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Revista Cubana de Medicina Tropical

versión impresa ISSN 0375-0760versión On-line ISSN 1561-3054

Rev Cubana Med Trop v.48 n.3 Ciudad de la Habana sep.-dic. 1996

 

Laboratorio de Investigaciones del SIDA

Detección de anticuerpos contra la proteína de 24 kd del VIH-1. Correlación clínico serológica

Dr. HÉCTOR DÍAZ TORRES,1 Dr. ELADIO SILVA CABRERA,2 Dra. ORFELINA RODRÍGUEZ GARCÍA,2 Lic. JORGE BÁRCENAS MOSES3 y Dra. ANA LUISA LUBIÁN CABALLERO4

RESUMEN

Se estudió la presencia de anticuerpos contra la proteína de 24 kd del VIH mediante el empleo paralelo del Western Blot DAVIH BLOT y del DAVIH AC P24 en muestras de suero de 176 pacientes en diferentes estadíos de la infección por VIH-1. Los resultados se correlacionaron con la clasificación clínica del paciente al momento de la toma de muestra y con la evolución posterior durante 6 meses. El 57 % de los pacientes con infecciones oportunistas menores y el 96 % de los enfermos de SIDA presentaron títulos bajos de anticuerpos. Los fallecidos no mostraron reactividad o presentaron títulos muy bajos en muestras tomadas antes del fallecimiento. Se observaron diferentes titulaciones en grupos de sueros con reactividad aparentemente uniforme en el Western Blot. Los resultados indican una adecuada correlaciòn clínico serológica; por lo que el ELISA DAVIH AC P24 pudiera ser útil en el seguimiento clínico de personas infectadas por el VIH-1.

Palabras clave: INFECCIONES POR HIV/sangre; INFECCIONES POR HIV/clasificación; HIV-1; SÍNDROME DE INMUNODEFICIENCIA ADQUIRIDA/ clasificación; ELISA/métodos; PROTEÍNA P24 DEL NÚCLEO DEL VIH.

INTRODUCCIÓN

Los individuos infectados por el virus de la inmunodeficiencia humana tipo 1 (VIH-1) desarrollan respuesta inmune contra todas las proteínas virales, se incluyen anticuerpos contra productos de los genes estructurales y reguladores del virus. Esta respuesta muestra diversos patrones durante la progresión de la enfermedad.1

La respuesta humoral contra las proteínas de envoltura, glicoproteínas de 41 y 120 kilodaltons (kd) se mantiene en el curso de la infección por VIH;2,3 mientras que en asociación con la progresión de la enfermedad declinan los anticuerpos contra la proteína de 24 kd (p24) del núcleo.1,4 La titulación de los niveles de anticuerpos anti p24 y de antígeno p24 se ha usado como marcador de la progresión de la infección por VIH.5 Con estos fines los sistemas de ELISA son los más utilizados y se han desarrollado según diferentes principios, como pueden ser los de tipo competitivo, indirecto o de inhibición.6 Además, en el seguimiento clínico de los pacientes infectados también se han usado los sistemas de Western Blot,7 tal como se ha hecho durante varios años en nuestro país.

En el presente trabajo nos proponemos estudiar la correlación entre los diferentes estadios clínicos de la infección por VIH-1 y la detección de anticuerpos anti p24 con el uso de los sistemas DAVIH BLOT y DAVIH AC P24.

MÉTODOS

Se tomaron muestras de suero de 176 pacientes en diferentes estadios de la infección por el VIH-1 procedentes de varios sanatorios del país. En todos los casos se verificó la clasificación clínica del paciente8 en la fecha de la toma de la muestra y se observó la evolución clínica posterior durante 6 meses. Se estudiaron 100 individuos asintomáticos (grupo II), 18 pacientes pertenecientes al grupo III y 58 pacientes del grupo IV. En este último grupo se incluyeron 23 enfermos con el síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA).

Todas las muestras fueron analizadas en paralelo con el ELISA DAVIH AC P24 y el Western Blot DAVIH BLOT (DAVIH Labotatorios, Cuba). Ambos sistemas fueron usados siguiendo las indicaciones del fabricante. El estuche DAVIH AC P24 es un ELISA de inhibición que detecta anticuerpos contra la proteína de 24 kd del VIH-1; cuyos resultados se expresan como no reactivo, reactivo en el suero puro o reactivo en las siguientes diluciones: 1/50, 1/250, 1/1 250 y 1/6 250. Durante la interpretación de los resultados se consideraron altas las titulaciones mayores de 1/250 y bajas las titulaciones iguales a 1/250 o menores. La reactividad anti p24 observada en el DAVIH BLOT se interpretó como presente, débil o ausente; según criterios establecidos para el diagnóstico.9 Los hallazgos de ambos estudios serológicos fueron comparados entre sí y se correlacionaron con el estadio clínico del paciente. Para el análisis estadístico de los resultados se calcularon porcentajes y se usó la prueba de chi cuadrado.

