ARTICULOS ORIGINALES

 

Estudio serológico y de protección en ratones utilizando diferentes esquemas y dosis de VA-MENGOC-BC®

 

Serological and Protection Study in Mice using different vaccination schemes and Doses of VA-MENGOC-BC® Vaccine.

 

Juan F. Infante1, Jorge E. Mayo1, Sergio Sifontes2, Eslie Pedroso1, Enrique Muñoz1, Mildrey Fariñas1, Mercedes Gutiérrez1, Rolando Ochoa1, Juan C. Martínez1, Aida Annet1, María A.Camaraza1.

1. Instituto Finlay. Centro de Investigación-Producción de Vacunas y Sueros. Ciudad de La Habana, Cuba.
E-mail:[e-mail]

2. Centro de Bioactivos Químicos Universidad Central de Las Villas, Santa Clara, Cuba.

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RESUMEN

La alta incidencia mundial de meningitis meningocócica por Neisseria meningitidis serogrupo B (N. meningitidis) movilizó los recursos de la ciencia hacia su enfrentamiento en un período corto de tiempo. Para el estudio de esta enfermedad fue imprescindible desarrollar modelos experimentales que posibilitaran caracterizar no sólo la capacidad inmunogénica y protectora de los candidatos vacunales, sino también la toxigenicidad del producto. El estudio basado en el modelo ratón Balb/c con la utilización de factores estimulantes de la virulencia, posibilitó el desarrollo experimental de la enfermedad. Consistió en la aplicación de diferentes esquemas de dosis y diluciones de la vacuna (1/2, 1/4, 1/8, 1/16) en solución salina fisiológica 0,85%. Se conformaron 15 grupos de ocho animales cada uno que previamente recibieron Dextrana Férrica (IMEFA) y mucina gástrica de cerdo 8% en un volumen total de 0,4 mL, y un grupo control al que le fue administrada la vacuna pura. Se empleó para el reto la cepa 385 de N. meningitidis con una concentración del inóculo de 107 UFC/mL. El esquema de vacunación contempló grupos vacunados con 1, 2, y 3 dosis a los 0,15 y 30 días. Se administraron 0,2 mL del
inóculo de N. meningitidis por vía intraperitoneal. Se determinó la dosis letal media (DL50), anticuerpos bactericidas, respuesta serológica por el método de ELISA y se calculó la protección conferida. Se aplicó el método de Log rank para la comparación de los tiempos de sobrevivencia y para el ensayo de ELISA se aplicó el método de superficie ajustada por SPLINE. Hemos demostrado la utilidad del biomodelo ratón Balb/c para comprobar la eficacia de la vacuna VA-MENGOC-BC®. Quedó demostrada la correlación entre los niveles de anticuerpos y la protección conferida por la vacuna, comprobándose además por los ensayos de reto. Se logró obtener una aproximación con respecto a los límites de eficacia de VA-MENGOC-BC® mediante diluciones consecutivas del producto en la línea de ratones Balb/c.

Palabras claves: Neisseria meningitidis B, VA-MENGOC-BC®, ratón, protección.

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ABSTRACT

The elevated world incidence of meningococcal meningitis due to Neisseria meningitidis B (N. meningitidis) has mobilized scientists in the search for a speedy solution to this problem. In order to study this disease, it is indispensable to develop experimental models which will enable the characterization of, not only the immunogenic and protective capability of vaccine candidates, but also the possible toxicity of the preparation. Consequently, a Balb/c mouse model was used, together with virulence stimulating factors, in order to achieve the experimental development of the disease. Different vaccine dose schedules and dilutions were used (1/2,1/4,1/8,1/16) in 0,85% physiologic saline solution. Fifteen groups of 8 animals each, which had previously received Ferric Dextran (IMEFA) and swine gastric mucin (8%) in a total volume of 0,4 mL and a control group which received the pure vaccine were formed. N. meningitidis Strain 385, was used for the challenge, with an inoculum concentration of 107 UFC/mL. The following vaccination schedule was observed: the groups
of animals were vaccinated with 1, 2 and 3 doses on days: 0, 15 and 30. A total of 0,2 mL of the N. meningitidis
inoculum was administered intraperitoneally. The half lethal dose (LD 50), bactericidal antibodies and serological
response using an ELISA assay were determined and the protection conferred by the prepartions were calculated. The Log rank method was used for comparing survival time. The SPLINE surface adjustment method was used in the case of the ELISA assay. The usefulness of the Balb/c mouse biomodel for comparing the efficacy of the VA-MENGOC-BC® vaccine was demonstrated. The correlation between the different levels of antibodies and the protection conferred by the vaccine was demonstrated and verified by challenge assays. An approximation of the efficacy limit of VA-MENGOC-BC® was obtained by means of consecutive dilutions of the product in the Balb/c mouse line.

Keywords: Neisseria meningitidis B, VA-MENGOC-BC®, mouse, protection.

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