Centro de Investigaciones Científicas de la Defensa Civil

Pesquisaje de anticuerpos contra el virus linfotrópico de células T humanas tipo I (HTLV-I) en donantes de sangre y grupos de riesgo

Dr. ELADIO SILVA CABRERA, Lic. MARÍA T. PÉREZ GUEVARA, Dra. ANA L. LUBIÁN CABALLERO, Lic. JOSÉ L. DE LA FUENTE ARZOLA, Dra. LEONOR NAVEA LEYVA y Lic. OTTO CRUZ SUI

RESUMEN

Se estudió la presencia de anticuerpos contra el virus linfotrópico de células T humanas tipo I (HTLV I) en 3 774 sueros; de ellos, 1 409 eran de donantes de sangre, 1 444 de pacientes que habían padecido recientemente alguna enfermedad de transmisión sexual (ETS) y 921 de enfermos politransfundidos. Se emplearon los sistemas DAVIH HTLV I (ELISA) y DAVIH BLOT HTLV I (Western Blot) producidos en Laboratorios DAVIH (La Habana, Cuba), para el pesquisaje y confirmación, respectivamente. De los 68 sueros reactivos en la prueba de ELISA, en 2 se confirmó la presencia de anticuerpos al HTLV I/II y 12 fueron considerados indeterminados por el Western Blot.

Descriptores DeCS: ANTICUERPOS HTLV-BLV/sangre; DONADORES DE SANGRE; GRUPOS VULNERABLES; ELISA; WESTERN BLOTTING.

INTRODUCCIÓN

El primer aislamiento de un Retrovirus linfotrópico humano se reportó en 1980, en Estados Unidos, a partir de un paciente con malignización agresiva de células T maduras, se denominó virus linfotrópico de células T humanas tipo I.¹ Este virus es capaz de producir varias enfermedades, se destacan entre otras, la paraparesia espástica tropical y la leucemia linfoma de células T del adulto.^1-3

Se describen diferentes vías de transmisión de este agente. Se le confiere la mayor importancia a la sanguínea, a pesar de que otras como la sexual están bien documentadas.^4,5

La distribución geográfica del HTLV I es limitada, se reportan como zonas endémicas, el suroeste de Japón, Centro y Sur de África, América Central, sureste de los Estados Unidos y el área del Caribe.⁶

En el diagnóstico serológico se emplean pruebas de alta sensibilidad para el pesquisaje de los casos positivos, los cuales se deben confirmar en un segundo examen de alta especificidad, con el objetivo de descartar reacciones falsas positivas, con estos fines se usan el ELISA y el Western Blot.⁷

En Cuba se han realizado estudios seroepidemiológicos para HTLV I, y se ha encontrado una baja seroprevalencia de anticuerpos contra éste.^8,9 En el presente trabajo nos propusimos estudiar mediante los sistemas de ELISA y Western Blot (producidos por los Laboratorios DAVIH, La Habana, Cuba) una muestra de la población de donantes de sangre y 2 grupos de riesgo: pacientes con enfermedad de transmisión sexual (ETS) y enfermos politransfundidos, para ampliar los conocimientos sobre la circulación de este agente en nuestro medio.

MÉTODOS

Grupos de estudio. Se estudiaron 3 774 sueros: de ellos, 1 409 se donantes de sangre, 1 444 de personas que habían padecido recientemente ETS y 921 de politransfundidos. Las muestras se obtuvieron por venipuntura aséptica, se separó el coágulo por centrifugación a bajas revoluciones durante 10 min, para posteriormente almacenar el suero en tubos estériles y conservarlos a 4 °C hasta su uso.

Pruebas serológicas. Se emplearon los sistemas de ELISA y Western Blot (DAVIH HTLV I y DAVIH BLOT HTLV I, Laboratorios DAVIH, La Habana, Cuba) para el pesquisaje y confirmación de las muestras, respectivamente. Según las indicaciones del fabricante, las muestras fueron consideradas positivas por Western Blot cuando su reactividad incluía anticuerpos al menos a 1 proteína del gen GAG y 1 del gen ENV.

RESULTADOS

La tabla 1 muestra los resultados con el empleo de la prueba de ELISA, donde 68 sueros resultaron reactivos; la mayor prevalencia de anticuerpos contra HTLV I se vio en el grupo de enfermos politransfundidos (3,14 %), en tanto que la menor, entre los donantes de sangre (0,99 %), con una diferencia estadística significativa (p < 0,005) por comparación de proporciones.

En la tabla 2 se aprecian los resultados de la confirmación de las muestras reactivas por ELISA, mediante el sistema DAVIH HTLV I; de los 68 sueros examinados, 2 resultaron positivos, 12 indeterminados y 54 negativos, los sueros positivos pertenecían al grupo de pacientes politransfundidos, mientras que en los donantes de sangre se encontró el menor número de sueros indeterminados.

TABLA 1. Seroprevalencia de anticuerpos contra HTLV I con el sistema DAVIH HTLV I en grupos de estudio. CIC DC, La Habana, 1995

 

	DAVIH	HTLV	I
Grupos	N	Positivas	%
Politransfundidos	921	29	3,14
ETS	1 444	25	1,73
Donantes de sangre	1 409	14	0,99
Total	3 774	68	1,80

p < 0, 005. N: Número de muestras.

