Artículos originales

Instituto de Hematología e Inmunología

Frecuencia fenotípica y génica de los antígenos HLA en una muestra de la población cubana

Lic. Luz M. Morera Barrios, Dr. Catalino R. Ustáriz García, Dra. María A. García García, Lic. Nelioska Díaz Báez, Dra. Rosa M. Lam Díaz, Lic. Ana M. Guerreiro Hernández, Dr. Porfirio Hernández Ramírez y Dr. José M. Ballester Santovenia

Resumen

Se realizó un estudio de la frecuencia fenotípica y génica de los antígenos del sistema principal de histocompatibilidad HLA en personas no relacionadas, supuestamente sanas, tomadas como muestra de la población cubana. Se analizó la distribución de 87 antígenos HLA clase I ( loci A, B y C) y 25 clase II ( loci DR y DQ). Se emplearon las técnicas de microlinfocitotoxicidad (serológica) descrita por Terasaki y modificada por el NIH para los antígenos de clase I, y las técnicas de biología molecular para los de clase II. Los antígenos clase I del locus A: HLA A2, A9 y A19; del locus B: B5, B12 y B35; y del locus C: Cw4, Cw7; y los antígenos clase II de los locus DR y DQ: DR2, DR3, DR6, DR7, DQ2, DQ5 y DQ6, tienen las frecuencias más altas. Estos resultados son útiles como referencia para los estudios de asociación HLA-enfermedad, en la evaluación de la respuesta a los trasplantes, y a ciertas vacunas por la población cubana.

Palabras clave: antígenos de histocompatibilidad (HLA), frecuencia antigénica 0, frecuencia génica.

El complejo principal de histocompatibilidad (CPH) es una región genética que alberga genes altamente polimórficos, cuyos productos se expresan en gran variedad de células. Las proteínas codificadas por la región del CPH que se denominan "moléculas" o "antígenos" de histocompatibilidad son una barrera formidable para el éxito de los trasplantes e injertos cuando el donante y el receptor presentan diferencias en esta región genética y en sus antígenos.1 Las frecuencias poblacionales de los genes y antígenos del CPH en humanos, denominados antígenos HLA (del inglés human leucocyte antigens ), constituye la referencia necesaria para los estudios de asociación HLA-enfermedad. La compatibilidad HLA es fundamental en el éxito de los trasplantes, por lo que es imprescindible el estudio de estos marcadores genéticos. Además su polimorfismo determina el nivel de respuesta antigénica de las poblaciones, lo que pudiera ser de utilidad en el diseño de políticas de vacunación, conociendo previamente el porcentaje probable de ”no-respuesta” a diferentes vacunas 2-4 en cada grupo poblacional.

Métodos

Se estudiaron 721 individuos cubanos no relacionados y supuestamente sanos, integrantes del Registro Cubano de Donantes de Medula Ósea, para los antígenos de clase I de los loci A y B, y de ellos, 433 también para el locus C y 242 para los antígenos de clase II (DR Y DQ). En estas personas se tipificaron 87 antígenos de clase I: 25 del locus A, 51 del B y 11 del C; así como 25 antígenos de clase II: 15 del DR y 10 del DQ. Se utilizaron las técnicas de microlinfocitotoxicidad descritas por Terasaki y modificadas por el NIH para los antígenos de clase I (A, B y C), 5 y las técnicas de biología molecular para los antígenos de clase II (DR Y DQ).6

Las frecuencias antigénicas, tanto en el fenotipo como en el genotipo, se determinaron por conteo directo, según la frecuencia de aparición de cada antígeno en la muestra evaluada.

Resultados

Los resultados de las frecuencias fenotípica y génica de los antígenos de histocompatibilidad HLA de los loci A, B, C, DR y DQ, se expresan en las tablas. La tabla 1 muestra los resultados para los antígenos del locus A, la tabla 2 los del locus B, la tabla 3 los del locus C y la tabla 4 los DR y DQ (clase II).

