Instituto de Neurología y Neurocirugía

Perfil neurofarmacológico del Plectranthus amboinicus (Lour.) Spreng (orégano francés). Potenciación de las esteriotipias inducidas por anfetamina

Lic. María Teresa Buznego Rodríguez,¹ Lic. Miguel David Fernández Pérez,² Lic. Mirta Llanio Villate,¹ Lic. Niurka León Alonso,³ Lic. Marta Elena Acevedo González¹ y Dr. Héctor Pérez-Saad⁴

Resumen

Se estudió el perfil neurofarmacológico de la decocción de hojas verdes de P. amboinicus mediante su administración aguda en la prueba de Irwin, la conducta exploratoria, el modelo de estereotipias inducidas por anfetamina y las pruebas de analgesia (plato caliente e irritación peritoneal inducida por ácido acético). Se prepararon decocciones de 1,5 y 30 g en 100 mL de agua destilada (D1,D5 y D30, respectivamente) y se estudiaron sus efectos sobre los perfiles neurológico, conductual y autonómico. En particular, D30 produjo un aumento del acicalamiento y una disminución del reflejo auricular. Por otra parte, los extractos no produjeron cambios significativos sobre la conducta exploratoria y las pruebas de analgesia. El extracto D5 potenció las esterotipias inducidas por anfetamina. Por lo tanto, los resultados obtenidos tomados en conjuntos sugieren un perfil faramacológico similar al de los antidepresivos.

Descriptores DeCS: PLANTAS MEDICINALES; HOJAS DE PLANTA; EXTRACTOS VEGETALES; RATAS WISTAR; RATONES.

Abstract

Authors studied neuropharmacological profile of green leaves decoction from P.amboinicus, by means of acute administration in Irwin´s test, exploratory behaviour, model of amphetamine induced sterectipies, and analgesia test (hot dish and acetic acid- induced peritoneal irritation). Decoctions of 1.5 and 30 g in 100 mL of distilled water (D1, D5, and D30, respectively) were prepared and effects on neurologic, behavioural, and autonomic profiles were studied. In particular, D30 yielded an increase in "doing up" and a decrease in auricular reflex. On the other hand, extracts not produced significant changes on exploratory behaviour and analgesia tests. D5 extract has increase amphetamine-induced stereotypies. Thus, results obtained, all together suggested a pharmacological profile, similar to that of antidepressants drugs.

Subject headings: PLANTS MEDICINAL; PLANT LEAVES; PLANTS EXTRACTS, RATS WISTAR, MICE.

El Plectranthus aboinicus es una planta que se encuentra distribuida en todas las provincias de Cuba y en la región del Caribe, perteneciente a la familia Labiatae. A esta especie dentro de la medicina tradicional se le ha señalado diferentes propiedades medicinales¹ entre las cuales se encuentra la acción antiepiléptica.²

Trabajos previos demostraron que la administración aguda del extracto acuoso de la planta no produjo efectos anticonvulsivantes, sin embargo, durante la administración crónica se observó un efecto protector contra las convulsiones inducidas por lidocaína.³ Además, como parte del pesquizaje farmacológico se demostró que el liofilizado hidrosoluble de la planta posee acciones anticolinérgicas y simpaticomiméticas en órganos aislados (estudios no publicados). No obstante, se desconoce el perfil neurofarmacológico general de la planta, lo cual constituye el objetivo del presente trabajo.

Método

La especie P. amboinicus fue identificada por el doctor Victor Fuentes y registrada con el número de herbario Roig 4579 en la Estación Experimental de Plantas Medicinales "Dr. Juan Tomás Roig" perteneciente a la Industria Farmacéutica en San Antonio de los Baños.

Los experimentos se realizaron en ratones de la línea OFI y ratas Wistar, machos, de 18 a 22 g y de 150 a 200 g de peso corporal respectivamente. Se prepararon decocciones de 1, 5 y 30 g en 100 mL de agua destilada (D1, D5 y D30, respectivamente) con un tiempo de decocción de 10 min; luego se completó el volumen inicial.

Los extractos y la solución salina fueron administrados por vía intraperitoneal, en volúmenes de 0,01 mL por g de peso corporal, 20 min antes de comenzar la observación.

En general, se utilizaron 4 grupos de animales, a los cuales se les administraron D1, D5, D30 y solución salina (NaCl 0,9 %), correspondientemente.

Prueba de irwin

Esta prueba se realizó por un observador entrenado. Se emplearon 5 animales por cada decocción. La conducta se observó mediante el empleo de un recipiente circular de 30 cm de diámetro y 25 cm de altura, con piso desmontable.⁴ Ninguna de las dosis empleadas provocaron la muerte y no se observaron signos autonómicos severos. Todos los ensayos se realizaron en horas de la mañana (8.00 a.m. a 12.00 m.).

