente infectados. En tales casos, un ELISA de captura de antígeno podría ser una buena elección para diferenciar los animales vacunados de aquellos que están infectados. Con el objetivo de producir un anticuerpo policlonal que permita esta técnica, se inmunizaron dos conejos con proteína Erns recombinante. El anticuerpo fue conjugado a peroxidasa de rábano picante (HRP) y la dilución óptima de trabajo fue de 1:64 000 en un ELISA directo. Se evaluaron diferentes condiciones de recubrimiento para atrapar Erns recombinante en un ELISA y se concluyó que el recubrimiento a 10 μg/mL aseguraría mayor captura. En el ELISA se pudo detectar la Erns de una mezcla de sueros de cerdos vacunados con la cepa china del virus de la peste porcina clásica (VPPC). Además, no se observó reacción en sueros de animales sanos ni con sueros de animales vacunados con Porvac®, vacuna de subunidad basada en la glicoproteína E2. Se concluyó que el anticuerpo policlonal generado puede reconocer la proteína Erns viral en sueros porcinos y que podría ser utilizado en un ELISA sándwich para el diagnóstico de la PPC, en aquellos animales persistentemente infectados o inmunodeprimidos.

Keywords : anticuerpo policlonal anti-Erns; VPPC; ELISA.

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