Tabla 1. Frecuencia fenotípica y génica de los antígenos HLA del locus A en 721 individuos inscriptos en el Registro Cubano de Donantes de Medula Ósea

Antígenos locus A	Positivo	Negativo	Frecuencia
Fenotípica	Génica
A1	89	632	0,12	0,06
A2	266	455	0,37	0,21
A3	130	591	0,18	0,09
A9	187	534	0,26	0,14
A23	75	646	0,10	0,05
A24	115	606	0,16	0,08
A10	113	608	0,19	0,1
A25	19	702	0,03	0,02
A26	62	659	0,08	0,04
A66	1	702	0,00	0,00
A34	21	700	0,03	0,02
A28	87	634	0,12	0,06
A68	7	714	0,01	0,01
A69	0	721	0,00	0,00
A11	87	634	0,12	0,06
A19	244	477	0,34	0,19
A29	113	608	0,16	0,08
A30	69	652	0,09	0,05
A31	34	687	0,05	0,03
A32	39	682	0,05	0,03
A33	24	697	0,03	0,02
A74	2	719	0,00	0,00
A36	8	713	0,01	0,01
A80	2	719	0,00	0,00
Blanco	38	683	0,05	0,03

Tabla 2. Frecuencia fenotípica y génica de los antígenos HLA del locus B en 721 individuos inscriptos en el Registro Cubano de Donantes de Medula Ósea

Antígenos locus B	Positivo	Negativo	Frecuencia
Fenotípica	Génica
B5	153	568	0,21	0,11
B51	60	661	0,08	0,04
B5 2	17	704	0,02	0,01
B7	115	606	0,15	0,08
B12	197	524	0,27	0,15
B44	95	626	0,13	0,07
B45	22	699	0,03	0,02
B15	60	661	0,08	0,04
B62	25	695	0,03	0,02
B63	12	702	0,02	0,01
B75	1	720	0,00	0,00
B76	0	721	0,00	0,00
B77	1	720	0,00	0,00
B16	44	677	0,06	0,03
B38	11	710	0,01	0,01
B39	22	699	0,03	0,02
B21	75	646	0,10	0,05
B49	33	688	0,04	0,02
B50	16	705	0,02	0,01
B22	19	702	0,03	0,02
B54	1	720	0,00	0,00
B55	18	703	0,02	0,01
B56	3	718	0,00	0,00
B40	49	672	0,07	0,04
B60	14	707	0,02	0,01
B61	8	713	0,01	0,01
B70	6	715	0,01	0,01
B71	0	721	0,00	0,00
B72	0	721	0,00	0,00
B53	39	682	0,05	0,03
B42	16	705	0,02	0,01
B37	6	715	0,01	0,01
B46	0	721	0,00	0,00
B17	80	641	0,11	0,06
B57	26	695	0,04	0,02
B58	25	696	0,03	0,02
B35	139	582	0,19	0,1
B18	61	660	0,08	0,04
B14	74	647	0.10	0,05
B64	0	721	0,00	0,00
B65	32	689	0,04	0,02
B8	70	651	0,10	0,05
B59	0	721	0,00	0,00
B67	5	716	0,01	0,01
B13	23	698	0,03	0,02
B47	2	719	0,00	0,00
B27	36	685	0,05	0,03
B48	3	718	0,00	0,00
B73	1	720	0,00	0,00
B41	15	706	0,02	0,01
Blanco	52	669	0,07	0,04

Tabla 3. Frecuencia fenotípica y génica de los antígenos HLA del locus C en 433 individuos inscriptos en el Registro Cubano de Donantes de Medula Ósea

Antígeno HLA locus C	Positivos	Negativos	Frecuencia
Fenotípica	Génica
Cw1	3	430	0,01	0,01
Cw2	63	370	0,14	0,07
Cw3	97	336	0,13	0,07
Cw4	162	271	0,22	0,12
Cw5	9	494	0,02	0,06
Cw6	0	433	0,00	0,00
Cw7	134	299	0,31	0,17
Cw8	0	433	0,00	0,00
Cw9	0	433	0,00	0,00
Cw10	0	433	0,00	0,00
Blanco	250	183	0,58	0,35

Tabla 4. Frecuencia fenotípica y génica de los antígenos HLA de los loci DR y DQ en 242 individuos inscriptos en el Registro Cubano de Donantes de Medula Ósea

