ARTICULOS ORIGINALES

 

Ensayo in vitro para detectar la presencia de agentes adventicios en un banco de células de trabajo.

 

In vitro assay to determine the presence of adventitious agents in a Working Cell Bank.

Georgina Pardo, Ernesto Almora, Odalys Fidalgo, Arelys Zamora, Niurka Rodríguez y Ela María Pérez.

Instituto Finlay. Centro de Investigación–Producción de Vacunas y Sueros. Ciudad de La Habana, Cuba.
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RESUMEN

Actualmente las colecciones de cultivos de tejidos son consideradas valiosas fuentes de material biológico para
la investigación, diagnóstico y producción, sin embargo se hacen realmente útiles cuando las mismas están bien
organizadas, caracterizadas y manipuladas como Bancos Celulares Maestros y de Trabajo, en dependencia de
la dirección de los objetivos de trabajo. Las agencias reguladoras en todo el mundo consideran el
establecimiento de Bancos Celulares Maestros y de Trabajo siguiendo las Buenas Prácticas de Fabricación
vigentes y los “Puntos a Considerar en la Caracterización de Líneas Celulares utilizadas en la Producción de
Biológicos”. El objetivo de este trabajo fue determinar que un Banco Celular de Trabajo (BCT) obtenido en
nuestro laboratorio estaba libre de agentes adventicios, para lo cual se realizó la observación a través del
microscopio óptico y electrónico para visualizar morfología y presencia de retrovirus, se verificó la ausencia de
contaminación bacteriana, fúngica y de micoplasmas; además se buscó presencia de otros agentes adventicios
utilizando tres sistemas de cultivo celular. La morfología de las células fue seudofibroblástica como está
reportado para esta línea, el Banco Celular está exento de bacterias, hongos y micoplasmas y los resultados de
la prueba de agentes extraños fueron negativos, la observación al microscopio electrónico no reveló partículas
tipo A y tipo C de retrovirus. Como conclusión podemos decir que el Banco Celular de Trabajo cumple con las
regulaciones establecidas y pudiera ser empleado en la producción de vacunas veterinarias.

Palabras claves: Banco Celular de Trabajo, BHK- 21, Caracterización.

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ABSTRACT

At present tissue culture collections are considered valuable sources of biological material for research and production, nevertheless they are really useful when they are well organized, characterized and handled as Master Cell Banks and Working Cell Banks, depending on the objectives of the work. Regulatory agencies all over the world consider that the establishment of Master Cell Banks and Working Cell Banks follows good manufacturing practices in effect and the “Points to consider in the Characterization of Cell Lines used for the Production of Biologicals”. The objective of this work was to determine if a Working Cell Bank (WCB) obtained in our laboratory was free of adventitious agents. To achieve this, optical and electronic microscopy were carried out looking for the morphology or presence of retrovirus. Absence of bacterial, fungi and micoplasma contamination was also verified. Also the presence of other adventitious agents tested using three cell culture systems. The cell morphology was pseudo fibroblastic as reported for this cell line. The Cell Bank is free of bacteria, fungi and micoplasma. The results of the test for adventitious agents were negative, electronic
microscopy observation didn’t reveal type A or C retroviral particles. As a conclusion we may say that the Working Cell Bank complies with the regulations established and can be used in the production of veterinary vaccines.

Keywords: Working Cell Bank, BHK- 21, Characterization.

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