TABLA 2. Seroprevalencia de anticuerpos contra HTLV I con el sistema DAVID BLOT HTLV I en muestras reactivas al pesquisaje. CIC DC, La Habana, 1995

	DAVIH	BLOT		HTLV	I
Grupos	N	Pos.	%	Ind.	%
Politransfundidos	921	2	0,21	7	0,76
ETS	1 444	0	0	3	0,20
Donantes de sangre	1 409	0	0	2	0,14
Total	3 774	2	0,05	12	0,31

N: Número de muestras. Pos.: Muestras positivas. Ind.: Muestras indeterminadas.

En la tabla 3 se observa la inmunorreactividad de los sueros clasificados como indeterminados a las diferentes proteínas virales, se encontró que la reactividad al nivel de la proteína de 19 KD fue la más frecuente en los patrones vistos, también se apreció en menor proporción reactividad a otras proteínas derivadas del gen GAG.

TABLA 3. Inmunorreactividad de los sueros clasificados como indeterminados a las proteínas virales, según grupos de estudio. CIC DC, La Habana, 1995

	Proteínas virales
Grupos	M	p19	p24	p28	p32	p53
1	X	X	X		X
2	X	X
3	X	X	X		X
Politransfundidos	4			X	X
5	X	X	X		X
6		X
1	X	X			X
ETS	2	X		X
3	X		X
Donantes de sangre	1	X	X	X		X
2				X

M: Muestra.

DISCUSIÓN

Algunos autores han planteado que Cuba presenta una baja seroprevalencia de anticuerpos contra el HTLV I, a pesar de encontrarse en el área del Caribe, reportada como endémica para este virus. Los resultados de este trabajo confirman lo anteriormente expuesto, al encontrar sólo 2 muestras positivas en las 3 774 estudiadas. También se evidencia la importancia de la vía sanguínea en la transmisión de este agente, pues las muestras positivas pertenecían al grupo de personas politransfundidas; donde también se observó el mayor número de muestras indeterminadas por DAVIH BLOT HTLV I. Se considera que la tranmisión del HTLV I es esencialmente celular, de ahí la gran importancia que se le confiere a la vía sanguínea, lo que ha quedado demostrado en múltiples estudios, algunos de ellos muy importantes, donde se ha podido concluir que el empleo de medios de pesquisaje de anticuerpos a este virus en donantes, ha permitido la reducción de la transmisión de la enfermedad por esa vía.^9-11

Diferentes autores, previamente, han reportado altas tasas de indeterminados por Western Blot para el HTLV I en sueros procedentes del área del Caribe; sin embargo, la razón para ello aún no ha sido aclarada.¹² Entre las muestras clasificadas como indeterminadas por DAVIH BLOT HTVL I, la mayor reactividad estuvo dirigida, como se reporta en la literatura, a proteínas derivadas del gen GAG.¹³ La inmunorreactividad a diferentes bandas proteicas del HTLV I, no significa necesariamente que un número igual de epítopes diferentes de este virus fue reconocido por los sueros. En este caso, todas las bandas reactivas representan a proteínas derivadas de núcleo, las que se forman debido al proceso postraslacional de la proteína de 53 kD codificada por el gen GAG; anticuerpos monoclonales contra las proteínas de 19 kD o de 24 kD han demostrado reactividad contra la proteína de 53 kD y otras de bajo peso molecular vistas en el Western Blot.¹³

Por último, queremos señalar que a pesar de que algunos autores confieren importancia a la presencia de anticuerpos a la proteína de 53 Kd,¹⁴ en los criterios de interpretación de nuestros resultados prevalecieron los orientados por la Organización Mundial de la Salud.¹⁵

SUMMARY

It was studied the presence of HTLV-I antibodies in 3 774 sera, 1 409 of them were from blood donors, 1 444 were from patients who had suffered from some sexually transmitted disease recently, and 921 from transfused patients. The DAVIH HTLV I (ELISA) and DAVIH BLOT HTLV I (Western Blot) systems produced at the DAVIH Laboratories (Havana, Cuba) were used for screening and confirmation, respectively. Of the 68 reactive sera utilized in the ELISA test, it was confirmed the presence of HTLV I/II antibodies in 2, whereas 12 were considered as undetermined by the Western Blot.

Subject headings: HTLV-BLV ANTIBODIES/blood; BLOOD DONORS; RISK GROUPS; ENZYME-LINKED IMMUNOSORBEENT ASSAY; BLOTTING, WESTERN.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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9. Navea L, Noa E, Lubian AL, Pérez MT, Carnot J, Rivero R. Screening of anti HTLV I antibody in sera from HIV infected persons and patients with hematological and neurological diseases in Cuba. Proceedings of the Fifth International Conference on Human Retrovirology; HTLV. Japón 1992.
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Recibido: 9 de mayo de 1995. Aprobado: 11 de octubre de 1996.

Dr. Eladio Silva Cabrera. Centro de Investigaciones Científicas de la Defensa Civil. Carretera de Tapaste y Ocho Vías, San José de Las Lajas, provincia de La Habana, Cuba.