RESULTADOS

En la tabla 1 se muestran los resultados del ELISA DAVIH AC P24 en los diferentes estadios de la infección por VIH. La mejor correlación se observó en el grupo de enfermos con SIDA; el 96 % de ellos (22/23) presentó títulos inferiores a 1/1 250 en correspondencia con su estado clínico, lo que resultó significativo (p < 0,001) cuando se comparó con el grupo de enfermos no SIDA, de los que el 57 % (20/35) presentó títulos bajos.

Tabla 1. Resultados del ELISA DAVIH AC P24 en diferentes grupos de estudio según la clasificación clínica

 

Títulos de anticuerpos ant p24

Grupos clínicos

No reactivo

Puro

1/50

1/250

1/1 250

1/6 250

Grupo II
n=100

4

20

18

12

17

29

Grupo III
n=18

1

5

1

2

5

4

(No SIDA)
Grupo IV
n=23

2

12

3

3

4

11

(SIDA)

10

6

5

1

1

-

Fuente: DAVIH Laboratorios.

El título más alto (1/6 250) apareció con mayor frecuencia en los individuos asintomáticos en comparación con los enfermos y no se observó en los casos SIDA, lo que resultó significativo (p < 0,00001).

También se observó un subgrupo de asintomáticos con títulos inferiores a 1/1 250 que requerirá un seguimiento clínico serológico cuidadoso ante la posibilidad del "debut" clínico. Sin embargo, la baja frecuencia de sueros no reactivos en este grupo(4/100) resultó significativa (p = 0,003) cuando se comparó con el número de sueros no reactivos entre los pacientes con alguna afección relacionada con la infección por VIH.

La tabla 2 muestra los resultados del estudio serológico paralelo (DAVIH BLOT-DAVIH AC P24) en los diferentes grupos clínicos. Los sueros con ausencia de reactividad anti p24 en el Western Blot DAVIH BLOT resultaron no reactivos o sólo reaccionaron en el ELISA DAVIH AC P24 cuando la muestra no fue diluida; las muestras débilmente reactivas resultaron en su mayoría no reactivas en estado puro y en menor proporción reactivas en las diluciones 1/50 y 1/250 del ELISA. No hubo sueros con buena reactividad anti p24 que resultaran no reactivas en el ELISA.

TABLA 2. Comparación del Western Blot con el ELISA DAVIH AC P24 en diferentes estadios clínicos
 

DAVIH AC P24

Estadio clínico

Western Blot (DAVIH BLOT VIH-1)

P24 ausente

n=8

P24 débil

n=29

P24 presente

n=139

No reactivos

II

2

2

-

 

III

1

-

-

N=17

IV

1

1

-

 

SIDA

2

8

-

Subtotal

 

6

11

-

Suero puro

II

-

6

14

 

III

-

-

5

N=43

IV

-

3

9

 

SIDA

2

1

3

Subtotal

 

2

10

31

1/50

II

-

3

15

 

III

-

-

1

N=27

IV

-

-

3

 

SIDA

-

3

2

Subtotal

 

 

6

21

1/250

II

-

2

10

 

III

-

-

2

N=18

IV

-

-

3

 

SIDA

-

-

1

Subtotal

 

-

2

16

1/1 250

II

-

-

17

 

III

-

-

5

N=27

IV

-

-

4

 

SIDA

-

-

1

Subtotal

 

 

 

27

1/6 250

II

-

-

29

 

III

-

-

4

N=44

IV

-

-

11

 

SIDA

-

-

-

Subtotal

 

 

 

44

Fuente: DAVIH Laboratorios.

