Rev Cubana Med Trop 1996;48(1)

Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kourí"

Efecto de las dosis letales de plantas de la familia Agavaceae sobre la actividad cardíaca y la oviposición de Biomphalaria havanensis (Mollusca: Planorbidae)

Lic. ROSALBA DIAZ GARCES¹ y Lic. JOSE R. FERRER LOPEZ†

---

¹ Licenciada en Biología. Centro Provincial de Higiene y Epidemiología de Ciudad de La Habana

---

RESUMEN

Se trabajó con las dosis letales de 3 agaváceas, Agave legrelliana, Agave fourcroydes y Agave franzosinii y se determinó la influencia de las LD50 y LD90 de las agaváceas en la disminución de la actividad cardíaca, se obtuvo como resultado que A. fourcroydes presenta el extracto acuoso que más influyó en la disminución de la frecuencia de los latidos del corazón. Las LD90 de las agaváceas también afectan el desarrollo embrionario de los huevos de 1 día y 7 días de puestos, se detectó mayor afectación en el caso de los primeros. A fourcroydes y A. legrelliana, respectivamente, son los que más influyen en la disminución del número de huevos. El número de huevos puesto por moluscos sobrevivientes a la aplicación de la LD90 de A. franzosinii es menor, así como el número de huevos eclosionados.

Palabras clave: FRECUENCIA CARDIACA/efecto de drogas; OVIPOSICION; BIOMPHALARIA.

INTRODUCCION

Existen áreas en el mundo tropical y subtropical donde la esquistosomiasis es endémica. En estos lugares se ha probado la actividad molusquicida de numerosas plantas y esto es evidenciado, porque tienen entre otras actividades biológicas, las de ser insecticidas, piscicidas y molusquicidas.¹ Además, los productos de estas plantas no afectan al medio, a diferencia de los molusquicidas químicos. Lambert² demostró que el endod-s extraído de granos tiernos de la planta Phytolacca dodecan dra es menos tóxico al medio que los molusquicidas sintéticos. La familia Agavaceae ha sido estudiada y se ha observado que existen diferentes especies con relativa actividad molusquicida.³ En esta familia se estudió la planta Agave wightii y su cultivo por medio de yemas; se secaron y se extrajeron saponinas esteroides y se observó que las yemas produje ron cantidades superiores de saponinas en comparación con cualquier otra parte de la planta.⁴

Estudios recientes en Cuba con Agave legrelliana, perteneciente a la familia Agavaceae por Ferrer et al.⁵ y Ferrer y Díaz⁶ han demostrado la actividad molusquicida de Agave legrelliana, Agave fourcroydes y Agave franzosinii sobre Biomphalaria havanensis, hospedero intermedia rio de esquistosomiasis. El-Eman et al.⁷ demostraron que el polvo seco de Agave fulifera disminuyó la capacidad de puestas de huevos de Biomphalaria alexandrina. Se debe realizar el estudio del efecto de estos productos naturales sobre la capacidad reproductiva de los moluscos hospederos, ya que es determinante a la hora de evaluar su uso como buen molusquicida. Este trabajo pretende analizar la influencia que tienen los extractos acuosos de 3 agaváceas sobre la oviposición y la frecuencia cardíaca de B. havanensis.

MATERIAL Y METODO

Fueron utilizadas las plantas Agave legrellia na, Agave fourcroydes y Agave franzosinii pertenecientes a la familia Agavaceae.

Se trabajó con el jugo de las agaváceas para observar el efecto de la LD₅₀ y LD₉₀ de las plantas sobre la actividad cardíaca de los moluscos. Se utilizaron las dosis letales descritas por Ferrer et al. ⁵ y Ferrer y Díaz,⁶ que fueron para A. legrelliana LD₅₀ = 0,15 y LD₉₀ = 0,44 mL/L; para A. fourcroydes LD₅₀ = 12,45 y LD₉₀ = 22,88 mL/L y por último para A. franzosinii LD₅₀ = 8,76 y LD₉₀ = 15,91 mL/L. Para determinar la actividad cardíaca se utilizó un grupo de 10 moluscos con la LD₅₀ de cada planta, otro grupo con la LD₉₀ y un grupo como control, se contaron las pulsaciones del corazón en 1 minuto, cada 20 minutos durante 2 horas.⁸

El efecto ovicida de la LD₉₀ de las plantas sobre huevos con 1 día y con 7 días de puestos, y el comportamiento de la reproducción se determinó al colocar 4 réplicas con huevos de 1 día de puestos (10 huevos/réplica) con la LD₉₀ de cada planta durante 24 horas, más un grupo de 10 huevos de control. Lo mismo se realizó con huevos de 7 días de puestos, se compararon en ambos casos mediante un test de hipótesis de proporciones que utiliza el paquete estadístico Microstat.⁹ Por otra parte, se siguió la reproducción en los moluscos que sobrevivieron después de haber sido expuestos a las LD90 de las plantas estudiadas, se contaron los nidos, los huevos/nidos, y los huevos eclosionados.

