Artículos Originales

Universidad de los Andes, Mérida, Venezuela
 

Estudio comparativo de 4 métodos para la identificación de especies del género Aeromonas*

^* Investigación financiada por el CONICIT. Proyecto nacional de Diarrea MPS-RP-IV-140031.
Lic. AURORA LONGA,¹ Lic. LUISA VIZCAYA,² Dra. BEATRIZ NIEVES,³ Lic. LAURA BRAVO⁴ y Dr. JOSÉ R. BRAVO⁵

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1. Licenciada en Bioanálisis. Especialista en Microbiología. Departamento de Microbiología y Parasitología, Facultad de Farmacia, Universidad de los Andes, Mérida, Venezuela.
2. Máster en Microbiología. Licenciada en Bioanálisis. Departamento de Microbiología y Parasitología, Facultad de Farmacia, Universidad de los Andes, Mérida, Venezuela.
3. Doctora en Microbiología. Licenciada en Bioanálisis. Departamento de Microbiología y Parasitología, Facultad de Farmacia, Universidad de los Andes, Mérida, Venezuela.
4. Licenciada en Biología. Investigadora Auxiliar. Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kourí" (IPK).
5. Especialista de II Grado en Bioestadística. Investigador Auxiliar. IPK.

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RESUMEN

Se exponen brevemente los resultados obtenidos con la aplicación de los métodos AEROKEY II, AEROKEY II + esquema de Abbott, Api 20 NE, Sistema Biolog. El estudio se llevó a cabo con 38 cepas de Aeromonas aisladas de niños menores de 5 años con enfermedad diarreica aguda (EDA), el AEROKEY II + esquema de Abbott resultó el mejor método de identificación.

Descriptores DeCS: AEROMONAS/clasificación; DIARREA INFANTIL/microbiología; AEROMONAS/aislamiento & purificación; TÉCNICA DE TIPIFICACIÓN BACTERIANA.

El género Aeromonas comprende un grupo de microorganismos ampliamente distribuidos en la naturaleza,¹ causante de una gran variedad de enfermedades intestinales y extraintestinales.^2,3 Este género tiene una taxonomía muy compleja, la cual es sometida continuamente a procesos de revisión.² Poseen una heterogeneidad genética muy importante, por lo que su identificación al nivel de especie es compleja.⁴ Entre los métodos utilizados para la identificación hasta este nivel están, entre otros: AEROKEY II,⁵ AEROKEY II + esquema de Abbott,⁶ Api 20 NE (Biomerieux), Biolog (Microlog Station) y la hibridación ADN/ADN. Este último es uno de los más precisos, pero por lo complejo de la realización de éste, así como también de los que se utilizan en la actualidad, como son el ribotipeaje y el análisis de ADN polimórfico amplificado al azar (RAPD), su aplicación en los laboratorios de diagnóstico de bacteriología clínica es muy limitado.^1,7-9

En este trabajo realizamos el estudio de 38 cepas de niños menores de 5 años con enfermedad diarreica aguda (EDA), procedentes de un Proyecto Nacional de Diarrea aplicado en el estado de Mérida en Venezuela, en el período comprendido entre junio de 1993 y junio de 1994. Una vez identificadas hasta género se procedió a la aplicación de los 4 métodos que se pretendían probar: AEROKEY II, Api 20 NE, Biolog y la combinación del AEROKEY II+ esquema propuesto por Abbott y otros en 1992, el cual fue inicialmente presentado por sus autores como un esquema independiente de identificación. Como método de referencia se utilizó el esquema bioquímico convencional propuesto por Von Graevenitz.¹⁰

En la tabla se muestran los resultados obtenidos por los 4 métodos. El análisis estadístico según el método de Cochran demostró una diferencia significativa entre los porcentajes de cepas identificadas. Además, con el AEROKEY II + esquema de Abbott se obtuvo 100 % de cepas correctamente clasificadas con un índice de Kappa= 1, lo cual es estadísticamente significativo para una p< 0,000001.

TABLA. Comparación de 4 métodos para la identificación de especies de microorganismos pertenecientes al género Aereomonas

	No. de cepas	Aero key II	Aerokey II+ esquema de Abbott	Api 20 NE	Biolog	Convencional
Cepas de referencia	8	6/8	8/8	8/8	7/8	8/8
		(75)	(100)	(100)	(87,5)	(100)
Cepas problema	38	37/38	38/38	36/38	25/38	38/38
		(100)	(100)	(94,7)	(65,7)	(100)

Nota: La cifra entre paréntesis representa el porcentaje.

Siendo Aeromonas un posible patógeno entérico, las evidencias sobre la función causal de estos microorganismos en la diarrea aguda han estado limitadas, pues son pocos los laboratorios de microbiología clínica que emplean técnicas y métodos específicos para su aislamiento e identificación.⁶

La perspectiva fundamental del Laboratorio de Síndromes Gastrointestinales del Departamento de Microbiología y Parasitología de la Facultad de Farmacia de la Universidad de los Andes, en Mérida, Venezuela, es continuar trabajando en el desarrollo de sistemas orientados hacia el diagnóstico causal de las diarreas, y simultáneamente ir incorporando métodos económicos y de fácil aplicación. De esta forma se perfeccionaría sustancialmente el diagnóstico de enfermedades infecciosas.

SUMMARY

It is given an explanation of the results obtained with the following methods: AEROKEY II, AEROKEY II + Abbot's scheme, Api 20 NE, and the Biolog System. The study was conducted with 38 strains of Aeromonas isolated from children under 5 with acute diarrheal disease (ADD). The AEROKEY II + Abbot's scheme proved to be the best identification method.

Subject headings: AEROMONAS/classification; DIARRHEA, INFANTIIE/microbiology; AEROMONAS/isolation and purification; BACTERIAL TYPING TECHNIQUES.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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2. Janda JM. Recent advances in the study of taxonomy, pathogenesis, and infectious syndromes associated with the genus Aeromonas. Clin Microbiol Rev 1991;4:397-410.
3. Janda M. Aeromonas species in septicemia: laboratory characteristics in clinical observation. Clin Infect Dis 1994; 19:77-83.
4. Altwegg MA. Polyphasic approach to the classification and identification of Aeromonas strains. Med Microbiol Lett 1993;2:200-5.
5. Carnahan A. Aerokey II: a flexible key for identifying clinical Aeromonas species. J Clin Microbiol 1991;29:2843-9.
6. Abbott S. Identification of Aeromonas strains to the genospecies level in the clinical laboratory. J Clin Microbiol 1992; 30:1262-6.
7. Joseph S, Carnahan A. The isolation, identification and systematics of the motile Aeromonas species. Ann Rev Fish Dis 1994;4:315-43.
8. Hanninen M, Siitonen A. Distribution of Aeromonas phenospecies and genospecies among strains isolated from water, foods or from human clinical samples. Epidemiol Infect 1995;115:39-50.
9. Miyata M, Aoki Tt, Inglis V, Yoshida T, Endo M. RAPD analysis of Aeromonas salmonicida and Aeromonas hydrophils. J Appl Bacteriol 1995;79:181-5.
10. Graevenitz Avon, Altwegg M. Aeromonas En: Ballowes W, Lennette E, Shadomy H, eds. Manual of clinical microbiology. 5 ed. Washington DC: American Society of Microbiology, 1991:396-401.

Recibido: 15 de julio de 1996. Aprobado: 7 de marzo de 1997.

Lic. Aurora Longa. Departamento de Microbiología y Parasitología. Facultad de Farmacia. Universidad de Los Andes, Mérida, Venezuela.