DISCUSIÓN

Ocho pacientes del grupo SIDA fallecieron varios meses después de la determinación del título de anticuerpos anti p24; los sueros de 3 de ellos resultaron no reactivos, 4 mostraron reactividad en el suero puro y 1 alcanzó el título de 1/50; lo que se corresponde con lo planteado por otros autores en relación con la asociación frecuente de la caída de anticuerpos contra la p24 y el desarrollo de manifestaciones clínicas de infección por VIH.1,4,10

También se ha señalado que la disminución de los anticuerpos puede proceder a la antigenemia p24 que acompaña el empeoramiento clínico en períodos de hasta 18 meses,11 por lo que la reducción de los niveles de anticuerpos contra la p24 puede considerarse un marcador que predice la evolución a SIDA.12

Sin embargo, no todos los individuos pierden anticuerpos durante la progresión de la enfermedad1 y en otros estudios se ha observado que pacientes sintomáticos conservan buena reactividad contra la p24;13 lo cual también se evidenció entre nuestros pacientes, pues el 43 % de los incluidos en el grupo IV no considerados SIDA (15/35) mostraron títulos mayores de 1/250. Se trata de individuos que sufrieron alguna infección oportunista menor sin evidencias de inmunosupresión severa, por lo que en este grupo podemos esperar un enlentecimiento de la evolución a SIDA.14

Se detectaron asintomáticos con títulos altos y más de 8 años de evolución desde la fecha del diagnóstico serológico que pudieran corresponder a "no progresores de larga fecha" como señala la literatura reciente.15,16

Los 4 individuos asintomáticos que no mostraron reactividad anti p24 en sus muestras de suero fueron estudiados algunas semanas después del diagnóstico serológico confirmatorio de infección por VIH, por lo que la ausencia de anticuerpos anti p24 pudiera estar relacionada con el período de seroconversión.17

De forma general, nuestros resultados se corresponden con lo planteado por otros autores acerca de la correlación entre la caída de los anticuerpos contra la proteína p24 y la severidad de los síntomas asociados a la infección por VIH.1,4,7,12 Pero esta correlación no es uniforme cuando se comparan poblaciones de individuos infectados de áreas geográficas diferentes. Contrariamente a lo que ocurre en pacientes europeos, en grupos de pacientes africanos se ha observado que la prevalencia de anticuerpos anti p24 no disminuye significativamente a medida quelas manifestaciones clínicas progresan hacia el SIDA y, por lo tanto, la determinación de los niveles de estos anticuerpos no se comporta como un marcador de progresión.18 Sin embargo, los pacientes cubanos estudiados muestran un comportamiento diferente al de los africanos y semejante al reportado por autores que han estudiado poblaciones de países occidentales. En este sentido resulta interesante conocer que DAVIH AC P24 fue capaz de detectar diferentes niveles de anticuerpos en muestras con reactividad aparentemente uniforme en el DAVIH BLOT sin resultados discordantes y que la correlación clínico serológica resultó satisfactoria; por lo que el uso de este ELISA pudiera resultar una alternativa útil y económica en el seguimiento clínico y serológico de individuos infectados por el VIH-1.

SUMMARY

The presence of antibodies against the HIV protein of 24 kd was studies by the parallel use of the DAVIH BLOT Western Blot and of the DAVIH AC P24 ELISA in serum samples from 176 patients at different HIV-1 infection stages. The results were correlated with the clinical classification of the patient at the moment of taking the sample and with the further evolution during 6 months. 57 % of the patients with opportunistic minor infections and 96 % of AIDS patients had low antibodies titres. Dead pattients showed no reactivity or presented very low titres in samples taken before dying. Different titrations were observed in serum groups with an apparently uniform reactivity in the Western Blot. The results show and adequate clinical and serological correlation. Therefore, the DAVIH AC P24 ELISA could be useful in the clinical follow-up of HIV-1 infected persons.

Key words: HIV INFECTIONS/blood; HIV INFECTIONS/classification; HIV-1; ACQUIRED IMMUNODEFICIENCY SYNDROME/blood; ACQUIRED IMMUNODEFICIENCY SYNDROME/classification; ENZYME-LINKED IMMUNO-SORBENT ASSAY/methods; HIV CORE PROTEIN P24.

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Recibido: 27 de febrero de 1995. Aprobado: 18 de julio de 1996.

Dr. Héctor Díaz Torres. Laboratorio de Investigaciones del SIDA. Carretera de Tapaste y Ocho Vías, San José de las Lajas, provincia de La Habana, Cuba.

1 Especialista de I Grado en Medicina Interna. Investigador Agregado.
2 Especialista de I Grado en Microbiología. Investigador Agregado.
3 Licenciado en Bioquímica. Aspirante a Investigador.
4 Especialista de I Grado en Epidemiología. Investigador Agregado.

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