RESULTADOS

Bajo la influencia de la LD₅₀ y LD₉₀ de A.legrelliana (figura 1) podemos observar cómo disminuye la frecuencia de los latidos del corazón, para la LD₉₀ alcanzan 38 latidos por minuto en un tiempo de 2 horas; sin embargo, existe un comportamiento poco variable en el transcurso del tiempo en los moluscos normales, de alrededor de 60 latidos por minuto.

En el caso de las LD₅₀ y LD₉₀ de A. fourcroydes (figura 2) en el tiempo cero (instante en que se añade el producto) la frecuencia de los latidos del corazón se hace más elevada que el control, para luego descender de forma acelerada y alcanzar 23 latidos por minuto a los 100 minutos de expuestos, de forma general muestra el mismo comportamiento para ambas dosis letales.

En la figura 3 se observa la variación de la frecuencia cardíaca bajo la influencia de las LD₅₀ y LD₉₀ de A. franzosinii. En este caso, la disminución de los latidos es acelerada, a los 80 minutos ocurre un ligero aumento que se hace más notable para la LD₅₀. Con posterioridad, desciende nuevamente y las LD₅₀ y LD₉₀ toman valores de 28 y 22 latidos/min, respectivamente.

Cuando estudiamos la influencia que tiene la LD₉₀ de las 3 plantas probadas al actuar durante 24 horas sobre los huevos de B. havanensis de 1 día de puestos, ésta se manifiesta como se muestra en la tabla 1. Al aplicar el test la hipótesis de proporciones y comparar los diferentes grupos con sus controles, el nivel de significación es muy alto.

TABLA 1. Actividad de las LD90 de las agaváceas sobre los huevos de 24 horas de desarrollo de Biomphalaria havanensis

Producto	No. de huevos	No. de huevos con  desarrollo embrionario   detenido	No. de huevos eclosionados	Nivel de   significación
Agave legrelliana  Control	46  9	39   1	7  8	< 0,001
Agave fourcroydes  Control	69 10	68  1	1  9	< 0,001
Agave franzosinii  Control	57 10	37 -	20 10	< 0,01

La tabla 2 indica la actividad que tiene la LD₉₀ obtenida del extracto acuoso de las agaváceas, sobre los huevos de B. havanensis con 1 semana de desarrollo embrionario. Observa mos que A. legrelliana influye significativamente en el detenimiento del desarrollo de los huevos. Esto se pone de manifiesto al observar los niveles de significación cuando se aplica el test de hipótesis de proporciones. También con A. franzosinii se obtienen resultados muy parecidos, aunque los valores son algo menores. A. four croydes es la planta que menos influencia tiene sobre las masas de huevos de 1 semana. TABLA 2. Actividad de la LD90 de las agaváceas sobre los huevos de 1 semana desarrollo de Biomphalaria havanensis

Producto	No. de huevos	No. de huevos con    desarrollo embrionario detenido	No. de huevos eclosionados	Nivel de   significación
Agave legrelliana Control	53 16	33 -	20  16	<0,01
Agave fourcroydes Control	53 11	14  -	39 11	< 0,001
Agave franzosinii Control	63 14	31 -	22 14	<0,05

La reproducción de los moluscos que sobrevivieron bajo el efecto de la LD₉₀ que sólo fueron moluscos tratados con A. franzosinii, se aprecia en la figura 4; no obtuvimos moluscos vivos con la aplicación de las LD₉₀ de las otras agaváceas. Existe cierta reducción del número de huevos puesto por molusco después que han sido sometidos a los efectos del producto, aunque al comparar los moluscos tratados con el control no se observan diferencias notables. Se observaron diferencias en el número de huevos que eclosiona, que es menor en los animales tratados que en los controles (figura 5).

DISCUSION

Cheng y Sullivan¹⁰ realizaron trabajos sobre la frecuencia cardíaca usando sulfato de cobre. Ellos plantean que monitorear la frecuencia cardíaca es un método cuantitativo efectivo para determinar el efecto del producto propuesto como molusquicida. Hay que tener en cuenta que al disminuir el ritmo cardíaco, disminuyen al mismo tiempo las funciones vitales del molusco, por lo que este parámetro es un indicador del efecto del molusquicida. Las aplicaciones de las LD₅₀ y LD₉₀ de las agaváceas, disminuyen la actividad cardíaca de B. havanensis, el extracto acuoso de A. fourcroydes se destaca como el que más influye en la disminución de la frecuencia de los latidos del corazón.