Conducta exploratoria

La conducta exploratoria fue observada en ratones mediante un recipiente de campo abierto con una pared de 15 cm de alto y un diámetro de 30 cm. (Palmer R, Universidad de McGill, Montreal, Canadá, 1985, Comunicación personal). En el piso se dibujó un círculo concéntrico de 10 cm de diámetro. La observación comenzó con la colocación del animal en el círculo central y a partir de ese momento se midieron los parámetros siguientes: 1. latencia (tiempo inicial transcurrido en el círculo central; 2. número de empinamientos; 3. número de veces que el animal atraviesa el círculo central-conducta diagonal y 4. tiempo total transcurrido en el círculo durante el tiempo de observación. Se emplea un cronómetro manual-mecánico y el tiempo total de observación fue de 6 min.

Estereotipias inducidas por anfetamina

Se utilizaron 3 grupos de ratas que se les administraron D5, D30 y solución salina (NaCl 0,9 %), correspondientemente. Luego, recibieron anfetamina (1,5 mg/kg;sc.) 5 min antes de comenzar la observación.⁵ Los animales fueron colocados en cajas de 25 x 25 x 25 cm, con pared frontal de plexiglass transparente. En esta pared se dibujaron 2 rayas horizontales a la altura de 8 y 12 cm en relación con el piso de la caja, lo cual definió 3 zonas, de abajo hacia arriba: a, b y c. En dependencia de la posición de la cabeza y/o las patas delanteras con la altura de las rayas, se le asignó un valor a cada estereotipia: 0 (zona a), 1 (zona b) y 2 (zona c). Las demás conductas como olfateo, mordisqueo, lengueteo, etc., recibieron el valor de 1. El tipo y presencia de las estereotipias fueron recogidas por un observador según un método de muestreo de tiempo en el cual se realizó una observación a cada animal, cada 5 min, durante 3 h.

Pruebas de analgesia

Prueba del ácido acético. Se inyectó por vía intraperitoneal ácido acético al 0,8 % y se observaron inmediantamente las contorsiones y estiramientos producidos durante 20 min.⁶

Plato caliente. Los ratones se colocaron sobre un plato metálico, éste en contacto directo mediante unas paletas soldadas en su superficie inferior- con el agua de un ultratermostato.⁶ Los desplazamientos de los animales sobre el plato se registraron mediante un cilindro de vidrio de 10 cm de diámetro y 15 cm de altura. La temperatura empleada fue de 54 ± 1 ^oC durante 2 min. El tiempo de reacción se tomó como el tiempo de demora de lamido de una de las patas traseras o salto.

Resultados

Prueba de Irwin

En la prueba neurofarmacológica de Irwin, los extractos D1 y D5 fueron prácticamente inefectivos. En cambio, D30 produjo marcha titubeante interrumpida por frecuentes episodios de acicalamiento. Paralelamente los animales mostraron cierto grado de temblor corporal y piloerección, así como una disminución del reflejo auricular.

Conducta exploratoria

Como se puede observar la conducta exploratoria no presentó cambios (tabla 1).
 
TABLA 1. Diferentes concentraciones de extracto acuoso de P. amboinicus sobre la conducta exploratoria
 

	Solución salina	D1	D5	D30
Latencia (s)	1,5 ± (0,4)	1,8 ± (0,3)	1,9 ± (0,5)	1,7 ± (0,3)
T-circ.(s)	358,5 ± (0,4)	358,2 ± (0,3)	358,1 ± (0,5)	58,3+ (0,3)
No. cruces+ empinamientos	31,6 ± (4,6)	33,9 ± (5,3)	30,9 ± (5,2)	28,7+(4,6)

Nota: Los datos representan las medias y entre paréntesis el error estándar.
T-circ.: tiempo total transcurrido en el círculo. n=10.

Estereotipias

En la tabla 2 se observan una potenciación de las estereotipias durante la administración del extracto D5.
 
TABLA 2. Estereotipias en diferentes momentos después de la inyección de anfetamina en animales tratados previamente con el extracto acuoso de P. amboinicus
 

Tiempo (min)	Solución salina	D5	D30
30	10,75	13,75*	8,37
60	28,50	37,12*	25,68
90	43,12	59,25*	40,87
120	53,12	75,62*	51,12
150	66,50	90,25*	60,62
180	73,75	103,87*	67,50

Nota: Sobre los datos que aparecen en la tabla 2 se realizó un ajuste de las curvas tiempo-efecto y se compararon las pendientes. Los resultados demostraron que las dosis D5 desplazó la curva hacia la izquierda de forma paralela y significativa ya que no hubo diferencias en las pendientes (en comparación con el control) pero sí en los interceptos. n=8.

