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Revista Cubana de Farmacia

versión impresa ISSN 0034-7515versión On-line ISSN 1561-2988

Rev Cubana Farm v.38 n.1 Ciudad de la Habana ene.-abr. 2004

 

Productos Naturales

Instituto Politécnico de Química "Mártires de Girón"

Identificación fitoquímica de las hojas y ramas de la Helietta cubensis Monach-Moldenke, especie endémica de Cuba

Sandra del Castillo Ochoa,1 José Antonio González-Lavaut,2 Johannes González Guevara,3 Sylvia Prieto-González4 y Armando Urquiola-Cruz5

Resumen

Se describe el tamizaje fitoquímico preliminar de las hojas y ramas de la Helietta cubensis Monach -Moldenke, especie endémica cubana que crece en la cima de los mogotes de Pinar del Río. La detección de los metabolitos secundarios se realizó mediante reactivos de identificación específicos para cada familia de compuestos. En ambas partes de la especie se identificaron en alta abundancia flavonoides y lactonas/coumarinas; en baja concentración se detectaron triterpenos/esteroides, lípidos/aceites esenciales, saponinas y carotenos y no la presencia de aminas y alcaloides. Mediante el análisis por cromatografía de capa fina se pudo corroborar los resultados obtenidos en la identificación de alcaloides, flavonoides y coumarinas. En general, los resultados obtenidos fueron homogéneos para ambas partes de la planta, y constituyen el primer reporte de la composición química para esta especie.

Palabras clave: Helietta cubensis, endémica, Cuba, fitoquímica, cromatografía.

Muchos de los medicamentos utilizados hoy día proceden de fuentes naturales. La medicina alopática, por ejemplo, utiliza universalmente 119 compuestos, con estructuras definidas, los que son aislados a partir de cerca de 90 especies de plantas superiores.1 De las aproximadamente 250 000 especies de plantas superiores que existen, solo del 5 al 15 % han sido sistemáticamente investigadas para determinar la presencia de algún compuesto bioactivo.2

La flora cubana posee un gran número de géneros de plantas (aproximadamente cerca de 1 200), cuyas especies, algunas de ellas endémicas, poseen propiedades medicinales reconocidas.3 De esta manera, hasta 1995 se refiere un total aproximado de 1 170 especies medicinales4 (Fuentes VR. La flora medicinal de Cuba. (Conferencia). VII Jornada Científica de la Estación Experimental Agronómica INIFAT-MINAGRI, Santiago de las Vegas, 4-8 de abril, 1994).

Helietta cubensis Monach & Moldenke es una planta endémica cubana3 perteneciente a la familia Rutacae. De acuerdo con la búsqueda de información científica acerca de la planta ,solo se encontró un reporte donde se describen sus características botánicas.3 Esto denota que es una especie poco estudiada, tanto química como farmacológicamente. Se encontró por primera vez el 21 de julio de 1944 en Punta Gorda, Oriente.

En el presente trabajo se realiza la evaluación fitoquímica de las partes aéreas de la Helietta cubensis Monach-Moldenke colectadas en Pinar del Río.

Métodos

La especie Helietta cubensis Monach & Moldenke fue colectada en abril de 2001 en la provincia de Pinar del Río, muestras de esta se conservan en el Herbario del Instituto Pedagógico de Pinar del Río (HPPR-9284). Todo el material vegetal fue secado a la sombra en atmósfera ambiental durante 20 días. Posteriormente se aislaron las hojas y las ramas, cada parte separada se pulverizó en un molino de cuchilla y se conservó en frascos ámbar.

El método empleado para el tamizaje fitoquímico fue una modificación del reportado por Schabra.5 El procedimiento consistió en la preparación de 3 extractos a partir de 5 g del material vegetal: un primer extracto se preparó por suspención del material vegetal en 50 mL de n-hexano y reflujo de la mezcla durante 30 min. Después de enfriar a temperatura ambiente y decantar, se separó el extracto (extracto en n-hexano) del material vegetal. A este último se le adicionaron 50 mL de etanol y se reflujó como en el caso anterior para obtener el extracto etanólico. Por último, se obtuvo el extracto acuoso a partir del material vegetal previamente extraído con n-hexano y etanol, según el mismo procedimiento.