Antígeno locus DR	Positivo	Negativo	Frecuencia
Fenotípica	Génica
DR1	46	196	0,19	0,1
DR2	53	189	0,22	0,12
DR3	53	189	0,22	0,12
DR4	49	193	0,20	0,11
DR5	43	199	0,18	0,1
DR6	60	182	0,25	0,13
DR7	77	165	0,32	0,18
DR8	17	225	0,07	0,04
DR9	3	239	0,01	0,01
DR10	13	229	0,05	0,03
DR11(5)	5	237	0,02	0,01
DR13(6)	2	240	0,01	0,01
DR15(2)	3	239	0,01	0,01
DR17(3)	2	240	0,01	0,01
Blanco	27	215	0,11	0,06
Locus DQ
DQ1	2	240	0,01	0,01
DQ2	91	150	0,38	0,21
DQ3	6	236	0,02	0,01
DQ4	20	222	0,08	0,04
DQ5	81	166	0,33	0,18
DQ6	91	151	0,38	0,21
DQ7	64	178	0,26	0,14
DQ8	31	211	0,13	0,07
DQ9	18	224	0,07	0,04
Blanco	13	229	0,05	0,03

Discusión

En este estudio la muestra es mayor que en el realizado en 1976, 2 por lo que en algunos casos los valores han variado, además se han incorporado nuevos antígenos que en aquel momento no se habían descubierto, y por primera vez, se estudiaron los antígenos de clase II de los loci DR y DQ. En estudios realizados de donantes de medula ósea de diferentes grupos raciales se informó que en poblaciones latinas, caucasoides y africanas se observan frecuencias incrementadas de los antígenos del locus A: HLA A2, A9, y A19, de los antígenos del locus B: HLA B7, y B12 y de los antígenos del locus DR: HLA DR2, DR3, DR6, y DR7; el DQ no se evaluó en ese estudio.7 Para algunos antígeno, la frecuencia es 0, y constituyen antígenos raros, tanto en nuestra población como en las estudiadas anteriormente.7 Se consideran como blancos aquellos antígenos cuyos antisueros no están disponibles o cuya distribución es homocigótica.

Estos resultados resultan de gran importancia, y deben tomarse en cuenta para los estudios de asociación HLA y enfermedad, así como en estudios poblacionales, para el desarrollo de diferentes vacunas, ya que podrían servir para determinar grupos respondedores y no respondedores en la población.

Agradecimientos

A los colegas del Institute for Transplantation and Cell Therapeutics, University Medical Center de Düsseldorf, Alemania, que de una u otra forma colaboraron en la ejecución de este trabajo.

Summary

A study of the phenotypic and genic frequency of the main histocompatibility HLA system in non-related, apparently sound persons taken as a sample of the Cuban population was conducted. The distribution of 87 class I HLA antigens (loci A, B and C) and 25 class II (loci DR and DQ) was analized. The techniques of microlymphocytotoxicity (serological) described by Terasaki and modified by the NIH for class I antigens, as well as the techniques of molecular biology for class II were used. The class I antigens of locus A: HLA A2, A9 and A l9; locus B: B5, B12 and B35; and locus C: Cw4, Cw7; and the class II antigens of locus DR and DQ: DR2, DR3, DR6, DR7, DQ2, DQ5 and DQ6, have the highest frequencies. These results are useful as a reference for the HLA-disease association studies, and for the evaluation of the response given by the Cuban population to transplantations and to certain vaccines.

Key words: Histocompatibility antigens (HLA), antigenic frequency 0, genic frequency.

 

Referencias bibliográficas

1. Altabe O. The mayor histocompatibility complex. Nature 1991;352:67-8.

2. Arce Bustabad S. Compatibilidad HLA y raza: su influencia en la evolución clínica del trasplante renal de cadáver en Cuba. Premio Anual del MINSAP al mejor trabajo científico de 1978. Actualidad en Nefrología. Información temática 1980;4 (1):3-80.

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4. Sidedney J, Grayy HM, Kubo RT, Sette A. Practical biochemical evolotionary implications of the discovery of HLA class I supermotifas. Inmunol Today 1996;17:261-6.

5. Terasaki LP, Bernoso P, Park SM. Microdoplet testing for HLA A,B,C and antigens. Am J Clin Pathol 1978;69:103-8.

6. Bunce M. PCR-SSP typing. En: Bidewell Jl, Navarrete C. Histocompatibility testing. Cap. 5. London : Imperial College Press; 2000; p.149-86.

7. Mori MB , Graves M, Boucher KM, Milford EG. HLA gene and haplotype frequencies in the North American population. Transplantation 1997;64:1017-24.

Recibido: 15 de diciembre de 2005.
Lic. Luz M. Morera barrios . Instituto de Hematología e Inmunología. Apartado 8070, ciudad de la habana, cp 10800, Cuba.Telf (537) 578268, 578695, 544214. Fax [phone]. e-mail: [e-mail]