Cuando estudiamos la influencia que tiene la LD₉₀ sobre los huevos de B. havanensis de 24 horas, es indiscutible que tiene un marcado efecto ovicida ya que se detiene el desarrollo embrionario de la mayoría de los huevos.

Ritchie et al.¹¹ examinaron la susceptibilidad de los diferentes estadios de los huevos a los molusquicidas, para obtener información sobre el rango de dosis necesaria en el campo para el control de todos los estadios. Se nota evidente mente que los productos usados actúan de manera más eficaz sobre huevos de 1 día de puestos, esto puede deberse a una mayor permeabilidad de la membrana que recubre al huevo y permite el paso de los extractos. Sin embargo, en huevos de 1 semana, la cubierta del huevo parece presentar una mayor resistencia al paso de las sustancias activas, que pensamos sean del grupo de las saponinas. Kloos y McCullough¹² señalan diferentes plantas con probado efecto ovicida, entre las que se encuen tran Ambrosia maritima, Phytolacca dodecandra y Euphorbia cotonifolia. El extracto acuoso de Croton macrostachys tuvo un excelente efecto como ovicida contra diferentes estadios de los huevos de Biomphalaria pfeifferi.¹³ Podemos señalar que los huevos de B. havanensis de 1 día y 7 días de puestos fueron afectados por las LD₉₀ de las 3 especies de agaváceas lo que acrecenta el poder molusquicida de estas plantas, ya que presentan actividad ovicida. Se notó mayor afectación en los huevos de 1 día que en los de mayor tiempo. Se observó una reducción del número de huevos de B. havanen sis después de aplicar la LD₉₀ de A. franzosinii, lo que nos demuestra que en este caso la acción del extracto acuoso limita el número de huevos viables.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

1. Deverall BJ. Phytoalexins. En: Harbourne JB, ed. Phytochemi cal ecology. New York: Academic, 1972:217-33.
2. Lambert JD, Temmink JH, Marquis J, Parkhurst RM, Lugt CB, Lemmich E, et al. ENDOD: safety evaluation of a plant molluscicide. Regul Toxicol Pharmacol 1991;14(2):189-201.
3. Farnsworth NR, Henderson TO, Soejarto DD. Plants with potential molluscicidal activity. En: Mott KE, ed. Plant molluscicides. Published on behalf of the UNDP/World Bank/WHO Special Programme for Research and Training in Tropical Diseases. New York: John Wiley, 1987:131-204.
4. Sharma OP. Steriodal sapogenins of Agave wightii Dr. and Prain: a systematic study in vivo and in vitro. Phitol Res 1989;2(2):151-4.
5. Ferrer JR, Sánchez R, Perera de Puga G, Yong M, Sánchez J. Estudios de la acción molusquicida del maguey (Agave legrelliana), sobre Biomphalaria havanensis en el laboratorio. Rev Cubana Med Trop 1993;45(2):118-121.
6. Ferrer JR, Díaz R. Estudio de la actividad molusquicida de diferentes plantas sobre Biomphalaria havanensis hospedero intermedio potencial de esquitosomiasis en Cuba. Rev Cubana Med Trop 1994;46(2).
7. El-Eman MA, Shoeb HA, Mohmed AM, Saad AM. Agave filifera (Family Agavaceae) as a molluscicidal agent. Abstract 10th International Malacological Congress, Tubingen. 1989:64.
8. Malek E, Cheng T. Medical and economic malacology. New York: Academic, 1974:397.
9. Microstat. Sistema estadístico computarizado, ECOSOFT, 1984.
10. Cheng TC, Sullivan JT. The effect of cooper on the heart rate of Biomphalaria glabrata (Mollusca: Pulmonata). Comp Gen Pharmacol 1974;4:37-41.
11. Ritchie LS, Frick LP, Berrios-Duran LA, Fox I. Molluscicidal qualities of sodium pentachlorophenate (NaPCP) revealed by 6-hour and 24-hour exposures against representative stages and sizes of Australorbis glabatus. Bull World Health Organ 1963;29:421-4.
12. Kloss H, McCullough FS. En: Mott KE, ed. Plant molluscici des. Published on behalf of the UNDP/World Bank/WHO Special Programme for Research and Training in Tropical Diseases. Nueva York: John Wiley, 1987:45-108.
13. Daffalla AA, Amin MA. Laboratory and field evaluation of the molluscicidal properties of habat-el-mollok (Croton spp.). East Afr J Med Res 1976;3:185-95.

Recibido: 15 de diciembre de 1993. Aprobado: 20 de enero de 1994.

Lic. Rosalba Díaz Garcés. Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kourí". Apartado 601, Marianao 13, Ciudad de La Habana, Cuba.