Pruebas de analgesia

Como se puede observar en la tabla 3 no se produjeron cambios en las pruebas de analgesias.
 
TABLA 3. Efecto de diferentes concentraciones del extracto acuoso de P. amboinicus sobre el método de plato caliente y la prueba de ácido acético
 

	Plato caliente	Prueba del ácido acético
	Lamidos de patas o saltos (s)	Número de estiramientos y contorsiones
Solución salina	13,90	39,80
D1	17,50	33,80
D5	11,20	34,90
D30	14,20	28,00

n=10.

Discusión

Los resultados de la prueba de Irwin sugieren que P. amboinicus presenta un perfil neurofarmacológico donde se combinan efectos conductuales, neurológicos y autonómicos. Dentro del perfil conductual lo más llamativo fue la conducta de acicalamiento. Esta conducta, cuyas bases neurofisiológicas aún no están bien dilucidadas es inducida por drogas serotonérgicas como el BRL43694 con acción sobre los receptores 5-HT3, la cual presentó un perfil ansiolítico.⁷ La conducta de acicalamiento además, pudiera involucrar sistemas de neurotransmisores subyacentes a la acción epiléptica ya que dicha conducta aparece en la fase de recuperación siguiente a las crisis epilépticas espontáneas en el gerbil mongol (datos no publicados). Sin embargo, ninguno de los extractos modificaron significativamente la conducta exploratoria.

El efecto potencializador de las estereotipias inducidas por anfetamina sugieren una acción inhibitoria de los mecanismos de inactivación de las catecolaminas, similar a las drogas antidepresivas.⁸ Dicha acción también puede estar contribuyendo al efecto antiepileptogénico de la planta,⁹ ya que se ha demostrado que las catecolaminas cerebrales juegan un papel importante en la regulación de las crisis epilépticas.¹⁰

Agradecimientos

Se le agradece a las técnicas Edita Mustelier, Nancy Meléndez y Betty Cabrera la asistencia brindada.

Referencias bibliográficas

1. Due HQ. On the use of Coleus aromatic Benth in the preparation of cough medication. Duoc Hoc 1979;5:15-17.
2. Roig JT. Orégano francés. En: Plantas Medicinales, Aromáticas o Venenosas de Cuba. La Habana: Editorial Científico-Técnica,1988, p 597.
3. Buznego MT, Pérez-Saad H, Carrión L, Garriga E. Efecto antiepiléptico del Plectranthus amboinicus (Lour). Spreng. (Orégano francés) en diferentes modelos de epilepsia experimental. Revista de Biología 1993;2-3:161-170.
4. Irwin S. Comprehensive observational assesment: Ia A systematic, quantitative procedure for assessing the behavioral and physiologic state of the mouse. Psychopharmacology 1978:13:222-57.
5. Lyon M, Robbins T. The actions stimulant drugs: a general theory concerning amphetamine effects. En: Essmann W, Valselli L, eds. Current development in psychopharmacology. New York: Sprectrum Publications,1975;81-163.
6. Turner RA. Analgesic En: Turner RA, ed. Screening methods in pharmacology. New York: Academic Press Inc, 1965;100-17.
7. Cutler MG, Piper DC. Chronic administration of the 5-HT3 receptor antagonist BRL436694; effects on reflex epilepsy and social behaviour of the Mongolian gerbil. Psychopharmacology 1990;101:244-49.
8. Kessler KA. Antidepresivos tricíclicos, mecanismo de acción y utilización clínica. En: Lipton MA, DiMiscio A, Killan KF, eds. Psicología a los treinta años de progreso. La Habana:Edición Revolucionaria, 1983:1439-54.
9. Frey HH, Voits M. Effect of psychotrophic agents on a model of absence epilepsy in rats. Neuropharmacology 1991;13:651-56.
10. McNamara JO, Bonhaus DW, Crain BJ, Gellman RL, Shin C. Biochemical and pharmacologic studies of neurotransmitters in the kindling model. En: Jobe PC, Laird II HE, eds. Neurotransmitters and epilepsy. New Jersey: The Humana Press, 1987:115-159.

Recibido: 21 de diciembre de 1998. Aprobado: 5 de enero de 1999.

Lic. María Teresa Buznego Rodríguez. Instituto de Neurología y Neurocirugía, Avenida 29 y calle D, Habana 10400, Ciudad de La Habana, Cuba. Teléfono:553022.

 

¹ Licenciada en Ciencias Biológicas. Investigadora Agregada.
² Licenciado en Bioquímica. Investigador Agregado.
³ Licenciada en Ciencias Farmacéuticas. Aspirante a Investigadora.
⁴ Doctor en Ciencias Médicas. Investigador Titular.