Luego de la preparación de los extractos se realizaron los diferentes ensayos mediante reacciones de identificación, por la aparición de color o no o precipitados para determinar la presencia de los metabolitos de interés o no.
Para la cromatografía de capa fina se empleó el método reportado por Wagner.6

Resultados

En el anexo se muestra el resultado general del tamizaje fitoquímico por familia de compuestos de cada parte de la especie estudiada.

Como muestra el anexo, la composición por grupos químicos correspondiente a los metabolitos secundarios presentes en las partes aéreas (ramas y las hojas) de la especie Helietta cubensis fueron semejantes, con excepción de los lípidos/aceites esenciales que se encuentraron en las ramas y la identificación de los carótenos en hojas.

Discusión

Los metabolitos secundarios que se identificaron con una gran abundancia en ambas partes de la planta fueron los flavonoides y lactonas/coumarinas, y no se detectaron, a su vez, aminas y alcaloides.

En el caso de la identificación negativa para hojas y ramas se puede inferir que no se encuentran en la planta o están en una baja concentración.

Para corroborar los resultados para alcaloides se realizó la identificación por la CCF después de una extracción específica.6 Luego de revelar la placa con reactivo de Dragendorff, se pudo constatar finalmente la no presencia de estos compuestos en hojas y ramas.

Para la identificación de flavonoides también se empleó la CCF. Por esta vía se confirmó el resultado positivo al observar en la placa con luz UV a 365 nm una serie de manchas características de este tipo de metabolito (verde y azul fluorescentes) a valores de Rf: 0,58 y 0,91 para el extracto de hojas y de 0,65 para ramas.6

El resultado positivo en la identificación de lactonas/coumarinas también fue corroborado a través del análisis por CCF, observando en la placa por UV a 365 nm la presencia de manchas azul intenso y azul-verde que son características de estas estructuras,6 a valores de Rf: 0,43; 0,54 y 0,78 para el extracto de las hojas y de 0,44; 0,52; 0,76 y 0,88 para ramas.

Resulta importante destacar la no identificación de fenoles/taninos y saponinas en el extracto etanólico para hojas y ramas, lo cual puede inferir la presencia de estructuras con alto grado de grupos hidroxilo enlazados a la molécula o en forma glicosidadas, que incrementan la solubilidad en medio acuoso, donde se identificaron con una gran abundancia. Este mismo análisis puede extenderse para las quinonas, las cuales no se detectaron en el extracto hexánico y en el etanólico se identificaron en una alta concentración.

De manera general se identificaron en gran abundancia flavonoides y lactonas/coumarinas. Se detectaron en una baja concentración triterpenos/esteroides, lípidos/aceites esenciales, carotenos y mucílagos. No se detectó la presencia de alcaloides y aminas en ninguna de las 2 partes de la planta. Los resultados del análisis por cromatografía de capa fina permitieron confirmar la no detección de alcaloides y la presencia de flavonoides y coumarinas. Todos estos resultados constituyen el primer reporte fitoquímico de esta especie.

Agradecimientos

Los autores desean agradecer al soporte brindado por el Proyecto Ramal MINSAP/Cuba (Código 0008001), también a la Base de Datos Napralert por el acceso a la información necesaria.

Anexo. Resultados del tamizaje fitoquímico de las hojas y ramas de Helietta cubensis

 

 

 

Extracto etanol

 

 

 

Ensayos (hojas)

Extracto

n-hexano

Residuo

Disolución ácida

Directo

Extracto acuoso

 

Alcaloides*

-

No

-

No

-

 

Triterpenos y esteroides

++

++

No

No

No

 

Quinonas

-

+++

H2O

CH3Cl

No

No

 

No

-

 

Lactonas/coumarinas

+++

No

No

+++

No

 

Lípidos/aceites esenciales

-

No

No

No

No

 

Saponinas

No

No

No

-

+

 

