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Biotecnología Aplicada
versión On-line ISSN 1027-2852
Resumen
SOUBAL, Jean P et al. Procedimiento de conjugación del polisacárido capsular de Streptococcus pneumoniae serotipo 6B a toxoide tetánico. Biotecnol Apl [online]. 2013, vol.30, n.3, pp.208-215. ISSN 1027-2852.
Anualmente Streptococcus pneumoniae provoca 826 mil muertes de niños menores de cinco años. El estudio del serotipo 6B, uno de los de mayor incidencia, es uno de los objetivos del proyecto de investigación-desarrollo para obtener una vacuna conjugada en Cuba. La estrategia de conjugación del polisacárido capsular del serotipo 6B (PS6B) fue fragmentarlo mediante hidrólisis ácida, activarlo mediante oxidación con peryodato y conjugarlo a toxoide tetánico (TT) mediante aminación-reductiva. Existe poca información sobre cómo estas modificaciones afectan las características físico-químicas y antigénicas del polisacárido, en particular para PS6B, a pesar de ser el menos inmunogénico de los polisacáridos de S. pneumoniae. En tal sentido, se estableció un procedimiento para obtener conjugados inmunogénicos de PS6B a TT. Se crearon condiciones de reacción para obtener el polisacárido en tres rangos de tallas y niveles de oxidación. Se determinó que la fragmentación del polisacárido por debajo de 10 kDa y la oxidación de más del 24 % de las unidades repetitivas implican pérdida de antigenicidad. La talla del polisacárido tuvo impacto en las características físico-químicas de los conjugados en las condiciones evaluadas; no así el nivel de oxidación. A diferencia del polisacárido nativo, conjugados de PS6B de 10 a 30 kDa y 30 a 100 kDa fueron inmunogénicos en conejos, con evidencias de respuesta timo-dependiente. Los procedimientos que incluyen la obtención del PS6B de 10 a 30 kDa y 30 a 100 kDa con niveles de oxidación entre 8 y 18 % de las unidades repetitivas oxidadas, permitieron obtener conjugados a TT reproducibles e inmunogénicos.
Palabras clave : polisacárido; conjugado; Streptococcus pneumoniae; serotipo 6B.