Fenoles y/o taninos

No

No

No

-

+++

 

Aminas

No

No

No

-

No

 

Compuestos reductores

No

No

No

++

-

 

Flavonoides

No

No

H2O

CH3Cl

No

+

 

++

-

 

Glicósidos cardiotónicos

No

No

H2O

CH3Cl

No

No

 

No

+

 

Carotenos

+

No

No

No

No

 

Mucílagos

No

No

No

No

+

 

Ensayos (ramas)

Extracto

n-hexano

Extracto etanol

Extracto acuoso

 

Residuo

Disolución ácida

Directo

 

Alcaloides*

-

No

-

No

-

Triterpenos y esteroides

+

-

No

No

No

Quinonas

-

+++

H2O

CH3Cl

No

No

No

-

Lactonas/coumarinas

++

No

No

++

No

Lípidos/aceites esenciales

+

No

No

No

No

Saponinas

No

No

No

-

++

Fenoles y/o taninos

No

No

No

-

+++

Aminas

No

No

No

-

No

Compuestos reductores

No

No

No

++

-

Flavonoides

No

No

H2O

CH3Cl

No

++

++

+

Glicósidos cardiotónicos

No

No

H2O

CH3Cl

No

No

No

+

Carotenos

-

No

No

No

No

Mucílagos

No

No

No

No

++

Leyenda: Ensayo positivo (+) (contenido: + poco, ++ medio, +++ abundante); ensayo negativo (-); no se realiza ensayo (No).

Summary

The preliminary phytochemical screening of the leaves and branches of Helietta cubensis Monach-Moldenke, a Cuban endemic species that grows in the hummocks of Pinar del Río is described. The detection of the secondary metabolites was carried out by reagents of identification that are specific for each family of compounds. A great number of flavonoids and lactones/coumarines was identified in both parts of the species. A low concentration of triterpenes/steroids, lipids/essential oils, saponins and carotenes was observed, whereas amines and alkaloids were not detected. The results obtained in the identification of alkaloids, flavonoids and coumarines were corroborated by thin layer chromatography. In general, the results attained were homogeneous for both parts of the plant and they are the first report about the chemical composition of this species.


Key words: Helietta cubensis, endemic, Cuba, phytochemistry, chromatography.

Referencia Bibliográficas

  1. Chediwick DJ, Marsh J. Bioactive compounds from plants. New York: Ed. John Wiley; 1990. p.25-36.
  2. Cragg GM, Newman DJ. Discovery and Development of antineoplastic agent from natural sources. Cancer Investig 1999;17(2):153-63.
  3. Roig JT. Plantas medicinales, aromáticas y venenosas de Cuba. La Habana: Editorial Ciencia y Técnica; 1974. p.1-58.
  4. Prieto S, González JA, Molina J. Contribución a una terapéutica natural en el tratamiento antiviral. Rev Latinoam Quím 2000;28:108.
  5. Schabra SC, Ulso FC, Mshiu EN. Phytochemical screening of tanzanian medicinal plants. I. J Etnopharm 1984;11:157-79.
  6. Wagner H, Bladt S, Zgainski E. Plant Drug Analysis. Berlín: Ed. Scott; 1983, pág. 163-165, 299-304.

Recibido: 7 de noviembre de 2003. Aprobado: 11 de diciembre de 2003.
Prof. Sandra del Castillo Ochoa. Instituto Politécnico de Química "Mártires de Girón". Ave 17 y 5ta. Ave, Rpto. Flores, municipio Playa, Ciudad de La Habana, Cuba. E-mail: jaglavaut@cqf.co.cu

 

1 Profesora. Instituto Politécnico de Química "Mártires de Girón"
2 Doctor en Ciencias Farmacéuticas. Investigador Auxiliar. Centro de Química Farmacéutica.
3 Master en Ciencias. Investigador Aspirante. Centro de Química Farmacéutica.
4 Doctor en Ciencias Químicas. Investigadora Titular. Centro de Química Farmacéutica.
5 Doctor en Ciencias Biológicas. Investigador Auxiliar. Jardín Botánico de Pinar del Río.

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